Colorantes Hematologicos PDF

LOS COLORANTES HEMATOLOGICOS
QCB.EH ROSARIO SALAZAR RIOJAS

SERVICIO DE HEMATOLOGIA
1
1. El color y los colorantes HEMATOLOGICOS

2. El color y las estructuras celulares
3. Problemas TECNICOS en las tinciones
4. Casos de morfología
2
¿Qué es un COLOR?
Es la longitud de onda del espectro de

LUZ VISIBLE que absorbe y refleja un
cuerpo
Espectro de la luz visible:

380 nm........Violeta
780 nm..........Rojo
3
Un cuerpo es BLANCO cuando “refleja”

todas las longitudes de onda
Un cuerpo NEGRO “absorbe” todas las

longitudes de onda
Un cuerpo ROJO “absorbe” todas las

longitudes de onda menos las rojas
4
BASOFILO NEUTROFILO
¿Qué es un COLORANTE?
Un colorante es una sustancia

con capacidad de transmitir
un color a un sustrato
Debe penetrar e interactuar

con las estructuras
moleculares de las células
HEMATIES PLAQUETAS
5
Las estructuras celulares que

vamos a teñir deben ser
tratadas previamente,
mediante la FIJACION
La FIJACION es un proceso físico-

químico que inmoviliza
determinadas estructuras
celulares, y que permite que
puedan ser posteriormente
coloreadas sin ser arrastradas en
el proceso
EOSINOFILOS 6
Durante la FIJACION se producen varios fenómenos:

Se “coagulan” las proteínas celulares conservando su
arquitectura
Pueden perderse algunas sustancias no esenciales para la
interpretación citomorfológica; los alcoholes disuelven las
grasas
Las extensiones sanguíneas se pueden fijar con calor
seco, alcoholes, formaldehído, acetona, etc. El mejor
fijador para morfología es el metanol (alcohol metílico)
7
¿QUE PRETENDEMOS CON LAS TINCIONES?
1. Identificar las células
2. Identificar sus estructuras internas
Densidad de la cromatina
Presencia de nucléolos
Citoplasma: Características
Granulación
8
CELULA PLASMATICA (LINFOCITO B): A LA IZQUIERDA IMAGEN AL MICROSCOPIO

ELECTRONICO Y A LA DERECHA UN ESQUEMA DE LA MISMA
9
MITOCONDRIAS
NUCLEO
APARATO DE GOLGI
RETICULO ENDOPLASMICO
CON RIBOSOMAS
10
NUCLEO
CONTIENE ADN Y PROTEINAS
ESPECIFICAS
SU MAYOR O MENOR
DENSIDAD, EQUIVALENTE A
MAS O MENOS MADUREZ, SE
TRADUCE POR UNA
COLORACIÓN +/– INTENSA
LA PRESENCIA DE
NUCLEOLOS (ACUMULACION
DE ARN PROPIA DE CELULAS
INMADURAS) SE VE COMO
UNA ZONA CLARA RODEADA
DE UN HALO MAS INTENSO
11
RETICULO ENDOPLASMICO
RUGOSO
ES EL LUGAR DONDE SE
SINTETIZAN LAS PROTEINAS
DE LAS CELULAS
ES MUY RICO EN ARN
(RIBOSOMAS) CUYO
CARACTER ACIDO ATRAE A
LOS COLORANTES BASICOS
A VECES MUESTRA
DILATACIONES QUE AL
MICROSCOPIO PARECEN
PEQUEÑAS VACUOLAS
SU PRODUCCION SE ENVIA AL
APARATO DE GOLGI, Y DE
ESTE AL EXTERIOR
12
ESTRUCTURAS GRANULARES
MITOCONDRIAS
LISOSOMAS
CENTRIOLOS
GRANULOS DE GLUCOGENO
VACUOLAS
OTRAS
SE OBSERVAN CON EL
MICROSCOPIO OPTICO COMO
GRANULOS, MAS O MENOS
GRANDES, QUE ADQUIEREN
DISTINTA COLORACION SEGUN
SU CONTENIDO
13
¿QUÉ “COLOR” TRANSMITE UN COLORANTE?
NEUTROFILO
1. El suyo propio
2. Un color distinto: metacromasia
3. Más de un color: alocromasia

