TEMA 5: INTERCAMBIOS DE LA CÉLULA CON EL MEDIO

EXTERNO II.
TRANSPORTE DE MACROMOLÉCULAS Y PARTÍCULAS

MECANISMO DE TRANSPORTE DE VESÍCULAS (Páginas 430-436)

Los procesos de endocitosis, toma de partículas por la célula, y exocitosis, expulsión de

partículas, dependen del transporte vesicular. Además, las vesículas de transporte
también desempeñan un papel fundamental en el tráfico de las moléculas entre los
compartimentos del sistema de endomembranas y entre estos y la membrana plasmática
siguiendo rutas definidas.

El transporte vesicular es la actividad celular responsable del transporte de macromoléculas

e incluso grandes partículas. Está basado en:

- Formación de vesículas de transporte.

- Selección de las macromoléculas que se incorporan en la vesícula.
- Reconocimiento entre la vesícula y la membrana que deben fusionarse.
- Fusión de la membrana para liberar el contenido y para incrementar la membrana.

Para mantener la composición de los distintos compartimentos entre los que hay transporte
vesicular las células han desarrollado también mecanismos de retención de material en un
compartimento dado y mecanismos de reciclaje.

Aunque se habla de vesículas de transporte, muchas veces tienen la forma de túbulos o

tienen porciones tubulares y porciones vesiculares. Las porciones vesiculares están
enriquecidas en material soluble, mientras que las porciones tubulares están enriquecidas
en material de membrana.

FORMACIÓN DE VESÍCULAS Y SELECCIÓN DE CARGA

Las vesículas de transporte están revestidas de proteínas, llamadas cubiertas, que cubren
la superficie citosólica de la membrana que se va a invaginar. Las vesículas se nombran en
relación a su cubierta.

Se conocen tres familias de proteínas de cubierta de las vesículas: clatrina, COPI y COPII.
Las vesículas recubiertas con estas proteínas intervienen en el transporte entre distintos
compartimentos de la vía secretora.

En la formación de las proteínas de cubierta participan proteínas de unión a GTP

monoméricas, lípidos específicos, proteínas de cubierta, proteínas adaptadoras y
dinamina.
Las proteínas de unión a GTP monoméricas (Arf y Sar) son interruptores celulares que
median múltiples procesos (transporte vesicular, importación y exportación nuclear,
señalización celular…). Alternan entre dos estados, en el estado inactivo están unidas a
GDP y en el estado activo a GTP. La activación se debe a un factor de intercambio de
nucleótidos de guanina (GEF) y la inactivación a un factor que hidroliza el GTP (GAP).
Estas proteínas son responsables de determinar el lugar y el momento de iniciación de la
formación de vesículas. La proteína Arf interviene en la formación de vesículas recubiertas
de COPI y clatrina que emergen del aparato de Golgi, y la proteína Ser participa en la
formación de vesículas recubiertas de COPII que emergen del retículo endoplasmático.

Los lípidos específicos, como el fosfoinositol bifosfato, al igual que las proteínas de
unión a GTP monoméricas determinan el lugar y el momento de iniciación de la formación
de vesículas.

Las proteínas de cubierta (clatrina, COPI y COPII) proporcionan las fuerzas para la
invaginación de la vesículas.

Las proteínas adaptadoras, que son incorporadas por las proteínas de unión a GTP, se
encargan de la selección de la carga, es decir, de las moléculas que van a ser incluídas en
la vesícula (si la carga es una molécula soluble, la molécula de membrana es un receptor
que interactúa tanto con la carga como con la proteína adaptadora). Además, también son
las responsables de la asociación de las proteínas de cubierta a la membrana.

Finalmente, la dinamina se dispone en anillos alrededor del cuello de la vesícula que se

está formando y facilita su separación de la membrana. Además, hidroliza GTP para
proporcionar la energía necesaria para la reorganización de las membranas. Cuando la
vesícula está formada se desprende de la cubierta.

- Transporte que median los distintos tipos de proteínas recubiertas:

El ensamblaje de las proteínas de cubierta impulsa la gemación de vesículas que contienen

proteínas de mercancía seleccionadas de la membrana donante. Las vesículas se
desplazan a lo largo de filamentos citoesqueléticos hasta sus destinos. Al llegar a las
membranas destinos, las cubiertas se eliminan permitiendo que las membranas se fusiones
y las vesículas liberen su mercancía luminal e inserten sus proteínas de membrana en la
membrana destino.

