Glucólisis

Dr. Octavio Loera Corral

 Rutas Metabólicas
Reacciones enzimáticas consecutivas que llevan a productos específicos

» Los reactivos, intermediarios y productos se llaman

metabolitos

» Algunos intermediarios o productos de una ruta puede

ser el inicio de otras rutas (bifurcación)

A B C D K

Las reacciones pueden

F G
ser reversibles

En cada paso participa una enzima que reconoce su

sustrato y lo convierte en el siguiente metabolito

https://es.slideshare.net/trenmx/vas-metablicas-integradas
 Metabolismo
• Proceso global de en los seres vivos
• Obtención y uso de la energía libre para realizar sus funciones
 Trabajo mecánico
 Transporte activo de moléculas (vs gradientes)
 Biosíntesis de sus propias moléculas

Catabolismo
Degradación exergónica de compuestos (se captura la energía)

Anabolismo
Biosíntesis endergónica de moléculas nuevas desde metabolitos simples (se invierte energía)

Repaso con
Kahoot
 ¿Para qué sirve la bioquímica?
¿Qué beneficios obtenemos?
• Manipulación de cultivos de seres vivos (Biotecnología)
– Plantas, células, bacterias, hongos, virus.
– Herramientas de diagnóstico (Coef. Respiratorio CO2/O2, Relación P/O)
– Diseño de sistemas para producción de alimentos, biomasa, metabolitos y
nuevas moléculas, medicamentos, etc.

• Cambio climático
– Medición del efecto y estrategias para mitigarlo

• Búsqueda de actividad metabólica extraterrestre

– Triple marcador: H2O Líquida, (CO2 o CH4) y O2 ¿Por qué?

Desde el inicio de la civilización:

Exploración Desarrollo Progreso

Cuento didáctico ¿Para qué sirve la bioquímica?

http://www.veterinaria.org/5359-Baul-veterinaria--para-que-sirve-la-bioquimica-cuento-didactico-.html#.WAeW2cmXNmM
 Reacciones de combustión
en presencia de O2
Metano (Biogás o Gas natural)

+ Energía calórica
(213 Kcal/mol)

Cuando se quema el gas propano (C3H8) de los cilindros de gas :

C3H8(g) + 5O2(g) → 3CO2(g) + 4H2O(g) + Energía

Cuando se quema la celulosa (C6H12O6)n del papel:

C6H12O6(s) + 6O2(g) → 6CO2(g) + 6H2O(g/líq) + Energía (686 Kcal/mol)

Antoine Lavoisier demostró que los animales consumen O2 y producen CO2
no hay flogisto (???)

¿El flogisto de los materiales

produce combustión?

¿… o es algo en el aire?

Se consume O2 y se produce CO2

 Más aportes de Lavoisier
• Un cobayo en una cámara cerrada consumía “aire eminentemente respirable” (oxígeno) y
producía “ácido cálcico” (dióxido de carbono)
• Cuantificó el O2 consumido y el CO2 producido por el metabolismo… y calor.
• Con un calorímetro de hielo, demostró que la combustión y la respiración eran la misma.

Similar a la combustión de la celulosa del papel (C6H12O6) con oxígeno:

C6H12O6(s) + 6O2(g) → 6CO2(g) + 6H2O(g/líq) + Energía (~ 686 Kcal/mol) 1 ca = 4.18 J

http://www.lightdocumentary.com/images/human_processes.jpg
 Análisis de estos Procesos
“… la respiración es sólo una combustión lenta de C, similar la que
ocurre en una vela que se quema… (por presencia del aire sin
flogisto). Los animales que respiran son verdaderos cuerpos de
combustión que se queman y se consumen entre ellos”
Armand Séguin y Antoine Lavoisier… en 1789.

Similar a la combustión de la celulosa del papel (C6H12O6) con oxígeno:

C6H12O6(s) + 6O2(g) → 6CO2(g) + 6H2O(g/líq) + Energía (~ 686 Kcal/mol)

1 ca = 4.18 J

La glucosa se oxida hasta CO2….

Las reacciones de oxidación liberan energía

 ¿Por qué no nos quemamos al respirar?
Aunque sí liberamos algo de calor
¿por qué no el total como la combustión del papel?
¿dónde queda el resto?