BASOFILO
14
¿COMO “TRANSMITE” EL COLOR?
Coloración = impregnación del sustrato
Reacción química = citoquímica
15
MECANISMO USUAL DE COLORACION
ATRACCION ELECTROSTATICA
+ -
16
Coloración: Afinidad de carga eléctrica del

colorante por el sustrato celular
Directa: Se produce una unión electro

polar entre colorante y sustrato
Indirecta: El colorante necesita una

“pieza de unión” intermedia, a la que se
denomina “mordiente”
17
Los “mordientes” suelen ser metales: aluminio,

molibdeno, cromo, vanadio, etc
Colorante Mordiente Sustrato
El conjunto colorante + mordiente se

denomina “laca”
Ejemplo: Tanto la Hematoxilina como el

Rojo Nuclear emplean el Aluminio como
mordiente
18
Coloración “progresiva”
Se añade al sustrato celular el colorante muy diluido
(por ej. al 1%), y se deja durante tiempos diferentes
en distintas muestras. Se observa la tinción de
distintas estructuras de manera progresiva
Coloración “regresiva”
Partiendo del colorante muy concentrado, se
enjuagan gradualmente las muestras
(“diferenciación”) hasta lograr la mejor visualización
de determinadas estructuras celulares
19
METACROMASIA
Fenómeno tintorial en el que un colorante

determinado tiñe a un sustrato celular en un color
diferente al propio
AZUL DE TOLUIDINA
Tiñe de color ROSA los gránulos de los basófilos
20
METACROMASIA
Los gránulos de los BASOFILOS

contienen mucopolisacáridos
ácidos con grupos sulfatos [-] a
menos de 5 Å unos de otros
Las moléculas de Azul de
Toluidina (intensamente básicas
+) se unen apretadamente
configurando una tonalidad final
rosada (fenómeno de basofilia)
BASOFILO
21
PARTES DE UN COLORANTE
GRUPO CROMOFORO: son grupos de átomos en

resonancia (e- en vibración) que predisponen a
la molécula a ser colorante
FRACCION CROMOGENA: constituyen la mayor

parte de la molécula, a la que da color (“peso y
densidad”)
GRUPO AUXOCROMO: portador de la carga

eléctrica, positiva o negativa, que se une al
sustrato
22
ANILINA
O2N - - NH2+ / Cl-
cromóforo cromógeno auxócromo
23
Grupos cromóforos: -NO (nitroso)

-NO2 (nitro)
-N=N- (azo)
-C=S (tio)
Son grupos atómicos en resonancia (nubes de electrones en

vibración), que confieren una “aptitud” colorante a la molécula.
Aportan el color de base: morado en el caso de la anilina
24
Fracción cromógena
Anillo bencénico
Cuanto mayor sea el peso de esta fracción mas intensa

será la acción colorante
Pueden ser cíclicos (derivados de Benceno, Antraceno o
Naftaleno) o Acíclicos (Etil, Metil,...)
25
Grupos auxócromos
Catiónicos (+): Amina primaria –NH2
Amina secundaria -NH-
Derivados arílicos y alquílicos
Aniónicos (-): Carboxilo –COOH

Sulfónico –SO3H
Oxidrilo –OH
Fosfórico PO4H3
Nota: Actúan como lugar de “enganche” al sustrato celular. Para ser
“activos” deben hallarse como sales solubles (sódicas, potásicas,
cloruros, sulfatos, etc)
26
COLORANTES BASICOS
Los AUXOCROMOS CATIONICOS o

básicos (+) se salifican con los ácidos BASOFILO
(-) del sustrato:
BASOFILIA
afinidad del sustrato celular [-] por

colorantes básicos [+]
BASOFILIA INTENSA
EN EL CITOPLASMA27DE
UN PLASMOCITO
COLORANTES ACIDOS
Los AUXOCROMOS ANIONICOS o

