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INFORME LABOTARIO DE IDENTIFICACION DE HONGOS Y BACTERIAS EN LA

UNIVERSIDAD DE LA AMAZONIA.

LABORATORY REPORT ON THE INDETIFICATION OF FUNGI AND BACTERIA AT

THE UNIVERSITY OF AMAZONIA.

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Vargas, Valentina; 1Rojas, Edinson*. 1Montoya, Samuel; 1Ramires, Gisell.

1
ESTUDIANTE DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA DE LA FACULTAD

DE CIENCIAS AGROPECUARIAS DE LA UNIVERSIDAD DE LA AMZONIA FLORENCIA

CAQUETA.

Correspondencia: edins.rojas@udla.edu.co

Resumen

La microbiología ocupa un lugar destacado dentro de las ciencias médicas, es sin duda uno de los

campos más apasionantes de las ciencias biológicas, y el de mayor desarrollo en los últimos años, la

microbiología en general, a la que se considera el agente causal de las enfermedades. En medicina

veterinaria, además del daño que los microorganismos causan a la salud animal, su importancia también

radica en que muchas enfermedades infecciosas son de origen animal; Estos microorganismos se

encuentran distribuidos en la naturaleza como parte del suelo, aire y agua; En los organismos de la piel,

mucosas, intestinos y flora intestinal, en donde surgió posteriormente la microbiología como campo de

estudio de estos microorganismos, Nestor Oscar Stanchi (Microbiología Veterinaria, 2007).

Por tal razón en esta práctica de laboratorio se realizó con el fin de identificar las características

morfológicas de cada microorganismo encontrado en los cultivos, así adquiriendo un registro de las

diferentes características y tipos en cada colonia.

(falta parte de conclusiones)

Palabras clave: microbiología, ciencias, medicina, veterinaria, animales, patógenos.

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Abstract

Microbiology occupies a prominent place within medical sciences, it is undoubtedly one of the

most exciting fields of biological sciences, and the one with the greatest development in recent years,

microbiology in general, which is considered the causal agent of the diseases. In veterinary medicine, in

addition to the damage that microorganisms cause to animal health, their importance also lies in the fact

that many infectious diseases are of animal origin; These microorganisms are distributed in nature as part

of the soil, air and water; In the organisms of the skin, mucous membranes, intestines and intestinal flora,

microbiology subsequently emerged as a field of study of these microorganisms, Nestor Oscar Stanchi

[Stanchi], Veterinary Microbiology, (2007).

For this reason, this laboratory practice was carried out in order to identify the morphological

characteristics of each microorganism found in the cultures, thus acquiring a record of the different

characteristics and types in each colony.

(part of conclusions is missing)

Keywords: microbiology, sciences, medicine, veterinary, animals, pathogens.

Introducción

La microbiología es una de las ciencias médicas que ha ganado popularidad en los últimos años,

ya que la microbiología se ocupa principalmente de estudiar la morfología de los organismos que no

podemos ver a simple vista y son vectores de patógenos, muchos de los cuales son zoonóticos y siendo

capaces de transmitirse de humano a animal o de animal a humano. Estos microorganismos tienen el

potencial de causar importantes pérdidas tales como; económicas y deficiencia en la alimentación

humana. En este sentido la microbiología es la encargada de estudiar los siguientes grupos; bacterias,

virus, levaduras y mohos, los cuales los podemos encontrar en los siguientes ámbitos; industrial,

ecológica, sistemática, agrícola y médico-sanitaria, sea el ultimo ámbito en donde los médicos
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veterinarios tienen más relevancia o en donde se encuentran como primera instancia, Stanchi, Veterinary

Microbiology, (2007).

A lo largo de la historia se ha tratado de clasificar a los seres vivos dentro de algunos reinos

basándose en características, pero no fue sino hasta 1675 que Anton van Leeuwenhoek el cual es el

padre de la micro-morfología y descubridor de los espermatozoides, Revista Argentina de Microbiología

[RAM], (2010).

Tabla 1

Haeckel Whittakerr Woese (1977) Woese (1990)

(1894) tres reinos (1969) cinco reinos seis reinos tres dominios

Protista Monera Eubacteria Bacteria

Plantae Protista Archebacteria Arhea

Animalia Fungae Protista aukaria

Plantae Fungae

Animalia Plantae

Animalia

Stanchi, Veterinary Microbiology, (2007).

