Seminarios de Microbiología – 1er Bloque – Medios de cultivo - Prof.

Antonio Doménech
Seminarios de Microbiología - Primer Bloque
Profesora responsable: Dra. Elena García-Valdés
Características de los medios de cultivo

Definición
Un medio de cultivo es un conjunto de componentes
que crean las condiciones necesarias para el
desarrollo de los microorganismos.
Prof. Antonio Doménech
Composición
•Macronutrientes.
•Micronutrientes o elementos traza.
•Factores de crecimiento.

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Macronutrientes Micronutrientes
Elemento Función celular
Elemento Forma normal del nutriente en el Forma suministrada Cromo (Cr)
ambiente en el medio de cultivo Requerido en los mamíferos para el metabolismo de la glucosa. Se
desconoce si los microorganismos lo requieren
Carbono (C) CO2, compuestos orgánicos Glucosa, malato, acetato,
piruvato, aminoácidos, extractos Cobalto (Co) Vitamina B12; transcarboxilasa (bacterias del ácido propiónico)
compuestos
Cobre (Cu) En la respiración, citocromo c oxidasa; en fotosíntesis, plastocianina y
Hidrógeno (H) H2O, compuestos orgánicos H2O, compuestos orgánicos en algunas superóxido dismutasas
Oxígeno (O) H2O, O2, compuestos orgánicos H2O, O2, compuestos orgánicos Manganeso (Mn) Activador de muchas enzimas; presente en algunas superóxido
dismutasas y en la enzima que rompe el agua en fototrofos oxigénicos
Nitrógeno (N) NH3,NO3-, N2, compuestos orgánicos Inorgánico: NH4Cl, (NH4)2SO4,
nitrogenados KNO3, N2 Molibdeno (Mo) Algunas enzimas que contienen flavinas; nitrogenasas, nitrato
Fósforo (P) PO43- KH2PO4, Na2HPO4 reductasa, sulfito reductasa, DMSO-TMAO reductasas y algunas formato
deshidrogenasas
Azufre (S) H2S, SO42-,compuestos orgánicos con S, Na2SO4, Na2S2O3 Na2S, cisteína y Níquel (Ni)
sulfuros metálicos (FeS, CuS, ZnS, NiS, etc.) otros compuestos orgánicos La mayoría de las hidrogenasas; coenzima F430 de metanógenos,
azufrados deshidrogenasa del monóxido de carbono y ureasa
Potasio (K) K+ en solución o como varias sales de K KCl, KH2PO4 Selenio (Se) Formato deshidrogenasa; algunas hidrogenasas y el aminoácido
seleniocisteína
Magnesio (Mg) Mg2+ en solución o como varias sales de Mg MgCl2, MgSO4
Tungsteno (W) Algunas formato deshidrogenasas y oxotransferasas de los
Sodio (Na) Na+ en solución, NaCl o como otras sales de Na NaCl hipertermófilos
Calcio (Ca) Ca2+ en solución, CaSO4 o como otras sales de CaCl2 Vanadio (V) Vanadio nitrogenasa; bromo peroxidasa
Ca
Zinc (Zn) Anhidrasa carbónica, alcohol deshidrogenasa, ARN y ADN polimerasa, y
Hierro (Fe) Fe2+ o Fe3+ en solución, FeS, Fe(OH)3 o como FeCl3, FeSO4, varias soluciones muchas proteínas que se unen al ADN
otras sales de Fe de hierro quelado (Fe3+ EDTA,
Fe3+ citrato, etc.) Hierro (Fe) Citocromos, catalasas, peroxidasas, proteínas con hierro y azufre,
oxigenasas y todas las nitrogenasas
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Factores de crecimiento Constituyentes habituales

