PR-INH-01 Manual de Proc de Inm y Horm Ver. 0 Monterrey

Procedimiento
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS DE ANÁLISIS Código :

Versión: 0
DEL ÁREA DE INMUNOLOGÍA Y HORMONAS PR-INH-01
Fecha de revisión:
Página 1 de 36
09-01-19
Índice y Presentación
Índice
No Contenido Pagina
1 Objetivo y Alcance 1
2 Responsabilidades 2
3 Políticas Generales 3
4 Definiciones y Terminología 3
5 Fundamento 5
6 Índice de procedimientos 7
7 Desarrollo – Resultados -Control de calidad 8
8 Anexos 32
9 Valores e intervalos de referencia 36
10 Documentos de Referencia / Bibliografía 36
11 Control de cambios 36
Presentación
El presente manual establece los procedimientos para realizar el análisis de las muestras dentro del
área de Inmunología y hormonas.
1. Objetivos y Alcance
1.1 Objetivo General
Determinar los lineamientos del procedimiento operativo, control de calidad y de seguridad para
realizar los análisis correspondientes al área de Inmunología y hormonas.
1.2 Alcance
Aplica a todo el desarrollo que se realiza en el área, las variantes producidas y los controles a verificar,
así como la coordinación conjunta del personal que lo lleva a cabo.
Control de Autorización
Elaboró Revisó Autorizó
Damaris L. Ortega Compeán Miguel Hernández Hernández Laura Elisa Perales Ramirez
Coordinador de Área Coordinador de Área Jefe de Laboratorio
Procedimiento
Versión: 0
Fecha de revisión:
Página 2 de 36
09-01-19
2. Responsabilidades
Es responsabilidad del Jefe de Laboratorio / Encargado del Laboratorio Foráneo:
 La aplicación y verificación del presente documento en el área correspondiente de su

laboratorio asignado.
 Informar al Encargado de Compras y Almacén las necesidades de insumos para el laboratorio
(en el caso de los Laboratorios foráneos).
Es responsabilidad del Coordinador del Área:
 Verificar que los resultados emitidos por el área sean congruentes con los análisis realizados.
 Gestionar / realizar los estudios alternos y reprocesos que se determinen necesarios.
 Verificar / realizar los controles de calidad (CC) de las pruebas llevadas a cabo en el área,
conforme a la programación establecida en las bitácoras correspondientes.
 Comprobar / llevar a cabo las actividades de mantenimiento marcadas en las bitácoras
correspondientes.
 Manejar / verificar que el manejo de los residuos generados por el área sea el adecuado,
conforme al Manual para el Manejo de RPBI (MN-SGC-03).
 Verificar / almacenar las muestras conforme al tiempo previsto para cada una de ellas, para
cualquier verificación futura.
 Gestionar con el Encargado de Compras y Almacén (para personal del Lab. CDMX) o con el
Enc. del Laboratorio Foráneo (para personal foráneo), los insumos necesarios para la
realización de los análisis correspondientes al área.
Es responsabilidad del Laboratorista:
 Realizar el procesamiento de las muestras solicitadas por el coordinador, conforme al rol de

actividades del área.
 Gestionar los insumos necesarios para la realización de los análisis con el coordinador.
 En caso de ausencia del coordinador, llevar a cabo las actividades del área (dividiéndose las
labores entre el personal disponible).
Es responsabilidad del Auxiliar de Laboratorista:
 Apoyar en el análisis de las muestras que sean recibidas en el área, así como en aquellas
actividades designadas.
Es responsabilidad del Personal de limpieza y cristalería:

 Preparar diariamente la solución para la inactivación del material utilizado y colocarlo en el
área al inicio de la jornada, así mismo cambiarla de manera constante en el transcurso del
día.
 Proporcionar el material de cristal en tiempo y forma (limpio/seco).
No Copia Controlada: Original

Procedimiento
Versión: 0
Fecha de revisión:
Página 3 de 36
09-01-19
3. Políticas Generales
 Se deben revisar todas las muestras que se reciben en el área, reportando aquellas que sean
inadecuadas para su procesamiento al responsable de su informe (Encargado de control y
rechazo de muestras / personal asignado) a Personal Operativo (cliente) y registrarlas dentro
de la bitácora de Muestras Inadecuadas.
 Cuando un equipo no se encuentre en condiciones adecuadas de funcionamiento se debe
registrar en la bitácora correspondiente y reportar al Jefe del Laboratorio o Encargado del
Laboratorio Foráneo.
 Las muestras compartidas deben ser identificadas a través de una simbología, y deben ser
recogidas por el personal del área o áreas que complementan el estudio.
 Los dispositivos/tiras para pruebas rápidas deben mantenerse en sus empaques hasta el
momento previo a su uso.
 Se debe realizar una alícuota de todas aquellas muestras que se requieran compartir con otras
áreas (para realizar un estudio adicional), previo al proceso de las mismas, debiendo rotular la
alícuota con los datos de la unidad y folio del paciente para garantizar su identificación.
 Las directrices establecidas en el presente manual no sustituyen la información contenida en
los insertos de los reactivos-dispositivos, así como de los manuales de los equipos empleados,
sino que complementa la misma.
4. Definiciones y Terminología
Termino Definición
Constituyente o característica que se va a medir en la muestra. Incluye
cualquier elemento, ión, compuestos, sustancia, factor, agente infeccioso,
Analito: célula, organelo, actividad (enzimática, hormonal o inmunológica) o
propiedad, cuya presencia o ausencia, concentración, actividad, intensidad u
otra característica que se vaya a determinar.
Son un conjunto heterogéneo de proteínas que producen en respuesta a la
Anticuerpo: estimulación antígena del sistema inmunológico y que tienen la propiedad de
reaccionar específicamente con el antígeno inductor de su producción.
Todo material, propio o extraño, soluble o particulado, que es capaz de
despertar una respuesta inmunitaria en un individuo inmunológicamente
Antígeno: competente. El antígeno debe ser capaz de interactuar específicamente con
productos de la respuesta engendrada: Anticuerpos y/o linfocitos
sensibilizados.
Conjunto de operaciones que establecen en condiciones específicas, la
relación entre los valores de las magnitudes indicadas por un instrumento o un
Calibración: sistema de medición, o los valores representados por una medida materializada
o un material de referencia y los valores correspondientes de la magnitud
realizada por los patrones.
Material de referencia cuyo valor es usado como variable independiente en
Calibrador:
una función de calibración.
Sistema diseñado para incrementar la probabilidad de que cada resultado
Control de
reportado por el laboratorio sea válido y pueda ser utilizado por el médico para
calidad:
hacer un diagnóstico o para tomar una decisión en su terapia.

