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Práctica 11. RDL

Este documento presenta información sobre el recuento diferencial de leucocitos. Explica que el recuento diferencial clasifica los leucocitos según su morfología y coloración, determinando los porcentajes de neutrófilos, linfocitos, monocitos, eosinófilos y basófilos. Describe el procedimiento para realizar un frotis sanguíneo, la coloración de Wright y el recuento bajo el microscopio. También caracteriza la apariencia de cada tipo de leucocito y cómo interpretar los resultados del recuento.

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Práctica 11. RDL

Este documento presenta información sobre el recuento diferencial de leucocitos. Explica que el recuento diferencial clasifica los leucocitos según su morfología y coloración, determinando los porcentajes de neutrófilos, linfocitos, monocitos, eosinófilos y basófilos. Describe el procedimiento para realizar un frotis sanguíneo, la coloración de Wright y el recuento bajo el microscopio. También caracteriza la apariencia de cada tipo de leucocito y cómo interpretar los resultados del recuento.

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UNIVERSIDAD NACIONAL PEDRO RUIZ GALLO

FACULTAD CIENCIAS BIOLÓGICAS

ASIGNATURA VIRTUAL

ANÁLISIS CLÍNICOS I

UNIDAD 2: LA SANGRE: CARACTEÍSTICAS, FUNCIONES Y ALTERACIONES.


ANÁLISIS CLÍNICOS BÁSICOS

Práctica 11. Recuento diferencial de leucocitos.

Dra. Ana María del Socorro Vásquez del Castillo


2020-II
Neutrófilos

Linfocitos
Orden de
frecuencia
Leucocitos Monocitos

Eosinófilos

Basófilos
RECUENTO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS

Clasificación porcentual de los leucocitos en base a su morfología y a la


afinidad de sus granulaciones a los colorantes.
Se le llama también fórmula leucocitaria, se determina en función a una
escala instituida por schilling, quien estableció los valores relativos (%) de
leucocitos (neutrófilos, linfocitos, monocitos, eosinófilos, y basófilos).

Objetivo: Realizar el recuento diferencial de leucocitos en sangre e


interpretar los resultados obtenidos.
Materiales

 Equipo de protección personal: Guantes, mascarilla, cofia, gafas y mandil.


 Material de toma de muestra: Algodón, alcohol, lancetas.
 Gradillas.
 Láminas portaobjetos con ángulos cortados.
 Micropipetas 10 – 100 µl.
 Microscópio con objetivo de 100x.
 Contómetro de mesa para recuento diferencial de leucocitos.
 Reactivo de Wright.
 Recipientes de polipropileno rígido resistente a perforaciones, con sistema
de cierre temporal y/o permanente.
 Cajas de bioseguridad de cartón.
Tabla 1
Clasificación de los leucocitos

I. Granulocitos II. Agranulocitos

 Neutrófilos  Linfocitos (21-35%)

 En banda (3-5%)  Linfocitos pequeños (75-80%)

 Segmentados (51-67%)  Linfocitos grandes (20-25%)

 Eosinófilos (2-4%)  Monocitos (4-8%)

 Basófilos (0-1%)
Procedimiento

Extensión sanguínea
 Obtener una muestra de sangre por punción capilar con una lanceta
descartable.
 Colocar I gota de sangre en uno de los extremos de un portaobjetos
limpio y seco.
 Sostener el portaobjetos con la muestra, con los dedos pulgar e
índice de la mano izquierda y con los dedos índice y pulgar de la
mano derecha coger otro portaobjetos de ángulos recortados.
 Apoyar el segundo de los portaobjetos sobre el primero en un
ángulo de 35 a 45° sobre la gota de sangre, esperando que esta se
extienda por capilaridad a lo largo del borde de contacto.
 Mediante un movimiento rápido y firme empujar hacia la izquierda
el portaobjetos superior para que la gota de sangre se extienda
sobre el portaobjetos inferior. Dejar secar espontáneamente por
exposición al medio ambiente.
Figura 1
Extensión sanguínea

Figura 2
Extensión o Frotis sanguíneo
Coloración de wright, observación y recuento
 Cubrir el extendido de sangre con 14 gotas de colorante de wright y
dejar actuar por un minuto.
 Cubrir con igual cantidad de agua destilada y dejar actuar por 4
minutos y lavar con agua destilada.
 Dejar secar el portaobjetos en posición vertical al medio ambiente.
 Observar al microscopio con objetivo de inmersión.
 Realizar el recuento en forma de almena , en cuatro parámetros
bien coloreados, hasta completar cien elementos.
Figura 3
Partes de una extensión sanguínea
Características de los neutrófilos en película coloreada con
wright
Son células redondeadas de 12 um de diámetro cuando se encuentran en
sangre.
 Citoplasma: Rosa pálido y presenta pequeños gránulos neutrófilos.

