GUÍA DE EXAMEN PARCIAL 1

Materia: Cultivo y Biorreactor

Docente: Domínguez Martinez Blanca Marisol

Alumno: Lenin Anibal Udabe Borunda
Ing. Biomédica
 1. ¿Qué es una célula?
Unidad anatómica fundamental de todos los organismos vivos, generalmente microscópica, formada
por citoplasma, uno o más núcleos y una membrana que la rodea.

2. Definición de cultivo celular

Se define como el conjunto de técnicas de aislamiento de células y obtención de poblaciones
celulares in vitro, manteniendo al máximo sus propiedades fisiológicas, bioquímicas y genéticas.

3. ¿Para qué cultivar células in vitro?

 Estudios de investigación: comprender la fisiología celular, toxicología, y virología.
 Ingeniería de tejidos: trasplantes, injertos (piel, hígado, hueso, cartílago).
 Producción de biológicos: anticuerpos monoclonales, hormonas, enzimas, vacunas virales
(polio, aftosa, moquillo etc.)
 Citogenética: estudios cromosómicos.
 Transgénicos: organismos genéticamente modificados.

4. Diferentes tipos de cultivos de tejidos

o Cultivo de órganos: mantenimiento de órganos o parte de órganos in vitro (por ejemplo,
corazón).
o Cultivo de tejidos y explantes: mantenimiento de tejidos in vitro.
o Cultivo de células.

5. Menciona las 3 formas principales de iniciar un cultivo celular

 Cultivo de órganos.
 Explantes primarios
 Células disgregadas.

6. Definición de cultivo de tejidos vegetales

Conjunto de técnicas que permiten el cultivo en condiciones asépticas de órganos, tejidos, células y
protoplastos.

7. ¿Qué es totipotencialidad celular?

Capacidad de una célula vegetal de formar una planta completa bajo ciertas condiciones químicas y
físicas, dadas en el cultivo in vitro.

8. Ventajas de los cultivos celulares

 9. Cultivo celular primario
Iniciado a partir de células, tejidos u órganos tomados directamente de un organismo.

10. Cultivo celular de líneas celulares

Se origina del cultivo primario, a partir del primer subcultivo exitoso.

11. Cultivo celular de línea celular continua

Células que han logrado sobrevivir a muchos subcultivos. Expectativa de vida “infinita”.

12. ¿Qué es un subcultivo?

Una vez que el cultivo alcanza la confluencia (máxima proliferación posible en el soporte en que se
encuentra), es necesario tomar una porción células y transferirlas a un nuevo soporte (repique o
pasaje).

13. ¿Cómo es el crecimiento celular en monocapa?

Los cultivos cuyas células son dependientes de anclaje crecen formando monocapas de células
adheridas al plástico o vidrio.

14. ¿Cómo es el crecimiento celular en suspensión?

Las células que proliferan sin necesidad de adherirse al sustrato, independientes de anclaje
(característico de células hematopoyéticas) crecen en suspendidas en el medio de cultivo
correspondiente.

15. Mantenimiento de líneas celulares

 Repique o pasaje: para mantener las células en cultivo.
 Congelación (criopreservación): para preservar las células a lo largo del tiempo (años) y
mantener un stock para los próximos usos.

16. Componentes del medioambiente del cultivo

o Medio de cultivo: (aporta nutrientes, vitaminas etc.).
o Suplementos: (ej suero que aporta factores de crecimiento).
o pH: (ej: 7,4).
o Temperatura: (ej. 37° C).
o Gas: Dióxido de carbono (ej. 5-7%).
o Soportes: materiales adecuados para el crecimiento (ej vidrio, plástico, biológicos etc.).

17. Componentes y cualidades de un medio de cultivo

 18. ¿Por qué evitar contaminaciones biológicas?
 Efectos adversos sobre el metabolismo celular.
 Pobre calidad de resultados experimentales.
 Pérdida de células valiosas.
 Pérdida de productos celulares (por ejemplo, producción de antígenos para vacunas, etc.).
 Pérdida de tiempo, dinero y esfuerzo.

19. ¿Qué son los microorganismos industriales?

Son especialistas metabólicos capaces de producir específicamente y con un alto rendimiento,
metabolitos particulares.

20. Requisitos de un microorganismo industrial

 Producir la sustancia de interés.
 Crecer rápidamente en un medio de cultivo barato.
 Fabricar el producto en un período corto.
 Desarrollarse en cultivo puro y en gran escala.
 Ser estable genéticamente pero susceptible de manipulación genética.
 Cultivos que se mantengan durante períodos largos en laboratorio y en planta industrial.
 Facilidad para inocular en grandes fermentadores.
 No debe ser peligroso para el hombre o las plantas y animales de interés económico.
 Posibilidad de retirar fácilmente las células del cultivo

21. Clases de productos industriales

Metabolitos microbianos: Enzimas:

 Alcohol o Digestión de Células microbianas:

 Ácido acético almidones, lípidos y
 Proteína unicelular:
 Ácido láctico proteínas.
levaduras, algas,
 Aminoácidos o Síntesis de antibióticos
bacterias y hongos.
 Vitaminas semisintéticos.
 Células para la
 Antibióticos inoculación: bacterias
 Esteroides fijadoras de nitrógeno,
 Alcaloides micorrizas, inóculos
para la fermentación de
lácteos y embutidos.

