Universidad de los Llanos

Facultad de Ciencias Básicas e Ingenierías

Programa de Ingeniería Ambiental
Biología

Microscopia l
Kevin Pinilla Peña – 161015127
Andrés Jiménez Daza 161015120

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1. RESUMEN
La microscopía óptica es una herramienta fundamental en la investigación biológica, ya que
permite observar objetos y estructuras muy pequeñas que no son visibles a simple vista.
Utilizando lentes, el microscopio óptico amplía la visibilidad de estos objetos en cientos o
miles de veces.
El campo visual del microscopio es la zona circular que se puede observar bajo un
determinado aumento, y se mide en micras, donde una micra equivale a 0,0001 mm. En
resumen, el microscopio óptico supera las dificultades de tamaño reducido y transparencia
de las estructuras biológicas, y su campo visual se mide en micras.

PALABRAS CLAVES
Micras, óptico,
hjnjjj
2. INTRODUCCIÓN
El microscopio ha sido un instrumento importante para observar un mundo diminuto que
el ojo humano no puede llegar a ver como lo indico (curtis,2006) El ojo humano solo tiene
el poder de observar aproximadamente 1/100 milímetros, o 100 micrómetros agregando
que el poder de resolución es la medida que tiene la capacidad de distinguir un objeto del
otro, con esto se hace referencia, la distancia mínima que debe existir entre dos objetos
para que estos sean vistos, como objetos separados, por ejemplo observar 2 líneas que
se encuentren a una distancia de 100 micrómetro de una de otra, se mirara una sola línea
más ancha. El microscopio fue inventado por el óptico (Zacarías janssen 1583-1638 ) con
la continuidad de un vendedor de telas aficionado a pulir lentes (Anton Leeuwenhoek
1632-1723), logró fabricar lentes lo suficientemente poderosos para observar todo tipo de
bacterias y hongos, A los que llamó “Animálculos” al realizar las primeras observaciones
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Claudia Patricia Negrete Varela, Ana María Petro Villalba

de microorganismos en el agua de lluvia, sarro de dientes, sangre, semen, excrementos,

etc., describió cada uno pequeños animales de gran diversidad. También agregando que
el microscopio de la luz es un instrumento básico, Es fundamental para el estudio de
células y tejidos vegetales, con el poder resolutivo que tiene la capacidad de hacer que
aquellos objetos que están muy juntos aparezcan.
Los microscopios empleados a la microscopía son de tipo óptico o compuesto y el
estereoscopio Los estereoscopios permiten hacer estudios de objetos y especímenes
demasiado pequeños para ser estudiados a simple vista, pero demasiado grandes para
ser estudiados bajo el microscopio compuesto, en su construcción prácticamente los
microscopios básicos se caracterizan por tener un tubo que lleva dos sistemas de lentes:
el ocular en el extremo superior y el objetivo y se magnifica por el ocular, los oculares,
binoculares, dependiendo su tipo , un microscopio puede estar equipado con varios
objetivos, los mas comunes son 2.5X (lupa) 10x, 40X y 100X.

3. METODOLOGÍA
Para el desarrollo de la práctica se llevan a cabo dos procedimientos:
A) Calcule el diámetro del campo de visión para un determinado aumento, siguiendo los
siguientes pasos:
 Recorte 1 cm² de papel milimetrado.
 Ponerlo sobre la parte central del portaobjeto.
 Observando por el ocular y con el objetivo de 4X, mover la muestra hasta lograr que la
línea 0 mm quede en el borde izquierdo del campo visual.
 Enfocar con el objetivo de menor aumento (4X) hasta que se vea con claridad. Enfocar la
preparación quiere decir, situarla a la distancia del objetivo que permite su observación
nítida. Esta distancia se conoce como distancia de trabajo, y es tanto menor cuanto
mayor es el poder de aumento del objetivo.
 Medir el campo visual haciendo coincidir una de las líneas del papel milimetrado con el
borde del campo de visión.
 Contar el número de milímetros que se ven (recuerde que la distancia entre dos líneas es
un milímetro) y estimar aproximadamente la fracción sobrante, si la hay. El resultado será
el diámetro del campo visual para ese aumento (objetivo x ocular).
 Si queremos calcular el diámetro del campo de visión para aumentos mayores, hay que
tener en cuenta que cuanto mayor sea el aumento, el campo será menor, es decir, se
verá menos de la muestra que estemos observando. De forma que, si el aumento es el
doble, el campo será la mitad; si el aumento es el triple, el diámetro será la tercera parte,
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 etc. (inversamente proporcionales). Por tanto, bastará con realizar un sencillo cálculo
matemático para saber el nuevo diámetro.

