FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE CIENCIAS

FARMACÉUTICAS Y BIOQUÍMICA

Efecto antimicótico in vitro de aceite esencial de Oreganun

vulgare (Orégano) sobre cepas de Cándida Albicans en
presentación de forma farmacéutica crema.
Autor (es):

1. ATAPOMA FLORES JORGE

2. BARBOZA FLORES LIZBETH NORMA
3. ESPIRITU ALONZO DORA MARICRUZ
4. GAMARRA MANAY PATRICIA
5. HUAMAN RAMOS ROSARIO CECILIA
6. HUAILINOS BARTOLO YUCELY LISETH
7. MONTELUIS ASPAJO LIVI
8. OBREGON NIETO ROSALINDA
9. VELASQUEZ TORRES MARIA

Asesor: DIANA ESMERALDA CASTILLO ANDAMAYO

Lima-Perú
2021
 Efecto antimicótico in vitro de aceite esencial de Oreganun
vulgare (Orégano) sobre cepas de Cándida Albicans en
presentación de forma farmacéutica crema.

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

En el Perú mediante un estudio retrospectivo de enfermedades fúngicas en el Instituto Nacional
de Enfermedades Neoplásicas (INEN) en el periodo 2012 a 2016. Se halló que las infecciones
sistémicas causadas por Candida albicans eran más habituales (54,0%) en pacientes con tumor,
además Candida albicans aumento su frecuencia de 14,7% a 31,0% durante el tiempo de
estudio.

En el ámbito mundial las micosis profundas y oportunistas son cada vez más continuas y en el
Perú son infecciones frecuentes y que tienen alta prevalencia. Las incidencias de estas
infecciones muestran elevación constante; esto seguirá en aumento por el incremento de la
esperanza de vida y en consecuencia, de las enfermedades geriátricas, uso de
inmunosupresores cada vez más potentes, empleo de antibióticos de amplio espectro,
complicaciones de las técnicas quirúrgicas modernas y presencia de síndrome de
inmunodeficiencia adquirida.1

La Candida albicans es una levadura comensal que reside en las membranas mucosas de las
cavidades oral y vaginal, así como en el tracto gastrointestinal de los humanos. Normalmente es
inofensiva en el hospedero sano, pero su patogenicidad se dispara en el hospedero
inmunocomprometido. Aunque la invasión inicial depende de los mecanismos inmunes del
hospedero, Candida albicans posee características intrínsecas que promueven su habilidad de
causar enfermedad.2

El orégano es una planta aromática originaria de Asia, muy utilizado en la actividad culinaria,
cosmética y farmacéutica, contiene aceites esenciales, cuyos metabolitos secundarios como
carvacrol y timol, tienen altos niveles de actividad antimicrobiana y antimicótica, siendo el timol el
más activo. La composición química de los aceites esenciales y sus propiedades, están sujetos a
variaciones debido a factores como el quimiotipo y el geotipo de la planta, por lo que es
necesario su estudio para su correcta aplicación terapéutica. Un estudio de la eficacia de aceites
esenciales contra diferentes micetos patogénicos evaluando in-vitro la inhibición de la actividad
de alguno de estos y sus componentes principales fue realizado en contra de una cepa de
Candida albicans. Dieciséis aceites esenciales comerciales, cuarenta y dos componentes puros
(alcoholes, aldehídos, cetonas, fenoles e hidrocarburos), fueron probados mediante el uso de un
agar semisólido.3

El orégano es una planta que presenta propiedades antifúngicas, por lo tanto, su potencial uso
en reemplazo de los medicamentos químicos resultaría muy beneficioso para gran parte de la
población, quienes no cuentan con recursos económicos o con el acceso a los fármacos
convencionales, frente a infecciones fúngicas.

Es importante realizar este estudio; ya que existen investigaciones y publicaciones acerca del
efecto de plantas medicinales sobre enfermedades Candida albicans, o indicaciones adversas
por el uso de plantas medicinales. Entonces, se pretende con esta investigación que el aceite
esencial de la planta de Origanum vulgare de resultados positivos contra la levadura Candida
albicans, es decir que podamos demostrar inhibición de la misma, para que este actúe como un
agente antifúngicas, con la finalidad de que en un futuro este compuesto a base de una crema,
sea empleada como un posible tratamiento natural, alternativo y de bajo costo, que sea accesible
a personas de bajos recursos económicos que no tienen acceso a la salud integral, mejorando
su calidad de vida. Poderlo emplear en productos antimicóticos contra alteraciones Candida
albicans, que afectan a la población peruana.