22. Clasificación de los productos industriales según su uso

o Productos farmacéuticos de origen microbiano: Antibióticos, hormonas esteroides, insulina,
linfocinas, péptidos neuroactivos, vacunas, entre otros.
o Biotecnología microbiana en agricultura: Productos farmacéuticos veterinarios de origen
microbiano e Ingeniería genética de plantas mediada por microorganismos como portadores
genéticos.
o Sustancias químicas y aditivos alimentarios: Aminoácidos (Glutamato, Aspartato+alanina,
glicina, Aspartame) y Vitaminas (rivoflavina, vitamina B12, vitamina C).
o Productos químicos comerciales y producción de energía: Etanol (combustible para motores),
Ácido acético, Ácido láctico y Glicerol.
o Biorremediación.

23. En condiciones ideales ¿cómo se multiplican las bacterias?

Se multiplican en forma logarítmica solo durante 3 a 5 h., agotan sus nutrientes esenciales y
acumulan productos tóxicos producto del metabolismo (curva de crecimiento).

24. Curva normal de crecimiento bacteriano

Hay cuatro fases en la curva normal de crecimiento: 1) fase de retraso, 2) fase logarítmica
(exponencial). 3) fase estacionaria y 4) fase de muerte.

25. Fase de latencia

Adaptación al medio, organismos metabólicamente activos, depende de edad del inóculo y
diferencia entre el medio de cultivo de procedencia y el nuevo.

26. Fase estacionaria

Crecimiento equilibrado a velocidad constante depende de condiciones ambientales y características
intrínsecas.

27. Fase de muerte

 Falta de energía para mantenimiento celular.
 Disminución del número de células del cultivo.
 Velocidad exponencial.
 Generalmente lisis celular.

28. ¿Qué es bacteriostático?

Todas las células son viables y no hay células muertas. No hay factores interviniendo en el proceso.
Se produce la inhibición del crecimiento de estos microorganismos.
 29. ¿Qué es Bactericida
Hay un factor que produce la muerte de las bacterias. Hay bacterias muertas y algunas son viables.
El recuento bacteriano viable disminuye en comparación con el recuento bacteriano total.

30. ¿Qué es Bacteriolítico?

Sustancias que mata a las bacterias e impide su proliferación y crecimiento, destruyen su pared
celular provocando la pérdida de material interno.

31. Requerimiento para el crecimiento bacteriano: temperatura, oxígeno y

nutrientes.
TEMPERATURA:

 Psicrófilas: crecimiento inferior a 20° C.

 Mesófilas: crecen entre 20 a 45° C.
 Termófilas: temperatura óptima: 45 a 60° C.
 Estenotermófilas: por encima de 60° C.

OXIGENO:
o Aeróbicas: desarrollan en presencia de oxígeno atmosférico.
o Anaerobias: no emplean oxígeno; anaerobias estrictas, atmósfera de oxígeno causan su muerte
(hay anaerobios en la boca).
o Anaerobios facultativos: como E. coli, crecen en condiciones aeróbicas o anaeróbicas.
o Microaerofílos: requieren reducción presión Oxigeno.
NUTRIENTES

 Algunas bacterias desarrollan en medios sencillos formados por: sales, cloruro de amonio y
glicerina.
 Otras son exigentes: tienen requerimientos complicados para su desarrollo.
 Muchos no desarrollan en un medio definido: que contengan sangre, suero, extracto de
levadura, peptona.
 Las rickettsias y las clamidias intracelulares obligadas no desarrollan en m. artificiales.

32. ¿Qué es la respiración aeróbica?

Desarrollan en presencia de oxígeno atmosférico. Deben contar con los ciclos metabólicos para
transformar las sustancias en productos que puedan metabolizarse aún más mediante vías
metabólicas centrales, como la glucólisis o el ciclo de Krebs.

33. ¿Qué es la respiración anaeróbica?

No emplean oxígeno; anaerobias estrictas, atmósfera de oxígeno causan su muerte (hay anaerobios
en la boca).

34. ¿Qué es la fermentación?

Algunos anaeróbicos que crecen en ausencia de oxígeno atmosférico. Su característica es que en
ácido orgánico actúa como aceptor terminal de electrones.
 35. Medición del crecimiento bacteriano
 Recuento de células totales: cámaras de recuento, recuento electrónico.
 Recuento de células viables: en medio sólido (profundidad o superficie).

36. ¿Qué es crecimiento celular cinético?

Velocidad en la que se desarrolla el proceso.

37. ¿Qué es crecimiento celular estequimetrico?

Balance de materia y energía de los procesos de crecimiento celular.

38. Modelos de crecimiento celular

Segregados, no segregados, estructurados y no estructurados.

39. Modelos segregados

Si se considera la heterogeneidad de la población celular. Son complejos ya que a las células se las
reconoce como discretas. Estos modelos pueden reconocer las diferencias existentes entre una
célula y otra.

40. Modelos no segregados

No se considera la heterogeneidad de la población celular. Se considera que una "célula promedio"
puede representar toda la población.

41. Modelos estructurados

Se describen las características internas de la célula o sus partes (reacciones metabólicas, procesos
celulares, etc.). Modelan a la biomasa como un sistema de componentes múltiples (ribosomas,
enzimas, membranas, etc.).

42. Modelos no estructurados

Se considera la célula como una entidad sin estructura interna. Todos los componentes celulares se
representan por una única concentración, la de la biomasa.