Instituto o Facultad de: Ciencias Exactas y Naturales

Programa: Química Farmacéutica

ASIGNATURA: BIOLOGÍA INTEGRADA

VICERRECTORÍA ACADÉMICA

CÓDIGO: I03812;103841

Laboratorio 2.
Microscopía: manejo y mediciones

PROFESOR (A) LOCALIZACIÓN

Diana Carolina Polanía Villanueva diana.polania@salesiana.edu.co

I. Nombre: Juan David Izquierdo Verjan; Sara Alejandra Buenaventura

INTRODUCCIÓN

Uno de los grandes avances que tuvo el mundo de la ciencia se dio con la llegada del Microscopio Óptico, que
consistió en la combinación de al menos dos lentes para lograr un aumento más que considerable de lo que
estamos observando, llevando nuestra atención más allá de lo que nuestros ojos pueden apreciar.

Esta invención fue el punto de partida de una gran variedad de avances en el mundo de la ciencia, que
partieron desde el mundo de la Microscopía y que además cambiaron la forma de ver el mundo, desde la
posibilidad de estudiar las bacterias y microbios (lo que dio marcha a la Bacteriología) hasta el análisis de
nuestra propia sangre con el descubrimiento de los glóbulos rojos y blancos, que supuso un fuerte avance en el
mundo de la medicina.
También se aplicó la Microscopía a la resolución de conflictos de índole legal, con las distintas disciplinas
científicas vinculadas a la Criminalística, que derivaron de otras ciencias como lo es la Bioquímica, permitiendo
además mayor precisión a la hora de realizar Reacciones Químicas, mejorando notoriamente la precisión a la
hora de interpretar resultados. Los avances en microscopía han sido considerables, y actualmente contamos
con la Microscopía Electrónica de Barrido que permite conseguir aumentos de más de 100.000X, siendo
derivada del instrumental conocido como Microscopio Electrónico de Transmisión (TEM) que emplea un haz de
electrones en lugar de emplear una fuente lumínica para lograr el enfoque (1).

Si bien el aumento total obtenido en el microscopio compuesto indica los diámetros en que se ha aumentado
la imagen, por ejemplo 100 veces (100x), esto no informa el tamaño real del objeto observado. El
procedimiento más sencillo a través del cual se puede estimar el tamaño de los organismos u objeto observado
es conocer el diámetro del campo óptico (Ф). La unidad de edición con el microscopio es el MICRON = µm,
equivale a 1/1000 mm, anteriormente conocida como micra = µ. Al ser difícil tener una impresión real del
tamaño de un micrón, algunos ejemplos ayudaran a apreciar esta medida: el diámetro de las bacterias oscila
entre 0,5 y 1,0 µm generalmente se observan a 1000 aumento. Una mosca común, con este mismo aumento,
se vería un poco mayor de 75 m, un eritrocito de 75 µm entre otras (2).

I. OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL

Conocer los principios de funcionamiento del microscopio óptico e identificar sus partes principales, con el fin
de aprender a utilizarlo, hacer mediciones y montajes húmedos que le permitan al estudiante usarlo como
herramienta de investigación y formación en Biología.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

✔ Señalar los componentes mecánicos y ópticos del microscopio

✔ Realizar montajes húmedos
✔ Manejar correctamente el microscopio.
✔ Comprender el método de medición indirecta de células u organismo con base en el diámetro del
campo óptico.
✔ Calcular el tamaño aproximado de algunas células y muestras.

II. DOCUMENTOS DE LECTURA Y MATERIAL PREVIO AL LABORATORIO

A. Historia del microscopio:

Sánchez Lera, Rita María, & Oliva García, Ninfa Rosa. (2015). Historia del microscopio y su repercusión en la
Microbiología. Humanidades Médicas, 15(2), 355-372. Recuperado de http://scielo.sld.cu/scielo.php?
script=sci_arttext&pid=S1727-81202015000200010&lng=es&tlng=es.

