“Arabidobrassica”

Una Nueva Planta

Obtenida por Fusión
de Protoplastos
• Adriana Barros

• Joel Chiliquinga

• Walter Torres
Introducción
• Producción de híbridos genéticamente
diferentes de los obtenidos por un cruce
sexual normal.
• Éxito limitado.
• Los cromosomas de ambas especies
estaban presentes y funcionalmente activos
en las células.
• Regeneración de brotes y plantas con
flores
• Híbridas somáticas Arabidopsis thaliana+
Brassica campestris
• Generación de híbridos asimétricos.
 Materiales y Métodos

Inducción mecánica
Líneas celulares - Seis líneas híbridas
(micromanimulador y
híbridas de Arabidopsis (1,2,7,10,15 y 16)
micropipeta) y cultivo de
thaliana + Brassica
productos de fusión de - Fusión de protoplastos
campestris
protoplastos individuales

Las líneas 1,2,7 y 16 se

El cultivo de estas líneas
originaron a partir de
consistió de 60
una célula octoploide de
cromosomas en los
Arabidopsis con una
primeros 4-5 meses
célula diploide Brassica
 Cuatro (1, 2, 10, 16) de
Las líneas celulares 10 y 15 se originaron de la Análisis de isoenzimas y seis líneas retuvieron
fusión de una célula de Arabidopsis octoploide cromosomas para líneas todos los cromosomas
con una célula tetraploide o dos diploides de celulares híbridas, 1, 2, marcadores y todas las
Brassica 7, 10, 15 y 16 isoenzimas esterasas
durante este período

En el período de cultivo temprano de

células = 80 cromosomas Durante el período de
Tiempo más tarde se convirtió en 65-85 crecimiento
cromosomas desorganizado, las
células se cultivaron en
medio sólido B5
Resultados
• Se usó medio B5 reforzado con 6-BAP. El medio fue efectivo para la inducción
de brotes y formación de raíces de dos de seis líneas.
• La morfogénesis fue un evento raro, solo 5 de estos se observaron, en la línea 1
y 15, cada una resultando en más de 100 plantas.

Todos los brotes clonados se sembraron en medio

B5 libre de hormona. Miles de brotes florecieron.

a. Híbridos somáticos de Arabidopsis thaliana

+ Brassica campestris.
b. Flores de “Arabidobrassica”

• La regeneración de las líneas hibridas dio

plantas morfológicamente intermediarias a
Arabidopsis y Brassica.
Características Morfológicas
• Las hojas fueron anchas y gruesas, redondas o
lobuladas, sin pelos. Estas tuvieron coloración roja
por antocianina (heredado de Arabidopsis).
• Análisis de cromosomas de brotes jóvenes
mostraron la presencia de cromosomas largos (tipo
Brassica) asi como cortos (tipo Arabidopsis) en
todas las metafases.

Cromosomas en metafase
a. Células de callo de línea 1
b. Células de brote línea 1-1
c y d. Células de primordio de flores línea 15-1

a= Cromosomas específicos de Arabidopsis; b= Brassica; bl=

Cromosoma Brassica más largo

Para inducir el crecimiento
organizado, las células se
transfirieron a medios sólidos de
diferentes composiciones
Los exámenes se
realizaron utilizando un
metal utilizando "pulverización catódica
microscopio de barrido
"Stereoscan 600"
Para la microscopía
electrónica de barrido el
material, previamente
cultivado en un medio libre
de hormonas, se deshidrató
en una serie de etanol y se
secó en un Critical Point
Dryer
El tejido se unió con Leitsilber a las
placas de prueba y se recubre con
de diodos" en atmósfera de argón
ratificado
Micrografía de escaneo electrónico
superficial del tricoma de las hojas de:
a. Arabidopsis thaliana
b. Brassica campestris
c. Híbrido “Arabidobrassica” línea 15-1
a

c b
 • Las células híbridas entre estas especies son
capaces de realizar morfogénesis.
• Los híbridos Arabidopsis + Brassica (o
"Arabidobrassica", en analogía con el término
Raphanobrassica de Karpechenko) son los
primeros híbridos en plantas con flor entre
diferentes tribus.
• Los híbridos producidos son genéticamente
Conclusiones muy heterogéneos.
• La estimación exacta del número relativo de
cromosomas de cada progenitor presente en
las plantas híbridas es imposible debido a que
los cromosomas de Arabidopsis como los de
Brassica son relativamente pequeños y no
todos pueden distinguirse entre sí.
Bibliografía
Gleba, Y. Y., & Hoffmann, F. (1980).
“Arabidobrassica”: A novel plant obtained by
protoplast fusion. Planta, 149(2), 112-117.