Procedimiento
Versión: 0
Fecha de revisión:
Página 4 de 36
09-01-19
Medición de un analito en una o varias muestras, simultáneamente (sin

Corrida:
interrupción), junto con estándares y controles.
Curva de Expresión de la relación entre una indicación y el valor medido
calibración: correspondiente.
Producto resultante de la descomposición (metabolismo) de un fármaco /
Metabolito:
droga por parte del cuerpo.
Muestras que no cumplen con condiciones para su correcto procesamiento,
Muestra
pudiendo ser por contaminación de la misma, muestra insuficiente, lipémica,
Inadecuada:
etc.

Procedimiento
Versión: 0
Fecha de revisión:
Página 5 de 36
09-01-19
5. Fundamento
Antidoping
El método utilizado para esta determinación es el de Inmunocromatografía, el cual está basado en el
principio de competición por sitios limitados de unión de anticuerpos entre una droga o los metabolitos
de una droga en la muestra y un conjugado de droga-proteína inmovilizado en un soporte de
membrana porosa, en ausencia de droga o si la concentración de la droga se encuentra por debajo
del límite de corte en la muestra, los conjugados de color se adhieren al antígeno de droga
correspondiente inmovilizado en el área de la línea de prueba, formando una banda de color (línea
T), mientras que si la concentración de droga se encuentra en o por encima del límite de corte, la
droga saturará todos los sitios de unión del anticuerpo, previniendo la unión de los conjugados de
color al antígeno en el área de la línea de prueba de la membrana.
Perfil reumático Antiestreptolisina (ASO)

El método utilizado para esta determinación es el de Aglutinación en placa, el cual se basa en la
reacción inmunológica entre exoenzimas estreptococales unidas a partículas de látex
biológicamente inerte y los anticuerpos estreptococales presentes en la muestra.
Perfil reumático Proteína C Reactiva (PCR)

reacción inmunológica entre el antisuero PCR Humano unido a partículas de látex y las Proteínas C
Reactivas en el espécimen de prueba, lo que deriva en la formación de un conglomerado de las
partículas.
Perfil reumático Factor Reumatoide (FR)

reacción inmunológica entre las partículas de látex recubiertas con gamma-globulina humana y los
anticuerpos conocidos como factores reumatoides (FR), lo que provoca una aglutinación que puede
ser medida.
Prueba Inmunológica de Embarazo

El método utilizado para esta determinación es el de Inmunocromatografía, la prueba utiliza una
combinación de anticuerpos que incluyen un anticuerpo monoclonal hCG para detectar
selectivamente niveles elevados de Gonadotropina Coriónica humana (hCG), que al reaccionar con
el conjugado de color del anticuerpo forma una línea de color, pudiéndose aplicar en muestras de
orina o suero.
Reacciones febriles-Rosa de Bengala

El método utilizado para esta determinación es el de Aglutinación en placa, en el cual los anticuerpos
presentes en pacientes afectados por enfermedades que causan fiebre, se ponen en contacto con
antígenos específicos (Tifico O y H, Paratifico A y B, Proteus OX, Brucella), lo cual desencadenan una
aglutinación visible en macroscópicamente si están presentes los primeros y dando una apariencia
homogénea si estos no se encuentran en la muestra.
VDRL
El método utilizado para esta determinación es el de Floculación, en el cual las "reaginas" presentes
en individuos infectados por T. pallidum se detectan en el suero, por la reacción con un antígeno
cardiolipínico, dentro del cual si la muestra contiene reaginas ésta se unirá al antígeno produciendo

Procedimiento
Versión: 0
Fecha de revisión:
Página 6 de 36
09-01-19
una aglutinación visible en el microscopio, mientras que muestras no reactivas no provocan el

agregado de partícula, dando una apariencia homogénea a la suspensión.
VIH
El método utilizado para esta determinación es el de Inmunocromatografía, en el cual se detectan
los anticuerpos producidos por el organismo afectado el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH)
dentro de muestras de sangre entera, suero o plasma. La prueba es de detección cualitativa y puede
dar un resultado de 1 a 15 minutos.
Access 2
El método utilizado por los equipos para realizar sus determinaciones es el de Quimioluminiscencia, el
cual es un inmunoensayo que se basa en la medición de luz emitida por reacciones específicas
(enzima sustrato), la cual se relaciona con la existencia y concentración de las proteínas de interés).
La emisión de luz es causada por los productos de una reacción específica química, siendo algunos
de los utilizados:
 Éster de acridina
 Peróxido-ácido
 Hidróxido de sodio
 Fosfatasa alcalina

Procedimiento
Versión: 0
Fecha de revisión:
Página 7 de 36
09-01-19
6. Índice de procedimientos
Pruebas Manuales
6.1 Antidoping
6.2 Dengue NS1
6.3 Perfil reumático
 Antiestreptolisina (ASO)
 Proteína C Reactiva (PCR)
 Factor Reumatoide (FR)
6.4 Prueba inmunológica de embarazo (PIE)
6.5 Reacciones febriles
6.6 Rosa de bengala
6.7 VDRL (presuntivo)
6.8 VIH (presuntivo)
Pruebas realizadas en Access 2