ácidos (-) se salifican con las
sustancias básicas (+) contenidas en
las estructuras celulares:
ACIDOFILIA
afinidad del sustrato celular [+] por EOSINOFILO

colorantes ácidos [-]
28
COLORANTES NEUTROS
Sus moléculas contienen AUXOCROMOS CATIONICOS Y

ANIONICOS, que les permite presentar acidofilia y basofilia
según los sustratos celulares sobre los que se fija. Ejemplo:
Eosinato de azul de metileno
[+]/Cl- [-]/Na+
- +
BASOFILIA CELULA ACIDOFILIA
29
COLORANTES NEUTROS
Suelen emplearse diluidos en

soluciones alcohólicas (metanol con
frecuencia), en las que existe un
equilibrio entre los iones [+] y [-]
NEUTROFILO
Ejemplo: El eosinato de azul de metileno tiñe los núcleos

de las células reaccionando con los ácidos nucleicos
(azul de metileno[+]) y con las nucleoproteínas
(eosinato[-])
30
COLORANTES NEUTROS
Variando el pH del medio en el

que interaccionan el colorante y
los sustratos celulares, se puede
modificar la afinidad y por tanto
la coloración final
31
COLORANTES NEUTROS
Las proteínas celulares contiene grupos aminos y grupos

ácidos:
Cualquier proteína a un pH inferior a su punto
isoeléctrico (PI) se carga [+], con lo que tendrá mayor
afinidad por los colorantes ácidos [aniónicos -].
Por el contrario, si elevamos el pH por encima de su PI
se pondrán de manifiesto sus cargas [-], aumentando su
avidez por los colorantes básicos [catiónicos +].
32
COLORANTES NEUTROS
HEMOGLOBINA: proteína eritrocitaria rica en grupos ácidos

(-COO-) y amino (-NH2). La tinción de MGG proporciones
varias coloraciones:
= Sepia (beige claro), a pH 7 - 7.2
= Rosa a rojo, a pH 6.4 – 6.8 (útil si policromasia)
= Gris-azulada, a pH 7.2 – 7.6
33
pH 7.4
pH 6.8
34
NEUTROFILO
COLORANTES NEUTROS
Normalmente para teñir extensiones de

citologías sanguíneas se emplean
colorantes “químicamente neutros”, con
los que se obtiene una:
TINCION PANCROMATICA,
ó una TINCION PANOPTICA
LINFOCITO
35
En 1.891, ROMANOVSKI empleó una

solución acuosa de Azul de Metileno
para teñir una muestra de sangre con
Plasmodios, en la que habían
aparecido colonias de hongos
después de 3-4 meses.
Sorprendido, observó que los núcleos
de los polimorfo nucleares adquirían
un tono rojo púrpura, mientras el
citoplasma permanecía más o menos
azulado.
TINCION NORMAL CON AZUL DE
METILENO
36
AZUL DE METILENO CH3

N+ auxócromo
CH3
S N cromóforo
cromógeno
CH3
N+
auxócromo
CH3
37
AZUL
AZUL DE METILENO
AZUL-VIOLETA
-CH3
AZUR B
VIOLETA-ROJO
-CH3
AZUR A
ROJO OSCURO
-CH3
VIOLETA DE METILENO
38
El azul de metileno y
sus derivados
aportan 3 colores
principales:
Rojo
Azul
Violeta
39
TINCION PANCROMATICA
Una SOLUCION UNICA,

compuesta por varios
colorantes y sus derivados
químicos en solución aportan
toda una gama de colores
NEUTROFILIA
40
TINCIONES PANCROMATICAS
De los trabajos de ROMANOVSKI, y de otros autores como