Por ende una vez adquiridos los conocimientos teóricos suficientes para iniciar la respectiva

actividad se llevó todo lo aprendido bajo las instrucciones del docente a cargo, en donde logramos obtener

muestras de las siguientes superficies y sujetos a estudiar; manos del operario, boca del ternero,

pezoneras, laso y leche, para posteriormente ubicarlas en un medio de cultivo (Agar sangre, Agar

MacConkey, Agar Bismuto de sulfito y Agar Saborau), en donde las colonias de microorganismos

lograron desarrollarse con tranquilidad y eficacia en un ambiente y entorno controlado, Fanny Hesse,

(1850-1934).
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Metodología

la elaboración del siguiente trabajo, se realizó mediante una visita de campo a las instalaciones de

la granja (cimaz-macagual)-(sede de la universidad de la amazonia) en la producción de Bovinos doble

propósito, en el cual se manejaron las distintas tomas de muestreo, manteniendo los parámetros

respectivos de asepsia y manejos obligatorios para evitar la contaminación de las muestras recogidas

durante el proceso; para llevar a cabo esta recolección se utilizaron materiales tales como hisopos,

vacutainer (tubo de muestras), guantes, solución salina y termos donde se conservaran los modelos; Una

vez que se observa y analiza el entorno donde se realizara el proceso de recaudación de muestras en los

bovinos, se procede a la selección del mismo (ternero) al que se le efectuó una muestra de la fosa bucal,

Después de realizarse la respectiva toma con el ternero se pasa a la madre, donde se empieza a seguir los

siguientes pasos y parámetro para sus pruebas, dando inicio con la toma de muestras en las ubres sin

hacerse una limpieza previa para frotar un hisopo en una de ellas, posterior a esto se pasa un lavado de las

ubres y tener una muestra de leche, dando finalizado la toma de muestras se le realiza a la persona

encargada de ordeñar manualmente, se le hace una toma de muestra en la zona palmar, para concluir se

realiza el embalaje y nombre de las muestras para saber su ubicación y a qué tipo de muestra nos

referimos; Las muestras fueron llevadas a laboratorio, en el cual realiza el respectivo cultivo en 4 tipos

diferentes de agar (son elementos solidificantes utilizados para la elaboración de medios de cultivo), entre

estos están los siguientes:

AGAR SANGRE:
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AGAR MACCONKEY:

AGAR SABOURAUD:

AGAR BISMUTO:

Una vez que tenemos los 4 tipos de agares ( dos de cada uno), se prende el mechero bunsen y se

abren cerca de este, permaneciendo cerradas para evitar contaminación alguna, con el asa

esterilizada(hasta el rojo vivo) se separan el medio de cultivo generando 3 porciones en una caja de Petri

y en otra 2 porciones, seguido se inocula mediante aislamiento en estría la superficie en la placa de agar y

se designan los datos necesarios de cada espécimen para su diferenciación; las cuales son sellados

totalmente con cristaflex, y son introducidas en incubación por 48 horas, pasado el tiempo requerido, se

pasa al refrigerador a una temperatura de 37,5, hasta el siguiente laboratorio.

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El siguiente paso es extraer la caja Petri de la nevera, procede al encendido del meche bunsen

para evitar la propagación de esporas con los debidos protocolos de seguridad al momento de abrir ya que

se han desarrollado diferentes bacterias, se toma un asa ya esterilizarlo (hasta el rojo vivo), se empieza la

realizar la extracción, por otro lado en una lámina portaobjetos, se vierte una gota de agua destilada,

inmediatamente con la muestra obtenida en el asa se esparce en dicha lamina y extiende uniformemente

para más adelante hacer el proceso de tinción, este a su vez se repite con cada muestra
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el proceso de tinción (Una tinción o coloración es una técnica auxiliar utilizada en microscopía

para mejorar el contraste en la imagen vista al microscopio (micro, s.f.)) se realiza en las muestras

recolectadas y su procedimiento se lleva de la siguiente manera mediante el método gram.