• El metabolismo evoluciona para “atrapar” la energía en forma utilizable

• La energía se libera poco a poco en oxidaciones sucesivas

• Así se va atrapando por pasos ordenados

• Desde la “fuente de energía” disponible se guarda como ATP

• El ATP libera la energía según se requiere

 Trabajo
31 kJ/mol 31 kJ/mol
 El metabolismo
se analiza por bloques

Hay metabolitos ●
que conectan los
bloques

Los bloques pueden ser

reversibles:

• Rutas Catabólicas
• Rutas Anabólicas
• Rutas Anfibólicas

Generación o demanda
de energía para
Romper o fabricar
Moléculas nuevas

Iniciamos con la
Glucólisis
Aquí se produce
la mayor parte
de ATP
 Perspectiva Histórica de la Glucólisis
• Glucólisis: rompimiento de la glucosa

• La conversión de Glucosa a Etanol y CO2 en la historia

– Cerveza … restos en tumbas como indicios de nutrición

• Siglo XIX control de producción de vinos

– Los mecanismos se estudian porque implica $
• Los mecanismos se estudian a partir del s. XIX
– Louis Pasteur
• Fermentación: “cambio químico con efervescencia”
• Proceso debido a las LEVADURAS, pero no si se “pasteuriza” el
medio
• VITALISMO

Otro mérito:
Pasteurización para eliminar
“causantes de la fermentación”
No es el aire el causante…
 Eduard Buchner

Eduard Buchner, bioquímico alemán, premio Nobel en 1907

Extactos sin levaduras podían fermentar … sin fuerza vital (!!!)
Trabajos de Arthur Harden y William Young (de 1905 a 1910)
– Se requiere P “inorgánico” en la fermentación
– Fracciones del extracto
1. No dializable y Sensible al calor (ZIMASA)
2. Dializable y termoestable (COZIMASA)

Grandes Retos:

– ¿Qué son cada una de estas fracciones?

1. Mezcla de Enzimas
2. Cofactores (NAD+, ATP, ADP, Iones Metálicos)

• Identificación de Intermediarios

Estrategia : INHIBIDORES Acumulación de intermediarios

Glucosa B C X D ?
 Otras observaciones

• Los inhibidores actuaban en otros tipos de extractos celulares

• … intermediarios comunes
• ¿bioquímica común?

Hacia 1940 habían mejores métodos de separación de compuestos

Elucidación de la RUTA COMPLETA DE LA GLUCÓLISIS : 10 reacciones

Contribución de la ciencia alemana

• Gustav Embden
Glucosa
Glucólisis
Glucosa
• Otto Meyerhorf
• Jacob Parnas

Piruvato

La misma ruta en casi todos los seres vivos

 Glucólisis
Todos los compuestos presentes en los extractos de Buchner
¿por qué requiere fósforo inorgánico para proceder in vitro?

Escriba la estequiometría de la reacción (Sustratos y Productos):

 La estrategia de la Glucólisis

• La Glucosa entra a las células por transportadores (reversibles)

• Las enzimas glucolíticas están en el citosol

• La glucosa puede salir de nuevo si no se etiqueta (primera
reacción de la glucólisis)
Estequiometría de esta reacción:

________ + ____ ________ + ____

 La estrategia Química de la Glucólisis

1. Adición de P a la glucosa
2. Conversión a intermediarios fosforilados… ¿por qué?
3. Acoplamiento de estas transferencias a la
formación de ATP
Go de la hidrólisis de fosfatos orgánicos
COMPUESTO Go (kJ/mol)
Fosfo-enol-piruvato -61.9
*
1,3-Bifosfo-glicerato -49.4
*
Fosfato de acetilo -43.1
Fosfato de creatina -43.1
Pirofosfato (PPi) -33.5
ATP AMP + PPi -32.2
ATP ADP + Pi -30.5
Fosfato-1-de Glucosilo -20.9
Fosfato-6-de Fructosilo -13.8
*
Fosfato-6-de Glucosilo -13.8
*
Fosfato-3-de Glicerilo -9.2
*

* Intermediarios de la glucólisis
 Dos etapas (Inversión y Recuperación)

I. Utilización de ATP para generar

2 triosas fosfatadas (2 GAP).
Rxs 1 a 5

II. Conversión del GAP a Piruvato,

formando ATP.
Rxs 6 a 10

Balance Global:

Glucosa + 2ADP + 2Pi + 2NAD+

2Piruvato + 2ATP + 2NADH + 2H+ + 2H2O

 Reacción 1

Para otras reacciones

Enzima Hexoquinasa (HK)

Las HK´s trasfieren grupos fosforilo entre el ATP y un metabolito

Es irreversible en condiciones fisiológicas

∆Go´=-16 kj/mol
 Reacción 2

Enzima Fosfoglucoisomerasa (PGI)

La PGI transforma a una aldosa en una cetosa

Las formas lineal y cíclicas existen simultáneamente, predomina la cíclica

∆Go´=+1.7 kJ/mol, no se favorece la acumulación de ningún reactante

 Reacción 3

Enzima Fosfofructoquinasa (PFK)

La Rx es irreversible in vivo (∆Go´)

 Reacción 4

Enzima Aldolasa

¿Cómo se puede favorecer el avance de la Rx con semejante ∆Go´?

