Fundamentos de métodos espectroquímicos

En química analítica se utilizan medidas en base a la luz y otras formas de radiación

electromagnética.
La espectroscopia es la ciencia que estudia las interacciones de la radiación con la materia, con
absorción o emisión de energía radiante. Tiene aplicaciones
en astronomía, física, química y biología, entre otras disciplinas científicas.
El análisis espectral se basa en detectar la absorción o emisión de radiación
electromagnética a ciertas longitudes de onda, en relación con los niveles de
energía implicados en una transición cuántica.
Existen tres casos de interacción con la materia:

 Choque elástico: existe sólo un cambio en el impulso de los fotones (por ejemplo,

los rayos X, la difracción de electrones y la difracción de neutrones);
 Choque inelástico: por ejemplo, la espectroscopia Raman;
 Absorción o emisión resonante de fotones.

Los métodos analíticos espectroscópicos se basan en la medición de la cantidad de radiación que

producen (emiten) o absorben las especies moleculares y atómicas de interés. Según la región del
espectro electromagnético utilizado para la medición, las regiones que se han utilizado abarcan:
 Rayos gamma (γ): es un tipo de radiación electromagnética, y por tanto constituida
por fotones, producida generalmente por elementos radiactivos o por procesos
subatómicos como la aniquilación de un par positrón-electrón.
 Rayos X: Los rayos X son una forma de radiación electromagnética al igual que la
luz visible, pero con algunas características diferentes. La diferencia importante es
que los rayos X pueden penetrar o pasar a través del cuerpo humano y producir
imágenes proyectando la sombra de ciertas estructuras, tales como huesos,
algunos órganos y signos de enfermedad o lesión.
 Radiación ultravioleta (UV): es la energía electromagnética emitida a longitudes de
onda menores que la correspondiente a la visible por el ojo humano, pero mayor
que la que caracteriza a los rayos X, esto es, entre 100 y 360 nm.
 Radiación infrarroja (IR): es un tipo de radiación electromagnética (denominada de
manera específica "radiación térmica"), de mayor longitud de onda que
la luz visible, pero menor que la de las microondas.
 Microondas: Son ondas de radio de alta frecuencia y por consiguiente de longitud
de onda muy corta, de ahí su nombre.
 Radiofrecuencias (RF): Se generan cuando una corriente alterna pasa a través de
un conductor. Las ondas se caracterizan por sus frecuencias y longitudes. La
frecuencia se mide en hercios (o ciclos por segundo) y la longitud de onda se mide
en metros (o centímetros).

Los métodos espectroquímicos se emplean para resolver estructuras moleculares y para la determinación
cuantitativa y cualitativa de compuestos orgánicos e inorgánicos.
Una onda electromagnética tiene un componente de campo eléctrico y un componente de
campo magnético. Ambos componentes tienen la misma longitud de onda (λ) y frecuencia
(v), por lo tanto, igual velocidad (u), pero se propagan en planos perpendiculares entre sí.

Radiación electromagnética
Forma de energía  con propiedades que pueden describirse en términos de ondas o de partículas de
fotones. Es la emisión y transmisión de ondas electromagnéticas, que se transmite por el espacio a
grandes velocidades.
Se puede describir como una onda con propiedades tales como, longitud de onda, frecuencia,
velocidad y amplitud.

Este modelo de onda, sin embargo, no explica los fenómenos de absorción y emisión de energía
radiante. En relación a estos fenómenos, la radiación electromagnética se puede considerar como
paquetes discretos de energía o partículas: Fotones o cuantos.
Luz
Es la radiación electromagnética en las regiones UV-Visible del espectro electromagnético. Las ondas
de luz, por lo tanto, consisten en un campo eléctrico y un campo magnético oscilante y
perpendicular entre sí.

Propiedades de las ondas

Amplitud (A)
La amplitud de la onda es la
longitud del vector del campo eléctrico
en el punto máximo de la onda.

Longitud de onda (λ)

Es la distancia entre dos puntos
máximos(o mínimos) sucesivos.
Período (p)
Es el tiempo en segundos necesario para el paso de máximos o mínimos sucesivos por
un punto fijo en el espacio.