6.9 HGC
6.10 Perfil hormonal
• LH
• FSH
• Progesterona
• Prolactina
• Estradiol
6.11 Perfil tiroideo

• TSH
• T4T
• FT4
• TUP-TAKE
• T3T
• Yodo Proteico
6.12 PSA

Procedimiento
Versión: 0
Fecha de revisión:
Página 8 de 36
09-01-19
7. Desarrollo
Prueba: Antidoping
Objetivo Específico del procedimiento. Determinar de manera cualitativa drogas y sus principales
metabolitos en muestras de orina humana.
A. Material y equipo:
Cronometro
Micropipeta
Dispositivo de detección (multi-tiras reactivas)
B. Reactivos:
NA
C. Muestra:
Tubo o frasco con orina.
D. Procedimiento:
No Responsable Actividad
Verificar que la muestra a procesar coincida con la orden de maquila.
Laboratorista y/o
1
Coordinador Nota: Se revisa que el número de folio y el nombre del paciente indicado en la
orden de maquila corresponda con lo indicado en la etiqueta de la muestra.
Verificar que la muestra no se encuentre alterada.
Laboratorista y/o Nota: La revisión se lleva a cabo observando las características físicas de la
2
Coordinador muestra, como son la coloración, olor, contaminación, etc. y en caso de tener
duda respecto a la muestra, apoyarse en el área de uroanálisis para descartar
cualquier anomalía.
Laboratorista y/o
3 Colocar el dispositivo de detección en una superficie limpia y nivelada.
Coordinador
Laboratorista y/o
4 Adicionar unas gotas de la muestra de orina en el dispositivo de detección.
Coordinador
Laboratorista y/o Dejar reposar el dispositivo con la muestra por 4 a 7 min, interpretar el resultado
5
Coordinador y registrar el resultado en el formato correspondiente.
Coordinador de
6 Revisar que el resultado a reportar sea el adecuado.
área
Laboratorista y/o Ordenar los resultados de acuerdo al orden de maquila y entregarlos al área o
7
Coordinador responsable de la recolección de resultados.

Procedimiento
Versión: 0
Fecha de revisión:
Página 9 de 36
09-01-19
E. Resultado:
Se indica en el formato de Pruebas Manuales FO-INH-02 (Ver anexo 1) si la muestra dio positivo
o negativo.
Negativo
Se interpreta una prueba como negativa si se generan las bandas de color en las zonas de
control (C) y la de prueba (T), este criterio se mantiene aun cuando la coloración de la banda
generada en la zona de la prueba (T) sea muy tenue.
Positivo
Se interpreta una prueba como positiva si una banda de color aparece en la zona de control
(C), mientras que en la zona de prueba (T) no debe aparecer nada.
Inválido
En el caso de no generarse una banda de color en la zona de control (C), el resultado del
ensayo será inválido.
F. Control de Calidad:
El dispositivo de detección para el Antidoping (multi-tiras reactivas) integra dentro de su
protocolo la verificación del funcionamiento adecuado del estudio, debiéndose constatar
que al realizar cada prueba el área de control (C) en el dispositivo presente la línea
correspondiente.
Aunado a lo anterior y con propósito de constatar el buen funcionamiento del dispositivo se

realiza una prueba con agua, dentro de la cual el dispositivo debe mostrar un resultado no
reactivo y el cual se registra en el formato de Verificación Viabilidad de Antidoping FO-COC-
17 (Ver anexo 2).

Procedimiento
Versión: 0
Fecha de revisión: Página 10 de
09-01-19 36
Prueba: Dengue NS1
Objetivo Específico del procedimiento. Determinar de manera cualitativa la presencia de antígeno

relacionado con el Dengue en muestras de suero o plasma.
Cronometro
Micropipeta
Dispositivo de detección
B. Reactivos:
Diluyente
C. Muestra:
Tubo con suero o plasma.
D. Procedimiento:
Laboratorista y/o
1
Verificar que la muestra se encuentre sin coágulos o fibrina.
Laboratorista y/o Nota: En caso de que la muestra presente alguno, retire el tapón (utilizando
2
Coordinador ambas manos), meta un aplicador de madera al tubo, retire la fibrina o coagulo
(colocando el aplicador en el recipiente del RPBI), centrifugue la muestra a
2000rpm durante 5 minutos.
Laboratorista y/o
Coordinador
Laboratorista y/o Adicionar 3 gotas de muestra (100 µl) en la sección destinada a la
4
Coordinador determinación del positivo o negativo al dengue.
Agregar 10 µl de muestra y 4 gotas del diluyente en la sección de identificación
del tipo de inmunoglobulina.
Laboratorista y/o
5
Coordinador
Nota: La muestra se adiciona en el pozo de cuadrado marcado con la letra S,
mientras que el diluyente se adiciona en el pozo circular.
Laboratorista y/o Dejar reposar el dispositivo con la muestra por 15 a 20 min, para interpretar y
6
Coordinador registrar el resultado en el formato correspondiente.
Coordinador de
área
8
E. Resultado:
o negativo.

Procedimiento
Versión: 0
09-01-19 36
Negativo
Se identifica una prueba como negativa si una banda de color aparece en la zona de control
(C), mientras que en la zona de prueba (T) no aparece ninguna banda (este análisis se realiza
dentro de la sección de prueba rápida Ag NS1).
Positivo
Se identifica una prueba como positiva si se generan las bandas de color en las zonas de
control (C) y la de prueba (T), este criterio se mantiene aun cuando la coloración de la banda
generada en la zona de la prueba (T) sea muy tenue (este análisis se realiza dentro de la
sección de prueba rápida Ag NS1).
Inválido
ensayo será inválido (este análisis se realiza dentro de la sección de prueba rápida Ag NS1).
El dispositivo de detección para el Dengue integra dentro de su protocolo la verificación del
funcionamiento adecuado del estudio, debiéndose constatar que al realizar cada prueba el
área de control (C) en el dispositivo presente la línea correspondiente.