Por estas razones, se plantea lo siguiente: ¿Cuál es la actividad antimicótica “in vitro” del aceite
esencial de Origanum vulgare “Orégano” frente a Candida albicans en presentación de forma
farmacéutica crema?
1.2. JUSTIFICACIÓN
Relevancia social
La realización del presente estudio de investigación determina, que el aceite esencial de
Origanum vulgare da resultados positivos contra la levadura Candida albicans, es decir
que podemos demostrar inhibición de la misma, y así pueda actúar como un agente
antifúngico, cuya finalidad en un futuro este compuesto en base crema, y sea empleada
como tratamiento natural alternativo y accesible a personas de bajos recursos
económicos, que no tienen acceso a la salud integral, mejorando la calidad de vida.

Relevancia teórico

La presente investigación aportará conocimiento científico sobre la existencia de plantas

medicinales con propiedades antibacterianas y antifúngicas, siendo una nueva alternativa
de prevención y tratamiento de las patologías más frecuentes de Candida albicans. El
orégano es una planta que contiene aceites esenciales, cuyos metabolitos secundarios
como carvacrol y timol, tienen altos niveles de actividad antimicrobiana y antimicótica,
siendo el timol el más activo.

Hipótesis

El aceite esencial de Origanum vulgare, presenta actividad antimicótica frente a Candida

albicans en forma farmacéutica de crema.

Objetivos General

Evaluar el efecto antimicótico antimicótico in vitro de aceite esencial de Oreganun vulgare

(Orégano) sobre cepas de Cándida Albicans en presentación de forma farmacéutica
crema.

Objetivos Específicos

1. Determinar la concentración mínima inhibitoria del aceite esencial de Oreganun

vulgare (Orégano) sobre cepas de Cándida Albicans
2. Evaluar el efecto antimicótico in vitro de aceite esencial de Oreganun vulgare
Orégano) a concentraciones del (50% y 70%) sobre cepas de Cándida Albicans.
 3. Comparar la eficacia antimicótica de la forma farmacéutica en crema de
Oreganun vulgare (Orégano) frente al ketoconazol sobre cepas de Cándida
Albicans.

Marco teórico

Las infecciones fúngicas, sobre todo las oportunistas originadas tanto por levaduras como por
hongos filamentosos, han visto incrementada su incidencia de forma significativa en los últimos
tiempos. El uso de antifúngicos ha experimentado un crecimiento en los últimos años y
consecuentemente, se ha producido un progresivo aumento de los niveles de resistencia a estos
fármacos. Los modernos antifúngicos presentan una mayor selectividad de actuación y existen
nuevas formulaciones galénicas que reducen los efectos secundarios de los utilizados
clásicamente. Las infecciones fúngicas pueden presentarse como superficiales, subcutáneas y
sistémicas, la mayoría están causadas por hongos filamentosos, hongos dermatofitos y
levaduras pertenecientes entre otros a los géneros Cándida, Cryptococcus y Malassezia.
Algunos de ellos pertenecen a la flora normal del organismo y en condiciones de inmunidad
competente del huésped no producen infección alguna. 4

La Candidiasis

Con respecto al marco teórico del estudio, Cándida albicans es un hongo que se presenta en dos
formas morfológicas o dos tipos distintos, esta depende de la temperatura del medio,
presentándose en la forma de levadura cuando se encuentra a una temperatura de 37°C en el
huésped y cuando se encuentra a 25°C aproximadamente el aspecto que presenta es el
filamentoso, por lo general en el medio ambiente. Pertenece al filo Ascomycota, reproduciéndose
por gemación de forma asexual.5

