MICROBIOLOGIA VETERINARIA

La microbiologia es el estudio de los microorganismos y sus actividades, su forma, estructura, reproducción,

fisiología, metabolismo e identificación, como están distribuidos en la naturaleza, sus relaciones con otros
seres, los efectos benéficos o perjudiciales que ejercen sobre los animales y las alteraciones físicas y químicas
que provocan en su medio. En su mayor parte, la microbiologia estudia los organismos microscópicos
unicelulares. En las llamadas formas superiores de vida, los organismos se componen de muchas células que
constituyen tejidos y órganos sumamente especializados, los cuales cumplen funciones específicas, en cambio,
en los organismos unicelulares todos los procesos vitales se llevan a cabo en una misma célula.
Independientemente de la complejidad de un organismo, la célula es la verdadera unidad básica de la vida.
Todos los organismos vivos tienen la facultad de responder al medio que los rodea y con frecuencia alterarlos.
Son capaces de movimientos autónomos, si bien en algunas formas éstos son muy limitados. Todas las células
vivas son básicamente similares, ya que se componen de protoplasma (del griego sustancia formada primero)
complejo orgánico coloidal constituido en gran parte de proteínas, lípidos y ácidos nucleicos, dentro de
membranas o paredes; todas tienen núcleos o una sustancia nuclear equivalente. Aunque probablemente no
fuera el primero en ver bacterias y los protozoos, Antony Leeuwenhoeck, que vivio en Delft, Holanda, de 1632
a 1723, fue el primero en comunicar sus observaciones con descripciones y dibujos precisos. Leeuwenhoeck
tuvo los medios y la oportunidad de proseguir su pasatiempo favorito de tallar lentes y hacer un microscopio,
hizo más de 250 microscopios que consistían en lentes de tallado casero montadas en latón y plata,
aumentando los más poderosos de ellos, unas 200 o 300 veces. Mucho más antes a Leeuwenhoeck, Roger
Bacon yá habia fabricado lentes en 1624 pero estos no habian sido tan potentes como para observar bacterias.
En la epoca que Leeuwenhoeck hacía sus obervaciones, la teoría que predominaba sobre el origen de la vida,
era el de la generación expontanea. (van Helmont). Francisco Redi, observó que si se ponía carne en un
recipiente y la cubria con una gasa que impedia se acercaran las moscas, habia putrefacción de la carne, pero
sin formación de gusanos, osea que para que hubiera proliferación de gusanos había la necesidad que las
moscas se posaran sobre la carne. Louis Joblot , indico que la generación expontanea estaba condicionada a
una fuerza vital o vegetativa que tenian las substancias de origen animal o vegetal.

John Needhan, Lázaro Spallanzani, Shulze y Schwann; demostrarón claramente que en las sustancia orgánica
no existía ninguna fuerza vital y que la descomposición de ella era debido a particulas vivientes que estaban
flotando en el aire junto con las particulas de polvo. Schroder y Von Dusch; fueron los primeros en emplear
tapones de al godón en los frascos para impedir que las partículas vivientes (Bacterias) contaminaran las
substancias orgánicas El científico que demostró en forma concluyente de que las bacterias están flotando
en el aire junto con las partículas de polvo fue Louis Pasteur (1822 – 1895), sabio francés quien observó que
si se ponia una substancia orgánica previamente hervida (esterilizada) en un frasco especial que se
comunicaba con el exterior por un tubo encurvado, la substancia orgánica del frasco no sufria ninguna
alteración debido a que las partículas de polvo ( que contienen las bacterias) se depositan en la parte más
baja del tuvo encurvado. (gráfico). Con los trabajos de Pasteur, finalizo la disputa sobre la generación
expontanea, quedando establecido que la alteración de las substancias orgánicas era debido a bacterias que
flotaban en el aire en partículas de polvo. Además Pasteur efectuó estudios inmunologicos muy importantes,
habiendo sido el primero en preparar una vacuna para prevenir la rabia y otra para prevenir la fiebre
carbonosa o antrax. Ademas Pasteur soluciono el problema que tenian los fabricantes de vinos con la
descomposición que sufrian los vinos transformandose en vinagre, Pasteur, despues de hacer varios
experimentos descubrio que los vinos no se alteraban si ellos eran calentados por algunos minutos a una
temperatura entre 50 y 60 oC. Pasteur, con estos experimentos establecio tres grandes principios:

1. Todas las alteraciones, ya sea de cerveza o vino, dependen del desarrollo de microorganismos que son
fermentos

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 2. Estos microorganismos o fermentos se originan en el aire, en los ingredientes o en los aparatos usados
en la industria vinicola
3. Cuando el vino o la cerveza no contenian microorganismos vivos no sufrian ninguna alteración.
A este proceso ideado por Pasteur, de calentamiento a 60 oC, aproximadamente, por breves minutos, se le
denomina actualmente Pasteurización, procedimiento empleado en leche y preparación de productos
biologicos. Una de las más importantes aplicaciones de los trabajos de Pasteur fue hecha por Lord Lister (1827
– 1919) cirujano ingles , quien empleo para realizar sus operaciones vapores de fenol (acido carbolico) con la
finalidad de destruir a las bacterias que contaminan las heridas.
Otro gran científico que hizo progresar la bacteriologia fue el sabio alemán Roberto Koch (1843-1910),
con Koch se inicia la bacteriologia exacta y él fue quien descubrio el agente causal de la tuberculosis.
Koch empleo en sus trabajos de bacteriologia las técnicas desarrolladas por otros científicos:
a.- De Weigert, Erlich y Gramm, las técnicas de coloración.
b.- De petri, las placas de vidrio que llevan su nombre.
c.- De la esposa de su discípulo, Hesse, el empleo del agar.
Winogradsky, demostró que el nitrogeno atmosferico es fijado en el suelo por la bacteria anaerobia,
Clostridium pasteurianun. En 1892 Iwanowski, descubrio el primer virus, que fue el del mosaico del
tabaco. En 1898 Loeffler y Frosh, descubrierón el primer virus que afectaba a los animales incluyendo al
hombre y éste fue el de la fiebre aftosa. En 1929 Fleming descubrió la penicilina y poco tiempo Waksman
descubrio la estreptomicina. En 1949, Enders, Robbins y Weller; cultivarón el virus de la poliomielitis en
cultivos de tejidos en frascos. Así la ciencia e historia de la microbiologia se ha desarrollado.
La bacteriologia es una de las ciencias básicas más importantes que debe ser conocida por un aspirante
a Medico Veterinario, no pudiendo concebir que un alumno llegue a ser un buen profesional sin tener
conocimientos profundos sobre ella. Para demostrar mejor la importancia del curso de bacteriologia
veamos que rol tienen los microorganismos en los procesos que a diario se observan:
a) Las bacterias producen enfermedades en los animales y plantas.
b) Las bacterias intervienen en la fertilidad del suelo.
c) Las bacterias intervienen en la industria, por ejemplo en la preparación de los quesos, cerveza etc.
d)Las bacterias son responsables de la alteración de los alimentos.
DIVISION DE LA MICROBIOLOGIA.- Los microorganimos son por lo general más conocidos por las
enfermedades que producen que por lo que son en realidad. La rama de la microbiología que trata sobre
los microorganismos que producen enfermedades en los seres humanos se le conoce como
Microbiología médica humana, y la que se ocupa de los microrganismos que causan enfermedades en
los animales se le conoce como Microbiología médica Veterinaria.
DISTRIBUCION DE LOS MICROORGANISMOS EN LA NATURALEZA.- Abundan en donde encuentran alimento,
humedad y una temperatura adecuada para su desarrollo y multiplicación. Como las condiciones que
favorecen la supervivencia y el desarrollo de muchos microorganismos son las mismas en que viven
normalmente las personas, es inevitable que vivamos en medio de una multitud de microbios. Se encuentran
en el aire que respiramos y en el alimento que comemos; asi mismo, sobre la superficie de nuestro cuerpo,
en nuestro conducto digestivo, en la boca, en la nariz y en otros orificios corporales. Afortunadamente La
mayor parte de ellos son inocuos para nosotros y disponemos de recursos para resistir la invación de los
potencialmente dañinos.
PROCARIOTAS Y EUCARIOTAS
Las çélulas eucariotas poseen un núcleo rodeado por una membrana (es decir, un núcleo verdadero), mientras
que en las células procariotas la sustancia nuclear no esta envuelta por una membrana. Las células bacterianas
son procariotas y las células de todos los demás seres vivos son eucarioticos.