Procedimiento
Versión: 0
09-01-19 36
Prueba: Perfil reumático “Antiestreptolisina” (ASO)
Objetivo Específico del procedimiento. Determinar semicuantitativamente el valor de anticuerpos y

exoenzimnas estreptococales en un suero humano.
Agitador
Lámpara de luz intensa
Cronometro
Micropipeta
Placa de reacción
Agitadores / Puntillas
Tubos /gradillas para el ensayo
B. Reactivos:
Buffer (Glicina Salina)
Reactivo antiestreptolisina
C. Muestra:
Tubo con suero (tapón rojo o amarillo).
Alícuota del suero (rotulado con unidad y folio del paciente)
D. Procedimiento:
Laboratorista y/o
1 Nota: Se revisa que el número de folio y el nombre del paciente indicado en la
Coordinador
orden de maquila correspondan con lo indicado en la etiqueta o rotulo de la
muestra.
Laboratorista y/o
2 Nota: En caso de que la muestra presente alguno, retire el tapón (utilizando
Coordinador
ambas manos), meta un aplicador de madera al tubo, retire la fibrina o coagulo
(colocando el aplicador en el recipiente del RPBI) y vuelva a colocar el tapón.
Laboratorista y/o
3 Centrifugar la muestra a 2000rpm durante 5 minutos.
Coordinador
Adicionar una gota de la muestra y de reactivo en un anillo de la placa oscura,
colocando la misma en el agitador.
Laboratorista y/o
4
Coordinador Nota: La agitación se mantiene durante 2 minutos a 80-100 rpm y en caso de
estarse realizando el análisis de las diluciones se debe cuidar que las muestras
se coloquen en un orden que permita su lectura fácilmente.
Colocar la placa bajo luz intensa, observar si se presenta alguna aglutinación y
reportar en el formato correspondiente.
Laboratorista y/o
5
Coordinador
¿La muestra presento una aglutinación?
Si la muestra presento aglutinación continuar en el punto 6.

Procedimiento
Versión: 0
09-01-19 36
Si la muestra no presento aglutinación o se determinó la titulación final continuar

en el punto 8.
Enumerar 4 tubos de ensayo agregando a cada una 100µl del diluyente (glicina-
salina) y 100µl de la muestra al No.1.
Laboratorista y/o
6
Coordinador
Nota: La muestra con diluyente debe homogenizarse para continuar al siguiente
paso.
Tomar una muestra de 100µl del tubo No1 y depositarlo en el tubo No.2 y
continuar conforme al punto 4.
Nota: Esta actividad se repite con el tubo 2-3 y 3-4 para desarrollar las siguientes
Laboratorista y/o diluciones (cuidando de homogenizar cada una de las mezclar resultantes
7
Coordinador previo a tomar muestra para la siguiente dilución y cambiar de puntilla):
 1:2
 1:4
 1:8
 1:16
Coordinador de
área
9
E. Resultado:
Se indica en el formato de Perfil Reumático FO-INH-03 (Ver anexo 3) si la muestra dio negativa
o positiva, así como el valor de la concentración a la cual se llegó al realizar las diluciones
Negativo
Se identifica una prueba como negativa si no se presenta una aglutinación y se expresa con
el valor 100 UI/ml en el reporte del resultado.
Positivo
Se identifica una prueba como positiva si se presenta una aglutinación, debiéndose realizar
un proceso de dilución para determinar semi-cuantitativamente la concentración de ASO, la
cual se determinar conforme a lo establecido en el inserto correspondiente del reactivo.
La verificación del funcionamiento adecuado del estudio se realiza mediante la evaluación
del reactivo con un control positivo y uno negativo, que deben mostrar la aglutinación y no
aglutinación respectivamente, registrando lo anterior en el formato de Bitácora de Control
Inmunología FO-COC-07 (Ver anexo 4).

Procedimiento
Versión: 0
09-01-19 36
Prueba: Perfil reumático “Proteína C Reactiva” (PCR)
Objetivo Específico del procedimiento. Determinar de manera semicuantitativa la presencia de

proteína C reactiva en suero humano.
Agitador
Cronometro
Micropipeta
Placa de reacción
B. Reactivos:
Reactivo PCR látex
C. Muestra:
D. Procedimiento:
Laboratorista y/o
Coordinador
muestra.
Laboratorista y/o
Coordinador
Laboratorista y/o
Coordinador
Laboratorista y/o
4 Nota: Previo a la adicionar del reactivo, este debe resuspenderse suavemente,
Coordinador
manteniéndose la agitación durante 3 minutos a 80-100 rpm y en caso de
reportar en el formato correspondiente.
Laboratorista y/o
5
Coordinador

Procedimiento
Versión: 0
09-01-19 36

en el punto 8.
Laboratorista y/o
6
Coordinador
paso.
7
 1:2
 1:4
 1:8
 1:16
Coordinador de
área
9
E. Resultado:
Negativo
el valor 4 mg/L en el reporte del resultado.
Positivo
un proceso de dilución para determinar semi-cuantitativamente la concentración de PCR, la

Procedimiento
Versión: 0
09-01-19 36
Prueba: Perfil reumático “Factor Reumatoide” (FR)
Objetivo Específico del procedimiento. Determinar de manera semicuantitativa el factor reumatoide

presente en una muestra de suero.
Agitador
Cronometro
Micropipeta
Placa de reacción
B. Reactivos:
Reactivo FR
C. Muestra:
D. Procedimiento:
Laboratorista y/o
Coordinador
muestra.
Laboratorista y/o
Coordinador
Laboratorista y/o
Coordinador
Nota 1: Previo a adicionar el reactivo de FR este debe resuspenderse

Laboratorista y/o suavemente, colocándose la gota de mismo a un costado de la gota de la
4
Coordinador muestra y mezclando con cuidado.
Nota 2: La agitación se mantiene durante 3 minutos a 80-100 rpm y en caso de

