UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

ESCUELA DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

In vestigación Formativa
N° 02
Espectrometría de Llama
Fundamentos. Instrumentos. Componentes y Aplicaciones

CURSO: Instrumentación y Análisis

DOCENTES:
• Dr. Rengifo Penadillos, Roger Antonio

• Mg. Sopan Benaute, Carlos Naval

INTEGRANTES:
• Pinzón Gonzales, Katherin Kelly

• Ruiz Carranza, Yuri Valenti

• Silva García, Rocío Raquel

• Toledo Tacanga, Carol Lisceth

• Zavaleta Carril, Lourdes Ivette

CICLO: V
SECCION: A
GRUPO: A-2
 ÍNDICE

I. INTRODUCCIÓN.…………………………………………..…………….3

II. OBJETIVOS………………………………………………………..……...3

III. FUNDAMENTOS……………………………..…………………………..4

IV. INSTRUMENTOS………………………………………..……………….8

V. COMPONENTES………………………………………..………………..8

VI. APLICACIONES……………………………………………….………..10

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÀFICAS………………………………...…12

INVESTIGACIÓN FORMATIVA N° 02 INSTRUMENTACIÓN Y ANÁLISIS

I. INTRODUCCIÓN 1,2

La espectroscopia de absorción atómica es una técnica de amplia utilización para la

cuantificación de elementos debido a que las líneas en la que se registra la absorción
atómica son considerablemente estrechas (de 0,002 a 0,005 nm) y las energías de
transición electrónica son únicas para cada elemento. Su aplicación puede darse para
uso en determinaciones cualitativas y cuantitativas de metales pesados tanto en industria
química como en farmacéuticas.

Dentro de este tipo de espectroscopia, una de los métodos más utilizados es la

espectroscopia de absorción atómica con llama, empleado para la determinación de
metales en una amplia variedad de matrices, midiendo sus resultados en ppb o ppm.

Su función es convertir los átomos combinados de la muestra en átomos en estado fundamental,

para ello es necesario suministrar a las muestras una cantidad de energía suficiente para disociar
las moléculas, romper sus enlaces y llevar los átomos al estado fundamental. Es así que se somete
a temperaturas cercanas a los 1,500–3,000°C las cuales son suficientes para producir la
atomización de un gran número de elementos, los que absorberán parte de la radiación proveniente
de la fuente luminosa.

Cabe resaltar que la popularidad de este método se debe a su especificidad, sensibilidad y facilidad
de operación.

II. OBJETIVOS

• Comprender los conceptos relacionados a la espectroscopia atómica y de emisión.

• Conocer las etapas del proceso de atomización de llama, así como las posibles
interferencias que se pueden presentar.

• Identificar los instrumentos espectroscópicos de llama y cada uno de sus

componentes.

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III. FUNDAMENTOS

Espectroscopia de emisión de llama, también llamada fotometría de llama, es una

técnica analítica que se basa fundamentalmente en la medida de la energía radiante
emitida por átomos de un elemento que se encuentra en estado de vapor. A temperatura
ambiente, todos los átomos que contienen una muestra se encuentran fundamentalmente
en el estado fundamental. Los átomos son elevados a un estado electrónico excitado
térmicamente. El tiempo de vida de un átomo en estado excitado es breve y su vuelta al
estado fundamental va acompañado de la emisión electromagnética y la longitud de
onda de esa radiación está en correspondencia con la diferencia de energía entre ambos
estados. Mediante un sistema monocromador o de filtro se aísla la zona del espectro de
interés y la intensidad de la señal emitida se mide con un sistema fotométrico adecuado.
La correlación entre la intensidad de la señal y la concentración del elemento emisor en
una solución permite la utilización de este fenómeno con fines cuantitativos. Si la
emisión se produce por la transición desde el primer estado excitado al fundamental se
obtienen las llamadas líneas de resonancia que son las más intensas y las que se utilizan
generalmente en este método 3.

