UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

Universidad del Perú, Decana de América

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

E.A.P. GENÉTICA Y BIOTECNOLOGÍA
LABORATORIO DE BIOLOGÍA CELULAR

Práctica Nº11: ESTRUCTURA DE TRANSCRIPCIÓN

Horario : Miércoles de 8:00 a 10:00 (G2)

Fecha de realización de la práctica: 26 de junio de 2019

I. INTRODUCCIÓN

Los cromosomas de los núcleos en interfase de algunos tejidos de la larva de la mosca

Drosophila melanogaster son más grandes respecto a sus estado normal. Estos cromosomas se

denominan politénicos y se forman por replicaciones sucesivas (hasta nueve duplicaciones) de

un par diploide en sinapsis, pero las copias no se separan, se mantienen unidas en fibras

extendidas. Además del cambio en el tamaño, los cromosomas politénicos muestran un patrón

peculiar de bandeo alternante que consiste en zonas cromáticas oscuras (bandas o cromómeros)

y zonas acromáticas claras (interbandas). Este bandeo es reproducido de núcleo a núcleo,

formando un patrón único constante de tal manera que los cromosomas pueden ser

identificados y ubicados en todo su largo.

En los cromosomas politénicos, la actividad de transcripción es visible al microscopio óptico en

la forma de abultamientos o puffs cromosómicos. Los puffs se forman en regiones donde las

fibras cromosómicas se desenrollan respecto de su estado de empaquetamientos en bandas,

manteniendo su continuidad con el resto del cromosoma politénico. El patrón de puffs se

relaciona con la expresión génica en un tejido. Los puffs son consecuencia de la necesidad de

relajar la estructura de la fibra politénica que contiene el gen, con la finalidad de transcribirlo.

II. OBJETIVOS

- Identificar puffs cromosómicos y el patrón de bandas en cromosomas politénicos de

glándula salival de larva de Drosophila melanogaster.

- Reconocer los puffs cromosómicos como estructuras de transcripción activa.

III. MATERIALES

- Láminas portaobjeto y cubreobjeto - Suero fisiológico

- Estilete y pinza de punta fina - Carnoy y orceína lacto-acética

 - Larvas de Drosophila melanogaster - Estereoscopio y microscopio

IV. OBSERVACIONES Y RESULTADOS

A. CROMOSOMAS POLITÉNICOS EN GLÁNDULA SALIVAL DE LARVA DE D. melanogaster

Se observan los brazos de los cromosomas politénicos que salen a partir de una región central

(cromocentro). Los cromosomas politénicos presentan un patrón de bandas alternantes: los

discos teñidos con el colorante orceína corresponden a las bandas o cromómeros; los

incoloros corresponden a las interbandas. También se observa un pequeño abultamiento o

puff en los cromosomas, que representa una estructura de transcripción.

B. DISCUSIÓN DE RESULTADOS

Los cromosomas politénicos se forman por la replicación sin separación de los 4 pares

cromosómicos homólogos (II, III, IV y X) de D. melanogaster. El cromocentro, donde todos

los cromosomas politénicos están unidos, se compone de los centrómeros de estos

cromosomas, que son regiones heterocromáticas (condensadas) y por ello se tiñen con el

colorante. A partir del cromocentro se observa que salen cinco brazos, que corresponden a los
 4 pares cromosómicos de D. melanogaster (2n=8): dos pertenecen al cromosoma II y dos al

cromosoma III, uno pertenece al cromosoma IV y el brazo perteneciente a X no se observa.

El patrón de bandas es característico de cada cromosoma politénico y se observará el mismo

patrón en todos los tejidos normales de la larva de D. melanogaster. Las bandas teñidas o

cromómeros son resultado de la condensación de la cromatina; mientras que las interbandas

están formadas por regiones eucromáticas de menor densidad.

Un puff se origina por el desenrollamiento y expansión transitorio de las fibras de cromatina

correspondientes a un cromómero, de manera que el gen ubicado en esa posición pueda ser

transcrito a ARNm y se pueda expresar su producto génico. A mayor número de puffs, habrá

más transcripción de genes distintos y mayor expresión génica. Aunque en la práctica solo se

distinguió con claridad un puff cromosómico, en las glándulas salivales de larva de mosca se

ha llegado a describir un total de 194 puffs (Lacadena, 1996), lo que evidencia una alta tasa de

transcripción y elevada expresión génica en los tejidos de la larva en desarrollo.

V. CONCLUSIONES

 Las glándulas salivales de la larva de la mosca D. melanogaster presentan núcleos con

cromosomas politénicos, con el fin de aumentar la expresión génica.

 Los cromosomas politénicos presentan un patrón característico de bandas (con tinción) e

interbandas (sin tinción). Las bandas son cromómeros o fibras enrolladas de DNA.

 Los puffs son estructuras de transcripción que se forman como consecuencia del

desenrollamiento de las fibras de cromatina en la región donde se halla el gen a transcribir.

VI. CUESTIONARIO

1. ¿Cuáles son las características de un cromosoma politénico?

- Se componen de numerosas copias (hasta 1024) de fibras de cromatina, producto de la

replicación sucesiva y sin separación de los cromosomas homólogos fusionados.

- Presenta un patrón de bandas alternadas compuesto por regiones de cromatina compacta

(bandas teñidas o cromómeros) y de eucromatina (interbandas sin tinción).

- Presenta puffs que representan regiones cromosómicas activas (en transcripción).

- El patrón de bandas es constante en los diferentes tejidos de un organismo

- Se presenta en células en interfase de tejidos con abundante expresión génica.

2. ¿En qué organismos y estructuras podemos encontrar cromosomas politénicos?

Se encuentran en células interfásicas de tejidos secretorios (glándulas salivales, túbulos de

Malpighi, epitelio intestinal) de larvas de insectos dípteros (moscas), como Drosophila

melanogaster, Sciara sp. o Chironomus sp.

También se encuentra en los sacos embrionarios de algunas fabáceas, como Phaseolus

vulgaris. Asimismo, se halla en protozoarios ciliados y en trofoblastos de embriones de

mamíferos.

3. ¿Qué nos indicaría una gran presencia de puffs?

Los abultamientos o puffs cromosómicos son producto de la expansión y desenrollamiento de

las bandas (cromómeros) en las regiones del cromosoma politénico que presentan expresión

génica activa. La presencia de abundantes puffs en las células de un tejido indica que se está
 produciendo la elevada transcripción de varios genes distintos, cuyos productos son

necesarios durante el crecimiento y desarrollo de la larva.

VII. FUENTES BIBLIOGRÁFICAS

 Jiménez L. & Merchant H. (2003). Biología celular y molecular. México: Pearson

Educación

 Lacadena J. (1996). Citogenética. Editorial Complutense

 Lewin B. (2008). Genes. 9ª edición. MacGraw Hill Interamericana Editores

 Passarge E. (2007). Genética. 3ª edición. Ed. Médica Panamericana