Verificar que el área de instrumentos se encuentre despejada, limpia, libre de
materiales y conectada a través de su cable de alimentación a la corriente eléctrica, así como la PC integrada a él. 2. Encender el instrumento a través del botón de encendido así como la PC. 3. Dejar pasar 15 minutos antes de realizar cualquier medición analítica. 4. Contar con 2 celdas de cuarzo de 1 cm de paso óptico que se encuentren limpias y libres de partículas. 5. Introducir las 2 celdas de cuarzo con agua destilada hasta su ¾ partes de capacidad dentro del instrumento, colocando de manera independiente cada una de ellas con su correspondiente porta-celda. Posteriormente cerrar el compartimiento. 6. En la PC ubicar el archivo de Scan, dar clic, ubicar el icono de ajuste de la línea base. Ajustar los parámetros: línea de base, 0 de absorbancia, seleccionar el modo de absorbancia, elegir el rango de escaneo: Región ultravioleta de 190 a 350 nm y rango de absorbancia de 0 a 3 de Abs. Dar clic en Aceptar. 7. Realizar escaneo, dar clic en ajustar la línea-base y ajustar a 0 de absorbancia. 8. Una vez finalizado el ajuste, abrir el compartimento de instrumento, retirar la celda de cuarzo y desechar el agua destilada. 9. Llenar la celda de cuarzo con la solución a la cuál se le va a determinar el espectro de absorción en el rango ultravioleta e introducirla en el portacelda sin retirar la celda que contiene agua destilada que permanece dentro. Cerrar el compartimiento Nota: Mientras el instrumento lleve a cabo las mediciones no se deberá abrir el compartimiento. 10. Dar clic en el ícono leer para que el instrumento realice las mediciones conforme al rango establecido así mismo realizará las correcciones de manera automática entre la lectura del blanco y la muestra, permitiendo detectar y determinar de manera automática la longitud máxima de absorción. El resultado obtenido será comparado contra el reportado en la bibliografía. 11. Establecer la máxima longitud de onda de la muestra de acuerdo a nuestras condiciones experimentales 12. Una vez obtenido el perfil del espectro de absorción retirar las dos celdas y enjuagarlas perfectamente bien con agua destilada. 13. En la carpeta de Varian, ubicar el archivo de lecturas simples y repetir los pasos 4 y 5. Ubicar el ícono de ajuste de la línea base. Ajustar los parámetros: línea base, 0 absorbancia, seleccionar el modo absorbancia, elegir la longitud máxima de absorción y el rango de absorbancia de 0 a 3 de Abs. Los demás parámetros mantenerlos fijos. Dar clic en aceptar. 14. En la ventana para realizar lecturas simples, en el ícono del extremo superior derecho aparece la longitud de onda seleccionada, dar clic en ajustar la línea- base y ajustar a 0. 15. Una vez finalizado el ajuste, abrir el compartimento de instrumento, retirar la celda de cuarzo y desechar el agua destilada de esta conservando la celda de atrás. 16. Llenar la celda de cuarzo con la solución a la cuál se le va a determinar el espectro de absorción en el rango ultravioleta e introducirla en el portacelda sin retirar la celda que contiene agua destilada que permanece dentro. Cerrar el compartimiento Nota: Mientras el instrumento lleve a cabo las mediciones no se deberá abrir el compartimiento. 17. En la ventana del menú superior del programa, aparecen dos icónos Leer y Stop. dar clic en leer, el instrumento realizará las mediciones conforme a la longitud de onda establecida, así mismo realizará las correcciones de manera automática entre la lectura del blanco y la muestra. Registrar la lectura de absorbancia que corresponda a la muestra leída. 18. Repetir el punto 15 y 16, cada vez que se introduzca una nueva muestra de concentración diferente para obtener su lectura de absorbancia manteniendo la celda de atrás que contiene agua destilada.
19. Cronograma de actividades
Actividad Fecha Observaciones
Determinación del tema del protocolo de investigación
Recopilación de la datos e información sobre la curva de
calibración Elección de la muestra a trabajar y el tipo de medio en el que se encontrara la muestra Procedimiento en la sesión experimental
Evaluación y correcta limpieza del equipo y materiales a
utilizar Preparar las soluciones a las concentraciones planteadas Calibrar el equipo