Frecuencia (v)
Es el número de ondas que pasan por un punto particular en un segundo. Descrito de otra
forma, es el número de oscilaciones del vector del campo eléctrico por unidad de tiempo (1/p). La unidad
de frecuencia es 1/segundos. Una oscilación por segundo se denomina Hertz (Hz). Una frecuencia de
106 s-1 se dice que es 106 Hz o 1 megaHertz (MHz). La frecuencia de cualquier onda de radiación
electromagnética está determinada únicamente por la fuente de emisión y se mantiene constante sin
importar el medio que atraviese.

Velocidad (u)
La velocidad (cm s-1 o m s-1) de una onda, depende del medio y de la frecuencia, la velocidad y longitud
de la onda, dependen del medio.
u= λ v

Velocidad de la luz
La luz viaja a una velocidad máxima en el vacío, aunque en el aire es 0,03% menor que
en el vacío, esta velocidad (c) es de aproximadamente 2,99792*108 m s-1.

c = λ v = 3*108 m s-1 = 3*1010 cm s-1

En un medio que contiene materia la luz viajará a una velocidad menor que c, debido a las interacciones
entre el campo electromagnético con los electrones delos átomos o moléculas de ese medio. La
frecuencia se mantiene constante, de modo que la λ se reduce cuando pasa luz del vacío a un
medio que contiene materia.

Cambios en la longitud de onda al paso de radiación desde el aire a un vidrio sólido y de

nuevo al aire. La longitud de onda se acorta en casi 200 nm (más del 30%) cuando pasa
al vidrio; este cambio se invierte cuando la radiación vuelve a entrar al aire.

 Número de onda (ū): Corresponde a otra forma de describir la radiación electromagnética.

Se define como el número de ondas por centímetro:
ū = 1/ λ
La unidad de ū es, por definición, cm-1.
 Potencia e intensidad de la luz.
La potencia (P) de la radiación (en vatios, W) es la energía de un haz que llega a un área dada
por unidad de tiempo. La intensidad es la potencia de la radiación por unidad de ángulo sólido.
Con respecto a la interacción de la radiación con la materia, es conveniente pensar en la luz como
partículas llamadas fotones o cuantos. Un fotón es una partícula de radiación electromagnética de
masa cero y energía (E), que viene dada por:
E=hv
Donde h es la constante de Planck (6,626*1034 J s)
Esta ecuación establece que la energía es proporcional a la frecuencia, por lo tanto, se puede reescribir
como:
E=hc/ λ = h c ū

Interacción de la radiación con la materia

Las formas más interesantes de interacción en espectroscopía abarcan las transiciones entre diversos
niveles de energía de especies químicas. Cuando una molécula absorbe un fotón, la energía de la
molécula se ve incrementada. Se dice que la molécula se encuentra entonces en un estado excitado.
Si una molécula emite un fotón, la energía de la molécula disminuye. El estado de más baja energía de
una molécula se denomina estado basal o fundamental.

La absorción de la luz aumenta la energía una molécula, mientras que la emisión de energía, disminuye
su energía.
Procesos moleculares representativos que ocurren cuando la luz en cada región del
espectro es absorbida.

De la figura anterior se puede ver que:

 La radiación de microondas estimula la rotación de una molécula.

 La radiación infrarroja estimula las vibraciones.
 La radiación UV y visible promueven electrones hacia estados altos de energía
(estados excitados).
 Los rayos X y la radiación ultravioleta de longitud de onda corta rompen enlaces
químicos y ionizan moléculas.

Medidas espectroscópicas
Los espectroscopistas emplean la interacción de la radiación con la materia para obtener información
sobre las muestras. Habitualmente la muestra se estimula en cierto modo al aplicar energía en la forma
de calor, energía eléctrica, luz, partículas o una reacción química. El analito, de esta forma, pasa de un
estado basal o fundamental a un estado excitado.
Se obtiene información sobre el analito al medir la radiación electromagnética emitida
conforme regresa a su estado fundamental o al cuantificar la radiación electromagnética que absorbe
como resultado de la excitación.
Espectroscopía de emisión
Involucra métodos en los que el estímulo es el calor (energía térmica) o energía eléctrica.

