Rev. Fac. Agron. (LUZ). 1999,16 Supl.

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Comparación in vitro del control químico y biológitco

de DothioreZZa sp., causante de la pudrición apiciil
de la guayaba (Psidiumguajava L)
Comparison i n vitro of the control chemical and bio1ogic:al
of Dothiorella sp., causing of the apical soft o-Fthe gua.va
(Psidiumguajaua)

Resumen
Con el objetivo de realizar la comparación i n uitro del biocontrol de Tricho-
derma harzianum con el control químico de Carbendazin sobre Dothiorelltz sp.
causante de la pudrición apical (PA) de la guayaba (Psidiumguajava),se utiliz.won
tres metodologías 1.-la dilución del fungicida en el medio, 2.- la colocacióri del
fungicida e n el centro de la placa de petri y 3.- la inmersión de discos de cuLtivo
del patógeno. Las evaluaciones se realizaron en el Laboratorio de la Unidad Téc nica
Fitosanitaria de La Universidad del Zulia. El diseño estadístico fue totalmente al
azar con cinco repeticiones. De los tres métodos utilizados en la comparación, el
método 3 fue el que permitió evaluar el efecto individual de cada fungicida. S e
corroboró i n uitro el biocontrol de Dothiorella sp. por T . harzianum , al
compararlo con el control químico, no hubo diferencias significativas entre am-
bos controles.
Palabras clave: control biológico, Trichoderma, Dothiorella sp. Psia'ium
guajava L. Carbendazin

Abstract
With the objective of carrying out the comparison i n uitro of the biocoiitrol
of Trichoderma h a r z i a n n m with the chemical control of Carbendaziii on
Dothiorella sp. causing OSthe apical soft rot of guava fruits (ASG) (Psiclium

Recibido el 15-0411999 Aceptado el 16-09-1999

1.trabajo de Investigación dc tesis de Grado para Magister Scientiarum de Jaqueline JHermindez
2. Departamento de Agronomía de la Facultad de Agronomía de La Universidad del Zulia.
Apartado 526, Maracaibo. 1s-mnil:jheinandezQ1uz.ve
3. Tutor de la tesis. Postgrado d e Agronomía de La UCV. El Limón-Maracriy.
4. Unidad Técnica Fitosanitaria, Facultad de Agronomía de La Universidad del Zulia.
 Hernández et al.

guajava), three methodologies were utilized 1.- dilution of tho fungicide i~ the
medium, 2.- placement of the fungicide in the center of t h e petri dish arid 3.-
immersion of disks of cultivation of t h e patogen. The evaluations were carried
out t h e Laboratory of the Unit Technical Fitosanitaria of The University of t h e
Zulia. The statistical design was totally a t random with five repetitions. In vitro
the biocontrol of Dothiorella sp sp by Trichoderma was corroborated, upon
comparing i t with t h e control chemical there were not significant differences.
From the three methods utilized in the comparison, the methocl3 was the t h a t i t
allowed to evaluate t h e individual effect of each fungicide.
Words Keys: biological control, Trichoderma, Dothiorella s p dothidea, Psitiium
guajava L. Tricobiol@