Las vesículas recubiertas con COPII se encargan de transportar proteínas desde el RE al

compartimento intermedio RE-Golgi y al aparato de Golgi. Las vesículas cubiertas de COPI
llevan las proteínas residentes a los compartimentos a los que pertenecen. De este modo,
forman parte las vesículas que llevan proteínas de la red trans del Golgi a la red cis, del
Golgi al CIREG y del CIREG al RE. Las vesículas cubiertas de clatrina se encargan del
transporte bidireccional entre la red trans del aparato de Golgi, los endosomas, los
lisosomas y la membrana plasmática.

RECONOCIMIENTO ENTRE MEMBRANAS: ENLACE Y ACOPLAMIENTO

Las vesículas de transporte tienen una alta especificidad para la membrana con la que
deben fusionarse; por ejemplo, una vesícula que transporta enzimas lisosómicas tiene que
llevar su carga sólo a los lisosomas. Para ello, las distintas vesículas de transporte poseen
marcadores de superficie que las identifican de acuerdo a su origen y carga. Estos
marcadores son reconocidos por receptores complementarios en la membrana diana con la
cual se fusionan.

El reconocimiento de una vesícula de transporte con su diana tiene dos etapas: el enlace o
anclaje y el acoplamiento.

El enlace es la interacción inicial específica entre las membranas que están destinadas a
fusionarse y depende de la interacción de proteínas de unión a GTP monoméricas
(proteínas Rab) y factores de anclaje (un ejemplo de factores de anclaje es el exocisto).
Las diferentes proteínas Rab (hay más de 60) o combinaciones de proteínas Rab, marcan
diferentes orgánulos y vesículas de transporte. Las Rab en estado ligado a GTP activo
reclutan los factores de enlace, de manera similar a como Arf recluta las cubiertas. De este
modo, se forma el puente inicial entre las membranas diana y las vesículas.

El enlace desencadena el acoplamiento, en el que intervienen las SNARE y otras

proteínas auxiliares. Todas las proteínas SNARE tienen un largo dominio central de hélice
enrollada. Los dominios enrollados de las SNARE de la vesícula y de la membrana diana se
unen en cremallera entre sí, formando complejos que acercan las membranas. De este
modo, el acoplamiento es el contacto específico fuerte entre las dos membranas previo a la
fusión.

FUSIÓN DE MEMBRANAS

Para que la vesícula y la membrana puedan fusionarse las bicapas lipídicas tienen que
estar tan próximas que se elimine toda el agua entre ellas. Este es un proceso
energéticamente muy desfavorable por lo que la fusión es catalizada por la interacción de
las proteínas SNARE (apareamiento SNARE-SNARE) que proporciona la energía necesaria
para la reorganización de las membranas que se fusionan.

Si las membranas que se fusionan son iguales la fusión es homotípica, como la formación
de las células plurinucleadas del músculo, si las membranas que se fusionan son distintas la
fusión es heterotípica, como la fecundación (espermatozoide → óvulo).

ENDOCITOSIS (Páginas 560-567)

La endocitosis es el proceso de captación de macromoléculas y partículas del medio

circundante por las células eucariotas. En la endocitosis, el material que se va a introducir
es rodeado por una porción de la membrana plasmática que luego se invagina para formar
una vesícula que contiene el material ingerido. El término “endocitosis” fue acuñado en los
60 e incluye tanto la ingestión de partículas grandes (como bacterias) como la entrada de
fluidos o macromoléculas en pequeñas vesículas.

- PINOCITOSIS O ENDOCITOSIS EN SENTIDO ESTRICTO

En una misma vesícula tiene la captación no selectiva de líquidos extracelulares

(endocitosis de fase líquida) y macromoléculas específicas (endocitosis mediada por
receptor).

La mayor parte de vesículas de pinocitosis dependen de la clatrina pero también hay

endocitosis independiente de clatrina.