Espectroscopía de quimioluminiscencia
Se basa en la excitación del analito con una reacción química. En estas dos técnicas, la energía
radiante emitida a medida que el analito vuelve al estado basal da información sobre su identidad
y concentración.

a) La muestra se excita con la aplicación de energía térmica, eléctrica o química (no

participa energía radiante) se les denomina por lo tanto, procesos no radiantes.
b) Las flechas hacia arriba representan procesos de excitación no radiantes, las
flechas hacia abajo indican la perdida de energía del analito.
c) Espectro resultante, que corresponde a una gráfica de radiación emitida en función
de la longitud de onda.

Espectroscopía de absorción
Se mide la cantidad de luz absorbida en función de la longitud de onda, lo que proporciona
información tanto cuantitativa como cualitativa de la muestra.

Métodos de absorción. La radiación de energía radiante incidente (P 0) puede ser

absorbida por el analito, lo que produce la transmisión de un haz de luz de menor energía
radiante (P). Para que pueda ocurrir la absorción, la energía del haz incidente debe
corresponder a una de las diferencias de energía que se muestran en b). En c) se tiene el
espectro de absorción resultante.
Espectroscopía de fotoluminiscencia
Se cuantifica la emisión de fotones después de la absorción. Las formas más importantes de
fotoluminiscencia, con fines analíticos, son:
 Espectroscopía de fluorescencia
 Espectroscopía de fosforescencia
La diferencia principal entre fluorescencia y fosforescencia es la escala de tiempo de emisión. La
fluorescencia se emite más rápido (10-8 – 10-4 s) que la fosforescencia (10-4-10-2 s).

a) La fluorescencia y fosforescencia resultan de la absorción de radiación 
electromagnética seguida de disipación de la energía por emisión de
radiación. 
b) la absorción puede causar la excitación del analito a los estados
energéticos 1 o 2.Una vez excitado, el exceso de energía
puede perderse por emisión de un fotón (luminiscencia, línea continua) 
o por procesos no radiantes (línea discontinua). La emisión ocurre en
todas las direcciones y las longitudes de onda emitidas.
c) corresponden a las diferencias de energía entre los niveles de energía.

Procesos de absorción
Cuando la luz es absorbida por una muestra, la intensidad de la radiación electromagnética
incidente disminuye.

Diagrama esquemático de un haz de luz monocromático que pasa a través de una

muestra en un experimento espectrofotométrico.

La fuerza radiante o potencia radiante (P) es la energía por unidad de tiempo y por unidad de área del haz
de luz (W/m2).

La luz con un rango de longitud de onda muy acotado se dice que es monocromática.
En la figura anterior, se tiene un haz de luz monocromático antes y después de atravesar un medio
(muestra) que tiene un espesor b y una concentración c de una especie absorbente. Como
consecuencia de las interacciones entre fotones y los átomos o moléculas absorbentes, la potencia del
haz disminuye de P0 a P.

La transmitancia (T) del medio se define como la fracción de luz original que pasa a través de la
muestra, por lo tanto, tiene un rango entre 0 y 1.
T = P / P0
El porcentaje de transmitancia es:
%T = 100 T = 100*(P/P0)

La absorbancia (A) se define como:

A = log (P0/P) = -log T

Cuando no se absorbe luz.

 Si el 90% de la luz se absorbe, el 10% se transmite.

 Si solo 1% de la luz se transmite.

A la absorbancia también se le denomina densidad óptica.

La espectroscopía de absorción molecular se basa en la medida de la transmitancia (T) o de la

absorbancia (A) de disoluciones que se encuentran en cubetas transparentes que tienen un
camino óptico de b cm Normalmente la concentración de un analito absorbente está relacionado
linealmente con la absorbancia.