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Protistas.- son organismos unicelulares indiferenciados que no poseen tejidos especializados ni sistemas
orgánicos como de los vegetales superiores y de los animales. Los protistas se dividen en protistas eucarióticos
(superiores) y protistas procarióticos (inferiores).
los protistas eucarióticos se dividen en algas, hongos, y protozoos. Las algas poseen clorofila y paredes
celulares. Los hongos poseen paredes celulares pero carecen de clorofila. Los protozoos no poseen
clorofila ni paredes celulares. Según el manual de Bergey’s de sistematica de la bacteriologia: se
proponen
Cuatro divisiones en el reino Procariote:
1.- Gracilicutes (gracilis), que significa fino delgado, poseen pared celular de tipo Gram negativo.
2.- Firmicutes (firmus), que significa fuerte, poseen pared celular de tipo Gram positivo.
3.- Tenericutes (tener), que significa blando, carecen de pared celular y son denominadas usualmente
micoplasmas.
4.- Mendosicutes (mendosus), que significa poseedor de alguna imperfección,son representantes de las
Archaeobacteria a las que pertenecen las bacterias formadoras de metano, halófilas y termoacidófilas,
que viven en medios extremados. Son denominados Arqueobacterias como consecuencia de su
organización primitiva y de las diferencias que las distinguen del resto de las bacterias cuando se las
compara con ellas. El resto de bacterias son denominadas Eubacteria (bacterias verdaderas).Las bacterias
asociadas a las enfermedades de los animales o productoras de las mismas, se incluyen en las divisiones
1,2,y 3 de las Eubacterias.
Las Eubacterias se agrupan de forma más adecuada como integradas por algas verde-azules y otras
bacterias.
La Observación Bacteriana. En Microbiología, el microscopio es un instrumento imprescindible para la
investigación y las medidas utilizadas en microbiología son la micra o micrometro. Los dos tipos de
microscopios que se utilizan son el microscopio óptico y el microscopio electrónico, que se diferencian
por el tipo de rayos que utilizan para conseguir la ampliación de imágenes y que son, respectivamente,
rayos luminosos y haces de electrones.
PROCEDIMIENTOS DE TINCIÓN.- Los métodos de tinción se utilizan para determinar la morfología bacteriana
y su afinidad por ciertos colorantes. Las bacterias se dividen en dos grandes grupos de acuerdo con su
forma de tinción por el método de Gram. Abreviadamente, el método de tinción de Gram es como sigue:
Las células son primeramente fijadas en un portaobjeto por acción del calor, posteriormente teñidas con
colorante básico (cristal violeta) que se quita lavando con una solución de yodo en yoduro de
potasio(mordiente) y después lavadas con agua y decoloradas con cuidado empleando acetona o alcohol
etílico. Por último se tiñe la preparación con safranina como colorante de contraste.
Las bacterias Gram (+) retienen el colorante básico tras la decoloración con alcohol-acetona y aparecen
teñidos de color violeta oscuro. Las bacterias Gram (-), no retienen la tinción con el colorante violeta pero
toman el colorante de constraste (safranina) tiñendose de un color rosa o rojo.
1. los organismos Gram (-) poseen más cantidad de lípidos en su pared celular.
2. Las bacterias Gram (+) poseen una capa de glucopéptido más gruesa que las hace más resistente a los
agentes mecánicos. Como consecuencia de las diferencias estructurales citadas, ambos grupos varían
en su reacción a la tinción de Gram y en su sensibilidad a enzimas, desinfectantes y sustancias
antimicrobianas. No todas las bacterias se tiñen de forma satisfactoria mediante el método de Gram.
La pared celular de las mycobacterias contiene lípidos y sustancias céreas(acido micolico) por lo que
son dificiles de teñir. Sin embargo, cuando son teñidas mediante la tinción ácido-resistente, retienen la
fucsina fenicada aún después de ser tratadas con una solución concentrada ácido- alcoholica(ácido
clorhídrico y etanol).
Las leptospiras y treponemas son muy finos y no pueden ser resueltos satisfactoriamente tras ser teñidos
por el Gram, pero pueden hacerse visible mediante tinción negativa utilizando nigrosina o tinta china.

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 Los organismos aparecen claros y sin teñir, rodeados de partículas inertes oscuras. La tinción negativa se
utiliza también para evidenciar cápsulas. Para hacer visibles los flajelos antes de proceder a la tinción, se
utiliza un mordiente que precipita sobre los flagelos aumentando de esta forma su grosor.
MORFOLOGIA Y ESTRUCTURA DE LAS BACTERIAS
Entre las principales características de las bacterias figuran su tamaño, sun forma, su estructura y su tipo de
agrupación. Estas características constituyen la morfología de la célula. La célula bacteriana posee una
anatomia intracelular, característica, descubrimiento que pudo hacerse mediante el perfeccionamiento de
las técnicas del microscopio electronico y gracias a la invención de instrumentos para llevar a cabo cortes
sumamente finos de una bacteria. Las tres formas básicas de las bacterias son el bastón recto llamado bacilo,
las esfericas llamados cocos, y el bastón espiral o incurvado como son los llamados: espiroqueta, espirilo,
vibrio. Existe una considerable variación dentro de las formas básicas citadas, siendo frecuente observar
formas cocobacilares, ovoides y filamentosas.
Los estafilococos se presentan en racimos o grupos, los estreptococos forman cadenas y los neumococos
generalmente se presentan en parejas. Algunos micrococos se presentan en grupos de cuatro o tetradas
(Aerococcus viridans) y algunos se hallan agrupados en paquetes de ocho(Sarcinas).
Las distintas especies de Enterobacteriaceae se encuentran como bastones bastante regulares, pero algunos
de los organismos más pequeños, como Pasteurella, Brucella y Haemophilus, se presentan a la vez con forma
bacilar y cocobacilar. Algunos organismos de los géneros Bacillus y Clostridium tienen forma de bastón
formando cadenas. Las corinebacterias son notablemente pleomórficas presentando organismos
claviformes. Los actinomicetos (Actinomyces y nocardia) tienen a la vez formas bacilares y formas
filamentosas ramificadas.El género Fusobacterium, anaerobio, tiene la forma de huso alargado.
Entre las formas espirales unas son incurvadas, en forma de coma o en forma de S (Vibrio y Campylobacter)
y otras están muy o poco enrolladas (Treponema y Leptospira).

Existe una notable variación en el tamaño de las bacterias. La mayor parte de las formas bacilares oscilan de
2 a 5 micras en su longitud y de 0.5 a 1 micra de anchura; las espiroquetas pueden tener mayor longitud
(hasta 20 um) y más finas (de 0.1 a 0.2 um). Los cocos tienen aproximadamente 1 um de diámetro.. El tamaño
de las bacterias varía algo dependiendo del medio en el que crecen y de la fase de crecimiento, siendo
generalmente de menor tamaño en la fase logarítmica de crecimiento.
De acuerdo con su tamaño, las bacterias pueden agruparse, de un modo general, como sigue:
Grandes: Espiroquetas, Bacillus, Clostridium.
Medianas: Enterobacteriaceae (Escherichia coli, Proteus) Pseudomonas.
Pequeñas: Brucella , Pasteurella, Haemophilus.
Muy pequeñas: Rickettsia, Chlamydia, Mycoplasma

ESTRUCTURA DE LA CÉLULA PROCARIONTE

Las bacterias según como se tiñen mediante el método de Gram, se dividen en dos grandes grupos: Gran (+)
y Gram (-), tomando una coloración azul- violeta y un color rosado y rojo respectivamente. Esta diferente
respuesta de las bacterias a la tinción de Gram radica en la naturaleza de la pared celular.
Pared celular.- Existen diferencias básicas entre la pared de las bacterias Gram- positivas y Gram negativas.
Proporciona al organismo la forma y una rigidez que protege a la célula de forma adecuada frente a agentes
químicos y físicos intensos.
La pared bacteriana es una estructura que rodea a toda la célula, con excepción de las bacterias llamadas
mycoplasmas. La pared celular de las Gram negativas es una estructura multilaminar y muy compleja, la
pared de las Gram positivas consta de una sola capa y es mucho más ancha.Aunque existen diferencias
entre las paredes de las bacterias Gram (+) y Gran (-) y las denominadas acido-alcohol resistentes, todos

