Es el mtodo ms difundido.

Es empleado para determinar la sensibilidad

(resistencia) bacteriana frente a antimicrobianos con concentraciones
conocidas impregnados en pequeos discos de papel secante.

Durante la incubacin, el antibitico difunde
radialmente desde el disco a travs del agar,
por lo que su concentracin va disminuyendo
a medida que se aleja del disco. En un punto
determinado, la concentracin del antibitico
en el medio es incapaz de inhibir al germen.
FUNDAMENTO
El microorganismo es inoculado en la superficie de una placa
de agar, sobre el cual se colocan discos impregnados con
antibiticos a una concentracin conocida. Las placas se
incuban de 18 a 24 horas a 37C.

Segn el dimetro del rea de inhibicin alrededor del
disco se puede clasificar como categora sensible,
intermedio o resistente (S, I, o R) de acuerdo a tablas
publicadas.
PROCEDIMIENTO
1) Seleccionar los antibiticos a probar en el anlisis.
2) Rotular una placa que contiene agar Mueller-
Hinton con la referencia del microorganismo.
3) Preparar y reservar una suspensin del
microorganismo problema, en solucin salina
fisiolgica equivalente al 0,5 en la escala de
McFarland.
INOCULACIN DE LA PLACA
Tomar con el hisopo
la muestra del tubo
presionando en las
paredes del tubo para
eliminar el exceso.
Rotar el hisopo por la
superficie del agar
por lo menos tres
veces para extender
el inculo, rotando la
placa 60.
4)
APLICACIN DE LOS DISCOS DE
ANTIBITICOS
1
2
3
4
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9
Con una pinza estril
aplicar los discos entre 3 a
15 min despus de la
inoculacin.
Los discos deben de estar
separados 24 mm de
centro a centro.
Cantidad: 12 unidades en
placas de 150mm y 5
unidades en placas se
100mm.
Dejar la placa en la estufa
a 37C de 18-24 horas de
incubacin

5)
MEDICIN DE LOS HALOS
Se usa Bernier o una regla
y se mide el dimetro del
halo de inhibicin.
Las longitudes obtenidas
despus se compararn
con estndares que nos
dirn si el medicamento
ser efectivo o no en el
tratamiento.
6)
LECTURA E INTERPRETACIN
DE LOS RESULTADOS
Sensible: El
microorganismo presenta
un gran rea de inhibicin
causada por el frmaco.
95% xito.
Intermedio: Se presenta
un halo de inhibicin mas
reducido.
Resistente: Presenta
muy poco o casi nada de
halo.
Categoras de interpretacin:
7)
PROCEDIMIENTO COMPLETO
LIMITACIONES DE ESTE MTODO
Es un mtodo solo cualitativo, orientado al
tratamiento.
No es aplicable a microorganismos de
crecimiento lento ni a
microorganismos anaerobios.
Antibiticos como la polimixina o
la vancomicina no tienen buena difusin en agar.