Ley de Beer
La absorbancia es importante puesto que es directamente proporcional a la concentración (c) de la
especie que absorbe luz en la muestra.
A=εbc
La ecuación anterior se conoce como ley de Beer-Lambert o simplemente ley de Beer, Esta ley
se aplica a la química analítica. La absorbancia es adimensional, aunque a veces se usa
unidades de absorbancia (u.a.)  después de la absorbancia. La concentración (c) se expresa
normalmente como molaridad (M).
El camino óptico (b) se expresa comúnmente en (cm) se denomina absortividad molar
(antiguamente, coeficiente de extinción molar). Su unidad es L mol-1 cm-1 (M cm-1)
 Absortividad molar (ε)
La absortividad molar es característica de una sustancia y da información acerca de
cuánta luz es absorbida a una longitud de onda particular, la ε de una especie en el punto máximo de
absorción es característico de la especie. La absortividad molar máxima de muchos compuestos
orgánicos varía desde 10 (o menos) hasta 10000. Algunos complejos metálicos de transición tienen
valores de ε de 10000-50000.

En el análisis cuantitativo se aconseja que este parámetro tenga un valor alto, pues proporciona una
mayor sensibilidad analítica, a mayor ε mayor es la absorbancia. Un espectro de absorción es una
gráfica que muestra cómo A (o ε) varía con la longitud de onda.

Aplicación de la Ley de Beer a mezclas

La ley de Beer se aplica también a soluciones que contienen dos o más tipos desustancias
absorbentes. Siempre y cuando no haya interacción de las diversas especies, la absorbancia total de un
sistema de componentes múltiples a una sola longitud de onda es la suma de las absorbancias de todos
ellos:

Atotal = A1 + A2 +…+ An = ε1 b c1 + ε2 b c2 +…+ εn b cn

Cuando la ley de Beer falla

La ley de Beer establece que A es proporcional a la concentración de la especie que absorbe. Esta se
aplica a radiación monocromática y funciona muy bien para soluciones diluidas (≤ 0 , 0 1 M ) de la
mayoría de las sustancias.
En soluciones concentradas, las moléculas de soluto comienzan a producir efectos unas con otras,
debido a su proximidad. Cada partícula afecta la distribución de cargas y, por lo tanto, la magnitud de la
absorción, de las partículas vecinas. Este fenómeno causa desviaciones en la relación lineal de
la absorbancia con la concentración.

En ocasiones ocurre un fenómeno similar, pero en soluciones muy diluidas. Por ejemplo, un ácido
débil HA es una solución concentrada puede estar en su mayoría sin disociar. A medida que la
solución se diluye, la disociación aumenta. Si ε de la especie A- no es el mismo que HA, la
solución no obedecerá la ley de Beer a medida que se diluye.

La absorción de energía luminosa por un compuesto implica:

•Transferencia de electrones desde orbitales en el estado fundamental a orbitales desocupados de mayor

energía (transiciones electrónicas)
•Transiciones vibracionales, en las cuales las moléculas pasan desde un estado vibracional
al otro.
 La energía requerida para producir
transiciones electrónicas es mayor
que para las vibraciones. Así, la región
del espectro electromagnético
necesaria para producir distintas
transiciones es también diferente:
 Si la materia absorbe luz
UV o visible, se producen
transiciones electrónicas.
 Si la materia absorbe luz
IR, se producen solo
transiciones vibracionales.

Espectros de absorción
En una muestra compuesta únicamente por átomos, sólo son posibles transiciones electrónicas, en
cambio, en las moléculas, donde los átomos se enlazan unos a otros, los niveles
vibracionales se superponen con los niveles electrónicos .En el caso de los átomos sólo son absorbidas
unas pocas longitudes de onda (hay pocas transiciones posibles). En el caso de las moléculas hay
muchas transiciones posibles, por lo que se absorbe en un rango de longitudes de onda.

Un espectro de absorción es un gráfico de absorbancia o absortividad molar en función de la

longitud de onda o de la frecuencia. En el caso de átomos, se obtendrá un espectro de líneas mientras
que en el caso de moléculas se obtendrá un espectro de bandas.

