UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN MARTÍN

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL
DE ENFERMERÍA

MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
DOCENTE: Blga. Mcblga Dra. Yoni Meni Rodriguez Espejo

INTEGRANTES
Dana Sofia Mestanza Grandez
Nina Liesset Rojas Carbajal
Hans Fredy del Aguila Flores
Alejandro David Ollague Escudero
Dorkas Danny Rivas Mego
Yasser Cristina Vargas Casique
Karly Chiarel Upiachihua Pezo
 Pruebas
de sensibilidad
antimicrobiana
para
Tuberculosis
 PRUEBAS DE SENSIBILIDAD O ANTIBIOGRAMAS
¿Qué es?
Las pruebas de sensibilidad o antibiogramas
determinan la susceptibilidad de un microorganismo
frente a los medicamentos antimicrobianos, a partir de
la exposición de una concentración estandarizada del
germen a estos fármacos. (1)

La razón fundamental de una prueba de sensibilidad es

la de realizar una predicción a través de una prueba in
vitro, observar la respuesta del paciente a un
determinado antibiótico, la evolución de la infección y
detectar una resistencia relevante del organismo que
está causando este proceso infeccioso. (2)

1. Vazquez M. Pruebas de sensibilidad o antibiogramas [Internet]. Manual MSD versión para profesionales. Manuales MSD; 2020 [citado 8 de Julio de 2022]. Disponible en:
https://www.msdmanuals.com/es-mx/professional/enfermedades-infecciosas/diagn%C3%B3stico-de-laboratorio-de-las-enfermedades-infecciosas/pruebas-de-sensibilidad-o-
antibiogramas
2. Herrera ML. Pruebas de sensibilidad antimicrobiana: métodología de laboratorio. Revista Médica del Hospital Nacional de Niños Dr Carlos Sáenz Herrera [Internet]. 2022
[citado 8 de Julio de 2022];34:33–41. Disponible en: https://www.scielo.sa.cr/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1017-85461999000100010
 TUBERCULOSIS
01 03
La tuberculosis es una Los síntomas incluyen tos
infección micobacteriana productiva, fiebre, pérdida
crónica y progresiva. (3) de peso y malestar
general. (3)

02 04
El diagnóstico se establece con
Afecta habitualmente a los frotis y cultivos de esputo y,
pulmones. (3) también con pruebas moleculares
de diagnóstico rápido. (3)

3.Tierney D, Nardell EA. Tuberculosis [Internet]. Manual MSD versión para profesionales. Manuales MSD; 2018 [citado 8 de Julio de 2022].
Disponible en: https://www.msdmanuals.com/es-pe/professional/enfermedades-infecciosas/micobacterias/tuberculosis
 DIAGNOSTICO
DE LA
TUBERCULOSIS
 LA MUESTRA:

ESPUTO
BACILOSCOPIA FIGURA 1

EL ENVASE

Debe tener las siguientes características:

 Boca ancha: de no menos de 50 mm de diámetro. (4)
 Capacidad entre 30 y 50 ml: para facilitar que el paciente pueda
depositar la expectoración con facilidad dentro , sin ensuciar sus manos
o las paredes del frasco y para que en el laboratorio se pueda
seleccionar y tomar la partícula más adecuada, con comodidad, para
realizar el extendido. (4)
 Cierre hermético: con tapa a rosca, para evitar derrames durante el
transporte y la producción de aerosoles cuando se abre en el laboratorio.
(4)
 Material plástico transparente, resistente a roturas, para poder
observar la calidad de la muestra cuando la entrega el SR, evitar roturas
y derrames de material infeccioso y para que pueda ser desechado. (4)

4.- Sequeira M, Barrera L. MANUAL PARA EL DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO DE LA TUBERCULOSIS [citado

el 8 de julio de 2022]. Disponible en: https://files.sld.cu/tuberculosis/files/2009/12/tb-labs-baciloscopia1.pdf
 BACILOSCOPIA
PARA LA RECOLECCIÓN DE LAS MUESTRAS

 Elegir un lugar bien ventilado y que ofrezca privacidad. Puede ser una habitación bien
ventilada y con acceso de luz natural (sol) o algún lugar abierto no concurrido del patio del
Servicio de Salud. (4)
 Entregar al SR el envase de recolección ya rotulado con su nombre o número de
identificación y el servicio que solicita la baciloscopia. (4)
 Solicitar al SR una buena muestra de esputo utilizando la palabra que lo identifica en cada
lugar (gallo, pollo, gargajo, del fondo del pecho, etc), instruyéndolo con lenguaje simple y
comprensible para que: (4)
1. Inspire profundamente llenando sus pulmones de aire tanto como sea posible. (1)
2. Retenga el aire un momento. (4)
3. Expulse luego la expectoración con un esfuerzo de tos, tratando de arrastrar las secreciones
del pulmón. (4)
4. Recoja el esputo producido dentro del envase tratando de que entre en su totalidad, sin
manchar sus manos o las paredes externas del frasco. (4)
5. Repita esta operación otras dos veces colocando todas las secreciones en el mismo frasco.
6. Limpie el exterior del envase con un pañuelo de papel y se lave las manos con agua y jabón.