1. Se aplica Violeta de genciana durante 1 minuto

2. Se limpia el exceso con agua destilada
3. Aplicamos Lugol durante 1 minuto
4. Enjuaga con Agua destilada
5. Lavar con solución acetona –Alcohol durante 10 segundos
6. Se repite el proceso con Agua destilada
7. Aplicar Safranina durante 10 minutos
8. Por último, se lava con agua destilada, secar y se examina
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OBJETIVOS

Identificar los patógenos presentes, las morfologías de los microorganismos, determinar las

características de las colonias, diferenciación de gram, aprender los métodos para cultivar

microorganismo y la importancia de estos en la medicina veterinaria.

MATERIALES

 Tubos vacutainer (tapa roja)

 Tijeras
 Guantes, tapabocas, gorro desechable
 Alcohol
 Gel antibacterial
 Termo para las muestras
 frascos coprológicos
 cinta de enmascarar
 marcador rotulador
 mechera
 porta laminas
 tollas de cocina
 laminas
 cajas Petri
 hisopos
 asas redondas y rectas
 Bata
 Cristaflex
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RESULTADOS

AGAR SANGRE

FIGURA 1. Agar sangre 3, muestra de laso 1.

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En la muestra se puede observar estreptobacilos los cuales son característicos por tener

forma de bastón las cuales son asociaciones que forman cadenas, estos son un género de

bacterias. Algunas de estas bacterias pueden ser patógenas para el ser humano. Este cultivo

desarrollo colonias que son muy pequeñas, con apariencia lisa (Hernández, 2014

La muestra son estreptobacilos gram positivos estos son ubicuos y, debido a su capacidad

para formar esporas, pueden vivir en el ambiente por varios años.

Figura 2. Agar sangre 3, muestra de laso 2

(bacilos en organización de letras chinas, gran positivos).

Las actino bacterias son un tipo y clase de bacterias gran positivas. La materia de ellas se

encuentra en el suelo en incluyen algunas de las más típicas formas de vida terrestre las cuales tienen un

rol importante en la descomposición de la materia (QUIMICA.ES, s.f.).

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Figura 3. Agar sangre 3, muestra de manos del operario 1

diplobacilos gran positivos

ERYSIPELOTHRIX RHUSIOPATHIE

Biología: bacilos gran positivos pleomorfos y delgados. Colonizan diversos organismos en

especial el cerdo y el pavo, pero en general a todos los animales de sangre caliente; Habita en el suelo en

materia orgánica y en el agua subterráneas contaminadas con residuos procedentes de los animales

colonizados, Es una enfermedad ocupacional es decir que se puede encontrar en, carniceros, procesadores

de carne, granjeros, avicultores, manipuladores de pescado y médicos veterinarios.

Diagnóstico: crece adecuadamente en agar sangre incubados en una atmosfera de CO2 al 5-10%.

Tratamiento, prevención y control, La penicilina es el fármaco de elección en las enfermedades

localizadas y sistémica, se puede utilizar el ciprofloxacino o la clindamicina en las infecciones cutáneas

producidas por esta bacteria. Se debe de cubrir la zona expuesta cuando se manejen animales o productos

animales (STUDOC, 2010).

Figura 2. Agar sangre 3, muestra de manos del operario 2

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ERYSIPELOTHRIX RHUSIOPATHIE

Biología: bacilos gran positivos pleomorfos y delgados, Colonizan diversos organismos en

especial el cerdo y el pavo, pero en general a todos los animales de sangre caliente, Habita en el suelo en

materia orgánica y en el agua subterráneas contaminadas con residuos procedentes de los animales

colonizados. Es una enfermedad ocupacional es decir que se puede encontrar en, carniceros, procesadores

de carne, granjeros, avicultores, manipuladores de pescado y médicos veterinarios.

Diagnóstico: crece adecuadamente en agar sangre incubados en una atmosfera de CO2 al 5-10%.

Tratamiento, prevención y control: La penicilina es el fármaco de elección en las enfermedades

localizadas y sistémica, se puede utilizar el ciprofloxacino o la clindamicina en las infecciones cutáneas

producidas por esta bacteria, Se debe de cubrir la zona expuesta cuando se manejen animales o productos

animales (LIFEDER, 2022).