Introducción
El cultivo de la guayabo (Psidium
guajava L.),e s uno de los frutales más
importantes cultivados en el municipio
M a r a d e l e s t a d o Z u l i a , con u n a
superficie sembrada de 4.000 hectáreas
aproximadamente y un rendimiento de
30.000 k g l h a l a ñ o . S u f r u t o e s
apreciado no sólo para consumo fresco,
por s u alto contenido de vitamina C,
sino también e n l a industria, para la
elaboración de pulpa, concentrados,
jugos, jaleas y compotas, tanto para el
mercado nacional como internacional
(2).
Desde 1984,cuando el cultivo del
g u a y a b o comenzó a e s t a b l e c e r s e
comercialmente e n el estado Zulia, la
pudrición apical de la guayaba (PAG),
comenzó a causar daños, acentuándose
con e l t i e m p o los p r o b l e m a s
ocasionados por esta enfermedad (6).
Son varias las alternativas que
s e h a n planteado para solucionar este
problema, e n t r e las cuales s e
encuentra el control biológico mediante
el uso de Tricobiola, fungicida biológico,
formulado a base de Trichoderma
harzianum. Dentro del género Tricho-
derma s e encuentran los agentes de
biocontrol m á s promisorios, debido a
s u s propiedades antagónicas .I los
hongos patogénicos d e plantas,
principalmente porque pueden
localizarse e n la rizósfera y coloilizar
y proteger l a s raíces d e p l a ~ i t a s .
También se ha observado su efectiliclad
e n enfermedades foliares de u n arnplio
r a n g o d e c u l t i v o s , a s í como e n
pudrición postcosecha de fruta de kiueso
(4, 5, 8, 10).
U n a de las ventajas de Tricho-
derma como controlador bioltigico
"poderoso", es la capacidad para ti;acar
hongos patógenos en diferentes eslados
d e d e s a r r o l l o , como coniciios,
esclerocios e hifas ( 3 1.
A pesar de ser u n habitante iiatu-
ral del suelo, tiene l a capacidad de
sobrevivir e n el philoplano y e n
anthoplano (11, 7). E l biocontrol es
técnicamente factible para u n arlplio
rango de enfermedades del follye y
frutos en varios sistemas de cultivo
(12).
Lo et al. (9), compararori l a s
poblaciones de Trichoderma del suelo
y las del follaje, y observaron que en la
ú l t i m a s e m a n a d e evaluacióri l a s
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poblaciones del suelo disminuyeron de
6 a 5 unidades formadoras de colonia
(UFC)/g suelo, m i e n t r a s q u e las
poblaciones del follaje s e mantuvieron
e n 6 UFC/50 g de follaje, lo cual indica
que e n el ambiente aéreo Trichoderma
tiene mayor capacidad de ocupar el
nicho que el follaje le ofrece. Sin em-
bargo, Andrew ( l ) , señala que el éxito
del biocontrol e n l a filosfera e s m á s
d e s a f i a n t e q u e e n l a rizosfera, y
depende de los factores que afectan l a
c a p a c i d a d d e colonización y
dominancia competitiva e n l a
comunidad foliar.
El éxito del biocontrol se h a
incrementado marcadamente e n los
últimos años, p a r a patógenos q u e
infectan flores, enfermedades del césped
Materiales y métodos
P a r a e l c o n t r o l I n vitro s e
utilizaron tres técnicas: 1.-Dilución del
fungicida e n el medio del cultivo; 2.-
Aplicación del fungicida e n el centro
de l a placa de petri; y 3.- Inmersión
del patógeno e n u n a solución del
c o n t r o l a d o r (fungicida químico o
biológico).
L a cepa del patógeno se aisló d e
u n síntoma característico de l a PAG
cosechado en u n a granja comercial del
municipio Mara del estado Zulia, y la
cepa del Trichoderma s e tomó del
biofungicida comercial TricobiolE.
Dilución del fungicida en el medio
del cultivo.
S e tomó u n disco de 5 m m de
micelio de Trichoderma y s e colocó e n
el centro de u n a cápsula de petri con
papa dextrosa agar (PDA), con y sin
fungicida diluido, justo al lado de u n
y patógenos e n restos de cultivos ( 12).
E l uso d e Trichoderma como
biocontrolador de l a PAG, constitqyen
u n a herramienta nueva para l a
producción de guayaba, por lo que e s
necesario evaluar y profundizar e r los
aspectos de validación del producto,
manejo, dosis, frecuencia de aplicación,
para lograr tener así la solución a este
problema q u e t a n t a s perdidas a
causado. Sin embargo, s e tiene poca
evidencia de l a s ventajas frente a l
producto químico que h a controlado
medianamente l a enfermedad. Por lo
que el objetivo de e s t e trabajo fue
comparar in uitro el biocontrol por
Trichoderma y el control químico por
Carbendazim, de l a PAG.
disco de Dothiorella sp. del mismo
tamaño, L a concentración del
fungicida, 1 ppm de Carbendaziii, s e
determinó de acuerdo a l a técnica de
Sharvelle, partiendo de la
concentración del ingrediente activ3 del
fungicida.
Aplicación del fungicidzi en
el centro de la placa de petrj.. S e
utilizaron colonias de Dothiorelltz sp.
de t r e s días d e edad, las cuales s e
h o r a d a r o n e n e l c e n t r o con u n
sacabocado d e 5 m m d e diámetro,
colocándose e n el h o y u e l o u n a
suspensión del fungicida Carbendazin
o de conidios del biocontrolador~.La
solución d e los conidios d e Tricho-
derma se realizó a partir de una co' oiua
e n crecimiento activo, de cinco días de
edad, diluida e n 500 m1 de agua estéril,
alcanzándose una concentración do 1%-
 Hernández et al.
choderma fue de 3x106 conidios/ml,
determinados con u n hematocímetro.
La concentración de Carbendazin fue
0,5 g ~ l .
Inmersión del patógeno en una
solución del controlador.
Se tomó un disco de micelio de
Dothiorella sp. y se sumergió por 10
segundos en soluciones de fungicida
(control químico) y en una solución de
conidios d e Trichodernta (control
biológico), con las concentraciones ya
indicadas. El disco del patógeno tratado
fue sembrado en una cápsula de petri
con PDA.
P a r a l a s t r e s técnicas las
Resultados y discusión
Al comparar in vttro el biocontrol
y el control químico mediante los tres
métodos: se observó control, tanto por
el químico como por el biológico con los
métodos 1y 3, ya que en el método 2,
l a colonia d e l patógeno siguió
desarrollándose a pesar de colocar en
s u centro la solución controladora.
A pesar de que con el método 1se
logró observar control t a n t o por
Carbendazin (figura lA), como por
Trichoderma (figura l B ) , pues en
ambos casos se impidió el desarrollo
del patógeno; no se pudo comparar
ambos controles bajo las m i s m a s
condiciones, ya que en las placas del
fungicida diluido no se logró desarrollar
las colonias de Trichoderma, por lo
tanto en estas placas el único que esta
cápsulas fueron incubadas a f:5 "C
aproximadamente y bajo luz continua.
El crecimiento del hongo Dothiclrella
sp. se realizó cada 24 horas. Pera el
control biológico, no s e estirió el
crecimiento de Trichoderma sino el
área de la colonia del patógeno que
logró crecer.
El Diseño Estadístico fue u n
t o t a l m e n t e a l a z a r con cinco
repeticiones, la unidad experimental
estuvo conformada por cada cápsi~lade
petri. El análisis de varianza (le los
datos se calculó con el uso del paquete
estadístico Statistix versión 1.0 para
Windows.
ejerciendo el control es Carbend.nzin.
Con el método 3, en el cue.1 am-
bos controles se aplicaron de la niisma
forma, no se detectaron diferencias
significativas entre el control químico
y el biológico (gráfico 1).Lo que indica
que esta enfermedad puede controlarse
mediante el uso del biofungicids..
E n el control biológico los conidios
de Trichoderma contenidos en e-.disco
d e Dothiorella s p . luego do l a
inmersión en la sol~ción
biocontroladora, desarrollaroii u n a
colonia d e T r t c l z o d e r m a , no
permitiendo que se desarrol1:ira la
colonia de Dothiorelba sp, (figura 2 ) .
Se evidenció que Trichotlerma
controla igual que Carbendazin que h a
logrado controlar el patógeno.
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c
i