4.- Sequeira M, Barrera L. MANUAL PARA EL DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO DE LA TUBERCULOSIS [citado

el 8 de julio de 2022]. Disponible en: https://files.sld.cu/tuberculosis/files/2009/12/tb-labs-baciloscopia1.pdf
 BACILOSCOPIA
CALIDAD DE LA MUESTRA
La muestra de esputo mucopurulenta, proveniente de árbol bronquial, es la que asegura mayor
probabilidad de que se puedan observar bacilos. (4)

Muestras para investigar la tuberculosis. Fuente (4)

4.- Sequeira M, Barrera L. MANUAL PARA EL DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO DE LA TUBERCULOSIS [citado

el 8 de julio de 2022]. Disponible en: https://files.sld.cu/tuberculosis/files/2009/12/tb-labs-baciloscopia1.pdf
 BACILOSCOPIA
OTRAS MUESTRAS:
SANGRE BIOPSIAS Y LÍQUIDOS
ORINA LÍQUIDO La investigación de MATERIAL PLEURAL,
Debe recordarse que la CEFALORRAQUÍDE sangre está RESECADO ASCÍTICO,
baciloscopia positiva O indicada para La obtención de estos PERICÁRDICO,
del sedimento de orina La obtención de este pacientes materiales está ARTICULAR Y
no necesariamente es material está con reservada al OTROS
diagnóstico reservada a personal inmunosupresión personal médico. Toda vez que se
concluyente de médico. (4) severa, como en En el caso de biopsia tomen muestras de
tuberculosis, por casos con de endometrio, la líquido pleural para
cuanto existen PUS infección por HIV muestra debe investigación de
micobacterias La muestra debe ser con bajo recuento consistir adenosina de
saprófitas en el tracto enviada de linfocitos totales preferentemente en aminasa (ADA), se
urinario que pueden inmediatamente al o raspado uterino debe
producir resultados laboratorio que hace CD4, y con tomado aprovechar la
falsos positivos. El el cultivo o ser baciloscopias de durante la primera fase oportunidad de
diagnóstico debe ser conservado muestras del ciclo menstrual o investigar por
completado con cultivo refrigerado y al respiratorias en el baciloscopia
e identificación del abrigo de la luz hasta reiteradamente período de ovulación. y cultivo el precipitado
bacilo observado. (4) su envío. (4) negativas. (4) (4) de la muestra. (4)

4.- Sequeira M, Barrera L. MANUAL PARA EL DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO DE LA TUBERCULOSIS [citado

el 8 de julio de 2022]. Disponible en: https://files.sld.cu/tuberculosis/files/2009/12/tb-labs-baciloscopia1.pdf
 BACILOSCOPIA SELECCIONAR LA
PARTÍCULA MÁS
PURULENTA. (4)
PREPARACION Y FIJACION DEL EXTENDIDO

ORDENAR LAS DEPOSITAR EN EL

MUESTRAS. (4) PORTAOBJETOS. (4)

MARCAR LOS EXTENDER LA

PORTAOBJETOS. (4) MUESTRA
UNIFORMEMENTE. (4)

FIJAR EL EXTENDIDO
PARTIR EL APLICADOR.
CUANDO ESTÉ
(4)
TOTALMENTE SECO. (4)

4.- Sequeira M, Barrera L. MANUAL PARA EL DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO DE LA TUBERCULOSIS [citado

el 8 de julio de 2022]. Disponible en: https://files.sld.cu/tuberculosis/files/2009/12/tb-labs-baciloscopia1.pdf
 Medios de cultivo para el Mycobacterium Tuberculosis