Espectros de absorción de moléculas orgánicas (características)

 Espectros de absorción del
permanganato de potasio, para
5 concentraciones distintas (en
ppm), en celdas de 1,00 cm de
paso óptico. λmax = 525 nm

La parte de una molécula, que contiene los electrones involucrados en la transición electrónica que da
lugar a la absorción, se denomina cromóforo.
Cualquier sustancia que absorba luz visible es coloreada cuando la luz blanca (que contiene todos los
colores del espectro visible) se transmite a través de ella o se refleja desde ella, la sustancia
absorbe ciertas longitudes de onda de la luz blanca y, nuestros ojos detectan las longitudes
de onda que no se absorben. El color observado corresponde al color complementario del color
absorbido.
Izquierda: solución acuosa de sulfato de cobre, que consiste en iones de Cu2+ hidratados
(complejo azul pálido [Cu(H2O)6]2+).
Derecha: al adicionar amoníaco acuoso a la solución de sulfato de cobre, se forma el
complejo [Cu(H2O)2(NH3)4]2+, de color azul-violeta intenso.
 Registro de espectros
Al registrar un espectro de absorción, primero de debe registrar el espectro de la línea base con una
solución de referencia (solvente puro o un blanco) en ambas cubetas a utilizar. La línea base
normalmente muestra pequeñas absorbancias (positivas y negativas). Esta absorbancia de línea
base se resta a la absorbancia de la muestra, para obtener la absorbancia verdadera a cada
longitud de onda (los equipos hacen esta resta de forma automática, al calibrar con la solución de
referencia).

Para un análisis espectrofotométrico, normalmente se selecciona la λ del máximo de absorbancia, por

dos razones:

(1) La sensibilidad del análisis es mayor a la absorbancia máxima, es decir, se tiene la

máxima respuesta para una concentración dada del analito.
(2)La curva es relativamente plana en el máximo, de manera que hay pequeñas
variaciones de absorbancia si es que hubiere una desviación en el monocromador o si el ancho de la
banda transmitida cambia un poco.

Características de los métodos espectrofotométricos y fotométricos

Aplicabilidad 
Gran cantidad de especies orgánicas, inorgánicas y bioquímicas absorben radiación UV-visible.
Muchas especies que no absorben se pueden modificar para convertirlas en especies que si
absorben radiación.

Alta sensibilidad 
Límites de detección habituales para espectroscopía de absorción están en el intervalo 10-4 – 10-5 M, se
puede ampliar incluso a 10-6 o 10-7 M.
 
Selectividad moderada a alta
Con frecuencia se puede identificar una longitud de onda en la que solo absorbe el analito, lo que
hace innecesarias las separaciones preliminares.

Buena exactitud.
Los errores relativos de concentración, encontrados en un procedimiento espectrofotométrico con uso de
radiación UV-visible, se ubican entre 1 y 5%.
Facilidad y comodidad.
Estas medidas se llevan a cabo de manera fácil y rápida con la instrumentación disponible. Además existe
la automatización.

Curva de calibrado
Gráfica que muestra el valor de una propiedad
versus la concentración del analito. Cuando
se mide la correspondiente propiedad de una
muestra desconocida, su concentración se
puede determinar a partir de la gráfica.

y = mx + b
m= pendiente
b= ordenada en el origen (intercepto). Valor de
y cuando x = 0
Espectro de absorción en la región visible del complejo (ferrozina)3 Fe (II) usa en análisis colorimétrico de
hierro.
 Curva de calibración que muestra la
validez de la ley de Beer para el
complejo (Ferrozina)3 Fe(II) usado en
la determinación de hierro

Bibliografía
https://es.wikipedia.org/wiki/Espectroscopia
http://www.academia.edu/35346687/An%C3%A1lisis_Espectroqu%C3%ADmico_Espectrofotometr
%C3%ADa
https://es.wikipedia.org/wiki/Rayos_gamma
https://rpop.iaea.org/RPOP/RPoP/Content-es/InformationFor/Patients/patient-information-x-rays/index.htm
https://www.ecured.cu/Radiaci%C3%B3n_ultravioleta
https://es.wikipedia.org/wiki/Radiaci%C3%B3n_infrarroja
http://telectronica.com/como-funciona-la-radiofrecuencia/
https://es.wikipedia.org/wiki/Ley_de_Beer-Lambert