PRACTICA 5.

ACTIVIDAD ENZIMATICA
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PRACTICA
EQUIPO 1: DIONICIO BALDERAS ANGEL EDUARDO, HERNANDEZ CARRASCO 5. ACTIVIDAD
JONATHAN ENZIMATICA
DAVID, SÁNCHEZ GALINDO BERENICE; Leticia García Albarrán, Lunes 14-4 pm, NRC: 13959, otoño 2021
EQUIPO 1: DIONICIO BALDERAS ANGEL EDUARDO, HERNANDEZ CARRASCO JONATHAN DAVID, SÁNCHEZ GALINDO BERENICE; Leticia García Albarrán, Lunes 14-4 pm, NRC: 13959, otoño 2021
¿Se puede determinar la actividad de la enzima Catalasa por la cantidad de Oxigeno liberado?
CONCEPTOS RESULTADOS
Resultados
DEFINICIÓN DE ENZIMA: son proteínas que catalizan reacciones químicas en los seres vivos. Los enzimas son catalizadores, es decir, sustancias que, sin consumirse RESULTADOS
en una reacción, aumentan notablemente su velocidad. No hacen factibles las reacciones imposibles, sino que solamente aceleran las que espontáneamente Discusión de resultados
podrían producirse. Ello hace posible que en condiciones fisiológicas tengan lugar reacciones que sin catalizador requerirían condiciones extremas de presión,
temperatura o pH. OBJETIVOS DISCUSIÓN DE RESULTADOS
CONCLUSIÓN
CARACTERÍSTICAS DE LAS ENZIMAS: l. Son proteínas; II. Son los catalizadores más eficientes que se conocen. La mayor parte de las reacciones celulares ocurren a
una velocidad alrededor de un millón de veces más alta de lo que serían en ausencia de enzimas; III. La mayoría de las enzimas se distinguen por su especificidad, lo
que significa que cada conversión de un reactivo (llamado sustrato) en un producto es catalizada por una enzima determinada; IV. Quizá una de las más notables Evalúa la actividad de la enzima Catalasa de diferentes CONCLUSIÓN
Procedimiento
características es que las acciones de muchas enzimas están reguladas de modo que pueden cambiar de un estado de baja actividad a uno de alta actividad, fuentes biológicas, comparando el efecto de la
dependiendo de las condiciones celulares en las que se encuentren. temperatura y de algunos inhibidores como el Pb y el CN PROCEDIMIENTO
Clasificación de las enzimas.
N. Clase NOMBRE REACCIÓN QUE CATALIZAN
Catalizan reacciones de óxido-reducción
1 OXIDORREDUCTASAS
Catalizan reacciones de transferencia de grupos
MATERIAL
MATERIAL REACTIVO
Y REACTIVOS
2 TRANFERASAS
Catalizan ruptura de enlaces químicos con adición de agua.
3 HIDROLASAS MATERIAL: El alumno deberá traer:
Catalizan la ruptura de enlaces químicos sin participación de agua (adición a dobles enlaces). 12 tubos de ensaye
4 LIASAS -H2O2
Catalizan reacciones de isomerización. 1 gradilla -Papa *
5 ISOMERASAS
Catalizan reacciones que consisten en unir dos moléculas. Reacción acoplada con la intervención de enlaces Baño María 100ºC -Hígado de pollo*
6 LIGASAS O SINTETASAS fosfato de ATP (consumen energía) Papel absorbente -Manzana *
SITIO ACTIVO.- Es la agrupación ordenada espacialmente pero estructuralmente asimétrica de un pequeño número de residuos aminoacídicos responsables Cuchillo * todo crudo
de la actividad catalítica de la enzima. El sitio activo recibe también el nombre de Sitio Catalítico o Centro Activo REACTIVOS: 2 goteros
COENZIMA: Una coenzima se define como molécula orgánica que ate a los sitios activos de ciertas enzimas para ayudar a la catálisis de una reacción. Más
concretamente, las coenzimas se pueden funcionar como las ondas portadoras intermedias de electrones durante estas reacciones o transferir entre las enzimas
Cianuro de sodio al 5% Pinzas pequeñas.
como grupos funcionales; COFACTOR: Es una molécula pequeña necesaria para la actividad de muchas enzimas. Los cofactores son iones metálicos o Nitrato de plomo al 5%
moléculas orgánicas que participan con las enzimas en la realización de una actividad enzimática.