B. Partes y funciones del microscopio:

https://www.lifeder.com/partes-microscopio-optico/

https://www2.ulpgc.es/hege/almacen/download/35/35697/uso_microscopio_optico.pdf

C. Unidades, resolución y mediciones con el microscopio

https://www.youtube.com/watch?v=bD1tTr2yGE4

https://www.youtube.com/watch?v=my1B-Dsdl28

III. MATERIALES
 SUMINISTRADOS POR LA UNIVERSIDAD
EQUIPOS Y MATERIAL
REACTIVOS MATERIAL BIOLÓGICO OTROS MATERIALES
DE LABORATORIO

Microscopio Azul de metileno No requerido Láminas y laminillas

Equipos de disección Aceite de inmersión Papel de arroz

Goteros

Cajas de Petri

RESPONSABILIDAD DE LOS ESTUDIANTES (POR PAREJAS)

EQUIPOS Y MATERIAL
REACTIVOS MATERIAL BIOLÓGICO OTROS MATERIALES
DE LABORATORIO

No requeridos Etanol para 1 cebolla cabezona Elementos de bioseguridad personal:

desinfección Guantes de látex, bata de laboratorio,
tapabocas.

Hojas de Elodea Cuchilla minora

1 hoja de papel milimetrado

Toallas absorbentes y toalla o paño

de limpieza de superficies

Colores, regla, calculadora y tijeras

Papel de arroz para limpieza de

oculares y objetivos

IV. METODOLOGÍA DE LA PRÁCTICA

A. DETERMINACIÓN DEL DIÁMETRO DEL CAMPO ÓPTICO A MENOR AUMENTO

Coloque una pequeña muestra del papel milimetrado en montaje húmedo y enfoque un cuadrado de 1mm de lado.
Ubique el cuadrado pequeño en un plano diametral y mida en mm el diámetro de campo óptico con el objetivo de
menor aumento.

Una vez obtenido el diámetro en mm realice la conversión a µm

B. DETERMINACIÓN Y CÁLCULO DEL DIÁMETRO DEL CAMPO ÓPTICO A MAYOR AUMENTO
Con el objetivo de mayor aumento, repita el procedimiento anterior.

Los datos teóricos de los diámetros son:

Diámetro del campo óptico a 10X (< aumento) = 1300 µm, entonces:

Diámetro del campo óptico a 40X (> aumento) = 10/40 x1300 = 325 µm

C. MONTAJE DE MUESTRAS Y ESTIMACION DEL TAMAÑO CELULAR

a. Medición del área de una hoja de Elodea

a. Recorte un cuadrado mínimo de 15mm X 15mm de papel

milimetrado, sobre dicho cuadrado ponga una hoja de Elodea de
manera vertical (ver imagen).
b. Determine el número de mm que ocupa la hoja de Elodea por cada
cuadrado de 5mm X 5mm, obteniendo 3 mediciones como se muestra
en la figura.
c. Calcule el área total de la hoja de Elodea sumando las tres áreas y
convierta el área de mm2 a µm2.

b. Medición del diámetro y área de una célula de Elodea

a. Tome una hoja de elodea, ubique la hoja de manera horizontal, haga observación con el objetivo 10X o 40X.
Determine el número de células que hay en el campo óptico horizontal y verticalmente.
b. La Célula de elodea es rectangular, el área de un rectángulo es A = L x h, siendo L = largo y h es = ancho.
c. Determine el número de células que hay horizontalmente en el campo óptico que observó, si el objetivo es 10X
entonces Ф10x = El diámetro de 10x hallado/el número de células que hallo horizontalmente, este valor
corresponde a h.
d. Luego haga el mismo procedimiento, pero divídalo por el número de células halladas verticalmente: Ф10x = El
diámetro de 10x hallado/el número de células que hallo verticalmente, este valor es L. Ahora aplique la fórmula
de área.