 Núcleo en banda: Alargado, curvo, generalmente en forma de U, C o


puede estar torcido. No es segmentado pero puede estar ligeramente
deprimido en uno o dos puntos. La cromatina es densa.

 Núcleo segmentado: Adopta la forma segmentada porque ya no se


puede dividir.
Núcleo del neutrófilo segmentado

 Células jóvenes: 2 a 3 lóbulos.


 Células maduras: 4 a 5 lóbulos.
 Células con deficiencia de b12 (ap) y ácido fólico (cirrosis): 6 a más
lóbulos.
 Células con anomalía familiar: 8 a 10 lóbulos (pleiocariocitos 20-25 µm).
 Células con anomalía de pelger huet:1 o 2 lóbulos baciliformes.
Figura 5
Pleiocariocitos

Figura 4 Figura 6
Células maduras Anomalia de Pelger Huet
Figura 7
Leucocitos neutrófilos
Figura 8
Células neutrófilas con varias formas de núcleo
Interpretación del recuento de neutrófilos
Neutrofilia o leucocitosis neutrófila
 Infección aguda pocas horas después del inicio.
 Infección crónica general o local.
 Infecciones pulmonares bacterianas, agudas e intensas (disminución
indica que es viral).
 Escasa neutrofilia o neutropenia: sugieren infección grave (intensa
destrucción tisular atrae leucocitos hasta que la MO supla la
demanda).
Figura 9
Incremento de neutrófilos en lámina coloreada
Neutropenia o leucopenia neutrófila
Neutropenia grave: agranulocitosis
Cifra absoluta: 1000 leucocitos/mm3 de sangre, a veces hasta 200 a 300
leucocitos/mm3
Las personas afectadas son susceptibles de padecer infecciones muy
severas, llegando a la muerte.
Puede ser:
 Producción disminuida de neutrófilos por lesión de la médula ósea
(granulopoyesis inadecuada o ineficiente).

 Destrucción o eliminación acelerada de neutrófilos de la circulación, a


velocidad que excede la capacidad de MO normal para compensarlos.
 Producción disminuida de neutrófilos por lesión de la médula ósea
(granulopoyesis inadecuada o ineficiente):
• Anemia aplásica (AA), algunas leucemias.
• Fármacos: quimioterápicos, cloranfenicol, sulfonamidas u otros.

 Destrucción o eliminación acelerada de neutrófilos de la circulación, a


velocidad que excede la capacidad de la MO normal para compensarlos:
• Lesión mediada por el sistema inmunológico a neutrófilos: idiopática o
desencadenada por fármacos.
• Infecciones abrumadoras: bacterianas, micóticas, etc.
• Hipertrofiaesplénica: retiro acelerado de neutrófilos de la circulación por
secuestro.
Nota: el médico se debe basar en una inspección de la médula ósea en pacientes neutropénicos, y
determinar si la neutropenia es causa de producción disminuida o destrucción acelerada.
Características de los eosinófilos en película coloreada con
wright
Conforman el segundo grupo celular de las células mieloides.
Miden de 12 – 17 um de diámetro.
 Citoplasma: Posee gruesas granulaciones de tamaño uniforme, grandes,
generalmente esféricas que se tiñen de rojo y no cubren el núcleo pero si
llenan el citoplasma.

 Núcleo: por lo general es bilobulado y presenta la forma de una


alforja, los dos lóbulos están conectados entre sí por una banda
delgada de cromatina, rara vez el núcleo es unilobulado o trilobulado,
contiene una masa de cromatina densa. Más de dos lóbulos nucleares se
observan en la deficiencia de vitamina B12 y de ácido fólico y en
trastornos alérgicos.
Interpretación

Eosinofilia
 Infestación parasitaria:
 Muy pronunciada: invasión de tejidos (triquina, cisticercos, etapa de
migración larvaria de áscaris, etc.).
 Menos pronunciada: oxiuros, áscaris, tenia, etc.
 Algunos trastornos alérgicos: asma, urticaria.

