INTRODUCCIN AL LABORATORIO DE MICROBIOLOGA I

TECNICAS DE OBSERVACIN DE BACTERIAS II

Juan Eduardo Lpez Gmez, Rosa Anglica Miranda Snchez, Geraldine Polo
Peate, Carolina Julieth Vergara

UNIVERSIDAD DE CORDOBA

FACULTAD DE EDUCACION Y CIENCIAS HUMNAS

LICENCIATURA EN CIENCIAS NATURALES Y EDUCACION AMBIENTAL VII

AREA MICROBIOLOGIA

MONTERIA

2017
1. INTRODUCCION: El laboratorio de microbiologa es un lugar convenientemente
habilitado donde se manejan y examinan microorganismos. Este tipo de trabajo debe
ser llevado a cabo con una buena tcnica asptica, y por tanto se requiere un
ambiente limpio y ordenado. Cuando manejamos cualquier tipo de muestra debemos
evitar que microorganismos ajenos a nuestros cultivos y presentes en el ambiente se
introduzcan en ellos contaminndolos, o que los microorganismos de la muestra nos
contaminen a nosotros. Por ello trabajaremos siempre en condiciones de esterilidad.
En el laboratorio de microbiologa encontramos estas condiciones bien en campanas
de seguridad biolgica o bien en la proximidad de la llama de un mechero de alcohol o
de gas.
Todos los procedimientos que se lleven a cabo dentro del laboratorio de
microbiologa deben estar enmarcados dentro del concepto de bioseguridad.
La bioseguridad ha sido definida por el Ministerio de Proteccin Social como el
conjunto de medidas preventivas, destinadas a mantener el control de factores
de riesgo laborales procedentes de agentes biolgicos, fsicos o qumicos,
logrando la prevencin de impactos nocivos, asegurando que el desarrollo o
producto final de dichos procedimientos no atentes contra la salud y seguridad
de trabajadores de la salud, pacientes, visitantes y el medio ambiente. (Manual
de conductas bsicas en bioseguridad. Ministerio de Salud. 1997). Aunque los
microorganismos que se manipulen no sean considerados patgenos, todos los
cultivos de todos los microorganismos deben ser manejados con precaucin Por lo
anterior es importante cumplir con los siguientes requisitos bsicos:
Restringir la presencia de los microorganismos a sus recipientes y medios de
cultivo para evitar el riesgo de contaminarse uno mismo o a un compaero.
Evitar que los microorganismos ambientales (presentes en pile, cabello, aire,
ropa, etc.) contaminen nuestras muestras.

Por otro lado los seres vivos presentan variedad en tamao, forma, estructura,
funcin, etc. Con relacin al tamao ste vara, el ojo humano logra identificar objetos
hasta de 200 micras, por lo que se hace necesario recurrir a instrumentos pticos que
faciliten la observacin de objetos de menor tamao, este instrumento es el
microscopio, que consiste en juegos de lentes que agrandan la imagen.
El microscopio se invent, hacia 1610, por Galileo, segn los italianos, o por Jansen,
en opinin de los holandeses. La palabra microscopio fue utilizada por primera vez por
los componentes de la "Accademia dei Lincei" una sociedad cientfica a la que
perteneca Galileo y que publicaron un trabajo sobre la observacin microscpica del
aspecto de una abeja.
Sin embargo las primeras publicaciones importantes en el campo de la microscopia
aparecen en 1660 y 1665 cuando Malpighi prueba la teora de Harvey sobre la
circulacin sangunea al observar al microscopio los capilares sanguneos y Hooke
publica su obra Micrographia.
A mediados del siglo XVII un comerciante holands, Leenwenhoek, utilizando
microscopios simples de fabricacin propia describi por primera vez protozoos,
bacterias, espermatozoides y glbulos rojos.
Durante el siglo XVIII el microscopio sufri diversos adelantos mecnicos que
aumentaron su estabilidad y su facilidad de uso aunque no se desarrollaron mejoras
pticas. Las mejoras ms importantes de la ptica surgieron en 1877 cuando Abbe
publica su teora del microscopio y por encargo de Carl Zeiss mejora la microscopa
de inmersin sustituyendo el agua por aceite de cedro lo que permite obtener
aumentos de 2000A principios de los
aos 30 se habia alcanzado el limite terico para los microscopios pticos no
consiguiendo estos, aumentos superiores a 500X o 1000X sin embargo existia un
deseo cientfico de observar los detalles de estructuras celulares ( ncleo,
mitochondria... etc.).
Al principio, el microscopio surgi como una lente que agranda la imagen (lupa), lo
que dio origen al microscopio ptico compuesto, que consta de juego de lentes (parte
ptica), sostenida por estructuras metlicas (parte mecnica).
Para observar los objetos a travs del microscopio ptico compuesto, es necesario
colocarlos sobre una laminilla de vidrio (Porta objetos) y generalmente se le coloca
otra laminilla de vidrio ms delgada (Cubre objetos); en esta forma se obtiene la
preparacin microscpica; la que puede durar poco tiempo (preparacin temporal), o
puede ser guardada (preparacin permanente), lo que nos da la clasificacin de
preparaciones de acuerdo a su duracin.
La mayora de los microorganismos se encentran distribuidos en una gran variedad de
hbitats y se encuentran formando poblaciones mixtas con otros microorganismos, los
cultivos de estas mezclas se denominan cultivos mixtos. La amplia distribucin de los
microorganismos puede ser demostrada exponiendo medios de cultivos estriles al
contacto con el medio ambiente y diferentes superficies, en estos medios los
microorganismos crecen formando colonias. El aspecto de las colonias, el tamao, su
color, etc., permiten diferenciar varios tipos de bacterias, aunque son propiedades muy
generales influenciadas por las condiciones en que se realice el cultivo.
2. Materiales y Mtodos

