Primera Unidad Fundamentos Bioquímicos, Enzimología y Biología Molecular de las membranas biológicas

"Año del Bicentenario del Perú: 200 años de Independencia"

FACULTAD DE MEDICINA
ESCUELA PROFESIONAL DE CIENCIAS DE LA SALUD
PRACTICA Nº2

INTEGRANTES:
Gómez Eztevez, Brigham Ramiro
Ignacio Fernandez, Pahola Annette
Solis Bravo, Ariana

DOCENTE:
Deyli Diaz Lezama

AULA
A2 – A2P2

TRUJILLO – PERÚ
2021

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 Primera Unidad Fundamentos Bioquímicos, Enzimología y Biología Molecular de las membranas biológicas

PRACTICA N° 2
- NATURALEZA QUÍMICA DE LAS ENZIMAS Y ACTIVIDAD ENZIMÁTICA - -
INTRODUCCION:
Las enzimas son proteínas relativamente frágiles con tendencia a sufrir desnaturalización e inactivación, por efecto de diversos
agentes físicos y químicos como: temperatura, ácidos, álcalis fuertes, sales pesadas, pH, etc.

Las enzimas se encuentran en pequeñas concentraciones en los materiales biológicos, resultando complicada su individualización
o purificación. Para poder verificar directamente las propiedades comunes de la naturaleza proteica que las caracterizan,
experimentalmente se pueden utilizar las propiedades de catalizadores específicos que tienen las enzimas, como indicador de las
alteraciones que pueden sufrir éstas cuando son sometidas a la acción de diferentes agentes físicos y químicos.

La finalidad de la presente práctica, es evidenciar la característica proteica de la enzima que al exponerse a agentes físicos y
químicos varían su comportamiento y actividad catalítica.

PROCEDIMIENTO:
1) Preparar: el primer sistema denominado: SISTEMA A. Rotular previamente los tubos y colocar en cada uno lo que se indica
en el siguiente cuadro:
TUBOS DE ENSAYO
COMPONENTES (en ml)
I II III IV V VI
Amilasa al 1% 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0
NaOH 1N - 2.4 - - - -
HCl 3N - - 2.4 - - -
Ácido Tricloro acético 20% - - - 2.4 - -
Sulfato de Cobre al 20% - - - - 2.4 -
Buffer fosfato 0.1M / pH 6.6 2.4 - - - - 2.4
a. Observar el aspecto y color producido.
b. Dejar los 5 primeros tubos del sistema en reposo por 10 minutos a la temperatura ambiente.
c. Colocar el tubo VI en un baño de agua hirviendo por 10 minutos.

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2) Durante este lapso, preparar el segundo sistema llamado SISTEMA B:

TUBOS DE ENSAYO
COMPONENTES (en ml)
I II III IV V VI
Almidón al 1.0% en solución acuosa 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0
Buffer fosfato 0.1 M / pH 6.6 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
NaCl 0.15 M 1.4 1.4 1.4 1.4 1.4 1.4
Agua Destilada 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0
Pre incubar por dos minutos a 37 °C
Agregar enzima tratada, del sistema (A) 0.6 0.6 0.6 0.6 0.6 0.6
Dejar en incubación a 37 °C por 20 minutos

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3) A continuación, armar el siguiente sistema:
TUBOS DE ENSAYO
COMPONENTES (en ml)
I II III IV V VI
Acido Clorhídrico 0.05N 5 5 5 5 5 5
Del sistema (B), extraer y agregar 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
Solución yodada 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5

4) Observar el color producido.

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ACTIVIDADES A DESARROLLAR POR EL ALUMNO:

Explique bioquímicamente lo encontrado en los tubos del resultado final producido.

CUESTIONARIO:
1) Explique los cambios de color producidos en los diversos sistemas.
Sistema A: En este sistema hubo cambio ya que el Sulfato de cobre fue añadido al 20% (2.4) en este caso en el tubo número
V.
Sistema C: En este sistema hubo cambio de color por la temperatura ya que en el VI tubo un baño de agua hirviendo por 10
minutos.

2) Explique la teoría de la acción molecular de las enzimas sobre sus respectivos sustratos.
Cada enzima cataliza un solo tipo de reacción y casi siempre actúa sobre un único sustrato o sobre un grupo muy reducido de
ellos. En una reacción catalizada por un enzima el sustrato se une a una región concreta llamada centro activo. Para que toda
esta reacción suceda, las moléculas del sustrato deben aumentar su entropía (grado de desorden molecular) para alcanzar el
estado de transición que reside en la cima de la energía que separa el sustrato del producto

3) Identifique las sales pesadas empleadas en la práctica y explique su mecanismo de acción.

El sulfato de cobre: Su mecanismo de acción se mantuvo el color en los 5 tubos.

4) Identifique los ácidos y bases fuertes empleadas en la práctica y explique su mecanismo de acción.
Ácido Tricloro acético: Tiene una intensa acción coagulante sobre las albúminas, manifestándose por efectos cáusticos,
hemostáticos y bactericidas, donde precipita proteínas y se usa como cáustico en concentraciones del 30% o más y como
queratolítico a bajas dosis.
Ácido Clorhídrico: Es secretado por las células parietales del estómago esto resulta imprescindible para la activación del
pepsinógeno, que se transforma en pepsina e inicia la degradación de las proteínas.

5) ¿Cómo actúa la temperatura sobre la estructura proteica de la enzima?

La temperatura acelera a las reacciones químicas ya que, por cada 10ºC de incremento, la velocidad de reacción será
duplicada.

REFERENCIAS:
1) Murray R. Harper Bioquímica Ilustrada. 31° edición, México 2019.
2) UCV. Protocolo de seguridad en laboratorios. Trujillo 2018.