Laboratorista y/o
5 reportar en el formato correspondiente.
Coordinador

Procedimiento
Versión: 0
09-01-19 36

en el punto 8.
Laboratorista y/o
6
Coordinador
paso.
Nota: Esta actividad se repite con el tubo 2-3 para desarrollar las siguientes
Laboratorista y/o
7 diluciones (cuidando de homogenizar cada una de las mezclar resultantes
Coordinador
previo a tomar muestra para la siguiente dilución y cambiar de puntilla):
 1:2
 1:4
 1:8
Coordinador de
área
9
E. Resultado:
Negativo
el valor 7 IU/ml en el reporte del resultado.
Positivo
un proceso de dilución para determinar semi-cuantitativamente la concentración de FR, la

Procedimiento
Versión: 0
09-01-19 36
Prueba: Prueba inmunológica de embarazo (PIE)
Objetivo Específico del procedimiento. Determinar de manera cualitativa la hormona Gonadotrofina

Corionica Humana en orina o suero.
Cronometro
Tiras reactivas
B. Reactivos:
NA
C. Muestra:
Tubo con orina o suero.
Alícuota del suero u orina (rotulado con unidad y folio del paciente)
D. Procedimiento:
Laboratorista y/o
1
Verificar que la muestra se encuentre en condiciones adecuadas de
procesamiento.
Laboratorista y/o Nota 1: En caso de que la muestra sea suero y presente coágulos o fibrina, retire
2
Coordinador el tapón (utilizando ambas manos), meta un aplicador de madera al tubo, retire
la fibrina o coagulo (colocando el aplicador en el recipiente del RPBI) y vuelva
a colocar el tapón
Nota 2: En caso de que la muestra sea orina que no venga contamina.
Poner en contacto la muestra con la parte reactiva de la tira.
Laboratorista y/o
3
Coordinador Nota: El tiempo de contacto debe ser de entre 10 y 15 segundos, manteniendo
el contacto por debajo del nivel Máximo indicado en la tira.
Colocar la tira en una superficie plana (no absorbente) y dejar reposar.
Laboratorista y/o
4
Coordinador Nota: El reposo se prolonga por 3 minutos para orina y 5 minutos para suero, para
realizar la lectura.
Laboratorista y/o Revisar la tira, interpretar el resultado y registrar el resultado en el formato
5
Coordinador correspondiente.
Coordinador de
área
7

Procedimiento
Versión: 0
09-01-19 36
E. Resultado:
o negativo.
Negativo
(C), mientras que en la zona de prueba (T) no aparece ninguna banda.
Positivo
control (C) y la de prueba (T).
Indeterminado
Se identifica de esta manera la prueba si se presentan ambas bandas, tanto en la zona de
control (C), como en la de prueba (T), pero en esta última no se identifica claramente, por lo
que debe ser verificado por una metodología alterna, por lo que en caso de no disponer de
la misma en los laboratorios foráneos, la muestra debe enviarse al Laboratorio CDMX para su
corroboración.
Inválido
Las tiras reactivas integra dentro de su protocolo la verificación del funcionamiento adecuado
del estudio, debiéndose constatar que al realizar cada prueba el área de control (C) en el
dispositivo presente la línea correspondiente.
Aunado a lo anterior y con propósito de constatar el buen funcionamiento de la tira se realiza una
prueba de concordancia con el método de Quimioluminiscencia y cuyo resultado se registra en el
formato de Prueba Inmunológica de Embarazo (Prueba Presuntiva) FO-COC-02 (Ver anexo 5)

Procedimiento
Versión: 0
09-01-19 36
Prueba: Reacciones febriles
Objetivo Específico del procedimiento. Determinar si un paciente presenta una infección causada por
una serie de microorganismos integrados en la prueba.
Microscopio
Agitador
Micropipeta
Placa de vidrio
Puntillas
B. Reactivos:
Tífico O
Tífico H
Paratífico A
Paratífico B
Brucella
Proteus
C. Muestra:
Tubo con suero.
D. Procedimiento:
Laboratorista y/o
1
Laboratorista y/o
Coordinador
Laboratorista y/o
Coordinador
Adicionar la parte de muestra y reactivo que corresponda con la dilución
deseada en cada anillo de la placa y colocar la misma en el agitador.
Nota 1: Al iniciar el análisis de la muestra se comienza con la dilución 1:20 (la

Laboratorista y/o cual se realiza conforme a lo establecido en el punto 6), así mismo las diluciones
4
Coordinador consecutivas se muestran el mismo punto.
Nota 2: La agitación de la placa se mantiene durante 2 minutos a 80-100 rpm y

en caso de estarse realizando el análisis de las diluciones se debe cuidar que las
muestras se coloquen en un orden que permita su lectura fácilmente.

Procedimiento
Versión: 0
09-01-19 36
Colocar la placa bajo luz intensa, observar con el microscopio si se presenta

alguna aglutinación y reportar en el formato correspondiente.

Laboratorista y/o en el punto 8.
5
Coordinador
Nota 1: Si no se presenta una aglutinación la prueba es negativa, sin embargo si
se presenta la prueba es positiva y se requiere realizar un proceso de dilución
para determinar semi-cuantitativamente el nivel la reacción.
Nota 2: La determinación del título del suero, será la última dilución que ya no
presente aglutinación.
Realizar el proceso de titulación y continuar conforme al punto 4.
Nota: El proceso de titulación se realiza variando la cantidad de muestra

adicionada en la placa y observando su comportamiento, siendo las
Laboratorista y/o titulaciones preparadas conforme a la siguiente relación:
6
Coordinador  1/20 ; Agregar 80 µl de muestra y Una gota de reactivo
 1/40 ; Agregar 40 µl de muestra y Una gota de reactivo
Coordinador de
área
8
E. Resultado:
Se indica en el formato de Reacciones Febriles FO-INH-01 (Ver anexo 6) si la muestra dio
negativo o positivo, así como el nivel de titulación al que se llegó (si dio positivo).
Negativo
Se identifica una prueba como negativa si no se presenta una aglutinación.
Positivo
Se identifica una prueba como positiva si se presenta una aglutinación y se debe indicar el
título al cual se llegó.
aglutinación respectivamente, registrando lo anterior en el formato de Bitácora de Control de
Calidad Interno de Inmunología (Reacciones Febriles) FO-COC-08 (Ver anexo 7).