➔ Endocitosis mediada por clatrina:

La endocitosis mediada por clatrina constituye un mecanismo para la captación selectiva

de macromoléculas específicas. El material extracelular se introduce en vesículas de
transporte, que a continuación transportan su carga a los endosomas y lisosomas. Los
procesos de selección de carga, formación de vesículas y fusión de las vesículas de la
endocitosis son similares a los del transporte de vesículas en la vía secretora. Las
macromoléculas que se internan se unen primero a regiones especializadas de la
membrana plasmática denominadas invaginaciones recubiertas de clatrina. Las señales
de internamiento de estos receptores se unen a las proteínas adaptadoras citosólicas, que a
su vez se unen a la clatrina en la cara citosólica de la membrana. La clatrina se ensambla
en una estructura tipo cesta que distorsiona la membrana, formando fosas invaginadas,
que se desprenden de la membrana para dar lugar a las vesículas recubiertas de clatrina,
en cuyo interior se encuentran los receptores y las macromoléculas a las que están unidos.
La proteína dinamina se dispone en anillos alrededor de los cuellos de las fosas y sufre un
cambio de conformación, inducido por la hidrólisis de GTP, que promueve la fisión de la
membrana subyacente para generar vesículas libres en el interior de célula. La endocitosis
mediada por clatrina también produce la captación no selectiva de líquidos extracelulares
que se incorporan también en las vesículas.

Un ejemplo de endocitosis mediada por clatrina es la captura de colesterol. El colesterol

viaja a través de la sangre en forma de partículas lipoproteínicas, las más común es la
lipoproteína de baja densidad (LDL), que tiene un núcleo de ésteres de colesterol rodeado
por una cubierta de colesterol y fosfolípidos. La entrada de las LDL a las células requiere la
unión a un receptor específico de la superficie celular que se acumula en depresiones
revestidas con clatrina y que se introduce por endocitosis. El receptor posteriormente se
recicla a la membrana plasmática y el LDL se transporta a los lisosomas, donde el colesterol
se libera para ser utilizado.

➔ Endocitosis independiente de la clatrina:

La endocitosis independiente de la clatrina no implica la selección de receptores
específicos de la membrana plasmática ni la formación de vesículas recubiertas. Algunos
ejemplos son, la macropinocitosis (explicada más adelante) y la internalización de
cavéolas (aunque la mayor parte de las cavéolas son dominios de membrana plasmática
estables no sometidos a una rápida internalización). También se han definido otra vías de
endocitosis independiente de la clatrina basándose en la carga transportada y en las
moléculas celulares que intervienen en la formación de vesículas. Por ejemplo, una vía de
endocitosis independiente de la clatrina actúa como mediadora en la captación de proteínas
de la membrana plasmática fijadas a GPI. La endocitosis de estas proteínas depende del
colesterol de la membrana plasmática y puede estar mediada por la agrupación de tales
proteínas en balsas lipídicas. De esta forma, una de las funciones de la endocitosis
independiente de la clatrina es el recambio gradual de proteínas de membrana plasmática a
través de la captación y degradación en lisosomas.

- FAGOCITOSIS

La fagocitosis es la acción celular de comer (fagos significa “comida”), durante el proceso

las células engullen partículas grandes como bacterias, desechos celulares e incluso células
intactas. La unión de la partícula a la superficie de la célula fagocítica estimula la extensión
de un pseudópodo (movimiento de la superficie celular) que termina por engullir la
partícula. La fusión de las membranas del pseudópodo da como resultado la formación de
una gran vesícula intracelular llamada fagosoma. Este se fusiona con los lisosomas para
formar un fagolisosoma, dentro del cual se digiere la partícula ingerida.

La fagocitosis desempeña papeles distintos en los distintos tipos de células. En las amebas
tiene como función capturar partículas alimenticias, como bacterias u otros protozoos. En
los animales pluricelulares los mecanismos de fagocitosis constituyen una defensa contra
los microorganismos invasores y también eliminan las células viejas o dañadas del cuerpo.
En los mamíferos la fagocitosis es llevada a cabo por tres tipos de glóbulos blancos:
macrófagos, neutrófilos y células dendríticas (llamados “fagocitos profesionales”).
Estas células eliminan los microorganismos de los tejidos dañados. Además, los
macrófagos, los fibroblastos y la células epiteliales, eliminan las células viejas o muertas
de los tejidos de todo el cuerpo.