Medio de cultivo Löwenstein-Jensen Medio de cultivo Ogawa Kudoh

6. Nacional I, Microbiología DE. MEDIO OGAWA KUDOH MÉTODO DIRECTO O

5. Seguir IPN. M. tuberculosis y m. bovis [Internet]. Slideshare.net. [citado el 8 de KUDOH [Internet]. Indemicsas.com. [citado el 8 de julio de 2022]. Disponible en:
julio de 2022]. Disponible en: https://es.slideshare.net/iltaitDes/m-tuberculosis-y- http://www.indemicsas.com/wp-
m-bovis content/uploads/2019/11/FICHA_MEDIO_DE_CULTIVO_OGAWA_KUDOH.pdf
 ANTIBIOGRAM
A Definición
Determinan la susceptibilidad
de un microorganismo frente a
los medicamentos
antimicrobianos, a partir de la
exposición de una
concentración estandarizada del
germen a estos fármacos. (7)

7. Vazquez-Pertejo MT. Pruebas de sensibilidad o antibiogramas [Internet]. Manual MSD versión para profesionales. [citado el 7 de julio de
2022]. Disponible en: https://www.msdmanuals.com/es-pe/professional/enfermedades-infecciosas/diagn%C3%B3stico-de-laboratorio-de-las-enfermedades-
infecciosas/pruebas-de-sensibilidad-o-antibiogramas
 03
¿Cuándo hacer el Complicaciones
análisis? La realización de esta técnica en el laboratorio,
no presenta complicaciones importantes para el
Después de obtenerse un paciente, salvo que de forma extraordinaria,
resultado positivo a un cultivo de exista una mala determinación o realización de la
bacterias o de hongos; si se tiene misma, lo que implique que no se detecte
adecuadamente el efecto de los antibióticos
una infección y se han aislado en estudiados en la bacteria o bacterias que
un cultivo uno o varios tipos de producen la infección en el paciente. Esto puede
bacterias u hongos, a partir de una limitar de forma errónea los tratamientos que
pueden usar los médicos que tratan al paciente.
muestra obtenida del lugar en el
(9)
que sospecha que se ubica la
infección; cuando una infección no
responde al tratamiento. (8)

8. Herrera ML. Pruebas de sensibilidad antimicrobiana: métodología de laboratorio. Revista Médica del Hospital Nacional de Niños Dr Carlos Sáenz Herrera
[Internet]. 2022 [citado 8 de Julio de 2022];34:33–41. Disponible en: https://www.scielo.sa.cr/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1017-85461999000100010
9. Antibiograma [Internet]. Salud Savia. [citado el 8 de julio de 2022]. Disponible en: https://www.saludsavia.com/contenidos-salud/otros-
contenidos/antibiograma
 Antibiograma MODS
para la tuberculosis
El método de MODS (Microscopic Observation Drug Susceptibility
assay) se basa en un cultivo directo de muestras de esputo en
medio líquido, que detecta Mycobacterium tuberculosis y evalúa la
susceptibilidad frente a isoniacida y rifampicina directamente de
dichas muestras. El método se basa en que el crecimiento bacteriano
en forma de cordones se visualiza tempranamente en medio líquido
a través de un microscopio de luz invertida. (10)
Este método nos permite diagnosticar tempranamente un infección por la
bacteria.
Resulta ser rápida, barata mas que algunos métodos convencionales. (10)

10. Daniel Lozano. El Método MODS, una alternativa [en línea]. Publicado
en 2010. Citado el 7 julio de 2022. Disponible en:
http://www.scielo.org.bo/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1817-
74332010000200007
 Método de las proporciones múltiples (PM)
Es uno de los métodos autorizados por la Norma Técnica Procedimiento
como prueba de sensibilidad4. Este método descrito por Se realizaron diluciones en base 10 de la suspensión
Canetti y Grosset5 compara el número de colonias bacteriana, se tomaron los tubos de las diluciones 10-
desarrolladas en medios con diferentes diluciones de 3, 10-5 y 10-6 y se inocularon 0.2 ml en dos tubos
antibióticos, respecto a las desarrolladas en los medios sin sin antibiótico para cada dilución como control de
antibióticos, interpretando el resultado a través de la viabilidad; con la dilución 10-3 y 10-5 se sembró un
proporción de colonias capaces de crecer en presencia del tubo para cada uno de los antibióticos
fármaco.(15) antituberculosos de primera línea. Luego se
incubaron a una temperatura de 37°C, en atmósfera
aeróbica durante cuatro semanas, cuando se hizo la
El método de las proporciones, el procedimiento resulta más primera lectura; luego se incubaron por dos semanas
laborioso; además este medio coagula a una temperatura más más al cabo de las cuales se obtuvieron resultados
elevada (90ºc) lo que puede alterar las propiedades de los definitivos de la prueba. Se utilizó la cepa de M.
antimicrobianos. La complejidad inherente a estos métodos, tuberculosis H37Rv como referencia.(12)
pero sobre todo los requerimientos de personal y las medidas de
contención necesarios para llevarlos a cabo, los ha relegado
históricamente a los centros de referencia.(12)

