OPERACIONES BÁSICAS DE LABORATORIO

Unidad 1
CLASIFICACION DE MATERIALES,
EQUIPOS BASICOS Y REACTIVOS
LIMPIEZA, DESINFECCION Y ESTERILIZACION DEL
MATERIAL DE LABORATORIO

Tamara Díaz Jáuregui

Septiembre 2022
LIMPIEZA, DESINFECCION Y ESTERILIZACION DEL
MATERIAL DE LABORATORIO
▪ La limpieza del material de laboratorio supone la eliminación de impurezas en dicho
material. Este proceso es de gran importancia para la obtención de datos precisos, fiables y
de calidad.

▪ Para la limpieza del material de laboratorio se usan diversos materiales: escobillones,

esponjas, secantes, fibras, recipientes de diversas formas y tamaños, guantes de hule y de
asbesto, etc.

▪ La limpieza general de los aparatos en el laboratorio se debe realizar utilizando franela,

gamuza o pinceles de pelo suave. Las soluciones químicas más utilizadas en la limpieza
química son:

▪ 1º Agua y jabón (para la limpieza simple)

▪ 2º Mezclas químicas (limpieza química): mezcla crómica o alcohólica (etanol 70%)

La mezcla crómica se emplea principalmente para eliminar materia orgánica o inorgánica que perma- 2
nezca adherida al material de vidrio, esto se debe gracias al poder oxidante de la mezcla.
Limpieza simple con agua y
jabón
Esta limpieza simple consiste en lavar con
agua y jabón, enjuagar bien con agua
corriente y a continuación, con agua
destilada (por triplicado) y, finalmente,
secar al aire. Resulta muy útil el uso de
frascos lavadores.
También se puede realizar lavado en
lavavajillas, la mayoría de los que se usan
en laboratorio, disponen además de un
mecanismo de secado

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DESINFECCION VS ESTERILIZACION

La limpieza no implica la destrucción de los microorganismos

que se encuentran en el objeto que se va a limpiar: reduce la
suciedad y, por tanto, también los microorganismos, pero no
acaba con ellos.
Desinfección: elimina los microorganismos y/o inactiva virus
indeseables pero no asegura la eliminación de las formas
más resistentes como las esporas bacterianas.
Esterilización: implica la destrucción total de todos los
microorganismos, incluyendo las formas más resistentes
como las esporas bacterianas, las micobacterias, los virus sin
envoltura y los hongos.

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 • Principales desinfectantes:
• Hipoclorito sódico (Lejía): Es un potente bactericida. Es de
acción rápida pero transitoria, porque su agente activo, el cloro, se
evapora. Es el desinfectante ambiental más común, para limpiar
Desinfección: superficies se prepara diluida al 20%. No puede usarse como
es el procedimiento antiséptico porque es corrosivo y tampoco sirve para desinfectar
ciertos instrumentos porque corroe los metales, algunos plásticos
que destruye la y el caucho.
mayoría de los
microorganismos de • Alcohol Etílico al 70%: Elimina muchas bacterias y algunos
un objeto, material o virus y hongos, pero no las esporas. Su principal desventaja es
superficie y puede que tiene un espectro antibacteriano muy limitado. Es uno de los
productos de uso más común para la desinfección de superficies
conseguirse de trabajo en los laboratorios y puede usarse como antiséptico de
mediante métodos uso externo (piel).
físicos y químicos.
• Otros desinfectantes son: Detergentes catiónicos, clorofenoles,
compuestos yodados, glutaraldehídos, biguanidas (como la
clorhexidina, muy conocido), oxidantes (como el agua oxigenada,
con un efecto antiséptico muy rápido)

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Esterilización: Es el procedimiento que
destruye todos los microorganismos de un
objeto, superficie o material. Por su
agresividad, es un procedimiento que nunca
puede usarse sobre tejidos vivos.

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 Factores que influyen en la mayor o menor resistencia frente a los medios
de esterilización son los siguientes:
• Carga bacteriana total.
• Presencia de materia orgánica.
• Presencia de sales minerales.
• El pH.
• La temperatura.

• Actualmente muchos de los instrumentos que

se necesitan estériles se adquieren de tipo
desechable, que llegan con la garantía de la
empresa fabricante, un ejemplo son las asas de
siembra de microorganismos que se utilizan de
plástico. A pesar de ello, hay materiales que se
deben esterilizar en el laboratorio.

