Universidad de Carabobo

Facultad Experimental de
Ciencias y Tecnología
Departamento de Química
Análisis Instrumental

P T I C O S
D O S Ó
MÉTO P I CO S
T R OS C Ó
S P EC
NO E

Carol Montaño
Maideley Santeliz
 
 MÉTODOS ÓPTICOS

Se definen como métodos ópticos de análisis aquellos que

miden la radiación electromagnética que emana de la
materia o que interacciona con ella.

MÉTODOS ESPECTROSCÓPICOS

Se basan en la medida de la intensidad y la longitud de

onda de la energía radiante.

MÉTODOS
NO ESPECTROSCÓPICOS

No miden espectros ni están relacionados con las

transiciones entre estados de energía característicos sino
que se basan en una interacción entre la radiación
electromagnética y la materia.
 TURBIDIMETRÍA

Mide la disminución de la potencia de la radiación transmitida

a través de una suspensión de partículas utilizando para ello un
espectrofotómetro.

Se suele utilizar para soluciones concentradas (para que haya

una buena disminución de la luz transmitida). La radiación
transmitida se mide en la dirección del haz incidente.

Figura 1: Situación del detector respecto a la dirección del

haz incidente.
 TURBIDIMETRÍA

Los cálculos utilizados para conocer la potencia radiante de la radiación

son:
Pt = P0 * ℮-k * l * ρ
Donde:
Pt = potencia radiante de la radiación transmitida;
P0 = potencia radiante de la radiación incidente;
℮ = base de los logaritmos neperianos;
k = constante que depende del tamaño de la partícula y de la longitud
de onda;
l = longitud de la cubeta de reacción;
ρ = concentración de masa de las partículas de la solución o suspensión.

Al aplicar el logaritmo, se tiene:

2,303 log (Pt /P0) =-k *l *ρ
 TURBIDIMETRÍA

Reorganizando la ecuación, se tiene que:

-log (Pt /P0) = (k/2,303)*l*ρ

El coeficiente (k/2,303) se denomina coeficiente de

turbidez y se representa por la letra T.

Al sustituir T en la ecuación anterior se obtiene:

-log (Pt /P0) = T*l*ρ
 TURBIDIMETRÍA

Origen de las señales

Cuando un haz de luz monocromática, de longitud de onda
no absorbible choca contra las partículas de una sustancia que
está en suspensión, cambia la dirección de propagación del
haz de luz (en realidad sólo cambian de dirección algunos
fotones del haz).

Figura 2: Haz incidente sobre la muestra.

 TURBIDIMETRÍA

Instrumentación

La medida de la concentración de partículas en

suspensión por métodos turbidimétricos se realiza en
espectrómetros de absorción molecular.

Para una mejor sensibilidad se requieren las siguientes

características:

-El haz de la radiación ha de ser colimado,

-Con el objeto de eliminar la luz difusa, debe haber una
gran distancia entre la cubeta de lectura y el detector.
 TURBIDIMETRÍA

Tratamiento de muestras
La turbidimetría puede realizarse en espectrofotómetros
de visible o violeta. Cuando la concentración de partículas
en suspensión se mide por turbidimetría, la suspensión se
pone en una cubeta similar a un tubo de ensayo, que
permite realizar las medidas de las energía incidentes y
transmitidas.

Figura 3: Esquema de un espectrofotómetro.

 TURBIDIMETRÍA

Turbidímetros

Figura 4: Diagrama esquemático de un turbidímetro

Du Pont Modelo 430.
 TURBIDIMETRÍA

Ejemplo

Tienen un interés especial las valoraciones

turbidimétricas, en las que se mide la turbidez de la
solución problema después de añadir incrementos
sucesivos de reactivos.
En el punto de equivalencia de la valoración, la turbidez
llega a su valor máximo, se afirma que este método de
detección del punto final permite alcanzar una exactitud de
2%.
El procedimiento tiene varias ventajas, entre ellas, la de
permitir el análisis de bajas concentraciones y la de
resolver la dificultad de hallar un indicador adecuado para
las valoraciones de precipitación.
 TURBIDIMETRÍA

Aplicaciones
La determinación de la turbiedad es de gran
importancia en aguas para consumo humano y en una
gran cantidad de industrias procesadoras de alimentos
y bebidas.