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Figura 3. Agar sangre 3, muestra de boca de ternero 1

escherichia coli

E. coli es el miembro mas frecuente del grupo escherichia. Este microorganismo se asocia a

múltiples infecciones que incluyen gastroenteritis e infecciones extraintestinales.

 Bacilos gramnegativos anaerobios facultativos

 Fermentadores; oxidasa negativos
 La enfermedad extraintestinal incluye bacteremia, meningitis neonatal, infecciones urinarias e
infecciones intraabdominales (EFE:SALUD, 2014).
Epidemiologia: Bacilos gramnegativos aerobios más frecuentes en el tubo digestivo, La mayoría

de las infecciones son endógenas (flora microbiana normal del paciente (MANUEL MDS, 2020)).

Figura 4. Agar sangre 2, Muestra de pezonera 1 contaminación hongo

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Figura 7. Agar sangre, Muestra de pesona 1

En la muestra se logra identificar hongos levaduriformes, este tipo de microrganismo se

encuentra en casi todos lados, incluso dentro del cuerpo. Hay muchos tipos de hongos

levaduriformes. Algunos tipos se usan para elaborar alimentos como el pan, el queso y las

bebidas alcohólicas. Hay pequeñas cantidades de cierto tipo de hongo levaduriforme que vive

habitualmente sobre la piel y en algunas partes del cuerpo, como la boca, la garganta y la vagina

(Pemán, 2016). Estos hongos  Forman colonias suaves, cremosas, de color variado: blanco,

crema, café, o negras, Son células únicas, aisladas, de forma redonda, oval o gemante, Su

reproducción es asexual por gemación (Tafur et al. 2014)

AGAR SABOURAU

Figura 8. Agar saborau 2, Muestra de manos del operario 4

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Esta imagen muestra levaduras las cuales son hongos microscópicos clasificados

como ascomicetos o basidiomicetos, predominantemente unicelulares en su ciclo de vida,

generalmente caracterizados por dividirse asexualmente por gemación o bipartición y por tener

estados sexuales que no están adjuntos a un esporocarpo. Específicamente las levaduras son

hongos que no forman redes filamentosas (hifas) (Mendoza 2005). Por otra parte, tienen forma

ovoide, estas tienen una característica que se reproducen por división celular o gemación, y

producen enzimas capaces de descomponer diversos cuerpos orgánicos, principalmente los

azúcares (Castro 2005).

Figura 9. Agar saborau 2, Muestra de manos del operario 3

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En esta muestra podemos identificar bacilos Gram positivos esporulados, Estos bacilos

son ubicuos y, debido a su capacidad para formar esporas, pueden vivir en el ambiente por varios

años. Están dispuestos en estreptobacilos. Poseen una cápsula de ácido glutámico (Macedo,

2008).

Figura 10. Agar saborau 2, Muestra de manos del operario 1

En esta muestra se pueden observar hongos los cuales son un tipo de germen que vive en

el aire, el suelo, las plantas e incluso en el cuerpo humano. Hay más de un millón de tipos de

hongos. La mayoría son inofensivos, pero algunos pueden causar infecciones (Cepero 2012).
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Tambien logramos observar levaduras las cuales son importantes por su capacidad para realizar

la descomposición mediante fermentación (Mendoa 2005).

Figura 11. Agar saborau 2, Muestra de manos del operario 2

Figura 12. Agar saborau 3, Muestra de boca de ternero 1

En la muestra se observa una agrupación de bacterias en forma de empalizada Estas se

caracterizan por ser uniones entre bacterias, por ejemplo, bacilos, de forma vertical (Alarcon et

al, 2021). La muestra son bacilos gramnegativos que son causantes de un gran número de

enfermedades. Algunos de ellos son microorganismos comensales presentes en la flora

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intestinal normal. Estos microorganismos comensales más otros provenientes de reaivorios

animales o del medioambiente pueden causar enfermedades (López et al, 2016). Por otra parte,

la muestra presenta contaminación.