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Métodos físicos y químicos

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 Métodos físicos:

CALOR

▪ SECO Estufa, aire seco 170ºC. Este método se

basa en el calentamiento del interior de un aparato
de acero inoxidable, el que se eleva la temperatura,
por energía eléctrica. El aire caliente destruye por
oxidación las proteínas microbianas, es un proceso
lento y necesita elevadas temperaturas, hoy en día
es un método en desuso en los hospitales

Nota: En ocasiones se utiliza para inactivar virus, de muestras potencialmente patógenas,

antes de realizar la extracción de ADN. A 60ºC unos 30 minutos sería suficiente. Ejemplo: COVID

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 Métodos físicos:

CALOR

• HUMEDO: Autoclave, 121º C 15

minutos. El vapor saturado a presión es un
método de esterilización muy utilizado,
económico, no tóxico y fiable.

• Son fundamentales tres parámetros: el

tiempo de exposición al vapor, la
temperatura y la cantidad de humedad.
▪ El ciclo de esterilización más utilizado es
el uso de vapor saturado calentado a
121ºC durante 15 minutos. 10
Métodos físicos:
FILTRACION En fluidos, los microorganismos
no se destruyen son retenidos en el filtro

RADIACION con rayos gamma, radiacción

ionizante, técnica nuclear con propiedad
bactericida

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 Métodos Químicos
• Oxido de Etileno: Gaseoso para
esterilizar objetos sensibles a
temperatura o presión. Dura 4 horas
pero debido a su toxicidad hay que dejar
12 horas de ventilación para eliminar el
gas

• Peróxido de Hidrógeno: Gaseoso, o

variación gas-plasma , este último no es
tóxico, muy utilizado para esterilizar
instrumental, ciclos de 55-75 minutos. El
inconveniente es un método caro

• Acido paracético y glutaraldehído:

Formato líquido, son muy tóxicos, se
utilizan para la esterilización en frío

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Unidad X. Nombre de la unidad
 Caducidad del material estéril
No tiene ninguna relación con el proceso de esterilización al que
se haya sometido el producto.
Según el Instituto Nacional de Gestión Sanitaria, la caducidad
del material estéril se refiere al período de tiempo durante el
que se puede garantizar la conservación de la esterilidad. Dicha
caducidad dependerá principalmente de las condiciones de La caducidad dependerá de:
envasado y almacenamiento.
• El tipo de material usado
• Contenedores metálicos: 6 meses. para empaquetar.
• La bolsa de papel simple de grado médico: 6 meses. • Transporte.
• La bolsa de papel mixto de grado médico: 12 meses. • Condiciones de
almacenamiento.
• Triple barrera (textil, papel crepado, textil): 3 meses.
• Tyvek Mylar :12 meses.
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 14

Papel Tyvek Mylar

Excelente resistencia de la
penetración microbiana. Los envases
poseen indicadores impresos que
atestiguan el paso del proceso de
esterilización por plasma Peróxido de
Hidrógeno. Las fibras duras y
continuas de Tyvek ayudan a proteger
la integridad del envase, del producto
en el interior y manejo rudo exterior.

Es ideal para autoclave, óxido de etileno y vapores de

formaldehido.
Almacenamiento
del material estéril
• El material estéril, antes de ser almacenado, se dejará enfriar para
evitar condensaciones. Además, se comprobará:

• Los controles de esterilización biológicos, químicos y físicos,

deben ser correctos.

• El paquete debe estar identificado y debe contar con su fecha de

esterilización.

• El envoltorio debe estar herméticamente cerrado e intacto. Se

desecharán los que cuenten con alguna rotura o humedad.

• La manipulación de los paquetes ha de hacerse con las manos

limpias.

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Almacenamiento
del material estéril
• El material estéril, antes de ser almacenado, se dejará enfriar para
evitar condensaciones. Además, se comprobará:

• • Los controles de esterilización físicos, químicos y biológicos

deben ser correctos.

• CONTROL FÍSICO La frecuencia con la que se realizará será en

cada carga de material a esterilizar; el equipo muestra en la
pantalla el control de tiempo, temperatura y presión, que quedará
registrado en la propia autoclave e impreso. El Técnico deberá
prestar atención a los parámetros y verificar que son los
correctos.