Los valores de turbiedad sirven para determinar el

grado de tratamiento requerido por una fuente de agua
cruda, su filtrabilidad, la efectividad de los procesos
de coagulación, sedimentación y filtración, así como para
determinar la potabilidad del agua.
 NEFELOMETRÍA

Mide la luz dispersada en dirección distinta a la

luz emitida (generalmente con ángulos que oscilan entre
15 y 90º). Utiliza como instrumento el nefelómetro.
Se suele utilizar para concentraciones más
diluidas. Permite mayor sensibilidad con concentraciones
menores de partículas suspendidas. Constituye un método
más exacto para la medida de la opacidad.

Figura 5: Situación del detector en un ángulo de 90º

respecto a la dirección del haz incidente.
 NEFELOMETRÍA

Origen de las señales

La nefelometría se basa en la dispersión de la radiación
que atraviesan las partículas de materia. Cuando la luz
atraviesa un medio transparente en el que existe una
suspensión de partículas sólidas, se dispersa en todas
direcciones y como consecuencia se observa turbia.

Figura 6: Haz incidente sobre la muestra.

 NEFELOMETRÍA

Instrumentación

Figura 7 : Esquema de un nefelómetro.

La turbiedad es la resultante de la luz captada por la

fotocélula de situada a 90º, debido a la luz dispersa
producida por los sólidos en suspensión.
 NEFELOMETRÍA

Nefelómetro
Es un instrumento para medir partículas suspendidas en
un líquido. Esto lo hace empleando una fotocelda colocada
en un ángulo de 90° con respecto a una fuente luminosa.
La densidad de partículas es entonces una función de la
luz reflejada por las partículas a la fotocelda.

Figura 8 : Nefelómetros.
 NEFELOMETRÍA

Aplicaciones
Se suele utilizar para medir concentraciones
específicas de colonias de bacterias en algún medio de
cultivo, o de muchas proteínas utilizando el principio de
dispersión luminosa molecular.

Se utiliza en el análisis de la calidad química del

agua para determinar la claridad y para el control de los
procesos de tratamiento.
 TURBIDIMETRÍA VS NEFELOMETRÍA

Tamaño de las partículas dispersante

Para nefelometría, la intensidad de la radicación

dispersada a 90° será mayor cuanto menos sea el tamaño
de las partículas. Para partículas mayores, la intensidad de
la dispersión a 90°disminuye.
Para turbidimetría, fenómeno menos dependiente de la
λ, en cambio el tamaño de las partículas es menos
importante; en este caso la señal es la disminución
relativa de la radiación trasmitida.

Selección de la longitud de onda

Con esta selección se minimiza las posibles
interferencias
 TURBIDIMETRÍA VS NEFELOMETRÍA

Factores para la elección entre turbidimetría y

nefelometría

 Intensidad de la radiación
 Tamaño de las partículas dispersante.

¿Cómo diferenciar la turbidimetría y la

nefelometría?

En la turbidimetría se compara la intensidad del rayo de

luz que emerge con la del que llega a la disolución. En
cambio, en la nefelometría la medida de la intensidad de
luz se hace con un ángulo de 90º con respecto a la
radiación incidente.
 POLARIMETRÍA

Es una técnica de análisis que consiste en medir la

actividad óptica de compuestos tanto orgánicos como
inorgánicos. Un compuesto es considerado ópticamente
activo si la luz linealmente polarizada sufre una rotación
cuando pasa a través de una muestra de dicho compuesto.

La Polarización
Es un fenómeno que puede producirse en las ondas
electromagnéticas, por el cual el campo eléctrico oscila
solo en un plano determinado, denominado plano de
polarización.

Figura 9: Polarización
de la luz.
 POLARIMETRÍA

Rotación óptica o actividad óptica

Es la rotación de la polarización lineal de la luz cuando
viaja a través de ciertos materiales. Suele ser un
fenómeno que ocurre en soluciones que presentan
moléculas quirales tales como la sacarosa (azúcar).

Quilaridad
Es la propiedad que tienen ciertas moléculas de poder
existir bajo dos formas que son imágenes especulares la
una de la otra, es decir, una es la imagen reflejada en un
espejo de la otra.

Figura 10: Quilaridad.

