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RESUMEN
Se estudió in situ las distintas etapas de la línea de producción de ensalada desde entrada de materias primas
hasta la zona de las mesas frías en el momento del autoservicio por parte del usuario para conseguir una dismi-
nución en el número de microorganismos presentes en los alimentos elaborados en frío, muestreando la línea en
las cocinas de tres centros (A, B, C).
Gran número de enterobacterias y de microorganismos aerobios mesófilos se aislaron de los ingredientes de
la ensalada antes de su lavado e higienización. Se observó que después del lavado con hipoclorito sódico el nivel
de microorganismos disminuyó. También las tablas de corte, cuchillas, cuchillos y otros utensilios se limpiaron
parra evitar la supervivencia y crecimiento de los microorganismos.
Se hizo mucho hincapié en la formación del personal manipulador, mostrándoles incluso los resultados de
las placas de cultivo sembradas durante la elaboración de los alimentos incide muy positivamente en la elabora-
ción higiénica de los alimentos. Los productos alimenticios elaborados bajo esta metodología de trabajo, pre-
sentan un gran margen de seguridad, distando mucho de los límites fijados por la norma microbiológica corres-
pondiente.
SUMARY
Salad samples are studied in the production line included the arrives raw ingredients, those which had been
washed and cut, and the final product during the storage and display in three school kitchens (A, B, C).
Large numbers of enterobacteria and aerobic mesophilic coloniees were isolated from the ingredients salad
before sanitising and washing. It has been observed after cutting and using active chlorine for wasshing, the
microorganism levels were lower. Also cutting boards, tables, slicers, knives and other utensils were cleaned to
avoid the survival and /or growth of microorganisms.
4 AN. VET. (MURCIA) 16: 3-14 (2000). MEJORA HIGIÉNICA EN LA LÍNEA DE ELABORACIÓN DE ENSALADAS EN
COMEDORES COLECTIVOS. A.M.VERA Y M.MARTÍNEZ TOMÉ
The illustration of microbiological infection by showing the culture plates to the staff receiving training
proved to be a useful tool in improving good manufacturing practices.
Una vez situados a pie de línea, toma- (PROKOPOWICH y BLANK, 1991) y se in-
mos muestras de los ingredientes antes y des- cubaron a 37ºC durante 24-48 horas. Típicas
pués de las manipulaciones que sufren, así colonias negras (gram-positivas, cocos
como de las superficies de trabajo, recipien- catalasa-positivas) se sometieron al test de la
tes, cuchillos y demás útiles empleados en la coagulasa (Difco Laboratorios, Detroit MI,
elaboración de las ensaladas. Los utensilios se USA).
desinfectaban con hipoclorito y se muestrearon Los microorganismos psicrotróficos se
antes y después de su limpieza; incluso si se determinaron en las muestras haciendo una
utilizaban para manipular otros ingredientes, siembra en superficie de diluciones seriadas
se volvían a muestrear. sobre el Agar-peptona de caseína-glucosa-ex-
Las muestras para su traslado al labora- tracto de levadura (Merck), las cuales fueron
torio las introducíamos en la nevera portátil entonces incubadas a 5ºC durante 7-10 días.
con placas de hielo en su interior y con un ter- No se utilizó medio selectivo para dichas po-
mómetro adecuado para controlar la tempera- blaciones (Sheridan, 1995). Para aislar
tura máxima y mínima. La nevera además tie- Estreptococos tipo D de Lancefield las mues-
ne un sistema de refrigeración incorporado y tras se sembraron sobre placas con Agar-
conectable al enchufe del coche. Canamicina-Esculina-Azida (Merck) y se in-
cubaron a 37ºC durante 24 horas.
Las poblaciones anaerobias se determi-
Metodología de la microbiología naron en tubo con el Agar-sulfito-Polimixina-
Sulfadiacina (SPS) de Merck®, que según
Para el enriquecimiento previo no selec- ANGELOTTI et al. (1962) es para el aisla-
tivo de bacterias especialmente de miento y enumeración de Clostridium
Enterobacteriáceas patógenas a partir de ali- perfringes y el Agar-triptona-sulfito-
mentos y otros materiales se utilizó Agua de Neomicina (TSN) que se utiliza según las es-
peptona (tamponada) Merck®. Se resuspenden pecificaciones de MOSSEL (1959) y
25,0 g de muestra de alimento en Agua de MARSHALL et al. (1965). Se incubaron en
peptona (225 ml) y se homogeneiza en un jarras anaerobias a 46ºC durante 24 horas. Las
Stomacher (IUL Masticator No.0927/94 tipo condiciones anaerobias se producen en dichas
0400) (HARRISON et al. 1996) y a partir de jarras con Anaerocult A (Merck) generador de
ella se realizan las diluciones seriadas. dióxido de carbono (HARRISON et al. 1996).