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 ellos poseen un componente comun llamado peptidoglucano, que constituye el autentico esqueleto de
la pared celular.
El peptidoglucano es un polimero de tamaño muy grande, estan integrados por dos clases de componentes
básicos llamados aminoazucares situados de forma alternativa: La N-acetil glucosamina y el N-acetil
murámico, en las bacterias ácido resistentes este último está sustituido por N-glicosil murámico. Durante una
infección la liberación de peptidoglucano no influye sobre el poder patógeno de la bacteria.
Recientemente se ha podido constatar que los residuos de ácido N-acetil muramico de algunas bacterias
resisten la acción hidrolitica de la LISOZIMA y las glucosidasas producidas por las células fagocitarias lo que
permite que estas bacterias hagan frente a la lísis enzimatica.
PARED DE LAS BACTERIAS GRAM POSITIVAS.- Es químicamente más compleja que las Gram negativas, sus
paredes contienen más aminoacidos, los ácidos teicoicos son propios de la pared celular de las Gram positivas,
el 90% de la pared lo constituye el peptidoglucano, los acidos teicoicos están ubicados en la pared y contactan
con el ambiente externo; Algunos ácidos que contienen glicerol están unidos a los lipidos de la membrana
citoplásmatica por eso toman el nombre de ácido lipoteicoico, estos atraviezan la pared celular y se pone en
contacto con el exterior, estos son determinantes antigénicos importantes en algunas bacterias.
Se ha visto que existen otras sustancias ligadas a la pared de las bacterias Gram positivas; los estafilococus y
estreptococus tienen capas de proteinas, los estreptococus pueden además, poseer capas adicionales de
hidratos de carbono especificas de los diferentes tipos. Estos elementos otorgan a las células una realidad
particular de carácter inmunológico y algunos se comportan como elementos antifagocitarios; en este sentido,
la proteina M de los estreptococus tiene poder antifagocitario al igual que la capsula. La proteina A de los
estafilococus también es antifagocitaria.
PARED DE LAS BACTERIAS GRAM NEGATIVAS En las bacterias gram negativas la pared es más compleja en
su composición y estructura, el peptidoglucano constituye una fracción mucho más pequeña del total de la
pared celular que en las Gram(+), tiene un contenido de lípidos superior a de los Gram (+), predominan las
proteinas, los fosfolipoidos y los lipopolisacaridos (LPS), este último identificado como endotoxina, juega un
papel importante en la patogenia de algunas enfermedades.
PROTOPLASTO.- Es una bacteria desprovista de su pared; cuando son sometidas a la acción de sustancias
que destruyen el peptidoglucano, como: la lisozima, y estas quedan desprovistas de la pared celular y se
convierten en protoplasto.
MEMBRANA CITOPLASMATICA.- Es una estructura de extrema importancia funcional. Es una membrana
semipermeable selectiva que regula el paso de nutrientes y productos de desecho dentro y fuera de la
célula, aquí se localizan varias enzimas en las que se incluyen los citocromos, enzimas que sintetizan
líquidos complejos, así como componentes de la pared celular y enzimas que intervienen en el transporte
de electrones y en la foforilación oxidativa. El daño a esta membrana por maltrato con agentes físicos o
químicos ocasiona la muerte de la célula aunque no haya aletraciones morfólogicas detectables.
Contiene proteinas, lípidos y pequeñas cantidades de H.C.
MESOSOMAS.- Son extensiones de la membrana citoplasmatica en forma de invaginaciones algunos son de
tipo vesicular, otros son de tipo concentrico, formados por torbellinos laminares que incluso pueden tener
forma de tubulos; intervienen durante la división en la formación de la pared celular y en la replicación del
ADN.
RIBOSOMAS.-Es una combinación de proteina-RNA llamados ribosomas, equivalentes al de partículas
similares de las células de los animales y plantas. La fracción ribosomal de las células bacterianas contiene las
enzimas que intervienen en la síntesis de las proteinas, se encuentran de manera abundante en el citoplasma,
y ligados debilmente a la membrana citoplásmatica.
INCLUSIONES CITOPLÁSMASTICAS.-
Granulos de polisacáridos.- Estan formados por glucógeno o almidon; pueden demostrarse al tratar la célula
con yodo. Son materiales de reserva de las bacterias.

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 Inclusiones lipídicas.- Aparecen en especies de los géneros Mycobacterium, Bacillus, Azobacter
Un lípido hallado como material de reserva exclusivo de las bacterias es el polímero de ácido poli-beta-
hidroxibutirato, estos se ponen de manifiesto con colorantes liposolubles ( Sudan III o Sudan negro B).
Granulos de cianoficina.- Están compuestos por polipéptidos grandes que contienen la misma cantidad
de arginina que de ácido aspá rtico. Lo poseen las cianobacterias.

GENOMA BACTERIANO.-El material genético esta constituido por ácido desoxirribonucleico o ADN, el cual rige
la biosíntesis de todo el material de la bacteria, también llamado génoforo, nucleoide, cromosoma bacteriano.
FLAGELOS.-Muchas bacterias son móviles y esta capacidad de desplazarse por si mismas se debe a la presencia
de flagelos, son apendices largos de 3 a 20um.
PILI Y FIMBRIAS.-Son similares a los flagelos, no intervienen en la movilidad de las bacterias. Favorecen la
adherencia de la bacteria a diversos tejidos del hospedador(1000 fimbrias-pili de 1 a 10), son elementos que
participan en la iniciación de la infección (adhesinas).
CAPSULA Y CAPA MUCOSA.- Se trata de sustancias amorfas polímericas y con frecuencia gelatinosas que se
localizan en la parte exterior de la pared celular, esta formado por polisacáridos, polipeptidos o complejos de
polisacáridos y proteinas. Este material posee especificidad antigénica de ahí que el antígeno capsular se le
denomine antígeno K. La capsula protege a las bacterias patogenas frente a la fagocitosis, por eso es un factor
importante de virulencia. También impide la fijación de los bacteriofagos a la célula bacteriana y dificulta el
paso de los antimicrobianos al interior de ésta.
ENDOSPORAS O ESPORAS BACTERIANAS.- Algunas bacterias cuando se encuentra en ambientes adversos son
capaces de trasnsformase en células especiales de alta resistencia llamados esporas o endosporas. Estos
soportan los efectos bactericidas del calor, radiaciones, congelación, desecación y de ciertos producto químicos
tóxicos (desinfectantes). Pueden permanecer en estado latente durante largos periodos de tiempo. Se
encuentran habitualmente en el suelo. Los géneros Bacillus y Clostridium son formadores de esporas, poseen
especies patógenas para el hombre y los animales. Algunas infecciones solo se originan cuando los esporos de
estas bacterias se introducen en un lugar donde pueden germinar por ejemplo una herida.
ESPOROGENESIS.-Las bacterias esporulan para sobrevivir a las condiciones ambientales adversas. La
esporogénesis se inicia cuando… Concurren tres circunstancias:
1). La bacteria tiene que estar ávida de nutrientes importantes;
2). debe existir una alta densidad bacteriana para permitir la secreción y reconocimiento del factor 1 de
diferenciación extracelular (EDF-1), factor que al parecer es un péptido pequeño que se enlaza con la bacteria
hambrienta y le indica que es el momento de iniciar la esporulación; 3). es necesrio que la bacteria se
encuentre en fase estacionaria.
FUNDAMENTOS DE CONTROL
Las condiciones de salud en una nación están determinadas, en gran parte, por la capacidad de sus habitantes
para controlar eficazmente las poblaciones microbianas. Los procedimientos son muy especificos cuando se
administra medicación para eliminar microorganismos infecciosos del cuerpo, o generalizados, como las
prácticas sanitarias en el hogar u hospital.La costumbre diaria de purificar el agua, pasterizar la leche o la
conservación y preservación de los alimentos, son métodos para controlar las poblaciones microbianas. No
sólo se trata de dejar un producto libre de riesgo, desde el punto de vista de la salud pública, sino de hacerlo
para el bienestar de la comunidad. Los microorganismos son también capaces de destruir materiales valiosos,
como madera y fibras textiles, causando pérdidas que necesitan evitarse con medidas eficaces. Los
microorganismos se eliminan, inhiben o matan por medio de agentes físicos, procedimientos físicos o agentes
químicos. Se cuenta con una gran variedad de técnicas y agentes que actúan de maneras muy diferentes y
cada uno, en la práctica, tiene su propias limitaciones. Los procedimientos físicos y agentes químicos
empleados en la lucha contra los microorganismos reciben los siguientes nombres:

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ESTERILIZACIÓN. Es el proceso de destruiur todas las formas de vida microbiana. Un objeto esterilizado, en
el sentido microbiológico , esta libre de microorganismos vivos. Los términos estéril, esterilizar y esterilización
se refieren a la ausencia o destrucción completa de los microorganismos y no se usan en sentido relativo. Una
sustancia o un objeto están estériles o no están estériles, pero no semiesteriles o casí estériles.
DESINFECTANTE. Es un agente, por lo regular químico, capaz de matar las formas de desarrollo, pero no
necesariamente las esporas resistentes de microorganismos patógenos. El término se aplica comúnmente en
sustancias que se usan en objetos inanimados.
La esterilización y la desinfección son de gran importancia para el veterinario clínico. La esterilización de
ápositos, instrumentos quirúrgicos y jeringas son prácticas comunes lo mismo que la desinfección de
perreras, locales infectados y calzado.
Desinfección.- Es la operación de destruir agentes infecciosos.
Antiséptico.- toda sustancia que se opone a la sepsis o impide el desarrollo o acción de los microorganismos,
ya sea para destruirlos o inhibir su crecimiento y actividad. Generalmente se refiere a sustancias aplicadas
al cuerpo.
CONTROL DE LOS MICROORGANISMO MEDIANTE AGENTES FÍSICOS: Calor humedo.- El calor húmedo,
especialmente el vapor, mata en forma efectiva a las células mediante la coagulación de las proteínas, dentro
del calor húmedo tenemos: Ebullición.-Este procedimiento es considerado como un proceso de desinfección
más que de esterilización, es utilizado para desinfectar instrumentos de cirugía menor, muchas esporas
también mueren a 100oC, pero muchas de las más resistentes, como las de Cl. tetani y las especies comunes
de bacillus pueden soportar la ebullición durante varias horas. De lo dicho se deduce que si bien la ebullición
elimina la mayor parte de las bacterias patógenas, no se trata de una esterilización en el sentido estricto de
dicho término. Vapor a presión (autoclave).El instrumento más común para la esterilización de material
resistente al calor es el autoclave, este instrumento produce la esterilización a través del calor saturado a
presión, es un aparato esencial de los laboratorios de microbiología y de los quirofanos. Pasteurización Esta
técnica, que incluye el calentamiento de la leche hasta una temperatura en la que los patógenos potenciales
para el hombre son destruidos, ha motivado una gran disminución de la incidencia en brucelosis y la
tuberculosis humanas desde hace años.
CALOR SECO.- La esterilización con calor seco o aire caliente, se recomienda cuando no se desea o no se
quiera que el vapor a presión tenga contacto completo y directo con el material a estrerilizar. El aire caliente
como el Horneado, el aparato que se emplea para este típo de esterilización es un horno especial de gas o
eléctrico. Para el material de vidrio de laboratorio, se consideran suficiente dos horas de exposición a 160oC.
Flameado, para el flameado se utiliza la llama de un mechero de gas, generalmente utilizado para esterilizar
las ansas y agujas de inoculación, de tal manera que los microorganismos pueden ser transferidos sin
contaminación.
Incineración .- La incineración mata a los microorganismos. Se usa para destruir esqueletos, animales de
laboratorio infectado y otros materiales de desecho o material muy contaminado en los laboratorios y
hospitales, así como los cultivos de microorganismos patógenos que se descartan en los laboratorios.
RADIACIÓN.- Los rayos gamma, rayos X, luz ultravioleta y aun la luz visible todos ellos constituyen formas
de radiación; causando daño o la muerte de la célula; cuanto más cortas sean las ondas, mayor sera la
radiación que produce la energia y por lo tanto mucho más letal.
FILTRACIÓN.- Durante la filtración los microorganismos son retenidos por los poros de los filtros que son de
un diametro menor que el de los microrganismos. Las membranas de filtro bacteriologico estándares son
hechas de nitrocelulosa y tienen poros de un diametro de 0.45 um, suficiente pequeños como para prevenir
el pasaje de la mayoria de bacterias.
DESECACION.- La desecación de las células microbianas y su medio produce la detención de la actividad
metabólica, seguida de una declinación de la población viable total. Algunas especies de cocos Gram(-) como

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los gonococos y meningococos son muy sensibles a la desecación; mueren en pocas horas.Los estreptococus
son más resistentes, algunos sobreviven semanas después de haber sido desecados.

GRUPOS DE AGENTES QUÍMICOS ANTIMICROBIANOS

Metódos Químicos.- Los agente químicos pueden ser compuestos inorgánicos u orgánicos, y son empleados
en el ambiente hospitalario.
Compuestos inorgánicos:
Sales.- Tratamiento con sal (salazón) es una práctica utilizada durante siglos y es un método habitual para la
conservación de carnes y pescado, al preservar los alimentos de la contaminación bacteriana. Pero la
sensibilidad de los microorganismos a los tratamientos con sales varía considerablemente, siendo las
sales de metales pesados los que poseen una mayor acción, en especial las sales de plata y de mercurio.
Por ejemplo, el nitrato de plata se usa en concentraciones adecuadas sobre mucosas con gran efecto
bactericida, aunque su valor práctico esta muy limitado por su acción irritante y cáustica.
Las sales de mercurio, tienen una acción extraordinaria antibacteriana, debido a su combinación con los
grupos SH2 de la bacteria. No obstante, en las instituciones hospitalarias se utilizan derivados orgánicos
del mercurio, como el mercurocromo y el timerosal, ya que los compuestos inorgánicos suelen ser
corrosivos.
Halogenos.- Su acción bactericida se debe a su efecto oxidante. En la práctica se usan el cloro, el yodo.
El yodo.- se usa en forma de tintura de yodo, de solución alcoholica al 10% o de solución acuosa al 2%, se
utiliza como antiseptico de la piel. En la actualidad se emplea combinado con sustancias orgánicas, los
llamados yodoforos.
El cloro.- es uno de los desinfectantes químicos más efectivos, ampliamente utilizado en el tratamiento de
aguas para consumo, piscinas y aguas residuales. Se utilizan en forma de cloro gaseoso, hipoclorito,
lejias y cloraminas. Todos actuan por oxidación de los radicales sulfhidrilo libres y por otra combinandose
con las proteínas bacterianas. El hipoclorito es muy oxidante, por lo que su acción es muy rápida,
mientras que la cloramina libera el cloro muy lentamente y su acción es muy prolongada.
COMPUESTOS ORGÁNICOS
Alcohol etilico e isopropilico.- Su acción se debe a la coagulación de las proteínas. El alcohol absoluto no
tiene ningún poder bactericida: para ello debe combinarse con el agua, la concentración que se usa es del
70%, al ser más eficaz mantiene un uso tradicional al aplicarse en la piel antes de una inyección
Hipodermica, no destruyen las esporas y tienen un escaso poder desinfectante. El alcohol isopropilico tiene
un efecto más potente que el alcohol etilico.
Fenol .- Es un potente bactericida en poca horas es menos activo frente a las esporas .
Debido a su toxicidad ya que es corrosivo y a su olor no se usa como antiseptico, aunque si como
desinfectantes de heces, pus, esputos. Para disminuir el poder corrosivo del fenol, se han obtenido los
derivados metilados (cresoles) y los compuestos difenolicos. Los derivados metilados tienen mayor poder
germicida, menor toxicidad y menor acción cáustica que el fenol.
Formol.- Es un gran desinfectante que actua coagulando las proteinas bacterianas. Es un gas que se usa en
solución acuosa al 40% llamada formalina muy utilizada en la práctica hospitalaria para desinfectar
habitaciones. Se emplea también en la la preparación de vacunas, igualmente se emplea como antiseptico
para las pezuñas de los rumiantes.
Colorantes.- Así como verde malaquita y violeta de genciana sea han utilizado como antisepticos durante
muchos años por su acción sobre los Gran (+), aunque su acción sobre los Gram (-) es muy escaso.
DETERGENTES.- Los detergentes se encuetran en la membrana celular y probablemente actúan alterando la
función normal de la membrana.
Detergentes aniónicos.- Incluyen los jabones naturales. Se utilizan como agentes limpiadores y por su escaso
poder bactericida se combinan con compuestos fenólicos.

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 Detergentes catiónicos.- incluyen muchos compuestos de amonio cuaternario, por ser tensoactivos, son
excelentes limpiadores de la piel, quemaduras, heridas y de objetos inanimados. Son activos frente a
microorganismos Gram positivos que frente a Gram-negativos. A diluciones elevadas son bacteriostaticos,
pero, los virus, las micobacterias y Pseudomonas aeruginosa son relativamente resistentes.
Principales antibacterianos agrupados por su mecanismo de acción y su estructura química.
Inhibidores de la síntesis de la pared celular
Betalactamicos:
Penicilina
Cefalosporina
Carbapenemas
Monobactamas
Antibacterianos que alteran la integridad de la membrana:
polimixinas
Inhibidores de la síntesis proteica
cloranfenicol
macrólidos
lincosaminas
aminoglucosidos
tetraciclinas
Inhibidores de la síntesis de Ácidos Nucleicos
• Rifamicinas
Quinolonas
Nitroimidazoles
Inhibidores metabólicos o antimetabolitos
Sulfamidas
Trimetoprim