11.Ugarte C, Alvarez P, . Pruebas de sensibilidad para Mycobacterium tuberculosis. Acta Médica Peruana [línea]. 2022 [citado 8 julio 2022];25(3):171–5. Disponible en:
http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1728-59172008000300010

12.Vista de Determinación de la susceptibilidad a drogas de primera línea en aislamientos de Mycobacterium Tuberculosis por la técnica del tubo indicador de crecimiento micobacteriano | Revista de
la Facultad de Medicina [línea]. Unal.edu.co. 2022 [citado 8 julio 2022]. Disponible en: https://revistas.unal.edu.co/index.php/revfacmed/article/view/16046/64095
 Método de las
concentraciones absolutas
El método de las concentraciones absolutas, descrito
por Meissner, se basa en la comparación del número
de colonias que crecen en presencia del fármaco con el
número de colonias que crecen en medio de cultivo sin
el fármaco.(13)
13.Cercenado E, Rafael M, Moreno C, Vega F. Métodos de determinación de sensibilidad a los antimicrobianos en micobacterias [línea] . [citado 8 julio 2022]. Disponible en:
https://www.seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimientosmicrobiologia/seimc-procedimientomicrobiologia56.pdf
El método requiere la preparación de una concentración
de fármacos uniforme en el medio de cultivo y una
rigurosa comprobación de cada lote, establecer las
concentraciones mínimas de cada fármaco, frente a las
que la cepa de referencia H37Rv, e incluso las cepas
salvajes, son capaces de multiplicarse.(13)
Con este método, el resultado dependerá del tamaño del inóculo. La
composición de un cultivo del complejo M. tuberculosis no es uniforme
en cuanto a la proporción de bacilos sensibles y resistentes, pero
estadísticamente se corresponde con una curva de distribución normal,
por lo que habrá unas concentraciones de fármaco para las cuales todos
los microorganismos serán resistentes y otras concentraciones para las
que sólo una proporción mayor o menor de bacilos serán resistentes. El
inóculo debe por tanto ser seleccionado de forma que pueda contener
suficientes bacilos como para poder evidenciar la presencia de un 1% de
microorganismos resistentes.(13)
 Método del Epsilon test
Las tiras en gradiente (E.test entre otros) se utilizan
en el método de gradiente de difusión
antimicrobiano, que combina los principios de la
difusión en disco y la dilución en agar en el estudio
de la sensibilidad in vitro. (14)
El principio del test del épsilon, descrito en 1988, consiste en
una tira de plástico no porosa de 6 cm de largo por 5 mm de
ancho que incorpora una escala de interpretación de las
concentraciones utilizadas expresadas en mg/L e impresa en
el anverso de la tira, y un gradiente continuo exponencial de
agente antimicrobiano inmovilizado en el reverso. Cada tira
cubre 29 concentraciones diferentes.(14)
14.Alcaide F, Esteban J, González M, Palacios J. Métodos de determinación de sensibilidad a los antimicrobianos en micobacterias. Enfermedades Infecciosas y Microbiología
Clínica [línea] . 2017 Oct. [citado 8 julio 2022];35(8):529–35. Disponible en: https://www.elsevier.es/es-revista-enfermedades-infecciosas-microbiologia-clinica-28-articulo-
metodos-determinacion-sensibilidad-antimicrobianos-micobacterias-S0213005X16301033
Para las pruebas de sensibilidad en M. tuberculosis se
precisa medio 7H11 de Middlebrook suplementado con
5% de glicerol y 10% de OADC. El tamaño del inóculo
debe ser lo más amplio posible, idealmente superior al
nº3 de la escala de McFarland (aunque en la práctica el
impacto de las variaciones del tamaño del inóculo sobre
este método es bajo). Una vez inoculadas las placas, se
precisa una fase de preincubación de 24 h antes de
colocar las tiras (una tira por cada placa de 90 mm, y
además una placa sin tira como control). Las placas se
depositan en bolsas permeables al CO2 y se incuban 10
días antes de proceder a la lectura de resultados. (14)
Referencias bibliográficas:
1. Vazquez M. Pruebas de sensibilidad o antibiogramas [Internet]. Manual MSD versión para profesionales. Manuales