Vitamina Función
Ácido p-aminobenzoico Precursor del ácido fólico
•Agentes gelificantes: agar.
Ácido fólico Metabolismo de compuestos de un carbono; transferencia de
grupos metilo •Extractos: levadura, carne, hígado, semillas...
Biotina Biosíntesis de ácidos grasos; β-descarboxilaciones; algunas
reacciones de fijación de CO2 •Peptonas: soja, carne, gelatina, caseína...
Cobalamina (B12) Reducción y transferencia de restos monocarbonados; síntesis de
desoxirribosa •Sistemas amortiguadores: fosfatos...
Ácido lipoico Transferencia de grupos acilo en la descarboxilación del piruvato y
α-cetoglutarato
Ácido nicotínico (niacina) Precursor del NAD+; transferencia de electrones en reacciones de
•Indicadores de pH: rojo neutro, cristal violeta,
oxido-reducción
Ácido pantoténico Precursor de la coenzima A; activación del acetilo y derovados rojo de fenol...
acilados
Riboflavina Precursor del FMN, FAD en flavoproteínas implicadas en transporte
de electrones •Agentes reductores: microaerofilia o
Tiamina (B1) α-descarboxilaciones; transcetolasa
Vitaminas B6 Transformaciones de aminoácidos y cetoácidos
anaerofilia.
Grupo Vitamina K Transporte de electrones; síntesis de esfingolípidos •Agentes selectivos: sales biliares,
Hidroxamatos Compuestos que unen hierro; solubilización y transporte del hierro
al interior celular antibióticos...

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Tipos de medios de cultivo Medio definido y medio complejo

•Sólidos y líquidos.
•Medio definido (sintético) y medio complejo.
•Medio mineral o basal: compuestos inorgánicos.
•Medio mínimo: medio basal + 1 fuente de carbono.
•Medio rico: todos los requerimientos nutritivos.
•Medio de enriquecimiento.
•Medio selectivo.
•Medio diferencial.
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Manuales de medios de cultivo Manuales de medios de cultivo

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Manuales de medios de cultivo Manuales de medios de cultivo

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Manuales de medios de cultivo Manuales de medios de cultivo

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Manuales de medios de cultivo Actividad 1 Medios de cultivo

Metodología
Actividad individual.
Consulta del material disponible.
Anotar en la plantilla correspondiente las características de los
microorganismos seleccionados.

Plantilla 1
Microorganismo Oxígeno Gram Morfología Oxidasa Catalasa Motilidad
celular
Escherichia coli
Salmonella spp. Anaerobio
Vibrio cholera Aerobio + Cocos + + +
Clostridium (facultativo) - Bacilos - - -
perfringens
Campylobacter Microaerófilo
jejuni
Staphylococcus
aureus
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Actividad 1 Medios de cultivo Actividad 1 Medios de cultivo

Plantilla 2 Recursos
Medio de cultivo Citrato de McConkey Hierro Baird Triptosa-
Simmons de Parker Sulfito- Manuales de medios de cultivo
Kliger Cicloserina
(TSC)
Escherichia coli
1. http://www.panreac.es/pdf/ManualCultimed_completo.pdf
2. http://www.scharlab.com/docs/ebooks/descargarpdf.php?i
Salmonella spp. d=6
3. http://www.condalab.com/
Klebsiella pneumoniae
Manual de análisis microbiológico
Clostridium
perfringens
1. http://www.cfsan.fda.gov/~ebam/bam-toc.html
Staphylococcus
aureus
Libros y artículos
• Madigan, M. T. y otros (2003): Brock: Biología de los
Microorganismos. 10ª edición. Prentice Hall Inc, Madrid.

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Actividad 1 Medios de cultivo Actividad 1 Medios de cultivo

Imagen de microscopía electrónica y placa de cultivo Plantilla 3 www.condalab.com

Meat &
Organismo Medio Grupo Medio
Water &
Beverages
Fish
Dairy
products
Bakery
Processed
Foods
Beer
industry
Waste
Water
Cosmetic
Industry
Pharmaceutical
industry
Industry

Acetate differential
Escherichia coli Mc Conkey 1 Agar

BCP Glucose Agar

Grupo 1
Salmonella spp. Mc Conkey 2 Fecal Coliforms
Broth Base

Koser Citrate Broth

Grupo 2
Klebsiella pneumoniae Citrato de 3
Mannitol Nitrate
Simmons Motility Medium
Grupo 3
Mio Medium
Pseudomonas aeruginosa Cetrimide 4 MR-VP Medium

Sim Medium Grupo 4

Tryptone Byle Salts
Clostridium perfringens TSC 5 Agar

TTC Chapman Agar

Grupo 5
Urea Indol Broth
Staphylococcus aureus Baird Parker 6 Grupo 6
VRBG