Los hongos como Candida albicans son un tipo de microorganismo patógeno que habita en los
humanos, se caracteriza por ser un hongo oportunista llegando a causar hasta infecciones
sistémicas que ponen en riesgo la vida de paciente con el sistema inmunológico comprometido.
Pueden vivir en presencia de oxígeno, su reproducción es asexual, presenta dimorfismo, se
convierte en levadura a hifa en el momento que invade un tejido y en condiciones normales se
comporta como comensal, pero por diversos factores se convierte en patógeno. 6
Las especies de Cándida se asocian a vulvovaginitis, sobre todo en ciertas etapas del ciclo
menstrual o cuando la paciente ha recibido dosis continuadas de antimicrobianos, presentándose
frecuentemente un flujo característico designado como de “leche cortada” acompañado de
intenso prurito, disuria y enrojecimiento de la mucosa vaginal y el epitelio vulvar. Se estima que
hasta un 75% de las mujeres sexualmente activas sufren candidiasis vaginal al menos una vez
en la vida y entre el 5 a 10% de ellas la padecen en forma recurrente (tres o más episodios en un
año).7

A nivel mundial la candidiasis se ha visto incrementada y debido a la resistencia que se ha

producido en las últimas décadas ha logrado elevar las cifras de mortalidad y elevar los costos
de tratamiento a nivel nosocomial. Según cifras publicadas en una revista europea se dice que 3
de cada 4 mujeres sufren de infecciones vaginales por lo menos 1 vez en el trascurso de su vida
y que la incidencia de padecerla al año entre 2 y 4 veces le corresponde a la mitad de estas. 8

El estudio revela que Candida albicans es sensible al carvacrol debido a que los diámetros de los
halos de inhibición son mayores a 8 mm según la escala de Duraffourd, tal como se observa en
la Tabla 1, que muestra diámetros de los halos de inhibición en ml del extracto de aceite de
orégano, carvacrol, sobre Candida albicans. Además, existe diferencia estadísticamente
significativa entre los diámetros de los halos de inhibición hallados de acuerdo a la concentración
del carvacrol (p< 0,05), es decir, el efecto es dosis dependiente; conforme aumenta la
concentración del carvacrol, aumenta el diámetro del halo de inhibición (Tabla 2). 9
Orégano
El Orégano es una especie nativa de la zona mediterránea. Existen más de dos docenas de
diferentes especies que contienen aceites esenciales y que le otorgan olor característico. Desde
tiempos inmemoriales se le reconoce por sus propiedades aromáticas. En la antigua Grecia se le
llamaba “Alegría de la Montaña” y se le consideraba como símbolo de alegría y felicidad. Los
antiguos egipcios consagraban la especie Origanum al Dios Osiris y lo tejían para fabricar
coronas o guirnaldas que Vestian durante sus rituales. 10,11.

Descripción botánica del orégano

El orégano es una especie herbácea, perenne, rizomatoso, con tallos erectos, ramificados y
vellosos. Alcanza una altura variable entre 0,30 y 0,70 m. Las hojas brotan de dos en dos en
cada nudo, son enteras, ovales, opuestas, verdes vellosas en su cara inferior y lisas en la
superior. Sus flores son pequeñas, dispuestas en espigas.

Los pétalos no sobrepasan los 2 a 3 milímetros de longitud, son de diferentes colores: blanco,
púrpura; dispuestas en inflorescencias terminales ramificadas; cáliz con cinco sépalos iguales,
brácteas lanceoladas u ovales, semillas pequeñas, ovales de color marrón.

Toda la planta posee pequeñas glándulas donde está contenida la esencia aromática. Los tallos
contienen sustancias tánicas. La parteútil de la planta son las hojas y sumidades floridas. 11,12.

Clasificación científica.

La clasificación Taxonómica del oregano. 11,13

 Reino: Plantae
 División: Magnoliophyta
 Clase: Magnoliopsida
 Sub clase: Asteridae
 Orden: Lamiales
 Familia: Lamiaceae
 Subfamilia: Nepetoideae
 Tribu: Mentheae
 Género: Origanum
 Especie: Origanum vulgare
 Nombre vulgar: Orégano

Aceite esencial
Los aceites esenciales son el producto final del metabolism secundario de las plantas
aromáticas. Son sustancias transparentes de color amarillo limón.

Estructura química de los aceites esenciales

Los aceites esenciales contienen principalmente terpenoides volátiles formados por unidades de
isopreno, unidas en estructuras de 10 carbonos (monoterpenoides) y 15 carbonos
(sesquiterpenoides). Los compuestos más frecuentes se derivan del ácido mevalónico. Cada
aceite integra por lo menos 100 compuestos químicos diferentes.