Figura 13. Agar saborau 2, Muestra de manos del operario 5

En la muestra se pueden observar hogos filamentosos extraído de las manos de un

trabajador estos hongos son organismos eucariotas heterótrofos y con la excepción de levaduras,

son aerobios. Son abundantes en suelos superficiales y son importantes para su papel en el ciclo

de nutrientes y la descomposición de materia y contaminantes orgánicos (Bueno 1998). Por otra

parte, la forma de las estructuras es fusiformes las cuales tienen una característica importante que

son alargados, elipsoide, y con las extremidades más estrechas que el centro.

Figura 14. Agar saborau 3, muestra de laso 1

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zoopagomicota dikaria

amastigomycota paraglomeras

mucoromicota mortirellomycotina

archeosporales

glomeromycetes

diversispolares

glomerales

(WIKIPEDIA, 2022).

AGAR BISMUTO DE SULFITO

Figura 15. Agar bismuto de sulfito 3, muestra de laso 1.

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Cocos, estafilococos sp) gran positivos.

Figura 16. Agar bismuto de sulfito 2, muestra de boca de ternero 2

(basilos pleomórficos gram negativos)

Proteus mirtabilis

Figura 17. Agar bismuto de sulfito2, muestra de boca de ternero1.

 21

En la presente muestra se pudo evidenciar hogos phylum zygomycota. Estos hongos se

caracterizan por un micelio aceptado, cenocítico que tiene septos en la parte de la base de las estructuras

reproductoras o lo que sería septos secundarios. En todo el grupo es importante la reproducción asexual,

(Maria Gonzales,2007).

FIGURA 18. Agar bismuto de sulfito 3, muestra de manos del operario 2

En la presente muestra pudimos observar estafilococos y cocos grampositivas. Estas bacterias o

(microbios) pueden llegar a causar daños en cualquier parte del cuerpo, como puede ser en infecciones de

la piel, huesos, neumonía, intoxicación por alimentos; los estafilococos pueden encontrarse en muchas
 22

partes, como lo son las toallas, ropa, manijas de puerta y pues en esta muestra en las manos del operario y

pues podemos verlos todos juntos en forma de ramillete, (Medline plus, 2020).

También se puede observar la presencia de cocos que también son un grupo de bacterias que

pueden ser gram positivas o negativas en forma esférica y una de sus principales características consiste

en la producción de enfermedades, (Dra Zoila del s, 2013).

Figura 19. Agar bismuto de sulfito 3, muestra de manos del operario 1.

En la presente muestra pudimos encontrar bacilos cortos en empalizada no esporulados

gramnegativos y también se evidencio contaminación; Podemos decir que los bacilos gramnegativos son

causantes de diversas enfermedades, algunos de ellos son microorganismos que mantienen presentes en la

flora intestinal, (Maria t, 2020).

Se sabe que son gramnegativos porque no fijan el cristal violeta y con el colorante de contraste

usado en la tinción de gram que es la safranina se tiñen, sabemos que los bacilos son patógenos para el ser

humano sin embargo algunos no hacen daño pues producen algunos productos lácteos como lo es el

yogur (lactobacilos), Se conocen como bacilos por su forma de bastón y empalizados por la forma

agrupada o pegada entre sí, (Jhon melloni,1982).

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AGAR MACCONKEY

Figura 20. Agar macconkey, muestra de boca de ternero 1

cocos spp. no esporulados gram positivos

los cocos son bacterias que tienen forma esférica (SCRIB, 2019).

Figura 21. Agar macconkey 2, muestra de laso 4

cocos sp (actinobacillus sp)

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Las actinobacterias son un tipo y clase de bacterias gran positivas. La materia de ellas se

encuentra en el suelo en incluyen algunas de las más típicas formas de vida terrestre las cuales tienen un

rol importante en la descomposición de la materia (ESTUDYANDO, 2020).

FIGURA 22. Agar macconkey 3, muestra de manos del operario 2.

En la presente muestra se puede evidenciar bacilos fusiformes gramnegativos, Los bacilos

fusiformes son aquellos que se caracterizan por tener los extremos de una forma más delgada y pues

muchas bacterias tienen formas similares a bacilos largos retorcidos para formar espirales o hélices, Se

dijo que era gramnegativo por el color rosado luego de la tinción; cómo se mencionó anteriormente

algunos bacilos son causantes de múltiples enfermedades para el ser humano, (Magali pedrique, 2001).

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