EXPERIMENTO 1- AISLAMIENTO DE SUSTANCIAS ORGÁNICAS A PARTIR DE

FUENTES NATURALES, MEDIANTES EXTRACCION SOLIDO-LIQUIDO Y

LIQUIDO-LIQUIDO

Los pigmentos son estructuras químicas que por medio de la refracción de la luz dan color a diversos
materiales. Los pigmentos se clasifican en inorgánicos y orgánicos. Los primeros son de origen
mineral, mientras que los segundos pueden ser productos naturales o sintéticos. Los pigmentos
naturales son extraídos de plantas y animales... (Wani y col, 2004).

Un criterio útil de clasificación de los colorantes es en base a su estructura molecular, que

permite agrupar componentes afines en cuanto a su comportamiento y propiedades genéricas
(Tabla 1) aunque hay algunas clasificaciones que se basan por su tipo de teñido, características
físicas, etc.

Tabla 1. Clasificación química. insaturados y la mayoría son tetra-terpenos

con 40 átomos de carbono. Los colorantes y
pigmentos de este grupo presentan una
paleta de colores que varía desde amarillo
pálido, pasando por anaranjado, hasta rojo
oscuro. Ejemplos de ello son:

❖ licopeno (color rojo del tomate y la

sandía)
❖ beta caroteno (color anaranjado de
la zanahoria)

son solubles en etanol, metanol y éter

libres o disueltos en la fracción lipídica,
Fuente:
asociados a proteínas,carbohidratos y
http://sgpwe.izt.uam.mx/files/users/uami/acym/Pigmentos_en_alimentos.pdf ácidos grasos.

ocuparemos la flor Hemerocallis que Antocianinas

contiene una sola antocianina
Las antocianinas forman uno de los seis
(cianidina-3-rutinósido) y dos
grupos de flavonoides existentes. Los
carotenoides (zeaxantina y luteína).
flavonoides son metabolitos secundarios de
Luteína y zeaxantina son pigmentos las plantas, esto es: compuestos que la
de color amarillo, solubles en grasa. planta elabora, pero no son vitales, pues en
su ausencia el organismo puede continuar
Carotenoides viviendo. Las antocianinas son verdaderos
Los carotenoides se presentan en colorantes naturales, ya que son pigmentos
colorantes y pigmentos naturales en plantas hidrosolubles. Son responsables de los
superiores, algas, hongos y bacterias. La colores rojo, anaranjado, azul y púrpura de
estructura química básica de estos las uvas, manzanas y fresas. Las funciones
compuestos poseen dobles enlaces de las antocianinas en las plantas son
múltiples, y van desde la protección de la
radiación solar hasta la de atraer insectos HIPÓTESIS
polinizadores.
Se ha estudiado que el cambio de un pH A través de un proceso de extracción sólido-
ácido (mayor estabilidad) hacia otro alcalino líquido se espera obtener los pigmentos de
hace variar de color hacia el rojo (efecto nuestra flor.
batocrómico) dando compuestos inestables
que se decoloran rápidamente. También las OBJETIVO
antocianinas son afectadas por la
temperatura, produciéndose cambios en su ❖ Extraer el pigmento de nuestra flor
estructura molecular (pérdida del glicósido) ❖ Implementar técnicas de extracción
que resulta en una pérdida del color. para obtener nuestros compuestos
orgánicos