 POLARIMETRÍA

Rotación específica
La rotación específica de una sustancia química es
simplemente una rotación angular obtenida en condiciones
de medición estándar: concentración, longitud del tubo,
temperatura y longitud de onda. La mayoría de las
rotaciones específicas tiene como referencia la longitud de
onda del sodio, de 589 nm.
Cada sustancia ópticamente activa tiene su propia
rotación específica, determinada por la siguiente
ecuación de Biots:
 POLARIMETRÍA

Instrumentación

Figura 11: Partes de un polarímetro.

 POLARIMETRÍA

Instrumentación

Partes de un polarímetro
 POLARIMETRÍA

Origen de las señales

La luz polarizada es aquella que ha pasado a través de un
“polarizador”, que fuerza ondas electromagnéticas aleatorizadas
hacia un plano. Cuando esta luz polarizada en un plano pasa a
través de una sustancia ópticamente activa, el PLANO de
polarización se gira en una cantidad que es característica de la
sustancia examinada.

Figura 11 : Polarímetro.
 POLARIMETRÍA

Información Cualitativa y Cuantitativa

La polarimetría es una técnica de alto rendimiento para

el análisis de líquidos ópticamente activos, como, por
ejemplo, las soluciones azucaradas, el ácido láctico o el
ácido tartárico. La medición del ángulo de giro de la luz
con polarización lineal al atravesar una sustancia
ópticamente activa pertenece al repertorio estándar de las
prácticas de laboratorio químicas, bioquímicas y
farmacéuticas. Estas ofrecen información valiosa acerca de
la estructura química, la quilaridad y la concentración de
una prueba.
 POLARIMETRÍA

Fuentes de error

El ángulo de rotación de una sustancia ópticamente

activa puede ser afectada por:

Concentración de la muestra
Longitud de onda de la luz que pasa a través de la
muestra
Temperatura de la muestra
Longitud de la celda de muestra
Polarímetros más modernos tienen métodos para
compensar o controlar estos errores
 POLARIMETRÍA

Ejemplo
 Determinación de la cantidad de sacarosa contenida
en una muestra.
Se preparan varias soluciones patrón de sacarosa en agua en
cantidades suficientes para poder llenar el tubo del polarímetro.
Es aconsejable preparar primero la disolución mas concentrada
y obtener a partir de ella, por dilución, las restantes.
Se llena con cada una de ellas el tubo del polarímetro y se
mide el correspondiente ángulo de la luz polarizada. Las
lecturas deberán hacerse con el tubo completamente lleno de
disolución.
En un gráfico, se representará la variación lineal del ángulo
de giro (en ordenadas) con la concentración en las abscisas.
Una vez obtenido este grafico, se efectúa la medida del
correspondiente ángulo de giro de la luz polarizada que
ocasiona la muestra problema.
 POLARIMETRÍA

Aplicaciones
La polarimetría puede ser usada para identificar
sustancias cualitativamente, así como caracterizar y
distinguir enantiómeros, medir la pureza o para llevar el
control de calidad en las industrias químicas y
farmacéuticas.
El polarímetro es usado en la industria química,
farmacéutica, hospitales, institutos, universidades y
laboratorios de investigación ya que, midiendo la
rotación óptica de las sustancias orgánicas con la ayuda
del polarímetro, podemos conocer el grado de pureza,
concentración y contenido de cientos de materiales
activos ópticamente, como soluciones de azúcar,
trementina, aceites industriales, alcanfor, etc.
 REFRACTOMETRÍA

Es una técnica analítica que consiste en la medida del índice

de refracción de un líquido con objeto de investigar su
composición si se trata de una disolución o de su pureza si es un
compuesto único.

¿Que es la refracción?
Cuando se pone un lápiz en el agua, la punta del lápiz
aparece inclinada. Luego, si se hace lo mismo pero colocando el
lápiz en una solución de agua azucarada, la punta del mismo
aparecerá más inclinada. Este es el fenómeno de la refracción de
la luz.
 REFRACTOMETRÍA

Origen de las señales

Un rayo de luz que pasa oblicuamente desde un medio hacia
otro de diferente densidad, cambia su dirección cuando traspasa
la superficie. Este cambio en la dirección se denomina refracción.
Cuando el segundo medio es más denso que el primero, el rayo
se aproxima a la perpendicular trazada sobre la superficie
divisoria en el punto de incidencia. La causa fundamental de este
cambio en la dirección se debe al cambio en la velocidad de la
luz que se hace más lenta cuanto más denso sea el medio por el
que pasa el haz.
 REFRACTOMETRÍA