Procedimiento
Versión: 0
09-01-19 36
Prueba: Rosa de bengala
Objetivo Específico del procedimiento. Determinar la presencia de anticuerpos homólogos contra

Brucella abortus en muestras de suero humano.
Agitador
Micropipeta
Placa de vidrio
Puntillas
B. Reactivos:
Antígeno Rosa de bengala
C. Muestra:
Tubo con suero.
D. Procedimiento:
Laboratorista y/o
1
Laboratorista y/o
Coordinador
Laboratorista y/o
Coordinador
Adicionar 30 µl de la muestra en un anillo de la placa y 30 µl de reactivo sobre
la muestra, colocando la misma en el agitador.
Laboratorista y/o
4
Coordinador
Nota: Ambas gotas deben mezclarse perfectamente con un aplicador
desechable y la agitación se mantiene durante 4 minutos a 110-120 rpm.
Laboratorista y/o Colocar la placa bajo luz intensa, observar si se presenta alguna aglutinación y
5
Coordinador reportar en el formato correspondiente.
Coordinador de
área
7

Procedimiento
Versión: 0
09-01-19 36
E. Resultado:
o negativo.
Negativo
Se identifica una prueba como negativa si no se presenta una aglutinación.
Positivo
Se identifica una prueba como positiva si se presenta una aglutinación.
aglutinación respectivamente, registrando lo anterior en el formato de Bitácora de Control de
Calidad Interno de Inmunología (Reacciones Febriles) FO-COC-08 (Ver anexo 7).

Procedimiento
Versión: 0
09-01-19 36
Prueba: VDRL (presuntivo)
Objetivo Específico del procedimiento. Determinar si existen anticuerpos no treponemicos para el

diagnóstico presuntivo de Sífilis en suero.
Agitador
Cronometro
Microscopio
Micropipeta
Placa de reacción
B. Reactivos:
Reactivo de VDRL
Solución salina 0.9%
C. Muestra:
Alícuota del suero (rotulado con unidad y folio del paciente)
D. Procedimiento:
Laboratorista y/o
Coordinador
muestra.
Laboratorista y/o Nota: En caso de que la muestra presente alguno, retire el tapón (utilizando
2
Coordinador ambas manos), meta un aplicador de madera al tubo, retire la fibrina o coagulo
(colocando el aplicador en el recipiente del RPBI), centrifugue la muestra a
2000rpm durante 5 minutos.
Adicionar 50 µl de muestra y una gota de reactivo en un anillo de la placa de
reacción, colocando la misma en el agitador.
Laboratorista y/o
4
Coordinador Nota: La agitación se mantiene durante 3 a 4 minutos a 80-100 rpm y en caso
de estarse realizando el análisis de las diluciones se debe cuidar que las muestras
Colocar la placa bajo el microscopio (10X), observar si se presenta alguna
aglutinación y reportar en el formato correspondiente.
Laboratorista y/o
5 ¿La muestra presento una aglutinación?
Coordinador
en el punto 8.

Procedimiento
Versión: 0
09-01-19 36
Laboratorista y/o
6
Coordinador
paso.
7
 1:2
 1:4
 1:8
 1:16
Coordinador de
área
9
E. Resultado:
Se indica en el formato de Pruebas Manuales FO-INH-02 (Ver anexo 1), si la muestra dio
reactiva o no reactiva, así como el valor de la concentración a la cual se llegó al realizar las
diluciones.
Negativo
Se identifica una prueba como negativa (no reactiva) si no se presenta una aglutinación.
Positivo
Se identifica una prueba como positiva (reactiva) si se presenta una aglutinación, debiéndose
realizar un proceso de dilución para determinar semi-cuantitativamente el título del suero
positivo.
La verificación del funcionamiento adecuado del estudio se realiza mediante una
comparación entre el resultado emitido por un equipo y el resultado emitido por la prueba
manual con una muestra positiva y otra negativa, registrando el resultado de lo anterior en el
formato de VDRL Prueba Presuntiva FO-COC-03 (Ver anexo 8).

Procedimiento
Versión: 0
09-01-19 36
Prueba: VIH (presuntivo)
Objetivo Específico del procedimiento. Detectar anticuerpos relacionados con el virus de

Inmunodeficiencia Humana en sus dos tipos (VIH1 y VIH-2).
Cronometro
Micropipeta
Puntillas
Dispositivo de detección
B. Reactivos:
Diluyente de muestra
C. Muestra:
Tubo con suero.
D. Procedimiento:
Laboratorista y/o
1
Laboratorista y/o
Coordinador
Laboratorista y/o
Coordinador
Laboratorista y/o
Coordinador
Laboratorista y/o Adicionar 30 µl de muestra y una gota de diluyente en el dispositivo de
5
Coordinador detección.
Laboratorista y/o Dejar reposar el dispositivo con la muestra por 15 min, para interpretar y registrar
6
Coordinador el resultado en el formato correspondiente.
Coordinador de
área
8
E. Resultado:
Se indica en el formato de Pruebas Manuales FO-INH-02 (Ver anexo 1), si la muestra dio positivo
o negativo.

