Práctica N° 12

TÍTULO DE LA PRÁCTICA: RECUENTO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS

El recuento diferencial de leucocitos se refiere a un recuento donde ya vamos

identificando cada tipo de leucocito ya no es un informe de cuántos hay en general aquí
hay que identificar qué tipo de leucocito es e Incluso si fuera alguna forma joven de algún
leucocito.
Ej. los linfocitos aumentan en infecciones virales los neutrófilos aumentan en infecciones
bacterianas.
¿Cómo se realiza?
Se lo realiza en el frotis sanguíneo al momento de tomar la muestra.
Cuáles son los cinco leucocitos maduros en sangre neutrófilos basófilos eosinofilos
linfocitos monocitos.

1. Competencia.

Conoce los criterios para la identificación de glóbulos blancos en preparados coloreados.

Realiza fórmulas leucocitarias en muestras de pacientes. Porque en estos procesos
donde el número de
2. Conocimientos previos. leucocitos se elevan y hay
El recuento diferencial de leucocitos es una parte rutinaria de la que saber qué tipo de
biométrica hemática que puede ser útil en la valoración de una leucocitos se está elevando o
infección o inflamación, en la determinación de los efectos de si fuera otra enfermedad que
intoxicación posible por sustancias químicas o drogas, en el provoca la disminución de
monitoreo de trastornos sanguíneos como la leucemia, y en los leucocitos cuál de ellos esta
efectos secundarios de tratamientos como la quimioterapia. El disminuida.
procedimiento consta de una toma de sangre, la misma se Ej. Así se puede diferenciar
disemina en un portaobjetos de vidrio y luego se tiñe. A entre una infección
continuación, se determina el porcentaje de cada tipo de bacteriana y una infección
leucocitos. viral
Los leucocitos son parte fundamental del tejido hemático y
presentan las siguientes características: son células que tienen
un mayor diámetro que los eritrocitos, presentan un núcleo de forma irregular, su citoplasma
presenta algunas granulaciones las cuales son teñidos con diferentes colorantes, y la
cromatina del núcleo puede ser de diferentes densidades.

Hay dos grupos de células maduras:

Agranulocitos porque no tienen gránulos en su citoplasma también se llama
mononucleares o no segmentados por su apariencia del núcleo, tienen un núcleo entero.
Ej. Linfocitos y monocitos
Granulocitos tienen gránulos en el citoplasma o también llamados polimorfonucleares o
segmentados por la forma de su núcleo que se encuentra fragmentado.
Ej. eosinofilos neutrófilos y basófilos.
Los cayados son una forma joven de los neutrófilos, pero se encuentran en Sangre hasta
un 2%.
Pueden distinguirse 5 tipos de leucocitos maduros (neutrófilos, eosinófilos, basófilos, monocitos
y linfocitos) basándose en general en las siguientes características:

Para realizar el recuento leucocitario lo importante es identificar a los leucocitos saber cómo
se ven en un frotis sanguíneo se debe tomar en cuenta los siguientes aspectos:

-Tamaño de la célula: hay leucocitos como el Linfocito qué es muy chiquito mide 7 a 8 micras,
el monocito puede venir hasta 20 micras.

- Forma del núcleo: Se debe observar sí es segmentada o no segmentada sí esta circular está
doblada o ariñonada.

- Contenido de gránulos: Presencia de gránulos los gránulos que se encuentran en el

citoplasma.

- Consistencia de la cromatina nuclear: Consistencia de la cromatina nuclear para ver la

presencia de formas de células jóvenes.

- Coloración de los gránulos: los gránulos de los basófilos, eosinofilos y neutrófilos presentan
pH diferentes los gránulos de los neutrófilos tienen un PH neutro, los gránulos de los eosinofilos
contienen un pH básico, los gránulos de los basófilos contiene un pH ácido.

El 65% de leucocitos corresponde a los GRANULOCITOS: Eosinófilos, Basófilos y Neutrófilos.

El 35% corresponde a los AGRANULOCITOS: Monocitos y Linfocitos.
Fórmula leucocitaria normal en adultos sanos:
LEUCOCITOS (%) ABSOLUTO (cel / mm3)
CAYADOS 0 – 1% 100 - 250
NEUTROFILOS SEGMENTADOS 55 – 70 % 3000 - 5000
EOSINOFILOS 1–4% 20 - 350
BASOFILOS 0–1% 10 - 60
LINFOCITOS 20 – 40 % 1500 - 4000
MONOCITOS 4–8% 100 - 500
No hay variación de la fórmula según el sexo, pero sí según la edad.

Valor relativo y valor absoluto:

 Los más abundantes son los neutrófilos.
 El que se encuentra en menor cantidad y es normal que no lo vemos son los
basófilos.
Estos valores no varían con el sexo, pero si varían con la edad, los nacidos, lactantes y
niños pequeños tienen más cantidad de linfocitos que de neutrófilos.