2.1. Metodologa.

Se inici con la charla de bioseguridad en donde se resaltaba la importancia de

tener presente la peligrosidad de un agente que est directamente relacionado con
el tipo de manipulacin a la que es sometido, para lo que se presentan las normas
bsicas de bioseguridad en un laboratorio de microbiologa, como disciplina en el
ejercicio cientfico. Refirindose el docente en turno a que:

Hay que trabajar con calma y concentracin

Es imprescindible en todo momento el uso del equipo de

proteccin personal EPP (batas, guantes, polainas, gorro, tapabocas).

Al iniciar y finalizar la prctica, el estudiante se lavar las

manos con agua y jabn

El lugar de trabajo siempre debe estar limpio y ordenado

 Est prohibido comer, beber y fumar en el laboratorio

Cualquier material que no se utilice en l realizacin de la

prctica debe estar apartado del lugar de trabajo

Los microorganismos deben manejarse siempre alrededor de

la llama del mechero

No se debe pipetear nunca con la boca

Para deshacernos del material contaminado utilizaremos

siempre los recipientes adecuados

Bajo ningn concepto debe sacarse ninguna muestra

contaminada del laboratorio
 Asegrese de conocer el procedimiento antes de realizar
cualquier experimento, si tiene dudas, no dude en consultar a su instructor

Todos los medios de cultivo deben ser transportados en

posicin vertical y almacenados en igual posicin en sus respectivos
receptores

Todos los materiales usados durante la prctica deben ser

retornados a los lugares de donde fueron obtenidos

Marque en forma legible los tubos y cajas de Petri que se

vayan a usar.
Adems de ser un compromiso, es una prioridad tener presente estas normas de
biseguridad.
2.2. Reconocimiento de Materiales y Equipos en el laboratorio de microbiologa.

EQUIPOS Y MATERIALES

Escobillones de algodn estril (copitos estriles)

Pipetas
Nevera
Reactivos qumicos
 Porta Objetos y Cubre Objetos
Papel impreso (peridico) con letra pequea
Tijeras y hoja de afeitar nueva
Papel y lpiz
Lpiz de colores
Lana o algodn de colores
Corcho
Polen de flor
Polvillo de ala de mariposa
Jabn antibacterial
Rollo de papel secante (toallas de papel de cocina)
Alcohol antisptico
Encendedor
Cinta pegante de papel

