son incapaces de crecer en ausencia de una compleja mezcla de nutrientes que
simula el plasma o el fluido intersticial. Esto supone la necesidad de mantener las condiciones de asepsia en todo momento, lo cual es limitante a nivel tanto del instrumental requerido como del personal calificado para su manipulación. Al estar generalmente las células en continua división durante el cultivo, es normal que crezcan hasta ocupar toda el área o volumen disponible. Esto puede generar varios problemas:
Agotamiento de los nutrientes del medio
Acumulación de células apoptóticas o necróticas Inhibición de la división celular por contacto: los contactos entre células pueden desencadenar un arresto del ciclo celular Diferenciación celular promiscua provocada por los contactos intercelulares Estos problemas pueden afrontarse mediante métodos de cultivo celular en esterilidad. El objetivo de estos métodos es evitar la contaminación con bacterias o levaduras que competirían por los nutrientes y/o podrían infectar y así eliminar las células. Toda manipulación se lleva a cabo, típicamente, en una campana de flujo laminar para evitar la entrada de microorganismos contaminantes. También pueden añadirse antibióticos al medio de cultivo.
Entre las manipulaciones más comunes llevadas a cabo en cultivos celulares, se
encuentran los cambios de medio, el pase de las células y la transfección. Contaminación por las bacterias, los hongos, y la levadura Este tipo de contaminación puede suceso a través del equipo de laboratorio, reactivos, e incluso a través del pelo, de las manos, de la respiración, o de la ropa del operador. El polvillo radiactivo de partículas o el polvillo radiactivo del aerosol durante cualquier escenario de cultivar llevará a la contaminación biológica. Además, las instalaciones del laboratorio tales como cabinas del flujo de aire laminar, dióxido de carbono humedecieron las incubadoras, y los baños del agua son fuentes para la contaminación biológica aparte de debido causada contaminación sacudir, los aerosoles, o la presencia de hendeduras. El matraz con los casquillos flojos y las placas de cultura incorrectamente tapadas pavimentan la manera para que los contaminantes se arrastren, naden, y crezcan en las culturas. Contaminación del micoplasma Conocido como el “garranchuelo” de los cultivos celulares, los mycoplasmas tienen la capacidad de alterar la función de la célula de la cultura del ordenador principal que causa efectos citopáticos. Contaminación química Las constituciones incorrectas de reactivos o la calidad inferior al nivel normal del agua, de los sueros, o de los contenedores usados para hacer los reactivos son algunas razones de la contaminación química de un cultivo celular. Las endotoxinas, el subproducto de bacterias gramnegativas, se encuentran a veces en los sueros y otros añadidos que afectan al incremento de una cultura. https://www.news-medical.net/life-sciences/Common-Problems-in-Cell-Culture- (Spanish).aspx