- MACROPINOCITOSIS

La macropinocitosis es la captación de líquidos extracelulares en vesículas grandes. Al

igual que la fagocitosis, se produce por movimientos basados en actina de la membrana
plasmática, que en este caso conducen a la formación de lamelipodios, que son
proyecciones a modo de lámina de la membrana plasmática. Los lamelipodios suelen
retraerse en el citoplasma, pero a veces se curvan en forma de copas abiertas de la
membrana plasmática, lo cual puede seguirse de una fusión de membrana para formar una
gran vesícula intracelular.

POSIBLES DESTINOS DEL MATERIAL INCLUIDO POR ENDOCITOSIS

- Reciclaje al mismo dominio de la membrana.

- Inclusión en otro dominio de la membrana o expulsión desde este.
- Lisosomas.

RUTA CONSTITUTIVA DE LA ENDOCITOSIS (Página 439, figura 11.40)

Es la vía que lleva material del exterior o de la membrana plasmática a los lisosomas para
su degradación. De este modo, la función principal de los lisosomas es la digestión del
material captado del exterior de la célula por endocitosis. Sin embargo, la endocitosis no
sólo está relacionada con la función de los lisosomas, sino también con su formación. Estos
se forman por la fusión de vesículas de transporte procedentes de la red trans del aparato
de Golgi con un endosoma tardío que contiene las moléculas ingeridas por endocitosis. La
formación de los lisosomas es así una intersección entre la vía secretora y la endocítica.

Veamos cómo se forman los endosomas tardíos que después darán lugar a los lisosomas.
En primer lugar, las moléculas captadas del exterior de la célula mediante vesículas
endocíticas se fusionan con los endosomas tempranos o periféricos. Estos endosomas
maduran a cuerpos multivesiculares y estos a endosomas tardíos o perinucleares.
Como ya dijimos antes, los endosomas tardíos se fusionan con vesículas procedentes de la
red trans del aparato de Golgi, que contienen hidrolasas ácidas. De este modo, se forman
los lisosomas que digieren las moléculas ingeridas por endocitosis.

Además, también hay reciclaje desde los endosomas tardíos a la red trans del aparato de
Golgi y de los endosomas tempranos a la membrana plasmática. El primero es el reciclaje
de los receptores de manosa-6-fosfato al Golgi tras liberar las hidrolasas ácidas al interior
de los endosomas tardíos (el pH ácido del endosoma hace que se separen de sus cargas).
El segundo es el reciclaje de los receptores de membrana y demás componentes de esta a
la membrana plasmática por medio de los endosomas de reciclaje. La finalidad de este
reciclaje es no degradar la propia membrana de la célula. De este modo, en los endosomas
tempranos se produce la clasificación de las partículas que se van a degradar (las de
endocitosis y las proteínas viejas o dañadas de la membrana) y las proteínas que forman
parte de la membrana. Estas últimas son enviadas a endosomas de reciclaje y de estos de
nuevo a la membrana plasmática. Como se dijo antes, los endosomas tempranos quedan
cargados con las proteínas que se van a degradar y maduran a cuerpos multivesiculares,
que son una etapa intermedia de la vía constitutiva de la endocitosis.

TRANSPORTE DE PROTEÍNAS A LA MEMBRANA PLASMÁTICA DE CÉLULAS

POLARIZADAS (Página 428 y figura 11.31 de la página 429)
Las células polarizadas tienen varios dominios (cada uno con endosomas tempranos y de
reciclaje propios) que contienen proteínas específicas relacionadas con sus funciones
diferenciadas. De este modo, las proteínas que salen de la cara trans del aparato de Golgi
deben transportarse de forma selectiva a dominios diferentes, lo que se lleva a cabo
mediante el embalaje selectivo de proteínas en vesículas de transporte dirigidas a dominios
específicos. Esto puede producirse tanto en al red trans del aparato de Golgi como en
endosomas de reciclaje.