Concentraciones in vivo de DHAP y GAP muy bajas

Hay acumulación de FBP con inhibidores (ácido iodoacético)

 Reacción 5

Enzima Triosafosfatoisomerasa (TPI)

DHAP y GAP se interconvierten entre sí

Símil a la interconversión entre F6P y G6P (Rx 2)

A pesar del ∆Go´, [GAP] es muy baja in vivo

FIN de la Fase de Inversión de Energía

 Dos etapas (Inversión y Recuperación)

I. Utilización de ATP para generar

2 triosas fosfatadas (2 GAP).
Rxs 1 a 5

II. Conversión del GAP a Piruvato,

formando ATP.
Rxs 6 a 10

Balance Global:

Glucosa + 2ADP + 2Pi + 2NAD+

2Piruvato + 2ATP + 2NADH + 2H+ + 2H2O

 Grupo acil-fosfato de alta energía

Reacción 6 ¿Qué átomo de C cambió el edo. de oxidación?

Enzima Gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa (GAPDH)

In vivo la Rx se favorece por la relación alta:

NAD+ / NADH [NAD+ ] elevada

El 1,3-BPG es el primer intermediario capaz de transferir el P al ADP

Para 1,3-BPG, ∆Go´ de transferencia del P = -49.4 kJ/mol

 La estrategia Química de la Glucólisis

1. Adición de P a la glucosa
2. Conversión a intermediarios fosforilados… ¿por qué?
3. Acoplamiento de estas transferencias a la
formación de ATP
Go de la hidrólisis de fosfatos orgánicos
COMPUESTO Go (kJ/mol)
Fosfo-enol-piruvato -61.9
*
1,3-Bifosfo-glicerato -49.4
*
Fosfato de acetilo -43.1
Fosfato de creatina -43.1
Pirofosfato (PPi) -33.5
ATP AMP + PPi -32.2
ATP ADP + Pi -30.5
Fosfato-1-de Glucosilo -20.9
Fosfato-6-de Fructosilo -13.8
*
Fosfato-6-de Glucosilo -13.8
*
Fosfato-3-de Glicerilo -9.2
*

* Intermediarios de la glucólisis
 Reacción 7

Enzima Fosfogliceratoquinasa (PGK)

1,3-BPG transfiere el P al ADP

“Fosforilación a nivel sustrato”

 Reacción 8

Enzima Fosfogliceratomutasa (PGM)

Las mutasas transfieren grupos funcionales en la misma molécula

El 2-Fosfoglicerato (2PG) es el intermediario para formar

al siguiente compuesto de “alta energía”

¿Por qué el 2PG no puede fosforilar el ADP?

 Reacción 9

Enzima: Enolasa
 La estrategia Química de la Glucólisis

1. Adición de P a la glucosa
2. Conversión a intermediarios fosforilados… ¿por qué?
3. Acoplamiento de estas transferencias a la
formación de ATP
Go de la hidrólisis de fosfatos orgánicos
COMPUESTO Go (kJ/mol)
Fosfo-enol-piruvato -61.9
*
1,3-Bifosfo-glicerato -49.4
*
Fosfato de acetilo -43.1
Fosfato de creatina -43.1
Pirofosfato (PPi) -33.5
ATP AMP + PPi -32.2
ATP ADP + Pi -30.5
Fosfato-1-de Glucosilo -20.9
Fosfato-6-de Fructosilo -13.8
*
Fosfato-6-de Glucosilo -13.8
*
Fosfato-3-de Glicerilo -9.2
*

* Intermediarios de la glucólisis
 Reacción 10 De Rx 1

Enzima: Piruvatoquinasa (PK)

Algunos puntos sobre la PK:

1. Genera otro ATP

2. Energéticamente favorable… “arrastra” a las 2 Rx´s anteriores

“Fosforilación a nivel sustrato”

Dos etapas:
I. Utilización de ATP para generar
2 triosas fosfatadas (2 GAP).
Rxs 1 a 5

II. Conversión del GAP a Piruvato,

formando ATP.
Rxs 6 a 10

Balance Global:

Glucosa + 2ADP + 2Pi + 2NAD+

2Piruvato + 2ATP + 2NADH + 2H+

+ 2H2O
NAD+
Es el agente oxidante más importante de la Glucólisis

2Hº
+ H+

Debe ser reoxidado para su uso continuo por estas vías:

1. Fosforilación oxidativa ATP

2. Reducción de piruvato a lactato

3. Fermentación alcohólica
Destinos del Piruvato

Glucosa
Glucólisis
Glucosa

Piruvato

Ciclo de Krebs
o TCA (del inglés)
 Conversión de Piruvato a Lactato

por la Lactato Deshidrogenasa

¿Qué átomo modifica su número de oxidación?

 Conversión de Piruvato a Etanol

por la Alcohol Deshidrogenasa

¿Qué átomo modifica su número de oxidación?

Fermentación Homoláctica

Glucosa + 2 ADP + 2 Pi 2 lactato + 2 ATP + 2 H2O

∆Go´ = - 196 kJ/mol

Formación de 2 ATP, ∆Go´ = + 61 kJ/mol

31% de eficiencia

Fermentación Alcohólica

Glucosa + 2 ADP + 2 Pi 2 Etanol + 2 ATP + 2 CO2

∆Go´ = - 235 kJ/mol

26% de eficiencia

En condiciones fisiológicas la eficiencia se aproxima al 50%,

Disipación por calor… proceso irreversible
 Regulación Metabólica y Control

En el edo. estacionario, para cualquier metabolito “S”, [S] es cte.

[S] se modifica si: V1 < V2 ó V1 > V2

Alteración del edo. estacionario Activación del control metabólico

(Mantenimiento de Homeotasis)

¿Por qué las células mantienen la Homeostasis?

•Edo. de máxima eficiencia termodinámica

•Metabolitos que son intermediarios de varias rutas
•Velocidad de respuesta baja si hay variaciones grandes en [metabolitos]
•Variaciones grandes de [intermediarios] pueden alterar la osmolaridad
 Reacciones en la Glucólisis
¿Candidatas para regulación?
 Reacciones en la Glucólisis
¿Candidatas para regulación?
 Reacción 1

Para otras reacciones

Enzima Hexoquinasa (HK)

Las HK´s trasfieren grupos fosforilo entre el ATP y un metabolito

Se regulan por alosterismo: inhibición si se acumula el producto G6P

Activación: ATP/AMP bajo (= poca cantidad de ATP)

Inhibición: ATP/AMP alto (= mucha cantidad de ATP)

Irreversible en condiciones fisiológicas ∆Go´=-16 kj/mol

 Reacción 3

Enzima Fosfofructoquinasa (PFK)

La PFK se regula por alosterismo

AMP (+), ADP (+), fructosa-2,6-bifosfato ó F2,6BP (+++)

ATP (--), citrate (--).

La Rx es irreversible in vivo (∆Go´)

 Reacción 10 De Rx 1

Enzima: Piruvatoquinasa (PK)

Algunos puntos sobre la PK:

1. Genera otro ATP

2. Energéticamente favorable… “arrastra” a las 2 Rx´s anteriores
3. Se regula por alosterismo:
FBP (+), producto de la Rx 3
ATP (--), alanina (--) y acetil-CoA (--)

“Fosforilación a nivel sustrato”

 ¿G6P sólo para glucólisis?
• Las rutas están interrelacionadas en una red multidimensional

• Destinos de la G6P:

– Glucólisis para producir ATP

– Degradación parcial a acetil-CoA para biosíntesis de Lípidos

– Conversión a otros azúcares como glucosamina, galactosa, etc (para glicosilación)

– Hidrólisis a G y P para restituir niveles de G en sangre.

– Escherichia coli construye todos sus esqueletos de C apartir de G

– Ruta de las PENTOSAS DE FOSFATO para producir NADHP y/o Pentosas

• Si una célula “decide” usar G6P para un propósito, se afectan todas las
rutas donde G6P es un intermediario
 El metabolismo
se analiza por bloques

Hay metabolitos ●
que conectan los
bloques

Siguiente bloque:
Entrada del Piruvato al
Ciclo de Krebs (CK)

Eventos en el CK:
• Oxidación total del C
• Captura de esos e-
(NADH y FADH2)
• Esos e- entran al
metabolismo
energético
• Producción de
GTP=ATP
Aquí se produce • Producción de
la mayor parte metabolitos para
de ATP
otras rutas
Hay otros reacciones
que también producen
ATP