LEISHMAN, WRIGTH, GIEMSA, TRIBONDEAU, etc, derivan las
actuales tinciones pancromáticas, basadas en diversas
combinaciones de:
 Azul de metileno y sus derivados (azures)

 Eosina
41
TINCIONES PANCROMATICAS
COLORANTE DE WRIGHT: Resulta de la demetilación del Azul

de Metileno (AM) en un medio muy alcalino (CO3HNa) y a 1
atmósfera de presión, obteniéndose sucesivamente una
mezcla de:
Azul de Metileno
+ Azur B (I)
+ Azur A (II)
+ Violeta de Metileno
42
TINCIONES PANOPTICAS
Empleo sucesivo de 2
o más soluciones
colorantes.
En general son de
mayor calidad
cromática que las
tinciones
pancromáticas
Ejemplo: La Tinción de
May-Grünwald-Giemsa
43
COLORACION DE MAY-GRÜNWALD-GIEMSA
(o panóptica de Pappenheim)
44
GIEMSA: - Eosinato de Azur II (azur A)

- Azur II al 0.76% en glicerina y metanol
MAY-GRÜNWALD (*): Eosinato de AM al 0.2% en

metanol
(*): Eosinato de Azul de Metileno (una molécula de Eosina

unida a dos de Azul de Metileno) al 0.2-0.25% en metanol
45
FIJACION: metanol
MAY-GRÜNWALD
PRECOLORACION: AM
+ eosina
GIEMSA COLORACION FINAL
NOTAS: La adición de pequeñas cantidades de GLICERINA a la solución de

Giemsa aumenta la ionización del colorante y su disponibilidad, y por otra parte
disminuye la formación de precipitados cuando la tinción es prolongada.
Si además se añade una gota de ACETONA (x 20 cc de sol. de Giemsa) se
mejora la penetrabilidad del colorante, hecho muy útil cuando existe una gran
densidad celular 46
EL COLOR DE LAS ESTRUCTURAS CELULARES
47
Para COMUNICAR lo que vemos al microscopio

debemos reconocer determinadas
CARACTERISITCAS de las células teñidas, e
informar en términos concretos que definan
situaciones de normalidad o de anormalidad.
Vamos a tratar a continuación sobre la
TERMINOLOGIA que debemos usar para expresar
nuestros resultados
48
Componentes moleculares implicados en la

química de las coloraciones
Acidos Nucleicos Ac. Fosfórico: anión principal
Nucleoproteínas Alcalinidad de HIS, ARG y LIS
Lípidos (fosfo-) Ácidos, básicos o neutros
Carbohidratos En su mayoría acídicos
(+): alcalino, carácter básico, pH elevado (>7), catión

(-): carácter ácido, pH bajo (<7), anión 49
COLORACION CELULAR
Fijando con metanol y coloreando con

AM/derivados y Eosina, se tiñen:
CROMATINA NUCLEAR
el ADN tiene avidez por el azul de metileno y ERITROBLASTO
MADURO
sus derivados, adquiriendo una tonalidad
violeta oscura-negruzca, más intensa cuanto
más maduro es el núcleo y más compacto.
Las nucleoproteínas son ricas en histonas y
protamina (+), por lo que tienen afinidad por
la eosina, que aporta una tonalidad roja.
ERITROBLASTO
INMADURO
50
COLORACION CELULAR
= HEMOGLOBINA de los hematíes: ya hemos

visto que esta proteína tiene numerosas
cargas eléctricas (+) y también (-). Esto da
lugar a que pequeñas variaciones en el pH de
la tinción modifica su basofilia/acidofilia
= GRANULOS NEUTROFILOS: toman las
moléculas de eosinato de AM sin disociar,
completas
= GRANULOS BASOFILOS: debido a su
contenido ácido (heparina) poseen alta
afinidad por el AM.
51
COLORACION CELULAR POLIMORFONUCLEAR
= GRANULOS EOSINOFILOS: su
contenido fuertemente básico atrae
únicamente a colorantes ácidos,
como la eosina
= VACUOLAS: cuando su contenido
es graso puede ser disuelto por el
alcohol usado como fijador, y
aparecen como estructuras vacías
MONOCITO
52
TERMINOS DE USO HABITUAL SOBRE COLORACION
BASOFILIA BASOFILIA
GRANULAR DIFUSA
BASOFILIA
La GRANULACION del basófilo (-COO-) tiene afinidad por los