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 El método más utilizado
en esterilización es el
AUTOCLAVE
Usa vapor saturado y produce la
hidratación, coagulación e
hidrólisis de las albúminas y
proteínas en las células
microbianas. Tiene una gran
eficacia, rapidez, nula toxicidad y
bajo coste. Su principal
inconveniente es que no es
posible su utilización con
materiales termosensibles.
Ventajas.
• Gran eficiencia.
• Rapidez.
• Nula toxicidad residual.
• Coste realmente bajo en relación con
su gran rendimiento.
• Facilidad de monitorización del
proceso.
Inconvenientes.
• Elevada temperatura que
imposibilita la esterilización de
materiales termosensibles.
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¿Qué es la Cinta de autoclave?

Cinta de autoclave es un producto de cinta

especializada que se utiliza en los paquetes de
materiales colocados en un autoclave. La cinta
tiene tiras químicas sensibles al calor y la
presión que cambia de color cuando se exponen a
la suficientemente alta de calor y presión, lo que
indica que ha sido autoclavado.

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Tipos de antisépticos
Los antisépticos son sustancias que se aplican sobre tejidos con vida con el objeto
de matar o impedir el desarrollo de los microorganismos. Son menos potentes que
los desinfectantes. Algunos de los más utiliza

Alcohol. Actúa desnaturalizando las proteínas de las bacterias y puede combinarse con otros antisépticos, como el
yodo. No es adecuado para desinfectar heridas abiertas, ya que se puede formar un coágulo debajo del cual pueden
desarrollarse las bacterias.
Agua oxigenada o peróxido de hidrógeno. Presenta un gran poder de arrastre e inhibe el crecimiento de bacterias
anaerobias. Su acción es fugaz, tiene poca penetración y se descompone rápidamente. Se usa para separar apósitos
adheridos a las heridas y para la limpieza de urgencia de heridas sucias.
Clorhexidina. Lesiona la membrana bacteriana, produciendo una inhibición enzimática y coagulando las proteínas.
Puede combinarse con el alcohol. Se suele utilizar para el lavado quirúrgico de las manos y la desinfección de
mucosas.
Yodo y productos yodados. Se presentan en forma de jabón, tintura, alcohol yodado o povidona yodada. Su espectro
de actuación es muy amplio y su poder irritante, escaso. Su principal inconveniente es que tiñen la piel. ƒMercuriales.
Son bacteriostáticos y muestran poder cicatrizante.
Violeta de genciana. Es fungicida y epitelizante. Su principal inconveniente es su color, que tiñe la piel. Se utiliza en
infecciones micóticas cutáneas, úlceras por presión y quemaduras.

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Tipos de antisépticos

Hexaclorofeno (fenol halogenado). Es muy activo frente a bacterias

grampositivas, poco activo frente a gramnegativas y nulo frente a
esporas. Tiene acción residual y se usa en forma de jabón para el lavado
de las manos.

Tensioactivos aniónicos. Su principal ventaja es su fácil accesibilidad,

por lo que forman parte de muchos preparados cosméticos. La mayoría
de los jabones son tensioactivos aniónicos.

Tensioactivos catiónicos. Su actividad antimicrobiana es debida a que

producen rotura de membranas y desnaturalización de las lipoproteínas
de las bacterias. Tienen buena capacidad detergente y su uso es
agradable. Están indicados en la desinfección de heridas por
mordeduras de animales.

Hipocloritos. Solo se utilizan como antisépticos si están muy diluidos en

agua y ante contaminaciones por virus (Lejía)

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 Referencias bibliográficas

− NTP 582. INSHT, Ministerio de trabajo y asuntos Forintra S.A. Instrumentos de medición de temperatura (Sin fecha). Productos para control de esterilización. Recuperado el 5 de Noviembre de
2015 de: http://forintra.com/indicadores-quimicos-de-esterilizacion.php
− sociales de España, 2001. Gestión de los equipos de medición en un laboratorio de higiene industrial. Recuperado el 28 de Abril de 2016 de:
http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/FichasTecnicas/NTP/Ficheros/501a600/ntp_582.pdf

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