Procedimiento
Versión: 0
09-01-19 36
Negativo
(C), mientras que en la zona de prueba (T) no aparece ninguna banda.
Positivo
control (C) y la de prueba (T).
Nota: Todo resultado positivo debe ser verificado por una metodología alterna, por lo que en
caso de no disponer de la misma en los laboratorios foráneos, la muestra debe enviarse al
Laboratorio CDMX para su corroboración.
Inválido
El dispositivo de detección para el VIH integra dentro de su protocolo la verificación del
funcionamiento adecuado del estudio, debiéndose constatar que al realizar cada prueba el
área de control (C) en el dispositivo presente la línea correspondiente.
Aunado a lo anterior y con propósito de constatar el buen funcionamiento del dispositivo se

realiza una comparación entre el resultado emitido por un equipo y el resultado emitido por
el dispositivo con una muestra positiva y otra negativa, registrando el resultado de lo anterior
en el formato de VIH Prueba Presuntiva FO-COC-04 (Ver anexo 9).

Procedimiento
Versión: 0
09-01-19 36
Prueba: Pruebas realizadas en Access 2
HGC
Perfil hormonal
 LH
 FSH
 Progesterona
 Prolactina
 Estradiol
Perfil tiroideo
 TSH
 T4T
 FT4
 TUP-TAKE
 T3T
 Yodo Proteico
 PSA
Objetivo Específico del procedimiento. Determinar de manera cuantitativa los niveles de múltiples
analitos.
Access 2
Micropipeta
Puntillas
B. Reactivos:
Los reactivos utilizados en cada prueba están integrados en cartuchos específicos para cada
prueba.
C. Muestra:
Tubo con suero, plasma (heparina, EDTA) u orina.
D. Procedimiento:
Revisar que se haya realizado el mantenimiento correspondiente.
Laboratorista y/o Nota: El mantenimiento debe ser realizado previo al proceso de la primera
1
Coordinador muestra en el equipo (las actividades incluidas en el mismo se establecen en el
manual del equipo) y registrando su ejecución en la Bitácora de Mantenimiento
de Access 2.
Revisar el estado del control de calidad de la prueba a realizar.
Laboratorista y/o ¿El control de Calidad de la prueba es adecuado para aceptar la corrida?
2
Coordinador Si el control de calidad es adecuado, continuar en el punto 4.
Si el control de calidad no es adecuado, continuar en el punto 3.

Procedimiento
Versión: 0
09-01-19 36
Nota: Para constatar el correcto funcionamiento de la prueba se debe verificar

que la curva de calibración se encuentre activa y que sea adecuada, que los
controles de calidad sean ingresados y que la gráfica de Levey-Jennings
cumpla con respecto a las reglas de westgard.
Realizar los ajustes necesarios y regresar al punto 2.
Laboratorista y/o
3 Nota: En caso de que la curva no esté vigente o no se tenga, esta actividad se
Coordinador
debe realizar con el respectivo calibrador de la prueba, así como el ingreso de
los controles o el ajuste de las gráficas.
Laboratorista y/o
4
Laboratorista y/o
Coordinador
Laboratorista y/o
Coordinador
Ingresar los datos de la muestra al equipo.
Nota 1: El ingreso de los datos se realiza de la siguiente manera:

 Seleccionar dentro de la pantalla principal, el menú “Administración
de muestras (F1)”.
 Seleccionar dentro del menú desplegado “Nueva solicitud (F3)”
 Seleccionar dentro del cuatro de diálogo “Solicitud de paciente (F1)”
Laboratorista y/o
7  Ingresar el código de la gradilla a la cual será asignada la muestra.
Coordinador
 Registrar los datos de tomaduría y número de folio de la muestra.
 Definir dentro del menú que aparece el ensayo o perfil a realizar.
 Destapar la muestra y colocarla en la gradilla definida con
anterioridad.
Nota 2: Este proceso se puede replicar para todas las muestras que han de ser
procesadas en una misma gradilla.
Permitir al equipo realizar el análisis de la muestra y analice el resultado emitido.
¿El resultado emitido por el equipo se encuentra entre los rangos de referencia
del estudio?
Laboratorista y/o Si el resultado se encuentra dentro de los rangos, continuar en el punto 10.
8
Coordinador Si el resultado no se encuentra dentro de los rangos, continuar en el punto 9.
Nota: Al realizarse un proceso de análisis de una muestra por dilución, este se

lleva a cabo hasta que el resultado se encuentre dentro de los rangos de
referencia (se muestre un valor específico).
Llevar a cabo la dilución de la muestra y regresar al punto 5.
Laboratorista y/o
9
Coordinador Nota: Existen dos métodos para realizar la dilución los cuales son:

Procedimiento
Versión: 0
09-01-19 36
 El equipo integra dentro de sus funciones la realización de una dilución

automática, la cual se puede solicitar al equipo el resultado en el equipo
y eligiendo la opción de diluir.
 La segunda forma es realizar un proceso de dilución manual de la

muestra y se utiliza en caso de que el resultado de la muestra aún no se
encuentre entre los rangos de referencia del estudio (después de la
dilución automática).
Para ello se enumeran 4 tubos de ensayo y se preparan las diluciones de

la siguiente manera (cuidando de homogenizar cada una de las
mezclar resultantes):
 1:2 ; Agregar 100 µl de solución salina y 100µl de muestra
Coordinador de
área
11

Procedimiento
Versión: 0
09-01-19 36
E. Resultado:
El resultado de una prueba que no requirió de una dilución o que la dilución implementada
se encuentra dentro de los rangos se imprime directo del equipo.
En el caso del aquellas pruebas que requirieron de una dilución manual, se realiza la
obtención del valor real y se coloca de manera escrita en el informe de resultados, el cálculo
de ese valor se realiza conforme a la formula mostrada a continuación.
Valor Real = Valor obtenido en la dilución x Factor de dilución (donde se obtuvo el resultado)
El equipo contiene dentro de su protocolo la verificación con controles de primera o tercera
parte, que son llevados a cabo previo al ingreso de las muestras a procesar y con cuyos datos
resultantes el dispositivo realiza una Gráfica de Levey-Jennings para monitorear el buen
desempeño del estudio, lo anterior conforme a lo establecido en el diagrama de flujo interno
de Realización del Control de Calidad DF-COC-01.
Así mismo se mantiene un registro de la corrección llevada a cabo en el caso de que el

resultado de algún control ingresado no sea adecuado, el registro se realiza en la Bitácora de
Verificación de Ingreso de Calibradores y Controles de Equipos FO-COC-01 (Ver Anexo 10).