➢ La llama como fuente de vapor atómico

En la atomización por llama, la disolución acuosa de la muestra se dispersa en
formando una fina nube que se mezcla con el combustible gaseoso y oxidante para
arrastrarla al mechero. El disolvente se evapora en la parte inferior, o base de la
llama, localizada justo por encima de la cabeza del mechero. Las partículas sólidas
finamente divididas que resultan son arrastradas a la región central de la llama,
denominada cono interior. Ahí, que es la parte más caliente de la llama, se forman
átomos e iones gaseosos a partir de las partículas sólidas, los cuales son arrastrados
al borde más exterior o cono exterior por lo que la velocidad a la que pasa la muestra
junto con la mezcla combustible/oxidante a través de la llama es muy elevada, sólo
una fracción pequeña de la muestra es atomizada. Aunque hay una gran variedad
de llamas que se han utilizado durante años para espectroscopía atómica, las dos
más usadas para fines analíticos son la de aire/acetileno y la de óxido
nitroso/acetileno. La elección de una llama y las condiciones operatorias dependen
del analito que va a ser determinado, la naturaleza de la matriz de la muestra, y la
técnica (emisión, absorción o fluorescencia atómica). La llama de aire/acetileno,

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que alcanza temperaturas de 2200 a 2400 ºC, se emplea en la determinación de

muchos elementos por absorción atómica. Con esta llama se favorece la formación
de átomos neutros, y si es rica en combustible se minimiza la formación de óxidos
de muchos elementos. Sin embargo cuando un elemento tiende a ser más
refractario, como es el caso del aluminio, silicio, vanadio, molibdeno, etc., por lo
que estos componentes forman óxidos refractarios siendo difíciles de
descomponer, se recomienda una llama más energética como la de óxido
nitroso/acetileno, que genera temperaturas entre 2950 y 3050ºC, tiene una zona que
contiene altas concentraciones de las especies CN y NH lo que da lugar a una región
fuertemente reductora que impide la formación de óxidos refractarios. Un
inconveniente de una temperatura muy elevada es que se puede producir un
incremento en la ionización de algunos analitos, con lo cual disminuye la población
de átomos neutros. Sin embargo, para medidas de emisión se prefiere la mezcla
nitrosa/acetileno que permite obtener espectros de emisión de la mayoría de los
elementos. En llamas aire/acetileno y óxido nitroso/acetileno se nebuliza agua. Se
observa que hay varias especies que emiten radiación, como C2, CH, OH y CN.
Este fenómeno no representa mayor inconveniente en medidas de absorción,
aunque en medidas de emisión se debe tener cuidado en evitar solapamientos con
las líneas de emisión de los analitos. Las llamas aire/hidrógeno y oxígeno/hidrógeno
que son útiles para observar líneas en el ultravioleta, de longitudes de onda más
cortas, porque son transparentes en esta región. La llama helio/oxígeno/ acetileno
está especialmente recomendada para medidas de fluorescencia atómica.

➢ Atomizadores de llama
En espectroscopía se utilizan dos tipos de mecheros: Los mecheros de flujo
turbulento están caracterizados porque tanto los gases (combustible y oxidante)
como la muestra confluyen a la vez a la salida del mechero en la base de la llama.
La muestra se aspira por efecto Venturi creado por el flujo de gases en torno a la
punta del capilar. Los caudales típicos son del orden de 1 a 3 ml /min. Estos
mecheros tienen la ventaja de introducir en la llama cantidades relativamente
grandes y representativas de la muestra. Entre los inconvenientes está un camino
óptico relativamente corto, problemas de obstrucción, ruidosos tanto desde el punto
de vista electrónico como sonoro. Se utilizan principalmente en emisión en
instrumentos poco costosos. Los mecheros de flujo laminar o de premezcla, la

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mezcla se nebuliza por el flujo de oxidante al pasar por la punta del capilar. El
aerosol resultante se mezcla a continuación con el combustible, y fluye a través de
una serie de deflectores que sólo dejan pasar las gotas más finas. De todo ello resulta
que una gran parte de la muestra se deposita en el fondo de la cámara de premezcla,
de donde drena a un recipiente de desecho. El aerosol, el oxidante y el combustible
pasan luego a un mechero de ranura, que da una llama normalmente de 5 a 10 cm
de longitud. Estos mecheros proporcionan una llama relativamente silenciosa que
junto con su gran camino óptico hacen que aumente la sensibilidad y la
reproducibilidad.

