Diferentes técnicas derivadas que se utilizan en Análisis instrumental Cromatología gaseosa-espectrometría de masa GC-MS es una técnica híbrida que combina dos técnicas analíticas para formar un método robusto para analizar mezclas químicas. Mientras que la CROMATOGRAFÍA GASEOSA separa los componentes individuales en una mezcla, el ms caracteriza los componentes separados para permitir análisis cualitativo y cuantitativo de una mezcla. En CROMATOGRAFÍA GASEOSA, la muestra se inyecta en una fase movible, que es generalmente un gas inerte tal como helio. Los componentes individuales de la muestra reaccionan con la fase estacionaria a diversos regímenes y por lo tanto se enjuagan en diversas horas. Aumentando la temperatura del sistema, las composiciones se pueden separar en base de sus puntos de ebullición. Espectrometría líquida de la Cromatografía-Masa LC-MS combina la separación de moléculas por el LC o la CLAR con análisis en masa usando ms. Es una técnica altamente útil que es muy sensible y trabaja según los principios similares al de GC-MS. Se utiliza en la separación, la detección, y la identificación de substancias químicas en mezclas complejas tales como extractos del producto natural. Los sistemas de LC-MS se pueden también utilizar para las aplicaciones preparatorias tales como purificación basada en la masa de las substancias para el uso en las industrias de la investigación, agroquímicas, farmacéuticas, y alimentarias. Espectroscopia Cromatografía-Infrarroja del gas GC-IR es una técnica de separación similar a GC-MS - la única diferencia es que la identificación está realizada usando la espectroscopia del IR aquí. La espectroscopia del IR se ocupa del análisis de acciones recíprocas moleculares con la luz del IR del espectro electromagnético. Mide la longitud de onda y la intensidad en las cuales una muestra absorbe la luz del IR. GC-IR fue realizado inicialmente pasando las moléculas enjuagadas de la columna cargada a través del instrumento del IR. Con el revelado de FT-IR, el análisis del efluente de la CROMATOGRAFÍA GASEOSA en tiempo real llegó a ser posible. Espectroscopia de resonancia magnética Cromatografía-Nuclear líquida En LC-NMR, el LC y el RMN se combinan para las aplicaciones analíticas. La espectroscopia del RMN es una técnica potente que explota las propiedades magnéticas de diversas moléculas. La frecuencia de la resonancia de una molécula varía con el campo magnético intramolecular presente alrededor de un átomo. Esta variación puede ayudar en el estudio de la estructura electrónica de la molécula. En LC-NMR, los rizos muestra-que contienen se transfieren al espectrómetro del RMN después de la separación cromatográfica. Ionización por electrospray La ionización por electroespray (en inglés, Electrospray ionization o ESI) es una técnica utilizada en espectrometría de masas para producir iones (ESI-MS). Es especialmente útil en la producción de iones a partir de macromoléculas, pues supera la propensión de estas a fragmentarse cuando se ionizan. El uso de la fuente de ionización por electrospray como un medio de establecer una interfaz entre un cromatógrafo de líquidos y un espectrómetro de masas. Funcionamiento Se introduce el analito (que será ionizado) disuelto en un solvente más volátil por un capilar de metal muy pequeño y cargado. Debido a la repulsión de las cargas eléctricas, el líquido se sale del capilar y forma un aerosol, una nube de pequeñas gotas (10 μm) altamente cargadas. Conforme el solvente se evapora, las moléculas de analito se aproximan, se repelen y finalmente, cuando la repulsión de las cargas positivas vence la tensión superficial, estallan las gotas (Explosión de Coulomb). El proceso se repite hasta que el analito está libre de solvente, de modo que no quedan más que iones. Los iones se mueven hacia el analizador de masa. Espectrómetro de masas La espectrometría de masas es una técnica de análisis que permite determinar la distribución de las moléculas de una sustancia en función de su masa. El espectrómetro de masas es un dispositivo que permite analizar con gran precisión la composición de diferentes elementos químicos e isótopos atómicos, separando los núcleos atómicos en función de su relación entre masa y carga (m/q). Puede utilizarse para identificar los diferentes elementos químicos que forman un compuesto, o para determinar el contenido isotópico de diferentes elementos en un mismo compuesto. Electroforesis capilar La electroforesis capilar (EC) es una técnica de separación utilizada en distintas áreas (química, bioquímica, etc.) para separar las diferentes moléculas presentes en una disolución de acuerdo con la relación masa/carga de las mismas. La separación se lleva a cabo en un tubo hueco de diámetro muy pequeño (menos de 50 µm de diámetro), de ahí que reciba el nombre de capilar. Técnica Dentro del capilar de separación se encuentra la disolución que contiene los analitos o las moléculas a separar y el tampón o medio electrolítico que es el encargado de conducir la corriente. El interior se encuentra formado por grupos silanol (Si-OH), los cuales al ser desprotonados (Si-O), elevan considerablemente pH y favorecen la presencia de analitos específicos. Como se ha dicho, la separación se lleva a cabo según la relación masa/carga de las distintas moléculas. Espectroscopia ultravioleta-visible La espectroscopia ultravioleta-visible o espectrofotometría ultravioleta- visible (UV/VIS) es una espectroscopia de emisión de fotones y una espectrofotometría. Utiliza radiación electromagnética (luz) de las regiones visible, ultravioleta cercana (UV) e infrarroja cercana (NIR) del espectro electromagnético, es decir, una longitud de onda entre 380nm y 780nm. La radiación absorbida por las moléculas desde esta región del espectro provoca transiciones electrónicas que pueden ser cuantificadas. La espectroscopia UV-visible se utiliza para identificar algunos grupos funcionales de moléculas, y además, para determinar el contenido y fuerza de una sustancia. Se utiliza de manera general en la determinación cuantitativa de los componentes de soluciones de iones de metales de transición y compuestos orgánicos altamente conjugados. Espectrometría de movilidad de iones - espectrometría de masas La espectrometría de movilidad de iones-espectrometría de masas ( IMS-MS ), también conocida como separación de movilidad de iones-espectrometría de masas , es un método de química analítica que separa los iones en fase gaseosa en función de su interacción con un gas de colisión y sus masas. En el primer paso, los iones se separan según su movilidad a través de un gas tampón en una escala de tiempo de milisegundos utilizando un espectrómetro de movilidad iónica . Los iones separados se introducen luego en un analizador de masas en un segundo paso donde se pueden determinar sus relaciones de masa a carga en una escala de tiempo de microsegundos. La separación efectiva de analitos lograda con este método lo hace ampliamente aplicable en el análisis de muestras complejas como en proteómica y metabolómica.