MODO DE ACCION DE LOS AGENTES ANTIMICROBIANOS

Existen muchos procedimientos y sustancias usadas como agentes antimicrobianos que manifiestan actividad
de diferentes modos. Por razones académicas y prácticas es importante saber como se inhiben o matan a los
microorganismos. DAÑO A LA PARED CELULAR.- Algunos agentes inhiben la formación de los componentes de
la pared celular en un cultivo de bacterias en desarrollo, dando por resultado la formación de protoplastos. El
protoplasto es susceptible a la lisis a menos de que se le provea de condiciones ambientales especiales. Por
ejemplo el efecto antimicrobiano de la penicilina sería la inhibición de la síntesis de la pared celular.
ALTERACIÓN DE LA PERMEABILIDAD CELULAR.- La membrana celular mantiene la integridad del contenido
celular , regula selectivamente el paso de sustancias. Los compuestos fenólicos, detergentes sintéticos, jabones
y compuestos de amonio tienen efecto sobre la permeabilidad celular (N y P).
ALTERACIÓN DE LAS MOLÉCULAS DE PROTEÍNA Y DE ÁCIDOS NUCLEICOS.- La vida de una célula está vinculada
con las moléculas de proteínas y ácidos nucleicos en su estado natural, toda sustancia que altere o
desnaturalice, daña irreparablemente a la célula. Las altas temperaturas o fuertes concentraciones de algunos
agentes químicos causan la coagulación irreversible de los constiutyentes protoplasmáticos vitales.
INHIBICIÓN DE LA ACCIÓN ENZIMATICA.- Algunos agentes afectan enzimas, por ejemplo, el cianuro inhibe la
citocromooxidasa, el fluoruro impide la glucólisis y los compuestos arsenicales trivalentes bloquean el ciclo del
ácido tricarboxilico. El dinitrofenol desacopla las fosforilaciones oxidativas. La inactivación de ciertas enzimas
es el resultado de su combinación con iones de metales como la plata, cobre y mercurio.
INHIBICIÓN DE LA SÍNTESIS DE ÁCIDOS NUCLEICOS.- Existen dos categorías de sustancias que inhiben la
síntesis del ácido nucleico: a) compuestos que interfieren con la formación de los bloques estructurales de los
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ácidos nucleicos, los nucleótidos purina y pirimidina, b) compuestos qur interfieren con la polimerización de
los nucleótidos en ácido nucleico.
FACTORES QUE INFLUENCIAN LA ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA
Temperatura. Un incremento de la temperatura. cuando esta es usada con otro agente, tal como un agente
químico, aumenta la destrucción de los micoorganismos. Ejemplo una pequeña cantidad del agente químico
a una temperatura elevada tendrá el mismo resultado que una gran cantidad del mismo agente a
temperaturas más bajas Susceptibilidad microbiana. Las bacterias vegetativas, hongos y virus envueltos, son
generalmente más susceptibles a la destrucción. Sin embargo, las células vegetativas de las mycobacterias,
que se hallan cubiertas por una capa de cera que las protege. son más resistentes a los agentes
antimicrobianos y químicos. Concentración o dosis del agente. Las sustancias químicas microbicidas diluidas,
generalmente reducen su actividad antimicrobiana, a concentraciones muy reducidas ellas se vuelven
microbiostáticas.
Tiempo de exposición. Para muchas sustancias germicidas, si el tiempo de exposición con los
microorganismos es lo suficientemente grande, la probabilidad de que un solo microorganismo sobreviva es
tan pequeña o baja que el efecto de esterilidad se asegura
Número de microorganismos. Conforme el número de contaminantes microbianos aumenta. o bien el
periodo de exposición aumenta o la concentración del agente, necesariamente debe incrementarse para
obtener niveles aceptables de efectividad microicida.
Medio ambiente. Las propiedades físicas y químicas del medio; de temperatura, pH, humedad, afecta la
eficacia de la mayoría de los agentes antimicrobianos, además algunos agentes químicos son absorbidos
por material orgánico, tales como la sangre, mucus heces y tejido.

MULTIPLICACIÓN DE LAS BACTERIAS (crecimiento bacteriano).- las bacterias se multiplican asexualmente por
división binaria o transversal. La velocidad con que las bacterias se dividen esta en relación con la especie
bacteriana, así por ejemplo el Clostridium welchii, se divide en fracción de minutos, en cambio el My. Bovis,
se divide uno o dos veces al día. Sí despues de sembrarse una bacteria en un medio de cultivo se determina
periodicamente su número, se podra hacere una curva de crecimiento.
Fase de latencia.- Cuando un población microbiana se inocula en un medio de cultivos, no se observa
crecimiento imediatamente, sino que transcurre cierto tiempo antes de que se haga evidente: a este
tiempo se le llama fase de latencia (fase de retardo) Se trata de un período de adaptación al medio,
previo al crecimiento activo de la población. En esta fase, aunque no se incrementa significativamente el
número de microorganismos, éstos son metabolicamente activos: incorporan nutrientes, sintetizan
enzimas, activan sus rutas metabólicas de producción y consumo de ATP, aumentan de tamaño, etc.
FASE EXPONENCIAL.- En esta fase la población microbiana presenta um crecimiento equilibrado a velocidad
constante. La velocidad es la máxima que le permiten sus propias características y las condiciones
ambientales. Esta fase se mantendrá mientras no haya ningún factor que limite el crecimiento.
FASE ESTACIONARIA.- Un cultivo en el que no se renueva el medio no puede crecer exponencialmente de
manera indefinida. Son diversos los factores que determinan el final de la fase exponencial, pero lo más
habitual es que se agote un nutriente esencial del medio o que se acumule un producto de desecho del
metabolismo hasta resultar tóxico e inhibidor del crecimiento. Otros factores que pueden influir son la
disminución de la cantidad de oxigeno disponible cuando se trata de microorganismos aerobios, o los
cambios de pH provocados por los propios microorganismos.
La fase estacionaria es aquella en la que no se aprecia un incremento neto de la población. En muchos casos,
se produce un incremento lento que es neutralizado por la muerte de las células, por lo que el número
de células se mantiene constante. Su representación gráfica es una línea horizontal. Aunque en esta fase
no hay crecimiento, se dan muchas funciones celulares, entre ellas producir energía, para el
mantenimiento de la célula y para algunos procesos biosintéticos.

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FASE DE DECLINACIÓN O MUERTE.- Tras una fase estacionaria más o menos larga, las condiciones de cultivo
se van haciendo cada vez más dificiles. El nutriente limitante que en muchos casos es la fuente de energía,
acaba de agotarse completamente; por lo que las células no pueden obtener la energía que necesitan para el
mantenimiento. Como consecuencia de todo esto, se produce la muerte celular.

CULTIVO DE LAS BACTERIAS. Para el cultivo de bacterias es necesario el conocimiento nutricional: Todo
organismo vivo necesita una fuente de energía,como las plantas, pueden consumir la energía radiante a las
que se las denomina fototrofas, y los animales se valen de la oxidación de compuestos químicos para obtener
energía, a éstas se les llama quimiotrofas. Entre las bacterias se encuentran los dos tipos de nutrición fototrofos
y quimiotrofos. Todo organismo vivo necesita obtener carbono, asi las plantas mediante la fotosíntesis
absorven el dioxido de carbono atmosférico y lo transforman en carbohidratos. Numerosas bacterias también
necesitasn el dioxido de carbono como su fuente de carbono; desde el punto de vista de la nutrición, todos
estos organismos son autotrofos. Si obtienen su energía de la luz, son fotoautotrofos; pero si obtienen
oxidando compuestos químicos son quimioautotrofos. Algunas bacterias son similares a los animales ya que
son incapaces de absorver el dióxido de carbono como su única fuente de carbono y tienen que valerse de los
autotrofós y su producción de carbohidratos y otros compuestos orgánicos para tomarlos como alimento. Los
organismos que necesitan de compuestos orgánicos de carbono se denominan Heterotrofos. También los
organismos vivos necesitan obtener nitrógeno; algunas bacterias absorven nitrógeno atmosférico, otras
obtienen en compuestos de nitrogeno inorgánico y otras más lo toman de las proteínas o de cualquier
compuesto orgánico que lo contenga. Algunas bacterias necesitan compuestos orgánicos de azufre, otras son
capaces de utilizar compuestos inorgánicos de azufre. El fósforo lo obtienen generalmente de los fosfatos. Las
bacterias también necesitan de metales, como: sodio, potasio, calcio, magnesio,hierro, zinc, cobre, fosforo y
cobalto; en algunas ocasiones son vestigios., así como también de vitaminas por ejemplo la tiamina (B1) en el
Bacillus anthracis; riboflavina en Clostridium tetani.
QUE ES EL CULTIVO BACTERIANO.- Es un procedimiento mediante el cual se promueve el crecimiento de los
microorganismos, al proporcionarles las condiciones ambientales de nutrientes, Ph, temperatura y otros
factores para su desarrollo artificial en el laboratorio. De acuerdo a las sustancias que las bacterias utilizan y
emplean como fuente de energía para multiplicarse se dividen en dos grandes grupos:

Bacterias autotrofas.- son aquellas que emplean sustancias inorgánicas como fuente de energía. Las
Bacterias heterotrofas.- Son aquellas que emplean sustancias orgánicas como fuente de energía y se han
estudiado más ampliamente, en este grupo de bacterias se puede encontrar todos los que producen
enfermedades en el hombre, animales y plantas, así como la gran mayoria de la población microbiana del
ambiente inmediato que nos rodea. Para cultivar las bacterias en el laboratorio se emplean medios de cultivo
y pueden dividirse en dos grandes grupos: comunes y especiales. Los medios comunes, son los apropiados
para el cultivo de la mayoria de las bacterias heterotrofas comunes, ejemplo: agar simple, caldo simple.
Medios especiales: tenemos
Medios Enriquecidos.- son aquellos medios a las cuales se le ha adicionado componentes tales como sangre,
suero o extractos de tejido de animales y plantas al caldo nutritivo o agar, les proporciona sustancias
nutritivas complementarias para que el medio pueda soportar el crecimiento de los heterotrofos exigentes
como ejemplos tenemos al My. tuberculosis o el Haemophilus gallinarum.
Medios Selectivos.- La adición al agar nutritivo de ciertas sustancias químicas especificas, no permitirá el
desarrollo de un grupo de bacterias, sin inhibir al mismo tiempo el crecimiento de otros grupos. Por ejemplo,
el cristal violeta en concentraciones especificas previene el crecimiento de bacterias Gram (+) sin afectar el
desarrollo de variedades de Gram(-). A estos medios también se les denomina de aislamiento o diagnostico,
ejemplo el medio Mac Conkey.