Descripción de cada uno de los elementos que componen una fórmula normal

1. Neutrófilos: Núcleo lobulado (2-5 lóbulos). Los lóbulos están unidos entre sí por
filamentos cromatínicos muy delgados. La cromatina es condensada. Es una célula terminal.
Mide aproximadamente 12 um. El citoplasma es abundante y rosado, cubierto por una
granulación fina específica de color pardo rojiza.
2. Eosinófilos: Mide aproximadamente 13 um. El núcleo es segmentado, con predominio
del bisegmentado en forma de anteojo, aunque pueden aparecer con más lóbulos. El
citoplasma es abundante y está cubierto de granulaciones esféricas de mayor tamaño que
las del neutrófilo y que se colorean de anaranjado.
3. Basófilos: Mide aproximadamente 10 um. El núcleo está irregularmente lobulado. La
cromatina es densa. La masa nuclear es voluminosa con relación al citoplasma. Las
granulaciones son groseras y muy irregulares en forma y tamaño pudiendo quedar
superpuestas al núcleo, cubriéndolo parcialmente.
4. Linfocitos: Es una célula generalmente pequeña (7 um), pero puede llegar hasta 12
um. La forma más pequeña posee sólo un escaso anillo de citoplasma color celeste.
Alrededor de un 10% de los linfocitos circulantes son células más grandes y con citoplasma
más abundante. El núcleo por lo general es redondo, pero puede tener una escotadura. La
cromatina es densa.
5. Monocito: Es el leucocito normal de mayor tamaño (18-24 um). El núcleo presenta
forma irregular y variada, la cromatina se esponjosa. La proporción núcleo-citoplasma es
aproximadamente semejante. El citoplasma se tiñe de celeste plomizo y no presenta
granulaciones.

3. Material, equipos e insumos.

- Portaobjetos de vidrio
-Tinción panóptica
- Papel secante
- Contador celular (pianito)
- Cronometro
- Aceite de inmersión
- Microscopio
- Contador de diferencial
Los frotis sanguíneos son preparados secos.

4. Técnica o Procedimiento.
La observación debe hacerse al principio de manera panorámica con objetivo de 10X para
ver la dispersión de los elementos. Con este aumento se observarán la presencia de células
grandes como los linfocitos hiperbasofilos de la mononucleosis. Por ello debe evitarse la
tendencia a usar de comienzo la lente de inmersión.
Luego se pasa a 40 X aumento que resulta útil para evaluar alteraciones de tamaño de los
glóbulos rojos y finalmente se pasa a 100X para el recuento diferencial de los glóbulos blancos
y para la observación detallada de los elementos sanguíneos.
En todo frotis coloreado con tinción debe colocarse una delgada capa de aceite de
inmersión, aun para el pequeño aumento a seco. Si no se cumple este requisito la refringencia
de los elementos impide una buena observación. Para esto es suficiente depositar una gota
en un extremo.
Un extendido correctamente realizado poseerá tres áreas de diferente espesor y con
distribución también distinta de leucocitos:
1. Zona excesivamente gruesa: Se encuentra en la región inmediata al punto de partida de
 la extensión (cabeza). En ella hay siempre un aumento del número de linfocitos.
2. Zona excesivamente fina: Corresponde al final de la extensión (cola) y en ésta se observa
un exceso de granulocitos y monocitos.
3. Zona ideal: Región central (cuerpo), en ella hay un reparto equilibrado de las células.

Seguidamente se realiza el conteo

en forma de greca debo observar el
campo microscopio ideal que esté
distribuido de forma homogénea.
Al leer en forma de greca en el
microscopio es la mejor forma de hacer
el recuento de leucocitos y cuando te
llegue a 100 leucocitos contados el
contador suena tiene una Campanita.
Hasta el momento tenemos la forma
relativa del conteo el 100%, faltaría sacar
la forma absoluta.
El frotis sanguíneo cuenta con tres zonas:
cabeza, cuerpo y cola el sitio ideal para hacer el
diferencial de leucocitos está entre el cuerpo y
la cola.
En la parte de la cola las células están muy mal
distribuidas y empiezan a deformarse los
neutrófilos y los monocitos se concentran en esa
zona, los linfocitos se concentran entre la cabeza
y el cuerpo.

El campo microscópico se debería

observar algo así como en la imagen
debemos observar a los eritrocitos tienen
que estar bien distribuidas de manera
homogénea en todo el campo
microscopio. En la imagen observamos 6
leucocitos.
Formas de recorrer el preparado:

Contar por lo menos 100 leucocitos anotando la cantidad de cada uno de ellos para
establecer los porcentajes. Refiriendo al valor de recuento de glóbulos blancos se puede
expresar cada tipo de leucocitos en valores absolutos por mm3 de sangre.
Siempre que sea posible se deben contar 100 elementos, recordar que se está haciendo una
estimación porcentual de las poblaciones, el recuento de 100 elementos resulta
relativamente sencillo en pacientes con valores absolutos de GB dentro de los valores de
referencia. Distinto es el caso de pacientes leucopénicos con recuento bajos por ej: 1500 GB
/ mm3 en estos casos resultará muy tedioso llegar a encontrar 100.