Para el recuento de aerobios mesófilos Enterobacterias se determinaron (37ºC,
se utilizó el medio Agar-peptona de caseína- 18-24 h) mediante siembra en superficie de
glucosa-extracto de levadura de Merck®. El diluciones homogeneizadas (1.0 ml) de la
inóculo (1.0 ml) se disemina por la superficie muestra sobre Agar McConkey (Merck).
del agar con la ayuda de un asa de vidrio esté- Coliformes totales se determinaron con el pro-
ril (PROKOPOWICH y BLANK, 1991). Las cedimiento del número más probable utilizan-
placas ya sembradas se incuban a 37ºC de tem- do el medio de cultivo selectivo Caldo-
peratura durante 24 horas. laurilsulfato (Merck) seguido de la confirma-
En el aislamiento y la diferenciación de ción de los tubos gas-positivos en el medio de
Staphylococcus aureus en alimentos se utilizó enriquecimiento selectivo Caldo-Verde brillan-
el Agar Baird Parker (Merck) te-bilis-lactosa (BGBB) (Merck). El período
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servar como a pesar de que la materia prima caso la lechuga no era iceberg); en este
recepcionada presenta elevado el número de muestreo también recogemos la caída de los
bacterias aerobias mesófilas (3,3.105 u.f.c./gr) niveles microbiológicos de la lechuga, después
y enterobacterias (2,6.105 u.f.c./gr), estos ni- del tratamiento desinfectante (recuento de
veles disminuyeron drásticamente con el pro- aerobios mesófilos 0,7.10 3 u.f.c./gr y
ceso de lavado y clorado llegando a unos ni- enterobacterias 0,3.103 u.f.c./gr), de igual for-
veles de producto final mucho más bajos (re- ma comprobamos la disminución de estos va-
cuento de bacterias aerobias mesófilas 0,2.103 lores microbiológicos en las superficies de tra-
u.f.c./gr y 1,8.101 u.f.c./gr de enterobacterias). bajo. En concreto, la tabla de corte utilizada
En la figura 1 también recogemos los ni- inicialmente para trocear la lechuga estaba muy
veles de hipoclorito detectados en las aguas contaminada (recuento de aerobios mesófilos
de lavado. Así se detectó que el nivel de cloro 2,3.102 u.f.c./cm2 y enterobacterias 7,8.101
libre después de lavar la lechuga era de 0,05 u.f.c./cm2), no obstante en la misma tabla des-
ppm, mientras que en el tomate los niveles fue- pués de desinfectada, el recuento de aerobios
ron superiores a 0,3 ppm. mesófilos era de 6,0.101 u.f.c./cm2 y el de
En el centro B (figura 2) observamos que enterobacterias, 2,5.101 u.f.c./cm2; de forma
la lechuga del proveedor llega muy contami- análoga ocurría para la encimera que antes de
nada (recuento de aerobios mesófilos 6,0.107 limpiarla estaba muy contaminada (recuento
u.f.c./gr y enterobacterias 0,2.107 u.f.c./gr, in- de aerobios mesófilos era de 1,9.102 u.f.c./cm2
cluso al desechar las hojas externas (en este y el de enterobacterias, 6,9.101 u.f.c./cm2) y
después de lavarla, los resultados fueron ne- da, que una vez cortada, se desinfecta con le-
gativos. jía de uso alimentario y el resultado del análi-
Con respecto a los niveles de hipoclorito sis microbiológico es negativo. El punto de
detectados en el lavado del tomate son ade- contaminación en este caso fue de nuevo la
cuados (0,2 ppm), pero disminuyen en gran máquina cortadora, pues los resultados de la
escala al lavar la lechuga, por lo que se reco- lombarda cortada eran de 5,0.103 u.f.c./gr en
mienda el lavado previo bajo el chorro de agua el recuento de aerobios mesófilos y 2,5.103
Por último, el proceso de elaboración de u.f.c./gr de enterobacterias.
ensalada en el centro C, lo recogemos en la Debemos también destacar que
figura 3. Es similar a los anteriores y los valo- muestreamos la tabla de corte de la lechuga al
res microbiológicos de los ingredientes mejo- terminar de cortar las hojas externas de la mis-
ran drásticamente, si comparamos los niveles ma y estaba muy contaminada. Se desinfectó
de la materia prima del proveedor, con los ni- con agua y lejía antes de empezar a trocear la
veles posteriores a la desinfección. En concre- lechuga y el análisis microbiológico de la ta-
to, los análisis de la lechuga del proveedor fue- bla de corte resultó negativo.
ron 9,0.105 el recuento de aerobios mesófilos En este caso, al analizar el cloro libre que
y 0,1.105 de enterobacterias, mientras que una resta tras el lavado y desinfección de la lechu-
vez cortada y lavada, el resultado fue de 1,4.103 ga, con el método de o-toluidina o DPD, ob-
y 0,7.103 u.f.c./gr, respectivamente. En este servamos que la cantidad no es suficiente para
centro, el ingrediente adicional fue la lombar- una desinfección adecuada, por tanto debere-