Vamos a estudiar el caso de las células epiteliales polarizadas, cuya membrana

plasmática se divide en el dominio apical y el dominio basolateral. El apical está
orientado hacia la luz del intestino y presenta microvellosidades que aumentan su superficie
y permiten la absorción de nutrientes, el basolateral está en contacto con las célula
adyacentes y con la lámina basal. Ambos dominios se separan por uniones estrechas entre
células adyacentes que impiden la difusión de las proteínas entre estos dominios. Las
proteínas destinadas al dominio basolateral son marcadas con secuencias de aminoácidos,
como grupos hidrófobos que contienen dileucina (LL) o tirosina. Las proteínas dirigidas al
dominio apical están menos estudiadas, pero parece ser que su distribución no está
mediada por secuencias de aminoácidos, sino por señales directores consistentes en
modificaciones de anclajes GPI e hidratos de carbono.

La anterior es la vía directa, pero también existe una vía indirecta en la que las proteínas
parte juntas del Golgi en una vesícula y si dirigen a un dominio, en general el basolateral,
donde tiene lugar la clasificación. Las proteínas del dominio basolateral son retenidas por la
unión a elementos del citoesqueleto y las del dominio apical son incluidas en vesículas que
se fusionan con los endosomas periféricos y por transcitosis son llevadas al dominio
apical.

La transcitosis es la toma de material de un dominio de la membrana y su liberación en

otro, por lo que las moléculas atraviesan la célula.

➔ La fagocitosis también es un proceso constitutivo.

EXOCITOSIS (Página 428 y figura 11.30)

La exocitosis es la expulsión o secreción de sustancias a través de la fusión de vesículas

con la membrana plasmática. Estas vesículas contienen proteínas solubles, que son
secretadas al ambiente extracelular, y proteínas y lípidos de membrana que pasan a formar
parte de la membrana. Se distinguen dos tipos de exocitosis, la constitutiva y la regulada.

La exocitosis constitutiva se produce en todas las células. Las moléculas liberadas

ayudan a la formación de la matriz extracelular y la regeneración de la membrana
plasmática. Las proteínas y lípidos pueden incorporarse a la membrana plasmática desde la
red trans del aparato de Golgi a través de transporte directo o a través de endosomas de
reciclaje que actúan como intermediarios.

La exocitosis regulada es llevada a cabo por células especializadas en la secreción, que

liberan moléculas que realizan funciones específicas en el organismo o afectan a la
fisiología de otras células. A diferencia de la exocitosis constitutiva las vesículas no se
fusionan espontáneamente con la membrana plasmática, sino que son secretadas en
respuesta a señales ambientales. En la exocitosis regulada, las proteínas son
empaquetadas en la red trans del aparato de Golgi en gránulos secretores inmaduros
que se desarrollan a gránulos secretores maduros. Estos gránulos almacenan las
proteínas hasta recibir señales específicas que induzcan su fusión con la membrana
plasmática. Algunos ejemplos de secreción regulada son la liberación de hormonas por
parte de las células endocrinas, la liberación de neurotransmisores por parte de las
neuronas y la liberación de enzimas digestivas por parte de las células acinares
pancreáticas.

DISTRIBUCIÓN Y EXPORTACIÓN DE PROTEÍNAS DESDE EL APARATO DE GOLGI

(Páginas 427-429)

Las proteínas, al igual que los lípidos y los polisacáridos, son transportadas desde el
aparato de Golgi a sus destinos finales a través de la vía secretora. Esto implica que su
distribución en distintos tipos de vesículas de transporte, que saldrán por gemación de la
red trans del Golgi y llevarán su contenido hasta la localización celular adecuada.

Anteriormente ya hemos descrito los distintos tipos de transporte desde el Golgi. Algunas
proteínas se transportan a la membrana plasmática directamente o a través de endosomas
de reciclaje (exocitosis constitutiva), otras se secretan de la célula (exocitosis y exocitosis
regulada), otras se dirigen a otros destinos celulares (a los lisosomas pasando antes por los
endosomas tardíos, como se explicó antes en la ruta constitutiva de la endocitosis), otras se
dirigen a dominios específicos de la membrana de las células polarizadas. Además, las
proteínas residentes del Golgi tienen señales que posibilitan su reciclaje desde
compartimentos posteriores de la vía secretora.

En las levaduras y las células vegetales, que carecen de lisosomas, las proteínas son
transportadas desde el aparato de Golgi.

Topología de las vías de endocitosis y secretora: el interior de los componentes del

sistema de endomembranas se corresponde con el exterior celular.