B) Observación de la célula:
 Haga un frotis bucal con un aplicador.
 Tome un portaobjetos y deposite la muestra.
 Tiña la muestra con unas gotas de azul de metileno, dejándola secar unos minutos.
 Tome la muestra con las pinzas y flaméela en la llama del mechero (dejar enfriar).
 Ubique la muestra en la platina y continúe con el correcto uso del microscopio que ya
conoce.
 Enfocar en 4X, 10X, 40X y 100X(recuerde que para poder enfocar en 100X debe aplicar
una gota de aceite de inmersión en el objetivo para evitar daños en el mismo.

4. RESULTADOS
Los resultados que se llegaron a obtener de los distintos puntos que se desarrollaron a lo
largo de la práctica de laboratorio aparecen evidenciados a continuación: En el caso A), se
puede decir que más o menos por las mediciones que aporto cada grupo se sabe cual es el
área de visibilidad de los objetivos. Mediante operaciones básicas se obtienen los resultados
expuestos en la tabla1.
En el caso B), la célula que se encuentra en el interior de la mejilla y que se puede observar
mediante el frotis bucal es la célula epitelial bucal(García, L. M., Pérez, J. R., & Martínez, C.
S, 2023). Quienes como vemos en las figuras 1.1, 1.2 y en especial en la 1.3 que tiene un
aumento en 40x son células planas y se agrupan en capas, lo que las hace fáciles de
observar bajo un microscopio. Son las células que se pueden observar y que ahora después
de este experimento se tiene en cuenta que las encontramos en los tejidos de la mejilla.

Tabla 1. Campo visual. En la siguiente tabla se evidencian los datos obtenidos del la primera
parte de la practica, en la cual se tenia que medir el campo visual del microscopio. Mediante
operaciones básicas se llegó a tales resultados.

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Objetivo en 4x Objetivo en 10x Objetivo en 40x

Figura1. El campo visual en 4x, para
determinar el diámetro lo que se hace es
promediar los milímetros que caben dentro
del área.
Figura2. El campo visual en 10x, se hace
lo mismo que se hizo con el objetivo de
10x, ya que aun se pueden contar los
milímetros que hay dentro del campo
visual.
Figura3. Objetivo en 40x, en este caso se
pudo hacer lo mismo que en los anteriores
casos. Pero para más exactitud se usa
una formula, ya que aquí la imagen es mas
grande por ende es mas difícil definir una
medida al ojo.

Objetivo en 4x Objetivo en 10x Objetivo en 40x

Figura1.1 Se puede observar que hay Figura1.2 En esta imagen se pueden Figura1.3 En 40x distinguimos se distingue
algunos organismos en la muestra y como apreciar las células con claridad y aunque el núcleo del resto claramente de acuerdo
no se ve a mucho detalle se pasa a más podemos identificar el núcleo aún no se con sus formas a más detalle.
aumento. pueden apreciar con mucho detalle.

