Sobre el antibiograma

El antibiograma, también conocido como Prueba de sensibilidad a los antibióticos, es un

examen que tiene como objetivo determinar el perfil
de sensibilidad y resistencia de las bacterias y hongos a
los antibióticos. A través del resultado del
antibiograma el médico puede indicar el antibiótico
más indicado para tratar la infección del paciente,
evitando así el uso de otros antibióticos que no son
necesarios y que no tratan la infección, además del
surgimiento de resistencia.

Normalmente el antibiograma se realiza después de la

identificación de microorganismos en gran cantidad en
la sangre, orina, heces y tejidos. Así, de acuerdo con el
microorganismo identificado y perfil de sensibilidad, el
médico puede indicar el tratamiento más adecuado.

Resistencia Natural.

La resistencia natural es propia de cada familia, especie o grupo bacteriano. Por ejemplo, todos
los gérmenes gramnegativos son resistentes a la vancomicina, y esta situación no es variable.

Resistencia adquirida.

La resistencia adquirida es variable y es adquirida por una cepa de una especie bacteriana. Así,
existen cepas de neumococo que han adquirido resistencia a la penicilina, cepas de Escherichia
coli resistentes a la ampicilina, cepas de estafilococos resistentes a la meticilina. Esta
resistencia adquirida es la que estudiamos en el laboratorio e informamos al clínico. La
resistencia adquirida es la que puede llevar a un fracaso terapéutico cuando se utiliza un
antibiótico supuestamente activo sobre el germen que produce la infección.

Clasificación.

Método del antibiograma disco-placa

El antibiograma disco-placa basado en el trabajo de Bauer, Kirby y colaboradores es uno de los

métodos que el National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS) recomienda
para la determinación de la sensibilidad bacteriana a los antimicrobianos. El antibiograma
disco-placa consiste en depositar, en la superficie
de agar de una placa de petri previamente
inoculada con el microorganismo, discos de papel
secante impregnados con los diferentes
antibióticos. Tan pronto el disco impregnado de
antibiótico se pone en contacto con la superficie
húmeda del agar, el filtro absorbe agua y el
antibiótico difunde al agar. El antibiótico difunde
radialmente a través del espesor del agar a partir del disco formándose un gradiente de
concentración. Transcurridas 18-24 horas de incubación los discos aparecen rodeados por una
zona de inhibición. La concentración de antibiótico en la interfase entre bacterias en
crecimiento y bacterias inhibidas se conoce como concentración crítica y se aproxima a la
concentración mínima inhibitoria (CMI) obtenida por métodos de dilución. Sin embargo, los
métodos disco-placa no permiten una lectura directa del valor de la CMI. Para cuantificarla,
basta con haber contrastado previamente el sistema disco-placa con un gran número de cepas
de CMI conocidas que han estado previamente determinadas por otros métodos de
determinación de la sensibilidad a los antimicrobianos (ej.: método de dilución). Esta
determinación se realiza con cientos de bacterias para minimizar errores. Se mide el diámetro
de la 5 zona de inhibición obtenida por cada una de tales cepas y se grafica dicha medida
frente a la CMI, obteniéndose la línea de regresión o "recta de concordancia" que proporciona
la correspondencia entre las CMI y los diámetros de inhibición. Para determinar la CMI de una
cepa se procede a medir el diámetro de la zona de inhibición y luego extrapolarlo en el gráfico
para obtener la CMI. Existen, por tanto, unos diámetros de inhibición, expresados en mm,
estandarizados para cada antimicrobiano.

Método del Épsilon

El principio de este método es una expansión de la técnica de difusión en disco. En el método

E-test (AB Biodisk, Suecia) podemos, mediante lectura
directa, determinar la concentración inhibitoria mínima
(CMI). Consiste en una tira de plástico no poroso de 6 cm de
largo por 5 mm de ancho que incorpora un gradiente
predefinido de antimicrobiano equivalente a 15 diluciones.
El protocolo para preparar el inóculo es el mismo que para
la difusión en disco. Siguiendo el método de difusión, una
vez inoculado la placa de agar con el microorganismo, se
coloca la tira de Etest sobre su superficie, produciéndose de
forma inmediata una difusión del antibiótico desde el
soporte hasta el agar, creándose de este modo a lo largo de
la tira un gradiente exponencial de las concentraciones del
antimicrobiano. Tras la incubación de las placas, se puede
observar una zona de inhibición elipsoidal y simétrica.
Después de la incubación la CMI será el valor obtenido en el punto en el que el extremo de
inhibición intersección con la tira.

Métodos de dilución

La cuantificación de la actividad in vitro de los

antimicrobianos se evalúa habitualmente mediante
alguna de las variantes de los métodos de dilución. Estos
métodos se basan en la determinación del crecimiento
del microorganismo en presencia de concentraciones
crecientes del antimicrobiano, que se encuentra diluido
en el medio de cultivo (caldo o agar).

¿Qué es un BLE?

Las ß-lactamasas de espectro extendido (BLEE) son enzimas capaces de hidrolizar penicilinas,
cefalosporinas de amplio espectro y monobactámicos que derivan de enzimas tipo TEM y SHV
principalmente (descritas también de CTX, PER, OXA). Se localizan en plasmidios y son
transferibles de cepa a cepa entre especies bacterianas.

¿Qué es el AMCP?
Las AmpC son serin-betalactamasas pertenecientes al grupo 1 de la clasificación de Bush-
Jacoby-Medeiros, presentes de forma natural en diversas enterobacterias y en bacilos
gramnegativos no fermentadores como Pseudomonas aeruginosa y Acinetobacter baumannii.
Estas enzimas son capaces de resistir la inhibición por ácido clavulánico, sulbactam y
tazobactam. Aunque para la detección de AmpC no existen métodos estandarizados por el
CLSI, se han diseñado diversas técnicas con elevada sensibilidad y especificidad. Las
betalactamasas AmpC están asociadas a elevada mortalidad y, a nivel de laboratorio, con
falsos reportes de susceptibilidad antimicrobiana. Por lo tanto, es de vital importancia su
investigación de rutina en los laboratorios de microbiología. En la presente revisión se describe
el contexto de las betalactamasas AmpC y algunos métodos disponibles para su detección
fenotípica.

¿Qué es el KPC?

La KPC Klebsiella Pneumoniae Carbapenemasa,  también conocida como superbacteria, es un

tipo de bacteria resistente a la mayoría de los antibióticos, que cuando invade al organismo es
capaz de producir infecciones graves, como neumonía o meningitis, por ejemplo. 

Generalmente, la infección por Klebsiella Pneumoniae Carbapenemasa suele surgir en

pacientes que se encuentran hospitalizados por un largo período, siendo más frecuente en
niños, ancianos o personas con el sistema inmunológico deprimido, principalmente en aquellos
que se encuentran conectados a respiradores artificiales, que reciben inyecciones
directamente en la vena o que han realizado muchos tratamientos con antibióticos.

La infección por la bacteria KPC puede curarse, sin embargo, esta puede ser difícil de lograr,
debido a que existen pocos medicamentos antibióticos capaces de destruir este
microorganismo multirresistente. Por lo que es importante que se tomen algunas medidas
preventivas en el hospital, debiendo ser adoptadas no sólo por los visitantes del paciente sino
también por todos los profesionales de la salud.