Eosinopenia
Se debe:
 Bloqueo de liberación de eosinófilos desde la médula ósea a la circulación.
 Reducción de la producción por la MO.
 Destrucción periférica.
Figura 10
Eosinófilos aumentados en lámina de sangre periférica
Características de los basófilos en película coloreada con wright
Constituyen menos del 1% de la población total de leucocitos. Miden
de 10 – 14 um de diámetro.
 Citoplasma: azul claro o rosado claro, en él se encuentran grandes gránulos
específicos de tipo basófilos que cubren el núcleo pero no llenan el
citoplasma, se tiñen intensamente, adoptando un color azul oscuro a negro
con tinciones de giemsa o wright, hacen presión sobre la periferia de la
célula, creando el “perímetro rugoso” característico.

 Núcleo: Deprimido y se cree que tiene forma de S, es difícil de observar


porque contiene poca cromatina dispuesta en masas alargadas, delgadas e
irregulares, está enmascarado por los gránulos.
interpretación

Basofilia:
Permite diferenciar ciertas enfermedades de la sangre:
 Leucemia mieloide crónica (LMC), policitemia verdadera (PV) de tuberculosis
diseminada y policitemia relativa.
Figura 11
Basófilo con tinción de Wright
Basopenia:
Basopenia relativa no existe.
 Disminución absoluta:
 Hipertiroidismo
 Stress
 Después de tratamiento prolongado con esteroides.
 Inmediatamente después de reacciones alérgicas.
Figura 12
Basófilos en lámina coloreada con wright
Características del linfocito en película coloreada con wright

Conforman el tipo celular predominante en el bazo, ganglios linfáticos y el


timo. Miden de 6 a 9 um de diámetro.

 Núcleo
 Redondo, ovalado o arriñonado, excéntrico Figura 13
 Ocupa la mayor parte de la célula. Linfocitos en lámina coloreada
 Cromatina densa y abundante.

 Citoplasma:
 Escaso.
 Frágil, forma proyecciones ahusadas.
 Basófilo, se tiñe de azul claro.
Interpretación

Linfocitosis:
 Infecciones víricas agudas: hepatitis infecciosa, sarampión y mononucleosis
infecciosa.
 Infecciones bacterianas: brucelosis, tifoidea, tuberculosis y sífilis.
 Observándose posteriormente linfopenia en ambos casos.
 Cáncer: linfosarcoma linfocítico, leucosarcoma y leucemia linfocítica crónica.

Linfopenia:
 Algunas enfermedades autoinmunes: LES.
 Infecciones piógenas agudas.
 Radiaciones.
 Administración de sustancias tóxicas.
Características del monocito en película coloreada con wright
Se caracterizan por presentar un diámetro de 14 a 20 um.

 Citoplasma: Abundante, opaco, azul grisáceo, disparejamente


coloreado, puede estar vacuolado.

 Núcleo: Excéntrico o central, arriñonado, ovalado, de contorno irregular


y se observa de color pálido.
Interpretación

Monocitosis:
 Incremento: no constituye diagnóstico de enfermedad específica.
 Expresan: reacción histiomacrofágica frente a células o tejidos alterados
especialmente por neutrófilos muertos (pus, obsesos).
 Traducen: necrosis, trombosis, peritonitis, supuraciones, gangrena, meningitis,
hemorragias internas.
Se observa
 Periodo inicial de enfermedades virales: sarampión, hepatitis, parotiditis y rubeola.
 Enfermedades parasitarias: malaria y tripanosomiosis.

Nota:
 Monocitosis con linfocitosis: buen pronóstico.
 Monocitosis con neutrofilia con desviación a la izquierda: no de buen pronóstico.
Figura 14
Monocitos en lámina coloreada con tinción Wright
Figura 15
Monocitos (monocitosis) en lámina coloreada con tinción Wright
Figura 16
Leucocitos normales en sangre 1000 x
Figura 17
Leucocitos: Abastonado, segmentado y basófilo (Laboratorio Análisis CÍlinicos FCCBB)
Figura 18
Leucocitos: neutrófilo abastonado y eosinófilo (Laboratorio Análisis CÍlinicos FCCBB)
Figura 19
Eosinófilo. Laboratorio de Análisis Clínicos-FCCBB
Figura 20
Leucocitos: Linfocito y Monocito. Laboratorio Análisis Clínicos-FCCBB
Muchas gracias por su atención

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