FACTORES QUE AFECTAN LA ACTIVIDAD DE LAS ENZIMAS: 1. Concentración de enzima: Manteniendo la concentración de sustrato constante la velocidad
de reacción es directamente proporcional a la concentración de la enzima; 2. Temperatura: La temperatura afecta a las reacciones químicas. Las
reacciones enzimáticas no son la excepción. Pero debido a que las enzimas son proteínas se presenta una desnaturalización térmica; 3. Ph; el pH óptimo FICHAS DE SEGURIDAD
de una enzima no es necesariamente idéntico al pH de su entorno intracelular normal. Esto probablemente sea una de las maneras de controlar la
actividad enzimática; 4. Concentración de sustrato: La velocidad máxima se presenta debido a la ocupación del sitio activo de TODAS las enzimas
presentes es decir se han SATURADO los sitios activos; 5. Efectores (Activadores e Inhibidores): La pérdida de actividad de una enzima se puede
lograr por desnaturalización, ya que se trata de una proteína y por lo tanto le afectan pH, temperatura, agitación vigorosa, por citar algunos agentes Otra
forma de hacer que la actividad de una enzima se pierda o disminuya es a través del uso de INHIBIDORES.
comp salu inflama peligro de peli peligros pictogramas Con formato
Desnaturalización: a la pérdida de la conformación nativa se le conoce como DESNATURALIZACIÓN e implica cambios en los niveles estructurales
uesto d bilidad inestabili gro relación a: Pá
caracterizados por la presencia de enlaces no covalentes es decir, el secundario, terciario y cuaternario.
dad esp CUESTIONARIO
Inhibidor: inhibidor competitivo se une al sitio activo e impide su unión al sustrato. El inhibidor no competitivo se une a un sitio diferente de la enzima, no Párrafo
bloquea la unión del sustrato pero produce otros cambios en la enzima de forma que ya no puede catalizar la reacción eficientemente. ecial
es
TIPOS DE INHIBICIÓN REVERSIBLE: Competitiva: Las sustancias que se comportan como inhibidores Peroxi 3 0 1 Al contacto con otro material puede causar Con formato
competitivos, suelen tener una estructura semejante a la del sustrato; Acompetitiva: El inhibidor sólo se une al do de fuego, puede ser dañino si es ingerido, puede relación a: Pá
complejo enzima – sustrato, y no a la enzima libre; No competitiva: suele observarse en las reacciones en las que hidrog causar efectos en el sistema nervisos central,
las enzimas unen más de un sustrato o en las que requiere un cofactor ya que el inhibidor suele unirse a él. Párrafo
eno anormalidades en la sangre
La catalasa es una enzima perteneciente a la categoría de las oxidorreductasas (clase 1) que cataliza la Tabla con fo
Cianur 3 0 0 Letal al contacto con la piel, Causa irritación
descomposición del peróxido de hidrógeno (H2O2) hacia oxígeno y agua. Esta enzima utiliza como cofactor un Con formato
grupo porfirínico de hierro. o de cutánea, Letal si se inhala, Muy tóxico para los
Con relación
sodio organismos acuáticos, Al entrar en contacto con
sustancias ácidas libera gases muy tóxicos. a: Párrafo
Tipo de inhibidores son el CN y el plomo
CN:La acción de la catalasa es por vía de la reacción directa del ión Fe(III) con el oxígeno, para liberar el peróxido y formar agua. La elevada constante de Con formato
Nitrat 3 0 3 Irritación, ardor en los ojos y posible
formación de complejos de hierro trivalente y divalente con aniones cianuro es debida al fuerte enlace sinérgico originado por la suma de dos efectos: relación a: Pá
o de conjuntivitis, Se absorbe por piel, los síntomas
❖ Donación de e: por parte del ligando en enlace s; ❖ Retrodonación de e: por parte del metal en enlace p. plomo de envenenamiento son los mismos de la Párrafo
Ya que el cianuro se une por enlaces covalentes al grupo funcional de la enzima, su inhibición es irreversible. ingestión. El contacto dérmico, causa irritación y Con formato
Plomo: El plomo ejerce sus efectos a través de su unión con grupos sulfhidrilos de proteínas y en las enzimas produce una inhibición de enzimas asociadas ardor, Irritación en las vías tracto respiratorias. relación a: Pá
a membranas, La unión del plomo a la catalasa se da en los grupos sulfhidrilo libres de las cisteínas que contiene la enzima, de forma covalente, por lo que
Párrafo
su inhibición sobre la enzima es Irreversible.