MATERIALES FUNCIN
Frasco gotero Recipientes en general de plstico
(tambin pueden ser de vidrio), con
tapn y un tubo fino y doblado, que se
emplea para contener agua destilada o
 desionizada. Se emplea para dar el
ltimo enjuague al material de
vidrio despus de lavado, y en la
preparacin de disoluciones. Estos
frascos nunca deben contener otro tipo
de lquidos. El frasco slo se abre
para rellenarlo.
Microscopio compuesto El microscopio es un instrumento ptico
que amplifica la imagen de un objeto
pequeo. Es el instrumento que ms se
usa en los laboratorios que estudian los
microorganismos. Mediante un sistema
de lentes y fuentes de iluminacin se
puede hacer visible un objeto
microscpico. Los microscopios pueden
aumentar de 100 a cientos de miles de
veces el tamao original
Porta y cubre objetos Un portaobjetos es una fina placa de
cristal sobre el cual se disponen objetos
para su examen microscopico. Sus
dimensiones son de 75 mm x 25 mm y
estan disponibles en cajas de 50
unidades. El objeto a observar suele
disponerse sobre este artefacto para
despus situarse en el microscopio y ser
observado. Tambien disponibles
cubreobjetos para cubrir la muestra
observada.
Un cubreobjetos es una fina hoja de
material transparente de planta
cuadrada. Se coloca sobre un objeto
que va a ser observado bajo
microscopio, el cual se suele encontrar
sobre un portaobjetos. Disponibles en
distintos tamaos (18, 20, 22, 24 mm
cuadrados) y se suministran en cajas de
100 unidades.

Asa bacteriolgica El asa bacteriolgica o asa de

platino es un instrumento de
laboratorio que consta de una base que
puede estar hecha
de platino, acero, aluminio y
un filamento que puede ser
de nicromo, tungsteno o platino que
 termina o en un arito de 5 mm o en
punta.
Se emplea para transportar, arrastrar,
trasvasar inculos (pequeo volumen
que contiene microorganismos en
suspensin) desde la solucin de trabajo
tambin llamada solucin madre
al medio de cultivo (slido o lquido) o de
un medio a otro (resiembra). Tambin
sirve para la realizacin de frotis.

Mechero de alcohol Un mechero o quemador Bunsen es

un instrumento utilizado en laboratorios
cientficos para calentar o esterilizar
muestras o reactivos qumicos. Una de
las fuentes de calor ms sencillas del
laboratorio y es utilizado para obtener
temperaturas no muy elevadas.
Autoclave Un Autoclave, Aparato para esterilizar
por vapor que consiste en un recipiente
cilndrico, de paredes resistentes;
metlicas, y con cierre hermtico
autoclave, en cuyo interior, que contiene
un lquido, generalmente agua, el objeto
se somete a presiones y temperaturas
elevadas sin llegar a hervir.
Horno Regulacin de la temperatura por
termostato hidrulico.
Circulacin de aire por turbo ventilador.
Recinto interior en acero inox. AISI 304
con alojamiento
para guas bandejas.
Puertas de cristal templado, correderas,
de quita y pon.
Orificios de salida de vapores.
Mueble exterior recubierto en epoxi.
Jarras de anaerobios Recipientes que se usan para conseguir
una atmsfera libre de oxgeno para el
cultivo de microorganismos anaerobios.
Pipetas automticas (micropipetas) y
puntas de pipeta Se utilizan para pipetear pequeas
cantidades de lquidos.

Se utilizan con puntas desechables de

distinto tamao y color segn la
micropipeta. Existen cuatro tamaos: de
0,5-2m; de 2-20 m; de 20-200 m y
de 200-1000 m.

Placas de Petri
recipientes para la preparacin de
medios de cultivo slidos

Incubadora
Incubadora (aparato de laboratorio)
Las incubadoras son esenciales para
una gran cantidad de trabajos
experimentales en biologa celular,
la microbiologa y en biologa molecular
y se utilizan para cultivos celulares, tanto
bacterianos como de clulas eucariotas.
Baos serologicos.
Bao de Mara o Serolgico para
laboratorio. Los baos de mara
o baos serolgicos, son equipos
utilizados generalmente en laboratorios
de qumica. Usualmente se utiliza un
mtodo basado en conferir la
temperatura uniforme a una sustancia
lquida o slida.
Cajas de Petri estriles con Agar
Nutritivo Se utiliza como agente gelificante para
dar solidez a los medios de cultivo. En el
agar bacteriolgico el componente
dominante es un polisacrido que se
obtiene de ciertas algas marinas y que
presenta la indudable ventaja de que a
excepcin de algunos microorganismos
marinos, no es utilizado como nutriente.
Un gel de agar al 1-2% se licua
alrededor de los 100C y se gelifica
alrededor de los 40C, dependiendo de
su grado de pureza.
Tubo de ensayo tubo de ensayo
Tubo de cristal, cerrado por uno de
sus extremos, que se utiliza para
hacer anlisis qumicos.