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 Medios diferenciales.- La adición de ciertos reactivos o sustanancias químicas a los medios de cultivo trae
como resultado determinado tipo de crecimiento bacteriano o de cambios, después de la siembra e
incubación del medio, lo cual permite al observador diferenciar distintos tipos de bacterias. Por ejemplo, si
se siembra una mezcla de bacterias en um medio agar-sangre, algunas de las bacterias pueden hemolizar
(destruir) los globulos rojos, mientras que otras no lo hacen. Cuando aparece una zona clara alrededor de
la colonia bacteriana es indicativo de que ocurre la hemólisis. Así es posible distinguir entre bacterias
hemolíticas y no hemolíticas que proliferan en el medio. De hecho, el medio agar-sangre sirve
simultáneamente como medio de enriquecimiento y diferencial. Tenemos también los medios de
carbohidratos que sirven para poner de manifiesto alguna porpiedad bioquímica de la bacteria.

•
• Características de ingredientes que se usan en los medios de cultivo:
Extracto de carne.- es una carne magra de res concentrado en pasta, contiene las sustancias solubles en
agua de tejidos animales, como carbohidratos, compuestos orgánicos nitrogenados, vitaminas solubles en
agua y sales.
Peptona.- Es el producto que resulta de la digestión de materiales proteínicos; por ejemplo, carne , caseina
y gelatina, la digestión del material proteínico se efectua con ácidos o enzimas; sirve para hacer medios de
cultivo bacteriológico. Es la fuente principal de nitrógeno orgánico y algunas vitaminas y carbohidratos.
Agar.- Son carbohidratos complejos obtenidos de ciertas algas marinas, se usa como agente solidificante de
los medios de cultivo, se disuelve en solución acuosa, gelifica cuando la temperatura baja de 45 oC; no se
considera al agar como nutriente para las bacterias.
Extracto de levadura.- Es un extracto en solución acuosa de levaduras, se obtiene comercialmente en polvo.
Es una fuente rica en vitaminas B, también contiene nitrógeno orgánico y compuestos de carbono.

• CONDICIONES FÍSICAS NECESARIAS PARA EL DESARROLLO: Además de conocer los nutrientes apropiados
necesarios para el cultivo de bacterias, es necesario también conocer las condiciones físicas
Del medio en donde el microorganismo puede desarrollarse mejor. Dicho de otra manera, para un buen cultivo
de las bacterias se necesita combinar apropiadamente los nutrientes necesaarios y las condiciones físicas
adecuadas.
Temperatura.- El proceso de desarrollo de las bacterias depende de reacciones químicas y la velocidad con
que se efectúan estas reacciones es influida por la temperatura. Cada especie de bacterias crece a
temperaturas que están dentro de ciertos límites. De acuerdo con esto las bacterias se pueden dividir en los
siguientes grupos:
1. Psicrófilas.- capaces de desarrollar a 0oC o menos, aunque crecen mejor a temperaturas superiores o
cercanas a 15 o 20oC (4 a 10 oC). Muchas de las especies aisladas en la Antartida se encontrarón en
proliferación a -7oC.
2.Mesófilas.- crecen mejor en límites de temperatura que están entre 25 y 40oC.
3.Termófilas.- crecen mejor entre 45 y 60 C, o también superiores a 60oC.
NECESIDADES DE GASES.- Los gases principales que afectan el desarrollo bacteriano, son el oxígeno y el dióxido
de carbono. Las bacterias presentan una respuesta amplia y variable al oxígeno libre, y sobre esta base se
dividen en cuatro grupos:
1.Aerobias, bacterias que se desarrollan en presencia de oxígeno libre.
2. Anaerobias, bacterias que se desarrollan en ausencia de oxígeno libre.
3. Anaerobias facultativas, bacterias que se desarrollan tanto en presencia como en ausencia de oxígeno
libre.
4. Microaerófilas, bacterias que crecen en presencia de pequeñisimas cantidades de oxígeno libre.
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 Las bacterias anerobias estrictas, sólo se podrán desarrollar si se toman precausiones especiales para
expulsar todo el oxígeno atmosférico del medio de cultivo. Se puede obtener un ambiente de anaerobiosis
por cualquiera de los siguientes métodos:
1. Agregando al medio un compuesto reductor, por Ejemplo, tioglicolato de sodio, para disminuir el contenido
de oxígeno.
2. Quitando el oxígeno por procedimientos mecánicos de los envases cerrados que contienen el medio de
cultivo inoculado, el aire se expulsa por bombeo de los recipientes y se reemplaza con nitrógeno, helio,
o una mezcla de nitrógeno y dióxido de carbono.
3. Mediante reacciones químicas dentro del recipiente que contiene el medio de cultivo inoculado, para
combinar el oxígeno libre con otro compuesto; esto puede ser tan sencillo como encender una vela para
transformar el oxígeno en dióxido de carbono.
ACIDEZ O ALCALINIDAD (pH)
En la mayor parte de las bacterias el pH óptimo de crecimiento está entre 6.5 y 7.5, aunque algunas
Bacterias pueden desarrollarse a pH extremos, en la mayor parte de las especies los límites mínimos y
máximos corresponden a cualquier punto entre pH 4 a pH 9.
CARACTERÍSTICAS CULTURALES: siembra y aislamiento de bacterias.- Sembrar una bacteria, es colocarla
en un medio de cultivo, elegido de acuerdo con las exígencias vitales del microorganismo, que permite así
su desarrollo y multiplicación, si se coloca a una temperatura adecuada y un tiempo conveniente.
Las finalidades de las siembras en los medios de cultivo pueden ser dos:
1)Trasplante o repique
2)aislamiento.
Transplante.- El material que se siembra contiene una Sola especie bacteriana, y su objeto es renovar
el medio de cultivo, ya sea para perpetuar la especie de que se trate, o bien para conocer algunas de sus
propiedades culturales o biológicas.
Aislamiento.- El material que se siembra contiene mezclas de especies bacterianas y su objeto es separarlas,
obteniendo cultivos al estado puro. Las técnicas de incubación varía según se trate de bacterias aerobias,
anaerobias o microaerófilas; haciendose la siembra en todos los casos en una forma más o menos
parecida.Las muestras que se remiten o reciben en el laboratorio pueden ser los siguientes:

• Secreciones: saliva, leche, semen, moco vaginal.

Excreciones: orina y heces.
Fluidos del organismo: sangre, suero sanguineo, líquido cefaloraquideo.
Exudados: pus, exudado abdominal o toracico, exudado uterino.
Fragmentos de organos y tejidos afectados.
Todas las siembras se efectuan en medios de cultivos previamente esterilizados, asi como debe ser
esterilizado el instrumental empleado en las manipulaciones.

• TECNICA DE LA SIEMBRA PARA EFECTUAR UN AISLAMIENTO.- Al cultivo que se realiza con una muestra
de sangre se denomina hemocultivo, de orina urocultivo y de heces coprocultivo. Cuando las muestras
son fluidas estas se inoculan directamente, pero si se trata de fragmento de órgano o tejido debera
hacerse un machacado empleandose un mortero.

En la practica podriamos tener los siguientes casos:

1. Muestras que usualmente no tienen gérmenes, tales como sangre, suero sanguineo, L. C.R. Estas
podran ser inoculadas en medios liquidos o en medios solidos en placas.