colorantes alcalinos (+). Igual ocurre en la basofilia difusa de las
células plasmática, ricas en ARN (-COO-)
53
BASOFILIA
ANILINA
O2N - - NH2+ / Cl-
cromóforo cromógeno auxócromo
54
BASOFILIA
AZUL DE METILENO CH3

N+ auxócromo
CH3
S N cromóforo
cromógeno
CH3
N
auxócromo
CH3
55
AZUROFILIA
A veces se comenta erróneamente que el Azul de

Metileno produce metacromasia, y no es cierto.
Se trata en realidad del fenómeno de AZUROFILIA,
coloración violeta-rojiza y no azul como sería de
esperar, debida a la presencia de pequeñas cantidades
de derivados trimetilados del A.M., denominados Azur
I (o Azur B).
56
AZUROFILIA
La GRANULACION del mielocito neutrófilo es típicamente

azurófila, igual que la de algunos linfocitos
57
ACIDOFILIA
EOSINA
cromógeno COO-/Na+
auxócromo
Br
ACIDOFILIA
Na+/O- O
Br Br
auxócromo cromóforo 58
ACIDOFILIA
La GRANULACION del eosinófilo (proteínas catiónicas [+]) tiene

avidez por los colorantes ácidos [-](como la eosina)
59
HIPOCROMIA
FALTA DE INTENSIDAD en la coloración: en la

imagen la “hipocromia” típica de la falta de
Hb en la anemia ferropénica
60
HIPERCROMIA
REFUERZO DE LA TINCION: en la imagen el

núcleo del eritroblasto es hipercromático
61
ANISOCROMIA
Distinta “intensidad” de la coloración en el

mismo tipo de células
62
TORMINOS DE USO HABITUAL SOBRE COLORACION
POLICROMASIA
Distinto color en el mismo tipo celular
63
CARACTERISTICAS DEL NUCLEO
Redondeado Hendido Lobulado
Linfocito Linfocito Polimorfonuclear

hendido Neutrófilo
64
Arriñonado Irregular Bilobulado
Monocito Monocito Eosinófilo
65
Centrado Excéntrico
Eritroblasto Cél. Plasmática
66
Cromatina de
Cromatina laxa Cromatina densa
densidad media
Blasto Monocito (cromatina Eritroblasto

indiferenciado “peinada”)
67
Dos
Un nucléolo >2 nucléolos
nucléolos
Mononucleosis Blasto maligno Blasto maligno

Infecciosa
68
CARACTERISTICAS DEL CITOPLASMA
INTENSAMENTE BASOFILO
Es decir contiene sustancias con gran
avidez por los colorantes básicos. Y
PLASMOCITO
concretamente las células con gran
actividad de síntesis poseen una gran
basofilia debido a la presencia en el
citoplasma de ARN, que contiene
abundantes grupos fosfóricos (PO3-).
LINFOCITO
“ACTIVADO”
69
DE BASOFILIA MEDIA
Como ocurre en los linfocitos
ligeramente activados o en los
promielocitos
LINFOCITO T ACTIVADO
(MONONUCLEOSIS I.)
70
Bordes netos Bordes irregulares
Linfocito activado Linfocito