➢ Etapas y procesos de la atomización

a) Transporte de la disolución. Implica el movimiento de la disolución desde el

recipiente que la contiene hasta el nebulizador a través de un estrecho tubo de
plástico. Es necesario que sea reproducible tanto para las muestras como para
los patrones, para lo cual es preciso que las disoluciones sean lo más iguales
posibles en cuanto a disolventes, viscosidad, tensión superficial, etc.

b) Nebulización. Implica la conversión de la disolución en un fino aerosol

(suspensión de partículas ultramicroscópicas de sólidos o líquidos en el aire u
otro gas). El objetivo ideal es convertir la disolución en aerosol con una eficacia
del 100%.

c) Transporte del aerosol. En esta etapa el aerosol es transportado hasta la llama

a través de la cámara de mezcla. Esta cámara tiene una serie de componentes
bola de impacto, deflectores que aseguran que sólo las partículas más pequeñas
lleguen a la llama.

d) Desolvatación. Es la conversión del aerosol en partículas de sal, depende de

factores tales como el tamaño de las gotas, disolvente, velocidad de aspiración,
temperatura de la llama, etc.

e) Vaporización. Se trata de la conversión en la llama de las partículas de sal en

vapor. Entre las variables que afectan a esta etapa podemos citar el tamaño de la
partícula, la composición de la misma, la temperatura de la llama y el tiempo
(altura) en la llama.

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f) Equilibrado de las especies vaporizadas. En general, en los métodos de llama

se prefiere los átomos neutros-especies primarias para absorción y fluorescencia,
y átomos neutros excitados para emisión. La distribución relativa de estas
especies depende del tipo de llama, de flujo relativo de los gases, y de la altura
de observación en la llama 4.

➢ Interferencias
Las podemos agrupar en dos tipos: Interferencias espectrales e interferencias
químicas. Las interferencias espectrales se presentan bien cuando partículas
procedentes de la atomización dispersan la radiación incidente de la fuente, o bien
cuando la absorción o emisión de una especie interferente se solapa o está tan cerca
de la de medida del analito que no puede separarlas el monocromador. Este tipo de
interferencia se puede corregir cambiando la de medida o eliminando la especie
interferente, como es el caso de la interferencia provocada por la molécula de CaOH
cuando se está determinando Ba. La molécula de CaOH presente una banda ancha
de absorción en la zona de en la que se determina Ba, por lo que provoca errores
por defecto. No obstante esta interferencia puede eliminarse fácilmente empleando
una llama suficientemente energética (como óxido nitroso + acetileno) que 4
destruya la molécula de CaOH. Las interferencias químicas se deben a diversos
procesos químicos que pueden ocurrir durante la atomización y que alteran las
características de absorción del analito. La causa más común de este tipo de
interferencias es la presencia en la muestra de aniones que forman con el analito
compuestos poco volátiles, que disminuyen por tanto el grado de atomización.
Finalmente habrá que procurar que las disoluciones de muestras y de los patrones
tengan una composición lo más parecida posible, pues de lo contrario podría haber
variaciones en la velocidad de aspiración y en la temperatura de la llama,
provocando errores en las medidas 5.

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IV. INSTRUMENTOS

Espectrofotómetro de absorción atómica de llama 2

V. COMPONENTES 6

En esencia el equipo de absorción atómica consta de tres partes una fuente de radiación,
un medio para la obtención de átomos libres y un sistema para medir el grado de
absorción de la radiación

➢ Fuentes de radiación
La fuente de radiación característica debe poseer tres propiedades fundamentales:

▪ Monocromaticidad: la línea de resonancia se debe poder seleccionar con toda

precisión exactamente a la longitud de onda del elemento a determinar.
▪ Intensidad: deber ser lo suficientemente intensa a la longitud de onda de interés.
▪ Estabilidad: suficiente como para poder realizar las medidas sin fluctuaciones
considerables.