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 2. Muestras que usualmente estan poco contaminadas, tales como fragmentos de organos, estos pueden
ser inoculados, previo machacado en medios sólidos en placa, o líquidos que despues seran
plaqueados.
3. Muestras regularmente contaminadas, como leche, saliva, semen, orina etc; que deberan ser
sembradas en medios sólidos en placa.
4. Muestras muy contaminadas, como las heces, que siempre se sembrarán en medios selectivos sean estos
líquidos o sólidos en placas, si se siembra en medios líquidos habra que hacer el plaqueo
correspondiente, previa incubación con la finalidad de obtener al final colonias aisladas.
EMPLEO DE ANIMALES DE LABORATORIO EN EL AISLAMIENTO.-Para efectuar el aíslamiento de algunos
microorganismos puede emplearse animales de laboratorio, los que son inoculados con las muestras y
una vez que mueren víctimas de la inoculación o que sean sacrificados se obtendra muestras que serán
inoculadas en medios de cultivo adecuados y de estos se hará e aíslamiento de la especie bacteriana en
forma pura.
LECTURA DE LOS MEDIOS DE CULTIVO. Después de la siembra del medio de cultivo y después de la
incubación, se pueden determinar las características de cultivo del microorganismo. Los aspectos más
peculiares en cada uno de los medios se resumen de la siguiente manera.
COLONIAS EN PLACAS DE AGAR
1. Tamaño.- Los límites de tamaño de las colonias varían desde Muy pequeñas (punta de alfiler), que miden
solamente unas fracciones de milímetro de diámetro, hasta colonias muy grandes que miden 5 a 10 mm
de diámetro.
2. Margen o borde. Los bordes de las colonias bacterianas son de diferentes tipos, según la especie de que
se trate. Pueden formar un círculo perfecto, como las orillas de una gota, o mostrar gran variedad de
irregularidades como salientes redondos, hendiduras irregulares, proyecciones filiformes, o proyecciones
en forma de raíz.
3.Elevación. Las colonias pueden ser muy finas (aplanadas) o gruesas (elevadas). Las colonias elevadas
muestra diferentes grados de convexidad.
4. Cromogénesis o pigmentación. Las colonias pueden estar coloreadas (pigmentadas) o sin color (no
pigmentadas). Algunas especies se caracterizan por los matices que presentan de rojo, amarillo, café y
violeta.
5. Características ópticas. Opacas, trasnparentes u opalescentes.
DESARROLLO EN CALDO NUTRITIVO (Líquido)
1.Cantidad de desarrollo. Escaso, moderado o abundante.
2.Distribución del desarrollo en el caldo. Uniformemente distribuido (turbiedad uniforme), desarrollo
confinado a la superficie del caldo como nata o pelusa, o desarrollo que se acumula como sedimiento,
que es granular o viscoso.
3.Olor. Pútrido, a frutas o aromático, o imperceptible.
La cromogénesis o pigmentación, es una de las características más notables de los cultivos. No todas las
especies bacterianas poseen esta característica distinción. En algunas especies productoras de pigmento,
éste es retenido dentro de las células de manera que la masa de células bacterianas se colorea, mientras
que en otras
El pigmento se excreta y lo que se colorea es el medio de cultivo. La intensidad de la coloración está influida
por la composición del medio y las condiciones de incubación. La producción de pigmentos se observa
mejor en los medios de cultivo sólidos.
Algunas de las especies bacterianas comunes que producen y retienen el pigmento intracelular son:
Serratia marcescens Rojo
Chromobacterium violaceum Violeta
Staphylococus aureus Amarrillo dorado

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 Algunas de las bacterias que producen pigmento y lo excretan al medio son:
Pseudomonas chlororaphis Verdoso a amarillo
P. fluorescens Verdoso a café oliva
P. aeruginosa Verde, azul, a café oscuro
Variabilidad Y Herecia De Las Características

La genética es el estudio de la variabilidad y la herencia de las caracteísticas de un organismo, y la genética

microbiana ha aportado las contribuciones más alentadoras a la Biología de las decadas pasadas. Antes
de estos adelantos, el único camino para hacer análisis genéticos eran los experimentos en las que se
utilizaban apareamientos de animales o plantas superiores. Estos experimentos tienen limitaciones
considerables pues los tiempos de generación son generalmente muy largos y el número de
descendientes muy pequeño. Por lo tanto las principales dificultades son la lentitud de la reproducción
y el escaso número de individuos que siempre resultan de cada apareamiento. Al establecer la similitud
entre los sistemas genéticos de las bacterias y los de las formas más altas de vida, se llegó al uso
experimental de las bacterias ( en particular la Escherichia coli ) para dilucidar los principios
fundamentales de la genética. Además, las bacterias poseen varios sistemas exclusivos de recombinación
genética. Por recombinación genética queremos decir que las células descendientes pueden surgir con
combinaciones de genes diferentes de los de sus antecesores. Un microorgasnismo cambiado
genéticamente rara vez se encuentra; sin embargo, mientras mayores sean las poblaciones, aumenta la
probabilidad de que se logre uno de tales organsimos. Los microorganismos, y en particular las bacterias,
se multiplican con gran rapidez; la E. coli, en su etapa logaritmica de desarrollo se duplica a intervalos de
20 minutos aproximadamente (una nueva generación cada 20 minutos) es decir que el número de células
después de 18 a 24 horas de incubación, llega a 2 mil millones por mililitro. La rápida división celular, las
enormes poblaciones y la facilidad de manipulación experimental, han hecho de las bacterias y otros
microorganismos instrumentos convenientes para la investigación de los procesos genéticos.
GENOTIPO Y FENOTIPO
Una característica de todas las formas de vida, desde el punto de vista de la genética, es la estabilidad
general o parecido de las características generales de la descendencia y las del antecesor;
Sin embargo, un organismo puede no exhibir características idénticas cuanndo se dersarrolla en
condiciones ambientales diferentes. Estos cambios están relacionados con dos propiedades
fundamentales de la célula que son el genotipo y el fenotipo. El genotipo se refiere a la dotación total de
genes que posee la célula; el fenotipo es la expresión de las propiedades expresadas por una célula en
un momento dado. El genotipo determina la gama de las características de un organismo, pero esta
“gama de características” puede no ser la misma en todas las circunstancias ambientales o, planteado de
otra forma, la característica que un gen determinado está sujeta a modificación temporal por las
condiciones del medio. El genetipo representa, por lo tanto, la capacidad total potencial de la célula,
mientras que el fenotipo representa características por las cuales se expresa.
MICROBIOLOGIA DEL AIRE.- La flora microbiana del aire es transitoria y variable. El aire no es un medio
en el que los microorganismos puedan desrrollarse pero es portador de materia particulada, polvo y
gotas, que pueden estar cargados de microbios. El número y tipo de microbios en el aire están
determinados por las fuentes de contaminación del ambiente; como los organismos que son expelidos
del aparato respiratorio al toser o estornudar, y las partículas de polvo que circulan al ser levantadas de
la tierra por el viento se forma cuando las pequeñas gotas se evaporan. Los microorganismos
transmitidos por el aire son transportados en las partículas de polvo, en las gotas grandes que quedan
suspendidas brevemente y en el núcleo de las gotas, que Así son llevados unos cuantos metros o muchos
kilómetros; algunos mueren en unos cuantos segundos, otros sobreviven durante semanas, meses o más

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 tiempo. Su destino final depende de un sistema de complejas circunstancias que incluye las condiciones
atmosfericas como humedad, luz solar, temperatura; el tamaño de las partículas que lo transportan, y su
propia naturaleza, es decir, el grado de susceptibilidad o resistencia de cada especie en particular al
nuevo ambiente, o su capacidad para formar esporas resistentes y quistes. En el aire frecuentemente se
encuentran especies bacterianas resistentes a la desecación y exposición a la luz solar, así por ejemplo:
esporas de Bacillus subtilis y Cl. Welchii, ascosporas de levaduras, fragmentos de micelios y conidias de
hongos.
Sarcina lutea, Micrococus luteus, Serratia marcescens; Chromobacterium y Flavobacterium.
En el aire de teatros, escuelas y hospitales pueden encontrarse bacterias patógenas como Mycobacterium
tuberculosis, Estreptococus, Neumococus, Estafilococus aureus, y el Corynebacterium diphtheriae.
Estas bacterias son dispersadas en el aire en gotitas de saliva y mucus cuando la persona tose, estornuda,
habla o se rie. También en el aire pueden encontrarse algunos virus por ejemplo el virus de la gripe.

MICROBIOLOGIA DEL AGUA.-El agua libre de microorganismos patógenos y sustancias quimicas

perjudiaciales para la salud se denomina potable, y la contaminada con desperdicios domésticos o
industriales agua no potable o contaminada. Los principales objetivos para obtener la potable son
eliminar los microorganismos perjudiciales y las sutancias químicas no deseables. Estas medidas se
deben aplicar lo mismo a los pozos o manatiales de los que se surten pocas personas, que a los sistemas
que abastecen a centernares o millares de ellas, sin embargo, los procedimientos para purificar son
completamente diferentes en cada uno de estos casos. Se sabe que los microorganismos patógenos que
llegan a los depósitos de agua proceden de las descargas intestinales de hombres y animales. Además,
ciertas especies de bacterias, particularmente Escherichia coli, y varios microorganismos similares,
denominados coliformes, Estreptococus fecales (como Streptococus faecalis) y Clostridium perfringens,
son habitantes normales del intestino grueso de hombres y animales y en consecuencia siempre están
en las materias fecales. Así pues, la presencia de cualquiera de estas especies en el agua es evidencia de
contaminación fecal y el camino está abierto a los patógenos ya que se encuentran en las materias
fecales.
EL GRUPO COLIFORME.-Este grupo de bacterias comprende todos los bacilos aerobios y anaerobios
facultativos, gram negativos, no esporulados que producen ácido y gas al fermentar la lactosa. Las especies
clásicas de este grupo son Escherichia coli y Enterobacter aerogenes. La realación de estos microorganismos
con otros del grupo entérico-Salmonella, Shigella, proteus, Pseudomonas, todos los cuales son bacilos Gram
negativos no esporulados.

