PRACTICA N°5: DETERMINACION DE PROTEINAS EN UNA MUESTRA DE

CARNE POR EL METODO DE BIURET

DARLY ALEJANDRA BEJARANO-COD: 117004106

SAMUEL ESTEBAN ZAPATA GALINDO- COD: 117004144
GRUPO 3

INFORME DE QUIMICA AGROINDUSTRIAL

DOCENTE: MIGUEL ANGEL RAMIREZ NIÑO

Qco-UIS,MSc-UPRM

UNIVERISIDAD DE LOS LLANOS

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS Y RECURSOS HUMANOS
PROGRAMA DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL
LABORATORIO DE QUIMICA AGROINDUSTRIAL
VILLAVICENCIO
2020

OBJETIVOS
  Determinar el contenido de proteínas en una muestra de carne por el método de
Biuret

DATOS
Tabla 1. Datos tomados de muestra de carne magra de cerdo
Peso de la muestra (g) Volumen total colectado (ml)
0,9636 19,00

Tabla 2. Datos para la curva de calibración

Tuvo Volumen (ml) Absorbancia Absorbancia Concentración
promedio (mg/mL)

1 0 0 0 0
2 0,20 0,052 0,053 2,00
0,053
0,054
3 0,40 0,183 0,184 4,00
0,184
0,185
4 0,60 0,283 0,286 6,00
0,286
0,288
5 0,80 0,369 0,370 8,00
0,371
0,371
6 1,00 0,461 0,464 10,00
0,466
0,465

Cálculos de la concentración para la curva de calibración

●Tubo 1
Vadd= 1.0 mL
Vsg= 0.0 ml
 Tubo 2
0,20 ml∗10,0 mg/ml
Vadd= 0,80 mL C2= =20,0 mg/ml
1,00
Vsg= 0.20 mL
  Tubo 3
0,40 ml∗10,0 mg/ml
Vadd= 0,60 mL C3= =4,0 mg/ml
1,00
Vsg= 0,40 mL
 Tubo 4
0,60 ml∗10,0 mg/ml
Vadd= 0,40 mL C4= =6,00 mg/ml
1,00
Vsg= 0,60 mL
 Tubo 5
0,80 ml∗10,0 mg/ml
Vadd= 0,20 mL C5= =8,00 mg/ml
1,00
Vsg= 0,80 mL
 Tubo 6
1,00 ml∗10,0 mg/ ml
Vadd= 0,0 mL C6= =10,0 mg/ml
1,00
Vsg= 1.0 mL

Grafica 1. curva de calibración 2 de proteína

 fig 1. Nivel de proteína en carnes (cerdo magro)

CALCULOS
Tabla 3. Datos para la determinación de proteínas
Tuvo Volumen(ml) Absorbancia Absorbancia
promedio
1 0,20 0,118 0,120
0,122
0,122
2 0,40 0,167 0,174
0,176
0,178
3 0,60 0,271 0,279
0,282
0,284
Ecuaciones para determinar las concentraciones
Pendiente: 0,0482x y= mx + b
Intercepto: 0,0148 y= 0,0482x -0,0148
R² = 0,9926
y−b y+ 0,0148
X= x=
m 0,0482
Y=valor de absorbancia de cada muestra
C1 * V1=C2 * V2
0,120+0,0148
Muestra 1 C2 = =2,80 mg/ml
0,0482
2,80 mg/ml∗1,0 ml
C1= =14,00mg/ml
0,2 ml
Masa=14 mg/ml*19,00 ml =266mg
1g
266mg* =0,266g
1000 m g
 0,266 g
%p/p= *100=27.6%
0,9636 g

0,174+0,0148
Muestra 2 C2 = =3,92 mg/ml
0,0482
3,92mg /ml∗1,0 ml
C1= =9,80 mg/ml
0,4 ml
Masa=9,80mg/ml*19,00 ml =186,2mg
1g
186,2 mg* =0,186g
1000 m g

0,186 g
%p/p= *100=19.3%
0,9636 g

0,279+0,0148
Muestra 3 C2 = =6,09 mg/ml
0,0482
6,09 mg/ml∗1,0 ml
C1= =10,15 mg/ml
0,6 ml
Masa=10,15mg/ml*19,00 ml =192,8mg
1g
192,8 mg* =0,193g
1000 m g

0,193 g
%p/p= *100=20%
0,9636 g

27.6+19,3+20
Promedio %p/p= =22.3%
3

22.3 %
 Determinación de proteínas = *100g=22,3g
100 %
 Desviación estándar
2 2 2

√
S= (27,6−22,3) +(19,3−22,3) +(20−22,3) = ±4,60%
3−1
22.3 ± 4,60
 Coeficiente de variación
 4.60
C.V= *100=20.6%
22,3
 Error relativo
22,3 g−22 g
Er= ∗100=1,36%
22 g
RESULTADOS
Tabla 4. Resultados de los datos experimentales
Muestra Absorbanci Concentració %p/p Desviació Coeficient Proteína Error
s (ml) a promedio n (mg/ml) promedi n estándar e de s (g) relativ
o %p/p variación o
0,2 0,120 14,00 22.3% ±4,60 20,6% 22,3g 1,36%
0,4 0,174 9,80
0,6 0,279 10,15