Lo importante y lo crítico es reconocer a los leucocitos cómo se ven, qué características

tienen cada uno de ellos.

Neutrófilos son células medianas qué tamaño están alrededor de 11 a 12 micras son
segmentados porque tienen el núcleo con lóbulos separados. Tiene gránulos en
cantidad regular muy menudos.
Neutrófilos cayados de una diferencia con el neutrófilo es que el núcleo aún no se ha
segmentado.
Linfocitos son los glóbulos blancos más pequeños miden entre 7 a 8 micras tiene
abundante núcleo y se ve muy escaso su citoplasma.
Cuándo hay infecciones virales parecen los llamados linfocitos activados o reactivos son
células más grandes porque crecen de tamaño.
Los monocitos son células más grandes y pueden llegar a medir 20 micras no presentan
gránulos estos poseen abundante citoplasma tiene un núcleo irregular puede ser
arriñonada una forma de c pueden enroscarse su núcleo.
Los eosinofilos se los distingue claramente porque presentan un color naranja en su
citoplasma presentan un pH básico por lo tanto sus gránulos se tiñen con la eosina
presentan un núcleo segmentado, los clásicos eosinofilos presentan dos lóbulos. Es una
célula mediana mide 13 micras.
Basófilos son células que presenta gránulos muy escasos se tiñen de un color bastante
oscuro tiene un núcleo segmentado pero sus gránulos qué son grandes llegan a tapar la
forma del núcleo. Miden de 10 a 11 micras son células medianas.

5. Actividades (opcional).
Registre sus resultados porcentuales, y calcule los valores absolutos de los diferentes
leucocitos.
Ejemplo:

Cálculos:
Para sacar el valor absoluto se necesita la cantidad de glóbulos blancos totales por
mm3.
Ejemplo. La forma absoluta es más útil que la forma relativa ya que la forma relativa
puede causar algún tipo de confusión.

Ejemplo
Con un 80% de neutrófilos, parecía que hay una neutrofilia relativa pero cuando
realizamos los cálculos del valor absoluto.

GB totales 3000/mm3
% neutrófilos 80%
3000/mm3..........100%
X......................80%
X = 2400 Neut /mm3.......no hay neutrofilia absoluta porque el valor normal de neutrófilos
va de 3000 a 5000 por mm3 mas al contrario el paciente presentaba una neutropenia
porque los valores de neutrófilos están disminuidos.

Muy importante en el hemograma debe estar acompañado el valor absoluto y el valor

relativo.

Ejemplo:
GB Totales 6000
Monocitos 7%
6000/mm3..........100%
X..................7%
X= 420 Mon. /mm3.

Ejemplo:
GB Totales 8000
Monocitos 1%
8000/mm3..........100%
X..................1%
X= 80 Bas. /mm3.

Importante: nunca se debe informar la cantidad de células con decimales, porque la célula
no se puede partir a la mitad, se debe redondear siempre a un numero entero.
¿Qué características celulares se deben observar para diferenciar a los leucocitos y poder
clasificarlos?
Para realizar el recuento leucocitario lo importante es identificar a los leucocitos saber
cómo se ven en un frotis sanguíneo se debe tomar en cuenta los siguientes aspectos:

 Tamaño de la célula

 Forma del núcleo

 Contenido de gránulos

 Consistencia de la cromatina nuclear

 Coloración de los gránulos

¿Qué significado clínico tiene un aumento de los eosinófilos?

La eosinofilia es el aumento de los eosinofilos por encima de los valores normales. Lo más
habitual es que surja por una causa alérgica, aunque puede haber otros motivos en el
aumento de estas células blancas. Las principales causas son: Alergias: Asma, urticaria,
dermatitis, rinitis alérgica…etc.

¿Cómo se le llama a la elevación de los linfocitos y qué significado tiene?

El aumento de linfocitos se llama linfocitosis.

La linfocitosis, o un recuento elevado de linfocitos, es un aumento en un tipo de glóbulo
blanco de la sangre denominado linfocito. Los linfocitos ayudan a combatir las
enfermedades, por lo tanto, es normal que la cantidad de linfocitos aumente temporalmente
después de una infección.

Mencione 3 enfermedades o patologías que produzcan una neutrofilia.

 Leucemia
 Herpes genital.
 Virus del Ébola
 Sarampión.

Menciones 3 patologías que manifiesten una linfopenia.

 Infecciones. VIH (SIDA)

 Desnutrición
 Infección parasitaria (Amebiasis intestinal)
Referencias bibliográficas.
RODAK, B. (2007). Hematología, fundamentos y aplicaciones clínicas. (2 ed). Buenos Aires,
Argentina. Editorial Médica Panamericana.
GARCIA, B; RUBIO, F; CRESPO M. Técnica de Análisis Hematológico. (1ra Ed.) España. Ediciones
Paraninfo.