Cristal violeta solucin acuosa (1%)

Sulfato de cobre (solucin al 20%)
Cultivo de klebsiella pneumoniae
Solucin salina isotnica
Yogurt con cultivos probioticos
Azul de metileno
Tinta china
Alcohol acetona
Solucin de safranina
Aceite de inmersin
Puente de cloracion

http://www.directindustry.es/prod/jp-selecta/product-69528-592681.html
http://campus.usal.es/~micromed/Practicas_odontologia/unidades/labv/LabMicro/pr
actica1.html
2.3. Lineamientos generales para el uso del Microscopio Compuesto.
Se indic de parte del docente cada una delas partes del microscopio y su funcin, con lo
cual no entraremos en detalle ya que se supone que se tienen el conocimiento previo
sobre este instrumento de trabajo y anlisis de laboratorio.

MICROSCOPIO PARTES Y FUNCION: Se explicarn las partes pticas y mecnicas del

microscopio
PARTE OPTICA.
Objetivos, Oculares, Diafragma y condensadores
PARTES MECANICAS:
El pie, La platina, Carro, uas o ganchos, el tubo, tornillos micromtrico y micromtricos

1. Baje completamente la platina del microscopio.

2. Haciendo uso del mecanismo del revlver, coloque frente a la preparacin el objetivo de
menor aumento (seco dbil 10 X).
3. Coloque la preparacin microscpica sobre la platina sujetndola con las pinzas del
carro y centre la preparacin haciendo uso de los tornillos del carro.
4. Regule la luz mediante el uso del mecanismo del diafragma.
5. Haciendo uso del tornillo macromtrico suba al mximo la preparacin hasta que
encuentre tope sin observar por los oculares.
6. Observando a travs del ocular, accione el tornillo macromtrico hasta que visualice la
imagen en el campo microscpico.
7. Una vez enfocada la imagen, afine el enfoque microscpico, haciendo uso del tornillo
micromtrico.
8. Si desea mayor detalle, cambie de aumento rotando el mecanismo del revolver a un
objetivo que le proporcione el aumento deseado, corrigiendo el enfoque de imagen
moviendo el tornillo micromtrico, y graduando la intensidad de luz con el diafragma.
9. Despus de haber realizado la observacin, se limpian las lentes con papel limpia
lentes, se coloca el objetivo de menor aumento en posicin de enfoque, se baja la platina,
se desconecta y se tapa. El microscopio queda listo para la prxima observacin.

2.3.1 Preparaciones microscpicas temporales.

Se realizaron los siguientes procedimientos de acuerdo con las muestras

biolgicas indicadas por el docente.
 TIPOS DE TINCION SIMPLE
2 muestras yogurt y sarro dental

Hacer frotis, secarlo y fijarlo
Cubrir con colorante la preparacin y dejarlo actuar

TINCION
durante un minuto.
Lavar suavemente con agua destilada para eliminar
el exceso de colorante.
Secar al aire y observar al microscopio con el
objetivo de inmersin (100x) empleando el
aceite apropiado.

Tcnica que permite observar la morfologa y

tamao de las bacterias, as como los tipos de
agrupaciones que forman.

Distribuir la mezcla a lo ancho del portaobjeto

TINCION NEGATIVA Colocar una pequea desplazar poco a poco el segundo portaobjeto a lo largo

gota de tinta china en el del primero para hacer una capa fina de la mezcla.
dejar secar al aire.

extremo de un Observar al microscopio (100X)

portaobjeto

E. coli., Klebsiella
pneumoniae

Aplique una capa delgada del espcimen en el
TINCION DE GRAM portaobjetos, djelo secar fjelo flameando con calor
Cbralo con cristal violeta durante 1 minuto,
lvelo con agua.
Aplique solucin yodada durante 1 minuto, lvelo con
agua
Cuidadosamente decolore la laminilla con alcohol-
acetona hasta que el color azul se torne en celeste
claro
Aplique solucin de safranina por un minuto,

Las bacterias gram

lvelo con agua, secando la laminilla con papel
filtro

positivas se tien de color

azul violeta.

Las bacterias gram

negativas se tien de
color rosado.