En un aceite esencial puede encontrarse hidrocarburos alicíclicos y aromáticos, así como sus
derivados oxigenados (fenoles, alcoholes, aldehídos, cetonas y ésteres), sustancias azufradas y
nitrogenadas; estos grupos funcionales son responsables del aroma que suelen poseer. 10

Composición química y características del aceite esencial

Los aceites esenciales están constituidos por terpenos con actividad y composición química que
varía de una especie a otra, debido a factores como quimiotipo y geotipo de la planta,
considerando que un metabolismo más activo puede asociarse con una mayor producción de
aceites, donde tiene papel importante la densidad de la planta sembrada, el corte y la estación
del año, el medio ambiente, la cantidad de agua usada en el riego e incluso la intensidad de luz
natural o artificial usada en el invernadero. 10,11

Los derivados fenólicos, carvacrol y timol, han sido encontrados en diversas hierbas y especias
incluyendo el orégano. Estas sustancias son monoterpenoides representativos de un pequeño
grupo de compuestos aromáticos volátiles con olor es intensamente pungentes, que son
responsables de las fragancias y sensaciones de olor y sabor de muchas plantas. Estructural y
biológicamente son muy diferentes y se clasifican hasta en 50 grupos. Los principals quimiotipos
de la especie Origanum vulgare son carvacrol y timol, cada uno con enzimas específicas que
dirigen su biosíntesis. Se ha observado que el incremento en porcentaje de timol provoca
disminución en el contenido de carvacrol; de igual manera, los hidrocarburos monoterpenoides:
p-cimeno, cis-β –Terpineol, ɣ- terpineno, α- pineno, limoneno y r-cimeno, entre otros; están
presentes de manera constante en los aceites esenciales, pero siempre en cantidades menores
al de los fenoles.11,13

Figura A. Estructura química de los principales componentes del oregano. 11,13

Usos del Orégano

 La Organización Mundial de la Salud estima que cerca de 80 % de la población en el

mundo, usa extractos vegetales o sus compuestos activos para cuidados primarios de la
salud. El orégano es una hierba aromática perenne, cuyas hojas, tallos y flores tienen
diferentes usos populares.

En el tratamiento de Infecciones micóticas y microbianas.

Trastornos gastrointestinales, respiratorios, irregularidades menstruales.

Aplicación tópica del aceite esencial para tratamiento de infecciones cutáneas.

En la industria, el orégano es usado como:

- Condimento, conservante y aromatizante de alimentos: carnes, embutidos, salsas,

ensaladas.
- Aroma en elaboración de licores.
- Fragancia en perfumería, jabonería y cosmética.
- Componente activo de pomadas contra dermatitis.
 - Fitofármacos para tratamiento de la Pediculosis, liniment antirreumático, desinfectante,
cicatrizante.

Propiedades de los aceites esenciales

Todos los aceites esenciales son antisépticos, cada uno tiene sus virtudes específicas y pueden
ser analgésicos, fungicidas, diuréticos o expectorantes. La reunión de componentes de cada
aceite actúa conjuntamente para darle una característica dominante, puede seraromático,
refrescante, estimulante o calmante.

El orégano como antimicrobiano y antifúngico, actúa contra microorganismos Gram positivos y

Gram negativos, aerobios y anaerobios: Salmonella typhimurium, Escherichia coli,
Staphylococcus aureros, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus mutans y Candida albicans
entre otros. Estas características también son importantes para la industria alimentaria ya que
favorecen la inocuidad y estabilidad de los alimentos. 10,11.

En el organismo puede actuar de modo farmacológico, fisiológico y psicológico. Habitualmente

produce efectos sobre diversos órganos o funciones de sistema, puede tener actividad
antifúngica, antibacteriana, antiparasitaria, antiséptica, antimutagénico, anticarcinogénico y
antiviral. Se puede considerar como una alternativa potencial para el tratamiento o prevención de
trastornos crónicos como el cáncer. El orégano también es una fuente potencial de vitamina C,
compuestos antioxidantes como los carotenoides y también actúan como repelente e insecticida.
Existe evidencia científica limitada que confirma cualquiera de estos usos. 14

La Actividad Antimicótica De Los Aceites : esencial del orégano sobre Cándida albicans ATCC,
se determinó en función al diámetro de halo de inhibición y los criterios del método de
arotmatorgrama de Duraffoourd así como de la concentración mínima inhibitoria (HCMI).13 Tabla
2, 3 y 4. A la concentración de 12,5 %, Origanum x majoricum (Arequipa), presenta mayor
actividad antimicótica sobre Candida albicans ATCC.15