Procedimiento
Versión: 0
09-01-19 36
8. Anexos
Anexo 1: Pruebas Manuales FO-INH-02
Anexo 2: Verificación Viabilidad de Antidoping FO-COC-17
Anexo 3: Perfil Reumático FO-INH-03

Procedimiento
Versión: 0
09-01-19 36
Anexo 4: Bitácora de Control Inmunología FO-COC-07
Anexo 5: Prueba Inmunológica de Embarazo (Prueba Presuntiva) FO-COC-02
Anexo 6: Reacciones Febriles FO-INH-01

Procedimiento
Versión: 0
09-01-19 36
Anexo 7: Bitácora de Control de Calidad Interno de Inmunología (Reacciones Febriles) FO-COC-08
Anexo 8: VDRL Prueba Presuntiva FO-COC-03

Procedimiento
Versión: 0
09-01-19 36
Anexo 9: VIH Prueba Presuntiva FO-COC-04
Anexo 10: Bitácora de Verificación de Ingreso de Calibradores y Controles de Equipos FO-COC-01

Procedimiento
Versión: 0
09-01-19 36
9. Valores e intervalos de referencia
Para revisar los valores de referencia ver el FO-GLT-03 Relación de valores de referencia por Estudio /
Perfil.
10. Documentos de Referencia / Bibliografía
Código Nombre
NA Todd E.W., J. Exp. Med 55:267:280 (1982)
NA Klein, G.C. et al Applied Microbiology 21:999 (1971)
NA Oscar Rosas E. Inmunología de memoria 4 edición, Medico panamericana,
(2017)
NA Manual de operaciones del sistema ARCHITECT
DF-COC-01 Realización del Control de Calidad
11. Control de cambios
Versión Cambios en el Documento Fecha de revisión
0 Por ser la primera versión no existen cambios. 09-01-19

PR-INH-01 Manual de Proc de Inm y Horm Ver. 0 Monterrey

Cargado por

Información del documento

Título original

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

PR-INH-01 Manual de Proc de Inm y Horm Ver. 0 Monterrey

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

Procedimiento

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS DE ANÁLISIS Código :

1.1 Objetivo General

Es responsabilidad del Jefe de Laboratorio / Encargado del Laboratorio Foráneo:

 La aplicación y verificación del presente documento en el área correspondiente de su

Es responsabilidad del Coordinador del Área:

Es responsabilidad del Laboratorista:

 Realizar el procesamiento de las muestras solicitadas por el coordinador, conforme al rol de

Es responsabilidad del Auxiliar de Laboratorista:

Es responsabilidad del Personal de limpieza y cristalería:

No Copia Controlada: Original

No Copia Controlada: Original

Medición de un analito en una o varias muestras, simultáneamente (sin

No Copia Controlada: Original

Perfil reumático Antiestreptolisina (ASO)

Perfil reumático Proteína C Reactiva (PCR)

Perfil reumático Factor Reumatoide (FR)

Prueba Inmunológica de Embarazo

Reacciones febriles-Rosa de Bengala

No Copia Controlada: Original

una aglutinación visible en el microscopio, mientras que muestras no reactivas no provocan el

No Copia Controlada: Original

Pruebas realizadas en Access 2

6.11 Perfil tiroideo

No Copia Controlada: Original

No Copia Controlada: Original

Aunado a lo anterior y con propósito de constatar el buen funcionamiento del dispositivo se

No Copia Controlada: Original

Prueba: Dengue NS1

Objetivo Específico del procedimiento. Determinar de manera cualitativa la presencia de antígeno

No Copia Controlada: Original

No Copia Controlada: Original

Prueba: Perfil reumático “Antiestreptolisina” (ASO)

Objetivo Específico del procedimiento. Determinar semicuantitativamente el valor de anticuerpos y

No Copia Controlada: Original

Si la muestra no presento aglutinación o se determinó la titulación final continuar

No Copia Controlada: Original

Prueba: Perfil reumático “Proteína C Reactiva” (PCR)

Objetivo Específico del procedimiento. Determinar de manera semicuantitativa la presencia de

No Copia Controlada: Original

Si la muestra no presento aglutinación o se determinó la titulación final continuar

No Copia Controlada: Original

Prueba: Perfil reumático “Factor Reumatoide” (FR)

Objetivo Específico del procedimiento. Determinar de manera semicuantitativa el factor reumatoide

Nota 1: Previo a adicionar el reactivo de FR este debe resuspenderse

Nota 2: La agitación se mantiene durante 3 minutos a 80-100 rpm y en caso de

No Copia Controlada: Original

¿La muestra presento una aglutinación?

No Copia Controlada: Original

Prueba: Prueba inmunológica de embarazo (PIE)

Objetivo Específico del procedimiento. Determinar de manera cualitativa la hormona Gonadotrofina

No Copia Controlada: Original

No Copia Controlada: Original

Prueba: Reacciones febriles

Nota 1: Al iniciar el análisis de la muestra se comienza con la dilución 1:20 (la

Nota 2: La agitación de la placa se mantiene durante 2 minutos a 80-100 rpm y

No Copia Controlada: Original

Colocar la placa bajo luz intensa, observar con el microscopio si se presenta

¿La muestra presento una aglutinación?

Nota: El proceso de titulación se realiza variando la cantidad de muestra

No Copia Controlada: Original

Prueba: Rosa de bengala

Objetivo Específico del procedimiento. Determinar la presencia de anticuerpos homólogos contra