Tome una asada del cultivo y haga un

TINCION SELECTIVA Para tincin de capsulas. extendido
Djelo secar al aire (no se debe calentar)
Sumrjalo en la caja de coloracin con cristal
violeta (1%) por 2-4 minutos
Lave la placa en la caja con solucin de sulfato
de cobre al 20%
Saque la placa de la caja y djela secar al
aire en posicin vertical
Observe con objetivo de inmersin

Staphylococcus aureus,
Klebsiella pneumoniae

En la tincin simple se realiz con dos (2), muestras una de yogurt y una de sarro dental.

Se agreg una gota de solucin salina sobre la placa de porta objetos.

Luego se tom la muestra de sarro introduciendo el mondadientes entre los
dientes, se homogenizo y se realiz el extendido.
Despus se realiz la fijacin, cual se realiza con calor pasndolo o flamendolo
con el mechero.
 Luego se realiza la tincin con azul de metileno.
Se lava con agua destilada secar al aire libre.
Se realiza microscopia con el objetivo 4X, agregando aceite de inmersin
tendiendo al objetivo de 100X.

NOTA: los mismos pasos se realizan con el yogurt.

En la Tincin Negativa , se utiliz.

Una gota de tinta china o tirosina.

En la misma gota se introduce Klebsiella sp.

Luego se hace un arrastrado con el portaobjeto

Se hace la microscopia al 4X tendiente a 100X.

En la Tincin Selectiva (Klebsiella sp)

Se aplica sobre la placa una gota de solucin salina

Luego se aplica klebsiella sp.
En este paso se omite la fijacin.
 Luego se tie con cristal violeta
Se deja por 2 minutos
Luego se lava con sulfato de CU (cobre) al 20%.
Secar y se hace la microscopia al 4X tendiente a 100X.

3. RESULTADOS Y DISCUSIN.

Tincin simple
Sarro
El sarro dental es un
depsito consistente y
adherente localizado sobre
el esmalte de los dientes.
Est constituido
principalmente por restos
proteicos, sales minerales
y bacterias junto con sus
productos metablicos.
Al hacer la observacin del
frotis de sarro se pudieron
ver reflejadas en el
microscopio (100x),
clulas bacterianas como
cocos, bacilos, diplococos,
espiroquetas y
cocobacilos. Para ello se
utiliz la forma de tincin
simple.
Yogurt Para hacer la microscopa
con la muestra de yogurt
se utiliz la tincin simple
en la cual se observa a
100x bacterias como
estreptococos y
lactobacilos las cuales se
reflejan en la imagen.
Es importante saber que
en el yogurt se encuentran
presentes bacterias dado
que, stas utilizan como
fuente de energa la
lactosa o azcar de la
leche, liberando cido
lctico como producto de
desecho, lo que provoca
un incremento de acidez
que hace a su vez que los
productos de la leche se
precipiten, formando un
gel. La mayor acidez (pH
4-5), tambin evita la
proliferacin de otras
bacterias patgenas.
Encontramos en ste tipo de tincin que se debe flamear la muestra,
esto se da con el propsito de fijarla.

4. PREGUNTAS DE CONSULTA

1. Cules son los poderes del microscopio y como pudo comprobarlos en su

trabajo practico? Los poderes del microscopio son los siguientes:

Poder de ampliacin: Propiedad que permite magnificar la imagen, lo cual depende

de la calidad de los lentes del objeto y del ocular. Tanto el ocular como el objetivo
poseen un poder de aumento determinado. El aumento total de la imagen observada
equivale a multiplicar el aumento del lente del ocular por el aumento del lente del
objetivo.
 Poder de penetracin o profundidad del foco: Es la propiedad que tiene el
microscopio de permitir observar varios planos del preparado con una misma posicin
de enfoque.
Poder de definicin: Es la capacidad del microscopio de permitir observar
imgenes claras de contornos ntidos tanto en el centro como en la periferia del
campo visual.
Poder de resolucin: Capacidad que ofrece el microscopio de permitir distinguir 2
puntos adyacentes o prximos, cuya distancia entre s es tan pequea que los hace
parecer como uno solo ante el ojo humano.