D. RESULTADOS

a. DIÁMETRO DEL CAMPO ÓPTICO A MENOR AUMENTO

Estudiante Resultados Dibujo

 Juan David Izquierdo Verjan Objetivo: 4x

Diámetro: 4mm

Diámetro en µm: 4.000

4 mm ( 1.000
1 mm )
µm
=4.000 µ m

Sara Alejandra Buenaventura Objetivo: 4x

Diámetro en mm: 4,3 mm

Diámetro en µm: 4.300µm

b. DIÁMETRO DEL CAMPO ÓPTICO A MAYOR AUMENTO

Objetivo: 40x

Diámetro en mm: 0,4 mm

Diámetro en µm: 400 µm

Estudiante Resultados Dibujo

Juan David Izquierdo Objetivo: 40x

Diámetro en mm: 0,4 mm

Diámetro en µm: 400µm

 4x
=0.1 ⋅4.000 µ m=400 µ m
10 x

400 µ m ( 1.000
1 mm
µm )
=0,4 mm

Sara Alejandra Buenaventura Objetivo: 40x

Diámetro en mm: 0.43 mm

Diámetro en µm: 430µm

c. Medición del área de una hoja de Elodea

Cálculos:
Estudiante Resultados Dibujo

Juan David Área en mm: 37mm^2

Izquierdo Verjan

Área en µm: 37.000.000 µm^2

Primera parte: 4 ⋅5=20 mm

Segunda parte: 3 ⋅5=15 mm

Tercera parte: 2 ⋅4=8−6=2 mm

A2=20+15+2=37 m m2

37 m m =
2
( 1000000 µ m2
1 mm
2 )
=37.000 .000 µ m
2
 Sara Alejandra Área en mm: 41 mm
Buenaventura

Área en µm: 41.000µm

d. Medición del diámetro y área de una célula de Elodea

Nombre de la observación: Células de Elodea

Aumento: 40X

Tinción: Montaje húmedo

Tipo de corte: No se realizó ningún corte

Taxonomía

Reino: Plantae

Phylum: Magnoliophyta

Clase: Monocotyledoneae

Orden: Alismatales

Familia: Hydrocharitaceae

Género: Elodea michx

Especie: elodea canadensis

Nombre común: Elodea

Observaciones: Se observaron las formas rectangulares de las células, en las cuales se

encuentran los cloroplastos y cada una de las células cuenta con su núcleo. Se puede
evidenciar que la pared celular es gruesa y rugosa.

Cálculos:
Nombres Resultados Dibujo
 Juan David Diámetro en mm: 1.4 mm
Izquierdo
Verjan
Diámetro en µm: 1.400 µm

Área en mm: 0.0196 mm^2

Área en µm: 19.600 µm^2

Número de células contadas de forma horizontal: 5

Número de células contadas de forma vertical: 20

1,4
=0,28 h
5
1,4
=0,07 L
20
A=L⋅h
2 2
A =0,07 ⋅ 0,28=0,0196 mm

( )
2
1.000 .000 µ m
2
0,0196 m m = 2
=19.600 µ m2
1 mm

Sara Alejandra Diámetro en mm:

Buenaventura

Diámetro en µm:

Área en mm:

Área en µm:

E. ANÁLISIS DE RESULTADOS / PREGUNTAS ORIENTADORAS

a. ¿Por qué es importante conocer el tamaño de un organismo microscópico?

Es de vital importancia conocer el tamaño de un organismo microscópico para entender como estudiar al
mismo, también para conocer los instrumentos a utilizar para su estudio y no estropear de esta forma la
muestra y por último para poder asignarle una clasificación.

b. ¿Cuántas veces es mayor el poder de resolución máximo del microscopio compuesto, comparado con
el ojo humano?
El poder de resolución máxima del ojo humano es de 200 µm, mil veces más que la resolución máxima del
microscopio compuesto, el cual tiene un poder de resolución máxima de 0,2µm.
0,2 µ m ⋅1.000=200 µ m ( Lo equivalente al poder de resoluci ó n del ojo h umano )

c. Identifique el aumento de los lentes oculares y de los lentes objetivos de su microscopio y registre la
siguiente tabla:

