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4- DEFINICIONES
5- PROCEDIMIENTO
Como todos los organismos vivos, los microorganismos requieren ciertos nutrientes
básicos y factores físicos para el mantenimiento de su vida, estas necesidades
varían según el tipo de microorganismo y es necesario conocerlas para cultivarlos
en el laboratorio.
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PROCEDIMIENTO ANAL-MIC-POES 005
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-Bifásico: Contiene fase sólida y fase líquida (listos para utilizar). Utilizados para cultivar
microorganismos tal y como se encuentran.
-Sintéticos: De composición exactamente conocida. Los más utilizados son los medios
comerciales deshidratados.
- Vivos: Contienen células u organismos vivos, como las células de riñón de mono o
huevos embrionados.
SEGÚN SU PROPOSITO
Aislamiento de microorganismos
* Existen medios que pueden cumplir funciones mixtas, es decir, permiten aislar
microorganismos y revelan una reacción o cambio químico específico de
metabolismo como: coloraciones de colonias o cambios de color del medio; es
decir, selectivos y diferenciales al mismo tiempo.
MÉTODOS DIRECTOS.
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MÉTODOS INDIRECTOS.
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Los patrones de McFarland, permiten establecer una relación entre una precipitación química y una
suspensión de bacterias (Figura 2). Se elaboran 10 estándares (Tabla 1), y por espectrofotometría
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se crea una recta patrón con la cual se va a poder determinar la concentración de las diluciones
bacterianas elaboradas. La información arrojada es aproximada, ya que la lectura depende de
factores como el tamaño de la bacteria y la formación de agrupaciones.
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En este tipo de conteo de viables, las colonias no siempre han de proceder de una
sola célula, dado que algunas bacterias pueden formar agrupaciones y estas
serán las que darán origen a la colonia; por lo anterior, los reportes de esta
metodología se refieren a “unidades formadoras de colonia” o UFC; unidad que,
corresponde como mínimo a una bacteria formando una colonia, así como,
también a un grupo de estas que han sido las formadoras de la misma.
Fig. 3. Cajas Petri sembradas con diluciones sucesivas, donde, la imagen de la izquierda
representa la dilución menor (o más concentrada), en progresión hacia la dilución mayor o más
diluida (imagen de la derecha)
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TÉCNICAS DE SIEMBRA.
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Existen varios métodos para aislar las bacterias en cultivo puro con el fin de
evaluar sus características en estos medios.
Se entiende por cultivo puro, una población de células las cuales todas proceden
de una misma célula. Existe gran variedad de técnicas por medio de las cuales las
diferentes especies en una muestra natural pueden ser aisladas en cultivo puro.
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Morfología Bacteriana
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Del mismo modo, los rasgos de las colonias y la disposición o agrupación bacteriana,
son criterios taxonómicos que deben ser descritos correctamente para aislamientos
no identificados, como parte de la identificación primaria.
Tamaño. Son invisibles al ojo humano, por lo tanto, estas se miden en micrómetros
-3
(µm), unidad que equivale a 10 mm. El tamaño de las bacterias varía dependiendo
de las especies entre menos de 1µm y 250µm; siendo lo más habitual entre 1 y
10µm.
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Los cultivos en este medio se inoculan en una sola línea recta (sobre la superficie
del bisel), y se evalúan de la siguiente manera (Figura 2):
Fig. 2. Apariencia del crecimiento bacteriano, sembrado en una sola línea sobre agar Nutritivo
inclinado, donde: (A) Crecimiento filiforme, (B) equinulado, (C) barbado, (D) difuso (E),
arborescente y, (F) rizoide.
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Son evaluados según la distribución y apariencia del crecimiento como sigue (Figura
3):
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Forma de la colonia
Puntiforme Circular Filamentosa Irregular
Rizoide Lanceolada
Elevación de la colonia
Convexa o
Plana o aplastada Elevada Convexa baja
cupuliforme
Bordes de la colonia
Espinoso, dentado o
Entero o continuo Ondulado Lobulado
lacerado
Ondulado Filamentoso
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