2. Porque es importante utilizar el microscopio en el estudio de la biologa?

Es importante utilizar el microscopio ya que con l se pueden observar cosas que a

simple vista no podemos como lo son bacterias, microorganismos, clulas, tejidos etc.
Lo que va a permitir el estudio de estas a profundidad, es sin duda un elemento
indispensable en cualquier laboratorio a la hora de determinar estructuras biolgicas,
y comportamientos en los microorganismos.

3. Qu relacin existe entre el poder de aumento de los objetivos y el rea del

campo visual?

El campo visual es la porcin del plano visible observado a travs del microscopio, la
relacin con el poder de aumento radica en que si el aumento es mayor, el campo de
visin disminuye, lo cual quiere decir que el campo es inversamente proporcional al
poder de aumento.

4. Explique porque en la medida en que aumenta el objetivo disminuye el

nmero de alas de mariposa y granos de polen observados.

Esta disminucin se da precisamente por la relacin inversamente proporcional que

existe entre el campo de visin y el aumento del objetivo, es decir que a medida que
aumentemos los objetivos tendremos un menor campo de visin por lo cual veremos
en menos proporcin en los granos de polen. Polen.

5. Cules pueden ser las causas de daos de los lentes del microscopio?

Las lentes se pueden daar ya sea por suciedad, hongos, ralladuras, desajustes
pticos (desplazamiento del lente) o por una mala colocacin del lente.
 6. Consulte los tipos de microscopios y sus caractersticas principales.

Microscopio Simple: Es el que utiliza slo una lente, es decir, es una lupa, su aumento
depende del tipo de lente y la graduacin que esta posea, pero el aumento que se puede
lograr con este microscopio para poder observar objetos pequeos es muy poco.

Microscopio ptico: Este tipo de microscopio es evolucin del anterior, en l hay varias
lentes superpuestas que se encuentran graduadas y colocadas de tal manera que el
aumento de tamao al ver los objetos puede superar las dos mil veces el tamao real del
objeto.

Microscopio Compuesto: Es el microscopio ms comn. Se utiliza para aumentar las

imgenes de objetos que no son visibles a simple vista. Su mtodo de iluminacin es luz
visible y por lo tanto el aumento es limitado.

Microscopios Electrnicos: Estos tienen un aumento mucho mayor que todos los
microscopios pticos, pues estos microscopios electrnicos pueden llegar a aumentar el
tamao de un objeto, hasta un milln de veces (o ms), llegando a tener una resolucin
de 0.1 nanmetros.

Microscopio Digital: Es como un microscopio ptico tradicional solamente que ahora

trae incorporado un dispositivo de acoplamiento y carga en la cmara que se utiliza para
visualizar muestras y especmenes de una forma ms amplia y cmoda a travs de un
monitor o pantalla de computadora.

Microscopio de Fluorescencia: En este tipo, la lente que comnmente es de vidrio es

remplazada por lentes de cuarzo, mientras que la iluminacin es efectuada por medio de
lmparas de mercurio, no utiliza filtros y se observa usando placas fotogrficas.

7. Porque la imagen aparece invertida en el microscopio compuesto?

Se ven al revs debido a que el objetivo o el ocular del microscopio acta como un
espejo, y tambin debido al aumento del objetivo que se usa para ver las cosas ms
grandes de su tamao normal, y a lo largo de las lentes que componen el microscopio, se
encuentran algunas con forma convexa. 8. Cite tres ejemplos de impactos positivos y
negativos de los microorganismos. Impactos positivos de los microorganismos:
 Algunos Lactobacillus forman parte de la flora intestinal y tambin son tiles para
producir yogurt.

Las E.Coli transgnicas pueden producir muchas protenas benficas para el hombre
Como por ejemplo hormonas peptdicas.

Algunas bacterias enriquecen el suelo, por eso dicen que tienen funcin geoqumica.
Impactos negativos de los microorganismos:

La mayora son altamente nocivas para los seres vivos.

Producen toxinas que pueden matar a los dems organismos.

Su capacidad mutagenica ante un antibitico, permite que se vuelvan resistentes a los

antibiticos. 9. Qu caractersticas les permiten a los microorganismos tener una amplia
distribucin?

Los microorganismos se encuentran en todas partes, son transportados por la corriente

de aire desde la superficie de la tierra hasta el contacto con la atmsfera.

Se localizan desde las partes ms profundas de los ocanos hasta las partes ms altas
de las montaas.

Se encuentran en los suelos frtiles (porque proporcionan nitrgeno (N) y transforman

la materia orgnica).