(mononucleosis inf.)
71
CARACTERISTICAS DE LA GRANULACION
Eosinófila (ó Basófila Neutrófila

acidófila) (mixta)
Granulocito Granulocito Granulocito

Eosinófilo Basófilo Neutrófilo
72
PROBLEMAS TECNICOS
Vamos a revisar brevemente algunos defectos comunes

en las tinciones de rutina que se realizan en los
laboratorios de Hematología
73
PROBLEMAS TECNICOS
Las extensiones de sangre

para examen morfológico se
deben de realizar
inmediatamente después de
la extracción de la muestra
en EDTA.
Cuando pasan más de 2 o 3
horas, comienzan a aparecer
fenómenos degenerativos en
las células.
CELULA NO IDENTIFICABLE, CON EL

NUCLEO EN DEGENERACION
(CARIOLISIS) 74
PROBLEMAS TECNICOS
La solución de
fijación
precoloración se
ha derramado,
secándose en la
zona dejada al
descubierto
75
PROBLEMAS TECNICOS
Fijación
defectuosa y
depósitos de
colorantes en
torno a los
hematíes
76
PROBLEMAS TECNICOS
Precipitados de
colorante en
“halo” entre las
células
77
PROBLEMAS TECNICOS
Defecto en la fijación: es imposible distinguir la morfología de los

eritrocitos
78
PROBLEMAS TECNICOS
Extensión insuficientemente seca, y

mal fijada por el alcohol
79
PROBLEMAS TECNICOS
Entre otros
excesos se
observa una
sobre-tinción que
impide reconocer
las características
de la cromatina de
los núcleos
80
PROBLEMAS TECNICOS
La cantidad
de solución
fijadora-
colorante es
deficiente
81
PROBLEMAS TECNICOS
Solución de
lavado con
suciedad que
dificulta la
visión
82
T. PANCROMATICA
DEFICIENTE: EXCESO
DE COLORANTE QUE
IMPIDE VER LA
CROMATINA NUCLEAR Y
SUCIEDAD
T. PANCROMATICA
CORRECTA
83
PROBLEMAS TECNICOS
LA GRANULACION ESPECIFICA LA GRANULACION SECUNDARIA

DEL BASOFILO SE HA PERDIDO DEL BASOFILO MUESTRA SU
PARCIALMENTE. AL SER SU TIPICA COLORACION NEGRUZCA
CONTENIDO SOLUBLE EN AGUA, DEBIDO A LA AVIDEZ DE LA
UN EXCESO DE LAVADO LA HA HEPARINA (ACIDO) POR EL AZUL
ELIMINADO DE METILENO (BASE)
84
PROBLEMAS TECNICOS
En las tinciones que usamos, ya hemos comentado que

el color se logra por una atracción electrostática,
estableciéndose enlaces químicos estables aunque no
muy fuertes.
Por ello un lavado excesivo, combinado o no con una
cantidad insuficiente de solución colorante, puede
conducir a una decoloración más o menos intensa
85
SOLUCIONES A LOS PROBLEMAS TECNICOS
Limpieza de los portaobjetos
Eter / Alcohol [1:1]
pH del agua destilada: 7-7.2
Hervir o tamponar
Secado de las extensiones
Mínimo 2 horas; óptimo 24 h

86
SOLUCIONES A LOS PROBLEMAS TECNICOS
Sobrecarga de color: precipitados
Glicerina
Suciedad de fondo
Lavar con A.D.
Conservación
Cubrir con DPX

87
CASOS DE MORFOLOGIA
88
Núcleo
Forma
Cromatina
Nucléolos
Citoplasma
Coloración
Fig. 1: Linfocito Bordes
Gránulos
89
Núcleo
Forma
Cromatina
Nucléolos
Citoplasma
Coloración
Fig. 2: Eosinófilo Bordes
Gránulos
90
Núcleo
Forma
Cromatina
Nucléolos
Citoplasma
Coloración
Fig. 3: Mielocito Bordes
Gránulos
91
Núcleo
Forma
Cromatina
Nucléolos
Citoplasma
Coloración
Fig. 4: Neutr. Bordes

