UNIVERSIDAD DE NARIÑO

FACULTAD DE CIENCIAS AGRÍCOLAS

PROGRAMA DE INGENIERÍA AMBIENTAL

ASIGNATURA: Microbiología

DOCENTE: Claudia Milena Quiroz Ojeda M.Sc

LABORATORIO # 3: Métodos de esterilización

El trabajo microbiológico requiere un grado máximo de asepsia de los

materiales, medios de cultivo e implementos que se utilizan en los diferentes
procedimientos que se realizan en laboratorio, lo anterior para evitar la
contaminación ambiental de la muestra microbiológica que se va analizar. Por
lo tanto, para realizar una buena práctica es necesario conocer los principios
básicos de la esterilización.

Esterilización es la eliminación o muerte de todos los microorganismos que

contiene un objeto o sustancia. Existen varios métodos de esterilización, entre
estos los agentes físicos (calor seco, calor húmedo, radiaciones) y agentes
químicos (cloro, y compuestos clorados, aldehídos, compuestos fenólicos,
ácidos). Por lo general, el material que se va a esterilizar se acondiciona de tal
forma que no puedan contaminarse nuevamente.

La desinfección, por otro lado, es el proceso de destrucción de toda vida

microbiana, que no corresponde a un proceso de esterilización, es, por lo tanto,
la eliminación de formas vegetativas de los microorganismos, pero no
necesariamente sus estructuras de resistencia. La desinfección se hace con
sustancias químicas denominadas desinfectantes, que son aplicadas sobre los
objetos o superficies que se desea desinfectar. El hipoclorito de sodio (NaOCl),
es por lo general el desinfectante mas utilizado.

Métodos empleados para esterilización

Rojas-Triviño, 2011
OBJETIVOS

• Capacitar a los estudiantes en los métodos de esterilización y

desinfección más utilizados en el laboratorio de microbiología de la
UDENAR.

• Instruirlos en la preparación adecuada del material para ser esterilizado

y en el uso adecuado de la autoclave y el horno de esterilización.

MATERIALES
Cajas de Petri (2 por grupo)
Asas de transferencia (una por grupo)
Vasos de precipitado Erlenmeyer (uno por grupo)
Papel craft
Alcohol
Tubos de ensayo (3 por grupo)
Cinta de enmascarar
Cinta testigo.
Autoclave

Horno de aire caliente

PROCEDIMIENTO

• Esparcir el alcohol sobre el área de trabajo antes de iniciar y limpiar con

toallas absorbentes.

• Sobre el área de trabajo colocar el papel craft, recortado de acuerdo a las

necesidades y envolver cuidadosamente el material entregado (como
indique el técnico o docente encargado). Los tubos, previo a la envoltura,
tapar la boquilla con algodón.

• Asegurar el envoltorio con cinta de enmascarar y colocar un trozo de cinta

testigo.

• Parte del material, llevarlo al horno de aire caliente y encienda en la

temperatura adecuada (180 ºC), una vez caliente empiece a contabilizar el
tiempo de esterilización (2 horas).

• Para el uso del autoclave, asegúrese que el nivel del agua sea el adecuado,
coloque la rejilla, sobre ella la canasta y dentro de ella el resto de material a
esterilizar.
• Cierre correctamente la olla, encienda y controle las condiciones de
esterilización. No deje que la aguja llegue a rojo pues ocurriría una
explosión.

• Una vez finalizado el proceso proceda según las instrucciones del uso de la
autoclave.

TRABAJO EN CASA

Describa el mecanismo de acción y aplicaciones de los siguientes

desinfectantes: halógenos, compuestos clorados y fenol.

Indique las condiciones que debe cumplir un método de desinfección.

Defina agente antimicrobiano y antiséptico.

BIBLIOGRAFÍA

SALGADO, T. 2007. Manual de laboratorio de microbiología. Ed Universidad de

Caldas. Manizales. 141p.

Rojas-Triviño, A. 2011. Conceptos y practica de microbiología general.

Universidad Nacional de Colombia. 161 p.