Actualmente hay varias fuentes de radiación utilizables: las de emisión continua,

que abarcan el espectro desde el ultravioleta lejano hasta el visible y las fuentes de
emisión discontinua, que emiten únicamente a longitudes de onda muy concretas.

Las fuentes de emisión continua son muy buenas, pero necesitan un monocromador
de un elevado poder de resolución cuyo precio es muy alto. Por esta razón son más

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INVESTIGACIÓN FORMATIVA N° 02 INSTRUMENTACIÓN Y ANÁLISIS

utilizadas las fuentes de emisión discontinua, entre las que se pueden distinguir las
lámparas de cátodo hueco y las lámparas de descarga sin electrodos.

➢ Atomizadores con llama

Su función es convertir los átomos combinados de la muestra en átomos en estado
fundamental, para ello es necesario suministrar a las muestras una cantidad de
energía suficiente para disociar las moléculas, romper sus enlaces y llevar los
átomos al estado fundamental.

Los componentes necesarios para obtener los átomos en estado fundamental son:

▪ Nebulizador: cuya misión en convertir la muestra aspirada en una nube de

tamaño de gota muy pequeño.
▪ Cámara de premezcla: donde penetra la muestra una vez se ha nebulizado. En
ella se separan las pequeñas gotitas que forman la niebla mezclándose la
muestra nebulizada con el oxidante y el combustible íntimamente.
▪ Mechero. Se sitúa sobre la cámara de premezcla, y por él sale la llama con
temperatura suficiente para poder comunicar a la muestra la energía suficiente
para llevar los átomos a su estado fundamental.
▪ La llama es el medio de aporte de energía a la muestra. Entre las llamas se
diferencia entre la de aire-acetileno y la de óxido nitroso-acetileno. Aquí se
pueden se pueden distinguir tres zonas:
o La zona interna: es la más próxima al mechero, de color azul y con
temperatura relativamente baja.
o La zona de reacción: donde se produce la atomización.
o La zona externa: Es la parte más fría de la llama.

➢ Monocromadores

Estos tienen como función seleccionar la línea de absorción, separándola de las

otras líneas de emisión emitidas por el cátodo hueco. Los aparatos comerciales
suelen venir equipados con monocromadores del tipo de prima o red de difracción.

➢ Detectores
Donde miden la intensidad de la radiación antes y después de la absorción por la
muestra. A partir de los valores obtenidos se podrá calcular la radiación absorbida.
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➢ Modulación
La llama emite energía continuamente a longitudes de onda no deseadas,
produciendo interferencia y una gran inestabilidad en las lecturas. Los detectores
que se utilizan son sensibles a determinadas frecuencias, ignorando las señales
continúas ocasionadas por la llama. Por ello, se modula el sistema de alimentación
de las lámparas a la misma frecuencia que el tubo fotomultiplicador.

➢ Sistema óptico
De acuerdo con el sistema óptico, los aparatos de absorción atómica pueden ser de
doble haz y de haz simple. En los aparatos de doble haz parte de la radiación pasa
a través de la muestra y otra parte va directamente al detector. Estos equipos
presentan la ventaja de que las variaciones de la intensidad de la fuente de radiación
son compensadas automáticamente. Sin embargo, estos aparatos son más caros que
los de haz simple.

Su función es conducir las radiaciones emitidas por la lámpara a través del sistema
de obtención de átomos en estado fundamental y el monocromador hasta llegar al
detector.

El sistema óptico está formado por:

o Espejos y lentes, que focalizan sobre la llama la mayor cantidad de energía

emitida por la lámpara y la sitúan a la entrada del monocromador.
o Láminas plano paralelas, que se utilizan para aislar los demás elementos del
exterior.
o Rendijas que se sitúan una a la entrada para obtener un haz paralelo y estrecho
procedente de la lámpara y otra a la salida para seleccionar la longitud de onda
adecuada eliminando el resto de las emisiones.