Son arrastrados por arroyos y ros para ser depositados en algunos lugares como:
lagos, lagunas, esteros.

Se localizan en los desechos humanos, si estas son arrastradas por aguas se infectan
y causan enfermedades.

Abundan donde se encuentra mucho alimento, humedad y una temperatura propicia.

Los microorganismos viven en las mismas condiciones ambientales que las personas
por lo que estamos rodeados de microbios, por ejemplo en el aire, en el alimento, en la
superficie de nuestros cuerpos, en las partes interna y orificios corporales, nariz, boca,
esfago, odo, etc.
 Afortunadamente la gran mayora de los microbios son inocuos para las partes sanas,
adems de poseer defensas contra ellos

4.1 ACTIVIDAD COMPLEMENTARIA

1. Consultar la funcin de los materiales de laboratorio mencionados en la prctica #1
adiciona aquellos que no fueron colocados en el listado y realiza los esquemas
correspondientes.

3. Seala en el siguiente dibujo al menos 10 de los errores que se cometen en este

laboratorio y explica cual es el error y qu se deber hacer para corregirlo

Ante todo el orden y el cumplimiento de las normas de bioseguridad priman ante un rea
para trabajo o labor seguro.

PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
1. Qu diferencias existe entre un desinfectante y un antisptico

Antispticos y desinfectantes son productos qumicos utilizados para matar o limitar el

crecimiento de bacterias, virus y otros agentes patgenos. Es frecuente que ambos
trminos se utilicen de forma indistinta pero en el mbito de las ciencias de la salud tienen
una importante diferencia: los antispticos son los destinados a un uso sobre tejido vivo y
los desinfectantes son utilizados sobre objetos inertes.
(https://curiosoando.com/diferencia-antiseptico-y-desinfectante)

2. En qu consiste el proceso de esterilizacin y la importancia de este.

Es la eliminacin completa de toda forma de vida microbiana de objetos inanimados,
incluyendo esporas. Puede conseguirse a travs de mtodos fsicos, qumicos o
gaseosos. Cabe destacar que la esterilizacin, es el resultado de un PROCESO y no solo
la exposicin al agente esterilizante. Y de ningn modo debe concebirse como un mtodo
de exposicin a un agente microbicida.
(https://ezzesblack.wordpress.com/2010/07/05/54/)

3. Explique la importancia de la pasteurizacin de la leche

La importancia est en la prevencin del detrimento de la calidad, la leche no procesada o

leche bronca contiene diferentes microorganismos que pueden acidificarla, cortarla, y ,
peor an, representar un peligro para la salud de quien la consume.
(Dr. Jess Alberto Quezada Gallo, Profesor investigador, Ingeniera de Alimentos, Universidad Iberoamericana, Ciudad de
Mxico)

4. qu dificultades se tendra si no se adiciona la safranina al final de la tincin?

Es un colorante de contraste (la safranina) solo puede teir a las clulas vegetativas
(decoloradas por el agua), por tal razn si no se adiciona este reactivo al final de la
tincin no se puede identificar las clulas de tipo vegetal.
(http://www.ugr.es/~pomif/pom-bac/pb-iii/pb-iii-3-esporas.htm)

5. Explique el fundamento de la tincin negativa realizada en la prctica. Qu tipo

de informacin se obtiene?

El fi n de rodear y delinear las bacterias no teidas u otros materiales biolgicos.

Utilizan diferentes mtodos de tincin negativa para evaluar estructuras individuales,
tan pequeas como las vesculas sinpticas e incluso de gran tamao, como los
microorganismos unicelulares. Este mtodo es muy til, aunque est limitado por la
presencia de un fondo oscuro que no permitir la correcta identificacin de forma
ntida y detallada de los componentes de dichas estructuras En microbiologa, la
tincin negativa proporciona un resultado presuntivo de la presencia de Cryptococcus
neoformans, microorganismo causante de meningitis en pacientes con
inmunosupresin, siendo la tcnica ms utilizada para poner de manifi esto su
cpsula.
(http://www.medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2014/ir141b.pdf)
 6. Investigue otra tcnica de tincin selectiva que permita observar estas estructuras
bacterianas.