Información Cuantitativa y Cualitativa

Los sólidos solubles
La concentración de sólidos solubles define el efecto de
la temperatura, la medición de estos representa uno de
los principales análisis a realizar durante la refractometría.
Este proceso constituye la piedra angular de diversos
procesos industriales como la elaboración de jugos.
Grados Brix
Los grados Brix (símbolo °Bx) miden el cociente total
de sacarosa disuelta en un líquido. Por ejemplo, una
solución de 25 °Bx tiene 25 g de sacarosa por 100 g de
líquido.
Grados Baumé
Un grado Baumé equivale a 17 gramos por litro de
azúcar o peso potencial de la muestra.
 REFRACTOMETRÍA

Instrumentación
Refractómetros
Los refractómetros son instrumentos de medición, en
los que éste fenómeno de la refracción de la luz se pone
en práctica. Ellos se basan en el principio por el cual,
cuando aumenta la densidad de una sustancia, el índice
de refracción aumenta proporcionalmente con la
concentración de la sustancia.

Figura 12:
Partes de un
refractómetro
 REFRACTOMETRÍA
Calibración del Refractómetro

Antes de calibrar el instrumento, se debe asegurar de que en

el refractómetro, el agua y la muestra del fluido estén a
temperatura ambiente, ya que una calibración adecuada depende
de la temperatura. El procedimiento es el siguiente:
Colocar una gota de agua entre la cubierta de plástico (6) y el
prisma (7). Mantener el refractómetro horizontalmente y apuntar
a una fuente de luz. Observar en el ocular (1) y ajustar la perilla
de calibración de la escala (4) hasta que la línea límite, que
separa las áreas claras y oscuras de la escala, se encuentre
colocado en el cero sobre la escala.
 REFRACTOMETRÍA

Refractómetros
Los aparatos más importantes se basan en dos
principios: refractómetros de ángulo límite o crítico y los
refractómetros de desplazamiento de imagen.

Refractómetros de ángulo límite

En estos aparatos se observa el campo del ocular
dividido en una zona obscura y otra clara. La separación
entre ambas corresponde al rayo límite.

Figura 13:
Esquema de un
refractómetro de ángulo limite.
 REFRACTOMETRÍA

Refractómetros Abbe
Los refractómetros Abbe se caracterizan por su sencillo
manejo y por unas cantidades de muestra reducidas. La
medición de las muestras sólidas o pastosas es igualmente
sencilla que la de las muestras líquidas.

Figura 14: Refractómetro Abbe.

Refractómetros de
desplazamiento de
imagen
En estos aparatos se
mide el desplazamiento
del rayo refractado en
relación al rayo incidente,
en vez de medir el
desplazamiento de la línea
de separación entre la
zona clara y oscura debido
al ángulo límite.
 REFRACTOMETRÍA

Ejemplo

Determinación de la concentración de acetona.

Se miden en el refractómetro los índices n1 y n2 de
refracción de la acetona y del tetracloruro de carbono.
A continuación se preparan cinco disoluciones patrón.
Se miden los índices de refracción n de cada una de las
disoluciones y se representan en un diagrama cartesiano
en función de las concentraciones. Una vez obtenida la
recta representativa, se mide el índice de refracción de la
muestra desconocida, al cual corresponderá en la grafica
construida anteriormente, un valor c1 que será la
concentración de la acetona expresada en mol/Litro.
 REFRACTOMETRÍA

Aplicaciones

Para monitorizar la pureza del butadieno y estireno

para la fabricación del caucho.

En la industria alimentaria para la semilla de soja o

del aceite de semilla de algodón

El índice de refracción tiene muchas aplicaciones en el

campo de la Química, como la identificación de productos,
análisis cuantitativo de soluciones, determinación de la
pureza de muestras, y son útiles para determinar
momentos dipolares, estructuras moleculares y pesos
moleculares aproximados.
 REFRACTOMETRÍA

Aplicaciones

Esta técnica es usada con fines de identificación y

caracterización de aceites y grasas, en el control de la
pureza de los alimentos, en la medición de jugos
azucarados, determinación aproximada del contenido de
alcohol en licores, concentraciones de azúcar ,entre otros.

Es por todas estas razones, además de otras como

la facilidad de uso del refractómetro, el uso de poca
muestra, la obtención de resultados al momento,
etc. que el conocimiento de la refractometría es de
suma importancia al momento de analizar alimentos
y fármacos como jarabes.
¿Preguntas?