MSD; 2020 [citado 8 de Julio de 2022]. Disponible en: https://www.msdmanuals.com/es-
mx/professional/enfermedades-infecciosas/diagn%C3%B3stico-de-laboratorio-de-las-enfermedades-
infecciosas/pruebas-de-sensibilidad-o-antibiogramas
2. Herrera ML. Pruebas de sensibilidad antimicrobiana: métodología de laboratorio. Revista Médica del Hospital
Nacional de Niños Dr Carlos Sáenz Herrera [Internet]. 2022 [citado 8 de Julio de 2022];34:33–41. Disponible en:
https://www.scielo.sa.cr/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1017-85461999000100010
3. Tierney D, Nardell EA. Tuberculosis [Internet]. Manual MSD versión para profesionales. Manuales MSD; 2018
[citado 8 de Julio de 2022]. Disponible en: https://www.msdmanuals.com/es-pe/professional/enfermedades-
infecciosas/micobacterias/tuberculosis
4. Sequeira M, Barrera L. MANUAL PARA EL DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO DE LA TUBERCULOSIS
[citado el 8 de julio de 2022]. Disponible en: https://files.sld.cu/tuberculosis/files/2009/12/tb-labs-
baciloscopia1.pdf
5. Seguir IPN. M. tuberculosis y m. bovis [Internet]. Slideshare.net. [citado el 8 de julio de 2022]. Disponible en:
https://es.slideshare.net/iltaitDes/m-tuberculosis-y-m-bovis
6. Nacional I, Microbiología DE. MEDIO OGAWA KUDOH MÉTODO DIRECTO O KUDOH [Internet].
Indemicsas.com. [citado el 8 de julio de 2022]. Disponible en: http://www.indemicsas.com/wp-
content/uploads/2019/11/FICHA_MEDIO_DE_CULTIVO_OGAWA_KUDOH.pdf
7. Vazquez-Pertejo MT. Pruebas de sensibilidad o antibiogramas [Internet]. Manual MSD versión para profesionales.
[citado el 7 de julio de 2022]. Disponible en: https://www.msdmanuals.com/es-pe/professional/enfermedades-
infecciosas/diagn%C3%B3stico-de-laboratorio-de-las-enfermedades-infecciosas/pruebas-de-sensibilidad-o-
antibiogramas
Referencias bibliográficas:
8. Herrera ML. Pruebas de sensibilidad antimicrobiana: métodología de laboratorio. Revista Médica del Hospital Nacional de Niños
Dr Carlos Sáenz Herrera [Internet]. 2022 [citado 8 de Julio de 2022];34:33–41. Disponible en:
https://www.scielo.sa.cr/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1017-85461999000100010
9. Antibiograma [Internet]. Salud Savia. [citado el 8 de julio de 2022]. Disponible en: https://www.saludsavia.com/contenidos-
salud/otros-contenidos/antibiograma
10. Daniel Lozano. El Método MODS, una alternativa [en línea]. Publicado en 2010. Citado el 7 julio de 2022. Disponible en:
http://www.scielo.org.bo/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1817-74332010000200007
11.Ugarte C, Alvarez P, . Pruebas de sensibilidad para Mycobacterium tuberculosis. Acta Médica Peruana [línea]. 2022 [citado 8 julio
2022];25(3):171–5. Disponible en: http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1728-59172008000300010
12.Vista de Determinación de la susceptibilidad a drogas de primera línea en aislamientos de Mycobacterium Tuberculosis por la
técnica del tubo indicador de crecimiento micobacteriano | Revista de la Facultad de Medicina [línea]. Unal.edu.co. 2022 [citado 8
julio 2022]. Disponible en: https://revistas.unal.edu.co/index.php/revfacmed/article/view/16046/64095
13.Cercenado E, Rafael M, Moreno C, Vega F. Métodos de determinación de sensibilidad a los antimicrobianos en micobacterias
[línea] . [citado 8 julio 2022]. Disponible en:
https://www.seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimientosmicrobiologia/seimc-procedimientomicrobiologia56.pdf
14.Alcaide F, Esteban J, González M, Palacios J. Métodos de determinación de sensibilidad a los antimicrobianos en micobacterias.
Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica [línea] . 2017 Oct. [citado 8 julio 2022];35(8):529–35. Disponible en:
https://www.elsevier.es/es-revista-enfermedades-infecciosas-microbiologia-clinica-28-articulo-metodos-determinacion-sensibilidad-
antimicrobianos-micobacterias-S0213005X16301033
Muchas gracias
Por su atención