Con formato
FUNDAMENTOS compuesto formula peso molecular densidad punto de solubilidad Con relación
ebullición a: Párrafo
Reacción que cataliza la enzima Catalasa Peroxido de hidrogeno H2O2 34.0147 g/mol a 20°c 1.245 115 °C miscible en agua
Con formato
g/cm3 relación a: Pá
La catalasa es una enzima que cataliza la descomposición del peróxido de hidrógeno (H2O2) en oxígeno y agua. Esta enzima utiliza
como cofactor al grupo hemo. 2 H2O2 -- 2 H2O + O2 Cianuro de sodio NaCN 49.01 g/mol N/A 1496ºC soluble en agua Párrafo
Nitrato de plomo Pb(NO3)2 331,98 g/mol. 4,53 g/cm3 470ºC en agua a 20°C 52 g Con formato
La reacción química se produce en dos etapas: la catalasa es oxidada por el peróxido siendo el resultado una molécula de agua y el
en 100 ml relación a: Pá
compuesto I, intermediario de la reacción global y formado por un grupo ferroxilo y un radical catiónico de porfirina. H2O2 + Fe (III)-
E → H2O + O=Fe (IV)-E La otra molécula de peróxido restante reduce al complejo I, es decir devuelve a la catalasa a su forma Párrafo
original. De esta reducción se origina una molécula de agua y otra de oxígeno. H2O2 + O=Fe (IV)-E → H2O + Fe (III)-E + O2
BIBLIOGRAFÍA
Tabla con fo
Efecto de la temperatura sobre la enzima Catalasa, con rangos de temperatura.
BIBLIOGRAFÍA
Los efectos de la catalasa como en la mayoría de las enzimas están relacionada con la temperatura. La velocidad de una reacción enzimática incrementara
al aumentar su temperatura dentro de un rango comprendido de 35 a 37°C, de esa manera alcanza su máxima actividad enzimática a una temperatura
optima de 37°C. La temperatura afecta a la estructura de la catalasa como a los enlaces de hidrógenos que están diseñados para escindir. A medida que la
temperatura este aumentando hacia su punto óptimo, los enlaces de hidrogeno estarán perdiendo rigidez facilitando que la catalasa actúa sobre las Aguilar, P. Avila, R. Davila, R. Flores, G. Garcia, L. Gonzalez, F. Lazcano, M.
moléculas del peróxido de hidrogeno. Si la temperatura llegara a sobrepasar su punto óptimo esta se desnaturalizará y su estructura se alterará. Mena, A. Morales, L. Rode, A. Perez, I. Ramos, E. Vera, O. Ayudas
Que tipos de inhibidores son el Cianuro y el Plomo y a que parte de la estructura química de la enzima Didácticas de Bioquímica 1 (2010).Departamento bioquímica-alimentos.
Catalasa se unen.
Los compuestos que contienen metales pesados como plomo, mercurio, cobre o plata son metales venenosos. Esto
ocurre debido a que los iones de estos metales son inhibidores no competitivos de varias de las enzimas. En donde el
PB- actúa sobre los grupos -SH de la enzima indispensable para realizar su actividad.

El cianuro actuará como un inhibidor no competitivo de la catalasa a niveles bajos de las concentraciones de H2O2 (<0,1M)
se volverá competitivo solo en concentraciones bajas. El grupo CN formara quelatos con el cofactor de la encima catalasa
el cual es FE 3+