Tincin de Ziehl-Neelsen La tincin de Ziehl-Neelsen es la tcnica comnmente usada

en el diagnstico rutinario de tuberculosis.22,23 Es una tcnica rpida, fcil y de bajo
costo,24 lo que permite que se pueda realizar en casi cualquier laboratorio clnico. Esta
tincin permite diferenciar a las bacterias en dos grupos: aquellos que son capaces de
resistir la decoloracin con alcohol-cido y aquellos que no lo son.25 La sensibilidad de
esta tincin para identifi car bacilos cido-alcohol resistentes es del 74%.

Tincin de Wright La tincin de Wright es una tcnica que se emplea generalmente para
la diferenciacin de elementos celulares de la sangre y es clasifi cada como una tincin
policromtica, dado que puede teir compuestos cidos o bsicos presentes en una
clula.20 Fue desarrollada por el patlogo James Homer Wright en 1902 a partir de la
modifi cacin de la ya existente tincin de Romanowsky, utilizada para diferenciar
elementos formes de la sangre.21

Tincin de azul algodn de lactofenol El examen microscpico es de gran importancia

en micologa para la observacin de las diferentes especies de hongos de inters clnico.
Se deben utilizar tinciones que logren preservar la integridad de las estructuras
fngicas.18 Para la correcta identifi cacin de hongos de inters clnico, ya sea con fi nes
de diagnstico o estudios taxonmicos, es necesario observar las estructuras fngicas
con una alta calidad y contraste; para ello se utilizan diversos compuestos qumicos que
permitan la tincin entre la pared y el citoplasma de las clulas fngicas.31
(http://www.medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2014/ir141b.pdf)

7. Realiza una lista de bacterias que sinteticen cpsulas.

Los limos:

Leuconostoc mesenteroides transforma la sacarosa en dextrano, por un lado es

un contaminante extremadamente molesto en el proceso de fabricacin de azcar
donde la abundante espuma de los lquidos contaminados le vali el apodo de
 "bacteria del desove de las ranas" (vea en este clip el aspecto de un autentico
desove de rana) y por el otro la base de la fabricacin de dos productos de alto
valor agregado: sustituto del plasma sanguneo y gel para separaciones
cromatogrficas.
Streptococcus salivarium y Streptococcus mutans transforma la sacarosa
en levanos (polifructosa), estos se fijan en los dientes y constituyen la base para
la produccin de cidos que favorecen las caries dentales.
Los limos mantienen en grupos a las bacterias (Zooglea) o bien en pelculas
superficiales como en Acetobacter aceti subsp. xylinum, en este caso el producto
excretado es celulosa quien da la consistencia correosa que la llev a ser
conocida como "mycoderma aceti"
CONCLUSIN

El material de laboratorio es esencial dentro del rea de microbiologa, no solo de manera

clnica sino tambin en alimentos, industrial y ambiental. Ya que las pruebas para la
identificacin de bacterias, tcnica de recuenta de bacterias, la observacin de los
microorganismos, cultivo de bacterias, pruebas de micologa, virolgica, gentica
bacteriana, tcnicas serolgicas, pueden variar en el proceso, pero bsicamente se utiliza
el mismo material y equipo, por eso es importante conocer las caractersticas y la tcnica
de manejo adecuado para cada instrumento empleado en el laboratorio. Es de suma
importancia conocer las tcnicas de esterilizacin para evitar la contaminacin de agentes
externos a las pruebas realizadas, as como evitar que el personal se infectado por un
microorganismo patgeno por eso es necesario que el material tenga un proceso de
limpieza procesamiento, mantenimiento, supervisin de programas para la esterilizacin,
carga de aparatos esterilizados, control de almacenaje de artculos procesados,
distribucin de artculos procesados, suministro de artculos estriles, control de artculos
contaminados y descontaminacin.
Bibliografia

http://www.biologia.edu.ar/bacterias/micro8.htm
http://www.higiene.edu.uy/cefa/2008/MorfologiayEstructuraBacteriana.pdf

http://www.medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2014/ir141b.pdf
http://www.ugr.es/~pomif/pom-bac/pb-iii/pb-iii-3-esporas.htm
https://curiosoando.com/diferencia-antiseptico-y-desinfectante
https://ezzesblack.wordpress.com/2010/07/05/54

http://www.directindustry.es/prod/jp-selecta/product-69528-592681.html
http://campus.usal.es/~micromed/Practicas_odontologia/unidades/labv/LabMicro/pr
actica1.html