VI. APLICACIONES 7,8

La llama es útil para la excitación de metales de bajo potencial de ionización, puesto

que la fracción del número total de átomos ionizados es mínima. Durante años, las
llamas se utilizaron para obtener los espectros de emisión por excitación de diversos
elementos, y los más modernos espectrómetros de absorción atómica están adaptados
para efectuar mediciones mediante la emisión de una llama 7.

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INVESTIGACIÓN FORMATIVA N° 02 INSTRUMENTACIÓN Y ANÁLISIS

La espectroscopia de absorción atómica con llama es el método más empleado para la

determinación de metales en una amplia variedad de matrices. Su popularidad se debe
a su especificidad, sensibilidad y facilidad de operación. En este método la solución
muestra es directamente aspirada a una llama de flujo laminar. La llama tiene como
función generar átomos en su estado fundamental, de los elementos presentes en la
solución muestra. Temperaturas cercanas a los 1,500 - 3,000°C son suficientes para
producir la atomización de un gran número de elementos, los que absorberán parte de la
radiación proveniente de la fuente luminosa 7.

En los últimos tres años se ha desarrollado y aplicado en el campo de la

espectrofotometría de absorción atómica con llama la denominada «thermospray flame
furnace atomic absoprtion spectrometry» (TS-FF-AAS) para la determinación de
metales pesados a niveles de µg L-1 mediante el uso de un tubo capilar cerámico como
sistema de introducción de muestra y un tubo metálico como sistema de atomización.
Recientemente, una de las variantes y aplicaciones de la TS-FF-AAS ha sido la digestión
en línea, transporte e introducción de muestras biológicas para la determinación de Cd,
Cu y Pb a niveles de µg g-1 8.

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VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Skoog, D.A. James; Holler F. James; Principios de análisis instrumental, 6° ed.; Ed.
McGraw - Hill .1998. pp: 230-233.
2. Gallegos, Wilma; Vega, María; Noriega, Paco. Espectroscopia de absorción
atómica con llama y su aplicación para la determinación de plomo y control de
productos cosméticos la granja. Revista de Ciencias de la Vida, [Internet]. 2012.
[Citado el 28 de marzo del 2021]; 15(1): 18-25.
3. Quispe, E. Espectrofotometría de llama. Universidad Nacional de la Plata,
Argentina. 2018.
4. Amartey E, Ssumadu-Sakyi A, Adjei C, Quas-hie F, Duodu G y Bentil N. 2011.
Determinación de la concentración de metales pesados en pomadas capilares en el
mercado ghanés mediante la técnica de espectrometría de absorción atómica.
British Journal of Phar-macology and Toxicology, 2 (4): 192–198.
5. Hepp N; Mindak W y Cheng J. 2009. Determinación del plomo total en el lápiz
labial: desarrollo y validación de una digestión asistida por microondas, método
espectrométrico de masa de plasma acoplado inductivamente. J. Cosmet. Scie.,
60(4): 405–414.
6. Gomis V. Espectroscopia de Emisión y Absorción Atómica. [Internet]. 2008.
[Citado el 28 de abril del 2021]. Disponible en:
https://rua.ua.es/dspace/bitstream/10045/8252/4/T7Abasorc.pdf
7. Razmilic B. Espectroscopia de absorción atómica. Fao.org. [Internet]. 2018.
[Citado el 28 de marzo del 2021]. Disponible en:
http://www.fao.org/3/ab482s/AB482S04.htm
8. González E; Ahumada R; Medina V; Neira J; González U. Espectrofotometría de
absorción atómica con tubo en la llama: aplicación en la determinación total de
cadmio, plomo y zinc en aguas frescas, agua de mar y sedimentos marinos. Química
Nova, [Internet]. 2004. [Citado el 28 de marzo del 2021]; 27(6):873–877.
doi:10.1590/S0100-40422004000600006

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