DISCUSION
Para el análisis de proteínas se contó con una solución de albumina bovina sérica (110 mg/ml) y su
respetiva curva de calibración, de la concentración en función de la absorbancia obtenida la cual
debe ser recta y directamente proporcional para ambas funciones, que se observa en la gráfica 1.
Para la obtención de la muestra se pesaron 0,9636 g de carne magra de cerdo, se le agrego 20 ml de
NaOH 0,5 N, en presencia de calor, seguido de éter de petróleo para remover la grasa de la muestra,
se centrifuga la muestra para separar solidos insolubles (de partículas muy pequeñas difíciles de
sedimentar).
Cada muestra cuenta con una concentración, se halla su respectiva concentración a cada tubo
mediante la ecuación obtenida de la curva de calibración, que se observa en la gráfica 1, la
concentración al multiplicarla por el volumen total colectado de 19 ml, obtenemos la masa de cada
concentración, donde después se incide a obtener el %p/p de cada muestra, para después
promediada cada %p/p de cada muestra para obtener la determinación total de proteínas que posee,
siendo este valor 22,3%, según la tabla 4. La prueba para cuantificación o determinación de dichas
proteínas fue con el método biuret, el cual se caracteriza por una coloración azul celeste cuando los
iones cúpricos son acomplejados por los enlaces peptídicos a pH alcalino, la intensidad de color es
directamente proporcional a la cantidad de proteínas, es decir que entre más intenso sea el azul más
proteínas contiene la muestra. (3) Este método tiene la ventaja de que es poco influenciado por la
composición aminoacídica de las proteínas presentes en la muestra ya que es una reacción en la que
interviene directamente el enlace peptídico. Sin embargo, se trata de un método que, comparado con
otros métodos disponibles, resulta poco sensible, ya que cada ensayo requiere una cantidad de
proteína superior a 0,1 mg, el intervalo regular de trabajo sería entre 1 y 20 mg de proteína. (1)
La comparación de las proteínas definidas en el laboratorio de 22,3 g con los de la etiqueta
nutricional de carne de cardo magra de 22 g según la figura 1, arroja un error relativo de 1,36 %,
una desviación estándar ± 4,60 y un coeficiente de variación de 20,6%, según la tabla 4, con este
% de error notamos que el análisis por el método de biuret y mediante el espectrofotómetro a 550
nm es relativamente preciso, se dice relativamente preciso debido a que al revisar la literatura
vemos que los datos de proteínas en un alimento deben aproximar a la unidad más cercana que
aplicándola al dato del laboratorio obtenido, el valor seria 22 g, que dado el caso el caso en el que se
hiciese el rotulado, este sería el dato para la tabla de etiquetado nutricional. La ingesta diaria de
proteínas está ligada al peso de la persona, partiendo de los resultados clínicos y médicos, se estima
que se necesitan tan solo de 0,6 a 0,8 g de proteína diaria por kilo de peso, es decir un hombre
adulto con peso promedio de 75 kg debe consumir alrededor de 60 g de proteínas al día, al consumir
100 g de carne magra de cerdo se puede obtener 22g de proteínas, experimentalmente se obtuvo un
valor de 22,3 g de proteínas es decir que al consumir 100 g de carne de cerdo se obtiene un tercio de
las proteínas necesarias en un día.(2)

CONCLUSION
Se determinó el contenido de proteínas en la muestra de carne de cerdo por el método de biuret,
siendo de 22,3 g de proteínas por 100 g, es decir 22,3% en %p/p, en cuanto al error relativo dieron
valores pequeños en comparación a los reales por motivo de buen manejo y practica de los métodos,
también se logró identificar experimentalmente proteínas de una manera acertada permitiendo
afirmar que el método de biuret es eficaz para determinar proteínas, al igual se puede decir que la
carne de cerdo tiene una cantidad significativa de proteina.
BIBLIOGRAFIA
1. LABORATORIO DE ALIMENTOS I. Fundamentos y técnicas de análisis de
alimentos.Fundamentos y técnicas de análisis de alimentos. México, Departamento de
alimentos y biotecnología, Facultad de química, México, Departamento de alimentos y
biotecnología, Facultad de química, UNAM,UNAM,2007-2008.
2. MARTINEZ, J. A. (1994). Fundamentos teorico-practicos de nutrición y dietética.
EUNATE. Pamplona.
3. Manual de experimentos de laboratorio para biolaboratorio para bioquímica, química,
Silvia Quesada MoraSilvia Quesada Mora,,Pag. 31 Determinación de Proteínas por el
método de Biuret.