Banda
Gránulos
92
Núcleo
Forma
Cromatina
Nucléolos
Citoplasma
Coloración
Gránulos
93
Núcleo
Forma
Cromatina
Nucléolos
Citoplasma
Coloración
Fig. 6: Basófilo Bordes
Gránulos
94
Núcleo
Forma
Cromatina
Nucléolos
Citoplasma
Coloración
Fig. 7: Neutr. Bordes

Segmentado
Gránulos
95
Núcleo
Forma
Cromatina
Nucléolos
Citoplasma
Coloración
Fig. 8: Monocito Bordes
Gránulos
96
Núcleo
Forma
Cromatina
Nucléolos
Citoplasma
Coloración
Fig. 9: Blasto Bordes
Gránulos
97
Núcleo
Forma
Cromatina
Nucléolos
Citoplasma
Coloración
Gránulos
98

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LOS COLORANTES HEMATOLOGICOS

QCB.EH ROSARIO SALAZAR RIOJAS

1. El color y los colorantes HEMATOLOGICOS

Es la longitud de onda del espectro de

Espectro de la luz visible:

Un cuerpo es BLANCO cuando “refleja”

Un cuerpo NEGRO “absorbe” todas las

Un cuerpo ROJO “absorbe” todas las

Un colorante es una sustancia

Debe penetrar e interactuar

Las estructuras celulares que

La FIJACION es un proceso físico-

Durante la FIJACION se producen varios fenómenos:

¿QUE PRETENDEMOS CON LAS TINCIONES?

1. Identificar las células

2. Identificar sus estructuras internas

CELULA PLASMATICA (LINFOCITO B): A LA IZQUIERDA IMAGEN AL MICROSCOPIO

¿QUÉ “COLOR” TRANSMITE UN COLORANTE?

2. Un color distinto: metacromasia

3. Más de un color: alocromasia

¿COMO “TRANSMITE” EL COLOR?

Coloración = impregnación del sustrato

Reacción química = citoquímica

MECANISMO USUAL DE COLORACION

Coloración: Afinidad de carga eléctrica del

Directa: Se produce una unión electro

Indirecta: El colorante necesita una

Los “mordientes” suelen ser metales: aluminio,

Colorante Mordiente Sustrato

El conjunto colorante + mordiente se

Ejemplo: Tanto la Hematoxilina como el

Fenómeno tintorial en el que un colorante

Tiñe de color ROSA los gránulos de los basófilos

Los gránulos de los BASOFILOS

GRUPO CROMOFORO: son grupos de átomos en

FRACCION CROMOGENA: constituyen la mayor

GRUPO AUXOCROMO: portador de la carga

O2N - - NH2+ / Cl-

cromóforo cromógeno auxócromo

Grupos cromóforos: -NO (nitroso)

Son grupos atómicos en resonancia (nubes de electrones en

Cuanto mayor sea el peso de esta fracción mas intensa

Aniónicos (-): Carboxilo –COOH

Los AUXOCROMOS CATIONICOS o

afinidad del sustrato celular [-] por

Los AUXOCROMOS ANIONICOS o

afinidad del sustrato celular [+] por EOSINOFILO

Sus moléculas contienen AUXOCROMOS CATIONICOS Y

Suelen emplearse diluidos en

Ejemplo: El eosinato de azul de metileno tiñe los núcleos

Variando el pH del medio en el

Las proteínas celulares contiene grupos aminos y grupos

HEMOGLOBINA: proteína eritrocitaria rica en grupos ácidos

Normalmente para teñir extensiones de

En 1.891, ROMANOVSKI empleó una

AZUL DE METILENO CH3

Una SOLUCION UNICA,

De los trabajos de ROMANOVSKI, y de otros autores como

 Azul de metileno y sus derivados (azures)

COLORANTE DE WRIGHT: Resulta de la demetilación del Azul

GIEMSA: - Eosinato de Azur II (azur A)

MAY-GRÜNWALD (*): Eosinato de AM al 0.2% en

(*): Eosinato de Azul de Metileno (una molécula de Eosina