i ) (B)
Figura l. Comparación del control In vitro de Dothiorella por Triciio-
derma y Carbendazin, con el método: fungicida diluido en el
medio. (A) Con fungicida diluido. (B) Sin fungicida diluitio.
(a) disco de micelio de Dothiorella (b). Disco de micelio de
Trichoderma.

Figura 2 Comparación del control In vitro de Dothiorella por Tricho-

derma y Carbendazin, Con el método: Inmersión del patógeno
en solución controladora
 Hernández et al.

L E n Carbendarin En Trichoderm iEn Agua

Solución Controladora
Letras distintas indican diferencias significativas, Prueba de Medias de Tukey

Figura 1. Comparación del control In vitro de Dothiorella por Tri:cho-

derma y Carbendazin
Conclusiones y recomendaciones
Zn v i t r o no s e d e t e c t a r o n
diferencias significativas e n t r e el
biocontrol por Tricobiolo, y el control
químico por Carbendazim, para la
Pudrición Apical de la guayaba (PAG),
lo cual justifica el uso de Trichodernza
como controlador no contaminante de
esta enfermedad.
Para la comparación i n vitro del
control químico y el biológico d e
Dothiorella sp s p , causante de la PAG,
la metodología más efectiva fue la de
Inmersión del Disco del Patógeiio en
la solución controladora.
Bajo e s t a p e r s p e c t i v a , s e
recomienda evaluar el uso de Tricobiol,
como producto comercial e n
plantaciones de guayabo, con el jin de
validar s u uso en el biocontrol de PAG
y poder así entregarle al productor una
herramienta de control que no dañe el
ambiente ni l a calidad d e vids del
productor y consumidor de esta fi-iita.

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