5. DISCUSIÓN

Para el desarrollo de la práctica Microscopia I, se debe poseer un mínimo conocimiento

acerca del manejo del microscopio y de como trabajar eficazmente en el área. El primer paso
se centra en determinar el campo visual de cada uno de los objetivos, se mide con ayuda de
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1cm² de papel milimetrado que ayudará a calcular el diámetro, el aumento total se haya
multiplicando el aumento del objetivo x el aumento del ocular y por último para saber cual es
el radio dividimos el área en 2.
Se hace el frotis bucal(por la parte interna de la mejilla) con un hisopo, para sacar una
muestra de tejidos que se deben observaran en el microscopio a una vista mas detallada ya
que según la primera actividad que se desarrolló, gracias al microscopio se pueden observar
cosas como la célula que a simple vista son imposibles de ver. Cuando se toma una muestra
de ese tipo, se usa el azul de metileno para teñir células y tejidos, lo que permite visualizar
mejor las estructuras bajo el microscopio y se deja secar bien sea a temperatura ambiente o
se flamea en la llama del mechero para acelerar el proceso, y se debe dejar enfriar para
poder completar el montaje y cuidar el microscopio. Se recomienda aplicar una sola gota de
azul de metileno para no teñir mucho ya que si la mancha azul es muy grande tampoco se va
a poder observar claramente; si quedo muy teñida la muestra lave con agua destilada para
aclarar un poco y repita el proceso de secado.
Se observan enfocando desde 4x, luego pasa a 10x y así sucesivamente hasta llegar a 100x
y tener la mejor visión del las células o lo que sea que se esté observando. Es este caso solo
se pudo enfocar hasta 40x, debido a que no se tuvo a mano el aceite de inmersión y para
poder enfocar en 100x se debe utilizar si o si dicho aceite para cuidar el lente.

El proceso de tinción en una muestra de laboratorio es fundamental para resaltar las

estructuras celulares y permitir su observación con mayor claridad bajo el microscopio. Una
de las técnicas de tinción más comunes es la tinción de Gram, la cual es de gran utilidad en
laboratorios microbiológicos. Además, la tinción celular es un proceso mediante el cual se
pueden conocer varios aspectos sobre una bacteria, un virus, o un protozoo. Las
coloraciones en microbiología constituyen el primer paso del análisis en el laboratorio para la
identificación de microrganismos(García, L. M., Pérez, J. R., & Martínez, C. S. (2023).

El flameo en una muestra se utiliza para esterilizar el material de laboratorio antes de su uso.
Consiste en pasar la muestra por una llama para eliminar cualquier contaminante que pueda
afectar los resultados de los experimentos. Es un paso importante en el manejo de muestras
en el laboratorio para garantizar la pureza de los resultados(Víctor Manuel, 2008).

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Aunque en el experimento que se realizó en esta práctica se utilizó para secar el azul de
metileno.

En conclusión: se cumplió con cada uno de los objetivos, empezando por conocer las
partes del microscopio y cada una de sus funciones, recomendaciones y uso adecuado del
mismo. Algo muy importante y significativo es conocer el campo visual de cada uno de los
objetivos, el alcance y el aumento que hace que quien mire por sus oculares vea hasta 1000
veces más grande. Queda muy claro como hacer un montaje y por otro lado conocer un poco
acerca de la célula que se encuentra en la parte interna de la boca. Se conoce a cerca del
proceso de tinción y flameo en algunas muestras.

6. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
 Calva-Chavarría, Primo-Alberto; Portillo-Méndez, Alberto-Rafael; Salazar-del-Moral,
Víctor-Manuel; De-la-Rosa-Vázquez, J. M.( 2008)Efecto de la humedad relativa sobre
las tensiones de flameo en aisladores de EPDM sujetos a contaminación científica,
vol. 12, núm. 2.
 Curtis, Helena en 2006: Biología https://www.syndetics.com/unbound
 García, L. M., Pérez, J. R., & Martínez, C. S. (2023). Avances en la investigación
científica. Revista de Investigación Científica, 5(2), 45-56.
 Raquel Boronat Gil y José Pedro López Pérez(2017-2018) Una visión cercana de la
Microscopía en el Laboratorio de Educación Secundaria.