Practica N°2 Formación de biopelículas bacterianas

Introducción
Las películas microbianas o biopelículas son comunidades formadas
principalmente por bacterias, en las que también se pueden encontrar fagos, virus
y protozoarios depredadores. Al adherirse a una superficie viva o inerte
constituyen una biopelícula propiamente dicha; por contraparte, si no se adhieren
se conocen como flóculos. Se encuentran en todas partes, en el sarro de la
cocina, de las tuberías, del baño, en la placa dental, inclusive se han identificado
sobre las superficies de las pirámides, las esculturas antiguas, etcétera.
(Ingraham, J.2018)
Las bacterias son las formas de vida más simple sobre el planeta, generalmente
pequeñas y sin núcleo, rodeadas por una membrana nuclear y sin organelos
celulares como mitocondrias, aparato de Golgi o retículo endoplásmico. Sin
embargo, por ser los seres vivos más antiguos sobre el planeta han
experimentado muchas formas de organizarse. Se sugiere que existen desde el
periodo precámbrico. Prefieren vivir en comunidades complejas, en las cuales
algunas de ellas actúan como organismos productores (fotosintéticos), otras como
organismos consumidores e inclusive otras más como depredadores.
(Betancourth, M.2016).
Las biopelículas se forman cuando células bacterianas, nadadoras o planctónicas
(colonizadores primarios) eligen y se adhieren a una superficie, al establecerse
emiten señales que les inducen a multiplicarse. Después de establecerse llegan
otras especies que se adhieren a las especies colonizadoras, se emiten señales
para que se unan otras especies y comienzan a formar estructuras en forma de
hongo, las cuales contienen canales de agua a través de los cuales les llega
oxígeno y nutrientes. (Varela, G.2018)
Las esporas son cuerpos de gran resistencia producidos en el interior de las
células de ciertas bacterias. Se encuentran en todas las especies de la familia
Bacillaceae, que se divide en dos géneros, Bacillus y Clostridium.
Las esporas tienen forma esférica o elíptica y pueden estar sustituidas en
cualquier lugar de la célula original o esporangio. Su diámetro puede ser menor
del resto del esporangio, igual al mismo o mayor. El tamaño de las esporas difiere
de una especie a otra, de manera que esta característica suele servir para la
clasificación (Muro, A.2017).
Materiales y métodos

1.Activación Clostridium 2.Inoculación Se inoculan dos 3.Incubación 37°C x toda la

perfringens tubos: 1 caldo Tioglicolato y 1 caldo noche
Choque térmico 75°C x 15 Dunca-Strong(rafinosa/almidón)
min en caldo tioglicolato

5.Preparar 2 frotis a partir de cada 6.Preparar el portaobjeto para

4.Recuperar los cultivos
uno de los tubos: tioglicolato y la tinción-shaeffer y fulton,
Duncan-strong verde malaquita y safranina

7.Calentar la tinción
8.Lavar el exceso de verde
malaquita 9.Teñir con safranina

10.Dejar secar la laminilla

11.Observar al microscopio. Fijar

campo 40x y después añadir aceite y
12.Observaciones
observar el 100x

13.Inocular nuevamente. Tubo Duncan-

strong-tioglicolato, tubo tioglicolato-
tioglicolato 14.Observar si hubo crecimiento
Resultados

Repeticiones E. coli
Repeticiones B. cereus
Lecturas de la matriz posterior a la
Lecturas del crecimiento previo a tinción
la tinción
570 1 2 3
630 1 2 3
A 0.668 0.526 0.616
A 0.096 0.1 0.097
B 0.637 0.864 0.823
B 1.008 1.108 1.067
C 1.218 1.034 0.986
C 1.021 1.102 1.087
D 1.175 0.611 0.835
D 1.204 1.339 1.361
E 1.166 1.771 1.064
E 1.224 1.26 1.264
F 0.092 0.1 0.091
F 0.087 0.083 0.086
G 0.094 0.092 0.095
G 0.088 0.088 0.09
H 0.093 0.089 0.089
H 0.085 0.086 0.085

A 1+ A 2+ A 3
CW = =0.603
3

  BFI=(AB-CW)/G Promedio Desv. Est.

E. coli 0.0337302 0.2355596 0.2061856
0.3035465 0.1929945
E. coli 0.6023506 0.3911071 0.3523459
B. cereus 0.4750831 0.0059746 0.1704629
0.4005312 0.3150024
B. cereus 0.4599673 0.9269841 0.3647152

BFI

1.4

1.2

0.8

0.6

0.4

0.2

0
E. coli B. cereus
Discusión
Conclusión

Bibliografías

1. Betancourth, M., Botero, J. E., & Rivera, S. P. (2016). Biopelículas: una

comunidad microscópica en desarrollo. Colombia médica, 35(3 Supl 1), 34-
39.
2. Ingraham, J. L., & Ingraham, C. A. (2018). Introducción a la microbiología.
II. Reverté.

3. Muro, A. L., Castillo, F. Y. R., González, F. J. A., & Barrera, A. L. G.

(2017). Biopelículas multi-especie: asociarse para sobrevivir. Investigación y
Ciencia: de la Universidad Autónoma de Aguascalientes, (54), 49-56.
4. Varela, G., & Grotiuz, G. (2018). Fisiología y metabolismo
bacteriano. Uruguay, Editorial Cefa, 43-58.