• E. coli, como ya ha sido señalado, es un habitante normal del intestino humano y de los animales.
Ent. Aerogenes es más frecuentemente en granos y plantas pero también en las materias fecales.
Como estas especies tienen gran semejanza en su aspecto morgológico y características de cultivo, es
necesario recurrir a pruebas bioquímicas para diferenciarlas.
La flora microbiana del agua esta en relación con:
a) sustancias nutritivas
b) substancias desfavorablles
c) presencia de otros microorganismos que pueden destruir bacterias como protozoarios y
bacteriofagos
d) factores físicos como ph, oxígeno disuelto, etc
El contenido bacteriano varía también con el típo de agua que puede ser:
- Aguas frescas como ríos, lagos, manantiales, etc.
- Aguas de mar (oceanos).
- Aguas termales.
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 - Aguas de acequia.
La presencia de E. coli en el agua se interpreta como signo de contaminación fecal, debido a que esta
bacteria es un habitante normal del tracto intestinal del hombre y animales.

PURIFICACÓN DEL AGUA.- Para purificar el agua puede emplearse diversos métodos:
-En ciertas zonas donde el agua es muy contaminada puede ser sometida a la ebullición. Otro método
de purificación del agua es filtrandola a traves de filtros que retienen la mayor parte de las bacterias.
El método más empleado en las ciudades es el de la potabilización, que consiste en someter al agua a
un proceso de sedimientación y luego adición de cloro, sustancia que tiene propiedades
antibacterianas.
MICROBIOLOGIA DE LA LECHE.- La leche segregada dentro de la ubre de la vaca es esteril y tiene un ph de
6.8, pero usualmente en el conducto galactoforo del pezón se multiplican bacterias saprofitas y es por esta
razón que la leche ordeñada nunca esta libre de bacterias. A parte de las bacterias que pueden contaminar
la leche en el conducto galactoforo, ésta será contaminada con bacaterias que están en los recipientes,
partículas de polvo, estiercol, orina , agua etc. Además si la ubre de la vaca esta enferma (mastitis), entonces
habran bacterias patógenas originadas en la ubre. En la leche encontramos diversos tipos de bacterias y
podemos clasificarlos en la forma siguiente: Bacterias Que Producen Acidez En La Leche.- Entre las bacterias
que producen acidez tenemos: Streptococus lactis, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus acidophilus etc.
Estas bacterias actúan sobre la lactosa produciendo glucosa y galactosa,
Luego la galactosa es desdoblada en ácido láctico, este ácido lactico va actuar sobre la caseina (caseinato
de calcio) formandose lactato de calcio y una proteina que precipita.

Bacterias Que Producen Gas.- Estas bacterias pertenecen principalmente al grupo de coliformes y se originan
en el estiercol. Estas bacterias actúan sobre la lactosa formando acidez y gas. Entre las especies más
importantes están: E. coli y el Aerobacter aerogenes.
Bacterias proteoliticas.- Entre las bacterias proteoliticas tenemos: El Bacillus subtiles, Bacillus mesentericus,
Proteus vulgaris. Estas bacterias hidrolizan las proteínas de la leche producieno una reacción alcalina. Las
bacterias proteoliticas producen enzimas; una parecida a la renina que precipita a la proteina.
Bacterias Formadoras De Alcalis.-Algunas bacterias de la leche la hacen alcalina sin producir ningún otro
cambio por ejemplo la Pseudomona fluorescen.
Bacterias Cromogénicas.- Estas bacterias producen pigmentos que hacen cambiar de color a la leche así por
ejemplo tenemos: Pseudomona aeruginosa, que produce leche azulada y a la
Serratia marcescens, que produce leche roja.
Bacterias Anaerobias.- Entre las bacterias anaerobias que podemos encontrar en la leche están: Cl. Welchii
tipo A, Cl. Butyricum, Cl. multifermentans estas bacterias contaminan la leche fermentando la lactosa
formando gas y produciendo ácidos de un olor bastante fuerte como butirico, valerianico y propionico.
Bacterias Inertes.-En la leche pueden encontrarse bacterias que no producen ningún cambio o alteración así
por ejemplo: My. Bovis, Br. Abortus, etc.
Bacterias Patógenas Que Causan Alteracion De La Leche.- En este grupo tenemos la mayoria de las bacterias
que producen mastitis y que producen algunos cambios en la leche, como acidificación, ejemplo: St.
Agalactiae.
Microbiología De Los Alimentos. En la actualidad la dieta de muchas personas se completa con alimentos
preservados por métodos especiales y por lo mismo, están preparados y disponibles en muchas formas.
Dichos alimentos están congelados, enlatados o deshidratados, parcial o completamente cocidos, listos para
ser calentados y servidos pero durante su preparación, pueden contaminarse con microorganismos capaces
de echarlos a perder a menos que el desarrollo y metabolismo de éstos sea controlado.Los alimentos están

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 compuestos de proteínas, carbohidratos y grasas, los cuales sirven de sustratos a cualquier clase de
microorganismo.
Carnes.- los restos de los animales sacrificados en los rastros y que han sido refrigerados sólo tienen,
usualmente, contaminación superficial, a diferencia de los tejidos internos que están ésteriles. La carne
fresca congelada tiene la superficie contaminada con los microorganismos característicos del medio y los
de los implementos (sierras o cuchillos) que usan para cortarla. Cada nueva superficie de carne que
resulta de un nuevo corte, agrega más microorganismos a ese tejido; los cual proporciona mayores y
nuevas extensiones a la contaminación, como sucede al preparar hamburguesas. Las especies más
comunes de bacterias que hay en las carnes frescas son pseudomonas, estafilococus, micrococus,
enterococus y coliformes. Las bajas temperaturas a las que se mantienen las carnes frescas permiten el
desarrollo de los microorgansimos psicrófilos.
Aves de corral.- Las aves de corral frescas desplumadas y desviceradas tienen flora bacteriana en la
superficie (piel) cuyo origen son las bacterias que regularmente hay en los corrales o gallineros y de la
manipulación durante la matanza, desplumado o desviceración. Los microorganismos del tipo
seudomonas son los principales contaminantes encontrados en la piel de las aves de corral
recientemente sacrificadas. Frutas y Vegetales.- Frutas y vegetales normalmente están expuestos a ser
infectados por bacterias, hongos y virus. La invación microbiana de los tejidos vegetales ocurre durante
varios estadios de su desarrollo y cuanto mayor sea la extensión de los invadidos aumentará el deterioro.
Otro factor importante que contribuye a la contaminación microbiana de frutas y vegetales depende del
buen o mal manejo al llevarlas al mercado. El manejo mecánico causa fisuras que facilitan la entrada de
los microorganismos. El pH de las frutas es relativamente ácido y varía de 2.3 en los limones, a 5.0 en los
plátanos, lo cual restringe el desarrollo bacteriano pero no retarda el de los hongos.
TAMAÑO, FORMA Y AGRUPACION DE LAS BACTERIAS.- Se conocen millares de especies diferentes de
bacterias, los organismos individuales tienen varias formas generales como son:
-oval o esferica o forma de coco
-cilindrica o forma de baston
-espiral o helicoidal.
A la forma esferica u oval también se les llama cocos, muchas de estas bacterias tienen modelos de
agrupacion que son utiles para su identificación. Cada uno de estos modelos de agrupación célular es
caracteristico de determinadas especies de bacterias. Al descubrir la morfologia de las bacterias
esféricas, la agrupacion de las células debe ser cuidadosa y adecuadamente interpretada.
Las bacterias cilindricas con forma de bastón, llamadas bacilos no se agrupan como los cocos, en ocasiones
se presentan en pares (diplobacilos) o en cadenas ( género bacillus).
El bacilo que causa la difteria tiene tendencia a agruparse lado a lado a manera de una empalizada, mientras
que los bacilos de la tuberculosis aparecen a veces en grupos de tres, que da la impresión de una estructura
ramificada. Siendo una excepción ya que la mayoria de bacilos se presentan aislados no adheridos entre si.
En las bacterias en espiral, los espirilos, predominan las células individuales aisladas. Las formas espirales de
diferentes especies exiben notables diferencias en cuanto a su longitud, número y amplitud de las vueltas de
espiral y en la rigidez de las paredes celulares, algunos son cortos y apretadamente enrollados.
Cuando la espiral es corta e incompleta, se habla de bacterias en como o vibriones.No obstante que las
bacterias son de tamaño minusculo es posible medir sus demensiones, la unidad de medida bacteriana es la
micra que

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