OCULAR (Oc) OBJETIVO (Ob) AUMENTO TOTAL

(At = Oc X Ob)

10x 4x 40 At

10x 10x 100 At

10x 40x 400 At

10x 100x 1.000 At

Con base en los valores de la tabla anterior, resuelva en el espacio destinado, las siguientes preguntas:

d. Se tienen dos microorganismos A y B que miden de largo 50 y 100 μ respectivamente. ¿Cuál de los dos se
verá aumentado mayor número de veces si se observan con objetivo de 10X?
Microorganismo A: 50µm
Microorganismo B: 100µm

Si observamos ambos microorganismos con el objetivo en 10x, ambos se verán aumentados el mismo número
de veces, en este caso 100 veces, esto debido a que ambos microorganismos están siendo observados por el
mismo objetivo y ocular.

e. Al observar una célula utilizando un microscopio con ocular de 10X y objetivo de 10X, se pudo determinar
que su tamaño aproximado era de 0.5 mm. ¿Cuál será su tamaño si se observa con el mismo ocular, pero
con un objetivo de 40X? Tener en cuenta que se habla del tamaño de la célula y no de su imagen.
El tamaño de la célula, será equivalente a un total de 0.4mm o 400 µm.
f. Consulte sobre el poder de resolución y el límite de resolución de un microscopio y calcule los respectivos
valores para los lentes del microscopio usado en la práctica. (El informe debe mostrar los respectivos
cálculos realizados) Tenga en cuenta el video subido a BrightSpace, al respecto.

g. En la siguiente tabla se mencionan estructuras celulares, células y macromoléculas, con sus

respectivos tamaños promedios. Analizar, teniendo en cuenta los poderes de resolución del ojo
humano, del microscopio compuesto y del microscopio electrónico, ¿con cuál o cuáles de ellos son
visibles? Convertir los valores de la columna tamaños a μm.

Células / Estructura / Macromolécula Tamaño Tamaño en μm Visible con…

Virus 200 nm 0.2µm Microscopio compuesto

y electrónico

Bacteria 2.8 nm 0.0028µm Microscopio electrónico

Paramecio 0.3 mm 300µm Ojo humano

Ovulo humano 0.15 mm 150µm Ojo humano

Escherichia coli 2 nm 0.002µm Microscopio electrónico

Virus de la viruela 0.35 nm 0.00035µm Microscopio electrónico

Virus del polio 0.02 nm 0.00002µm Microscopio electrónico

Ribosomas 30 A° 0.0003µm Microscopio electrónico

Glóbulos rojos 7 nm 0.007µm Microscopio electrónico

Cloroplastos 5 nm 0.005µm Microscopio electrónico

Mitocondrias 4 nm 0.004µm Microscopio electrónico

Membrana celular 75 A° 0.00075µm Microscopio electrónico

Pared celular 15 A° 0.00015µm Microscopio electrónico

F. BIBLIOGRAFÍA
https://www.importancia.org/microscopio.php

http://biobasica.weebly.com/uploads/4/6/3/1/46317897/descargar_practica_3.pdf

http://www.facmed.unam.mx/deptos/biocetis/PDF/Portal%20de%20Recursos%20en%20Linea/Apuntes/
2_microscopia.pdf

BENFORD, J.R. The Theory of the Microscope. New York. Bausch and Lomb Inc. 28 p.

B.S.C. S. Adaptación de la versión verde. 1969 Biología; El Hombre y su ambiente. Medellín, Edit Norma P. 11 –
15. Volumen I

Consejo Nacional para la Enseñanza de la Biología 1972. Investigaciones de laboratorio y de campo 3ª. Edición.
México. C.E.C.S.A. 304 p.

DAYSON. R. D. Principio de la Biología Celular México, Fondo Educativo Interamericano. 431 p.

ESCOLAR, L. D. Manual de Laboratorio de Biología General Medellín, Universidad de Antioquia. 159 p.