Extracción VARIABLES
1

Cuando se ha seleccionado una fuente de ★ temperatura

colorante natural, el siguiente paso es aislar ★ pH
el mismo del resto de la estructura de la
planta o animal que lo contiene. A este MATERIALES
proceso se lo denomina extracción. El
método a emplear para extraer un
determinado pigmento o colorante, va a MÉTODO
estar condicionado por una serie de factores El troceado de las flores fue realizado de
que hace que cada extracción sea un forma manual; básicamente se separaron
proceso particular y específico para cada todos los pétalos del tálamo y demás
organismo portador y para cada tipo de estructuras de las flores ya que estas
material a extraer. estructuras dan lugar a condiciones de
hacinamiento al almacenarlas en
SÓLIDO- LÍQUIDO refrigeración y debido a su contenido en
Es una operación unitaria que está referida humedad, facilitan en gran medida la
a la disolución de uno o mas componentes putrefacción del material vegetal de
de una muestra sólida, por el contacto que interés. (Cornejo, D. 2011). Los pétalos
se establece con un disolvente líquido. se fueron almacenados bajo refrigeración
concentra el solvente y se recuperan los por un período de una semana. Este
productos deseados, para que se realice la proceso se repitió hasta obtener una
extracción debe haber un contacto cantidad significativa de material vegetal.
superficial directo entre ambas fases y por 3 Secado Teniendo en cuenta las
tanto es conveniente que el sólido esté propiedades de los carotenoides; se
finamente dividido y que el proceso de procedió a realizar un secado a
extracción se repita varias veces para temperatura ambiente; distribuyendo los
incrementar su eficiencia pétalos en una superficie lo más amplia
posible cubierta de papel bond (sin
ningún tipo de escritura en el área de
1
contacto con las muestras); evitando que
http://agris.fao.org/agris-search/search.do;jsessionid=9649D36CE618E357F8
D37B383B8E9A75?request_locale=fr&recordID=US9727862&query=&source estén uno encima de otro o demasiado
Query=&sortField=&sortOrder=&agrovocString=&advQuery=&centerString=&
enableField= cerca entre sí. (Cornejo, D. 2011).
Posteriormente se los cubrió con papel
http://eljardindevebook.blogspot.mx/2009/04/plantas-que-florecen-en-febrero_
18.html
bond doblado en el centro, para
maximizar su contacto con el aire del
ambiente. Debido a que se tuvo a
disposición una casa de madera, el calor
ambiental tendía a acumularse de cierta
manera, por lo que el secado prosiguió
hasta obtener pétalos de consistencia
crujiente. De este modo se logró evitar la
pudrición de los pétalos; se consiguió
una evaporación uniforme; se evita el
contacto con la luz del sol y de cualquier
fuente de calor excesiva que degrade a
los compuestos de interés. (Cornejo, D.
2011). Pulverizado Una vez obtenidos los
pétalos secos se los guardo en
recipientes de plástico con tapa rosca no
translucidos. Posteriormente fueron
troceados lo mejor posible mediante
métodos mecánicos y molidos con un
mortero. El producto obtenido fue
tamizado para obtener solo el material
más fino. (Cornejo, D. 2011).
Almacenamiento Este material fue
almacenado en recipientes de plástico de
tapa rosca no translucidos, lejos de
cualquier fuente de calor, o de cualquier
contacto con la luz solar, a temperatura
ambiente. Pesaje Para cada muestra se
peso una cantidad representativa de
material vegetal, que fue colocado en
botellas de vidrio, color ámbar con tapa
rosca. En total se obtuvieron veinte
muestras (cuatro métodos de extracción
a cinco repeticiones por cada método).
Extracción de carotenoides del material
vegetal Se extraerán los carotenoides
con cuatro métodos diferentes. Método
No 1 Consistirá en una maceración o
extracción sólido-líquido con los
siguientes parámetros: Para la
extracción se añadió alrededor de 80ml
de éter de petróleo al material vegetal
pesado y guardado en botellas de vidrio.
Luego se cerró herméticamente la tapa
de la botella; y se la sello con una
cobertura de plástico; fueron utilizados
empaques de aluminio colocados en las
tapas de los recipientes para evitar su
contacto con las mismas (solventes
como el Clorofomo disuelven el plástico
por lo que es conveniente aislar con
aluminio cualquier material usado en la
extracción, ya sea la tapa o parte de la
tapa). Se almacenó las botellas en
oscuridad y ausencia de fuentes de calor.
Adicionalmente las botellas fueron
agitadas periódicamente una vez al día.
(Cornejo, D. 2011). Este proceso tuvo una
duración de ocho días aproximadamente,
luego de lo cual se filtró el material
vegetal (este proceso se detalla en la
siguiente sección) y se recuperó el
solvente en botellas de 150ml. Luego
este proceso de extracción se repitió 2
veces más. (Cornejo, D. 2011). Método No
2 Se empleó el mismo esquema que el
método 1, pero el solvente de extracción
fue éter etílico y cloroformo (1:1). Los
demás parámetros fueron mantenidos
como: temperatura, agitación, relación
material vegetal-solvente y tiempo de
extracción. Método No 3 Se continuó
empleando el esquema propuesto para el
método 1, en este caso el solvente de
extracción fue cloroformo. Manteniendo
todos los parámetros propuestos en el
método 1. 4 Método No 4 Se siguió
empleando el esquema propuesto para el
método 1, en este caso el solvente de
extracción fue únicamente Isopropanol.
Sin variar los demás parámetros. Filtrado
El material vegetal se separó del
solvente mediante un tamiz, gasa,
algodón y un embudo. Por supuesto se
trató de que el material vegetal se
decante y de que solo el solvente pase
de una botella a la otra. El material
vegetal se recuperó en su totalidad para
repetir este proceso dos veces más
como se mencionó anteriormente.
Mezclado.- Posteriormente para la
determinación de la concentración se
construyeron muestras compuestas
hechas con las repeticiones de cada
método de extracción. De este modo se
va a obtener un total de 24 datos de
concentración. Saponificación.- En los
extractos obtenidos existen una infinidad
de compuestos que también son
solubles en los solventes seleccionados;
por lo tanto fue necesario un paso
adicional de saponificación y filtrado de
estos compuestos para removerlos. Los
carotenoides no toman parte de este
proceso, lo que permitió separarlos de
forma adecuada. (Natalucci C.L., 1982).
Se trabajó con dos muestras de cada
método. Fueron tomados 3 gramos de
muestra a los cuales se añadió 5 gramos
de hidróxido de potasio, 5 ml de agua y
90 ml de metanol. Se adicionó también 2
gramos de ácido ascórbico, para evitar la
oxidación de los carotenoides presentes
(el ácido ascórbico funciona como
antioxidante). La muestra se calentó en
baño maría con reflujo a 50°C por 30
minutos. Luego de este tiempo se
formaron residuos de consistencia
pastosa en las paredes del recipiente, y
mostraron una coloración rosada.
(Natalucci C.L., 1982). Las muestras se
taparon con una película de plástico, y se
dejaron reposar por aproximadamente 20
minutos en oscuridad. (Natalucci C.L.,
1982).

Bibliografías

Wani, K.S., Naphade, B.S., Chaudhari, B.L.,

and Chincholkar, S.B. 2004. “Pigment
Production”. in Concise Encyclopedia of
Bioresource Technology. Ashok Pandey, PhD.
The Haworth Reference Press, Inc. 645-652