El orégano (Origanum vulgare L) es portador de sustancias como carvacrol y timol, entre otros
principios, que pueden disminuir la viscosidad de la digesta mejorando la digestión El uso de los
aceites esenciales extraídos del orégano es relevante si tiene en cuenta sus cantidades de timol,
flavonoides, taninos, triterpenos y carvacrol contenido, las cuales le dan su capacidad
antioxidante, para disminuir la formación de radicales libres. Además, tiene propiedades
antibacteriales, antifúngicas, antiparasitarias, antimicrobianas, antivirales, antialérgicas,
vasodilatadoras, estrogénicas, antiinflamatorias, espasmolíticas, antitumorales, entre otras

El uso de aceite esencial de orégano es una alternativa viable en las dietas de aves, debido que
la ingesta de alimento, ganancia de peso, índice de conversión alimenticia y mortalidad no se
ven afectadas cuando se hace uso de dicho aceite esencial También ha sido utilizado como
aditivo en las dietas de aves destinadas a la producción de carne, esto es debido a que tiene
efectos benéficos en la actividad antibacteriana del tracto intestinal de pollos de engorda, lo que
ha beneficiado a la producción de las explotaciones avícolas. Sin embargo, es importante
profundizar las investigaciones con relación a la dosis de inclusión de orégano en las dietas
alimenticias, principalmente en el Ecuador por lo incipiente de la información .16

Aceites esenciales del orégano: Los aceites esenciales son una mezcla compleja de diferentes
compuestos volátiles presentes en las plantas aromáticas de manera natural que, debido a sus
propiedades y su fragancia, son ampliamente utilizados en cosméticos, en la industria
alimentaria para mejorar el sabor y las propiedades organolépticas y en una variedad de
productos del hogar. Además de su sabor y fragancia, muchos aceites esenciales y sus
componentes aislados exhiben actividades antimicóticas, antibacterianas y relajantes para los
músculos:17

La composición química que presenta el aceite esencial de orégano cultivado en Coloso Sucre
pertenece al quimiotipo Timol. Este compuesto permite dar gran valor agregado a esta planta,
por su alto porcentaje en masa, que se convierte en posible fuente natural de este terpeno, y que
le otorga múltiples propiedades antioxidantes, microbiológicas y conservantes de alimentos, así
también como su uso en perfumería y cosmética dados las muchas aplicaciones como
alternativas que se requieren en la industria.

Sobre la composición química del orégano, y sus aceites esenciales se han identificado
flavonoides como la apigenina y la luteolina, agliconas, alcoholes alifáticos, compuestos
terpénicos y derivadosdel fenilpropano, también se han encontrado ácidos coumérico, ferúlico,
caféico, r-hidroxibenzóicoy vainillínico. La subespecie Oreganum vulgare ssp. Hirtum es la
másestudiada, especialmente en relación a la composición y calidad de su aceite esencial, ya
que este último tiene un importante valor comercial. 18
Timol: es uno de los principios activo del orégano La determinación de timol y carvacrol en
muestras de orégano y otras plantas, ha sido realizado por muchos autores utilizando métodos
por HPLC y cromatografía de gases con detector FID o de masas. La cromatografía de gases es
muy útil para realizar el análisis cualitativo y cuantitativo de todos los componentes no volátiles
del aceite esencial; pero no puede ser utilizado para dosis grandes. El método por HPLC es una
técnica muy precisa para cuantificar los componentes volátiles y no volátiles de una planta,
logrando una buena separación y una rápida determinación del contenido de timol y carvacrol en
el aceite esencial de orégano. La diferencia principal entre los diferentes métodos de
determinación por HPLC radica en el tipo de detector a utilizar; éstos pueden ser: Detector por
arreglo de diodos en el rango UV o de fluorescencia. Los detectores de fluorescencia tienen la
capacidad de medir señales de luz muy débiles comparados con los detectores de absorción UV
tal como el DAD. Los diferentes métodos de determinación hacen uso de diferentes tipos de
columnas de marcas registradas y diversas longitudes, pero todas tienen en común el uso de
una columna de fase reversa.19

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

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