UNIVERSIDAD POLITECNICA DE TLAXCALA. INGENIERIA EN BIOTECNOLOGIA. BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR.

ACTIVIDAD ENZIMATICA DE LOS PEROXISOMAS.

PRESENTAN: y DIDIER CARIN HERNANDEZ HERNANDEZ. y ARTURO DANIEL CEVADA PEREZ. y JATZIRI HERNANDEZ SALAMANCA.

PROFESORA. PROFESOR: JUVENAL JUAREZ HERNANDEZ.

TERCER CUATRIMESTRE. GRUPO: ³D´

FECHA DE ENTREGA: 04 ± AGOSTO ± 2011

MATERIALES: EQUIPO:                   12 tubos de ensaye 1 gradilla 1 bisturí 2 cajas Petri 5 vasos de precipitado de 100 ml 1 pinzas de disección 1 vaso de precipitado de 500 ml 1 pipeta de 10 ml Pizeta Espátula 1 mechero 1 mortero con pistilo 1 bolsa de hielo por grupo 3 pipetas graduadas de 5 ml 1 propipeta 1 pinza moss 1 matraz aforado de 50 ml 6 vasos desechables para gelatina         REACTIVOS: 1 hígado de pollo 1 papa 1 corazón de pollo 1 riñón de pollo 1 rama de apio 100 ml de HCl 100 ml de alcohol etílico al 98% 10 ml de peróxido de hidrógeno al 30 %  50 ml de NaOH 10 % INTRODUCCION: Los peroxisomas se denominas así porque contienen enzimas que utilizan el oxígeno molecular para eliminar átomos de hidrógeno de sustratos específicos. La reacción global sería: RH2 + O2 R + H2O2 Siendo RH2 el substrato oxidable (aminoácidos. acil-CoA. ACTIVIDAD ENZIMATICA DE LOS PEROXISOMAS. ácido úrico. alantoína. enoil-CoA.UNIVERSIDAD POLITECNICA DE TLAXCALA. cetoácidosa. ácido glicólico. etc. ácido glioxílico. OBJETIVO: Que el alumno pueda apreciar y la actividad enzimática de los peroxisomas en diferentes tipos de tejido y por lo tanto de células. . a través de una reacción oxidativa que produce H2O2. QUIMICA ANALITICA.).

6 de apio. según la reacción: 2H2O2 + R'H2 2H2O + R' Siendo R'H2 una de las diversas sustancias anteriormente mencionadas. formaldehído y acetaldehído). 4. variable de unos tejidos a otros. la catalasa. APIO MACHACADO COCIDO CON HCl CON ETANOL AL MOMENTO DE AGREGAR (H2O2) AL MOMENTO DE AGREGAR (H2O2) . A cada tubo adicione el tejido tal como se anota en la tabla: TUBO 1 2 3 4 5 6 TUBO 1 2 3 4 PAPA MACHACADO COCIDO CON HCl CON ETANOL CON NaOH SIN NINGUNA ALTERACION. DESARROLLO: 1. ácido fórmico. 6 de hígado. Mediante su dotación enzimática. Enumerar los tubos del 1 ± 6 y adicione 4 gotas de peróxido de hidrógeno. que difieren según los organismos y tipo de tejido. los peroxisomas pueden intervenir en diversas vías metabólicas. fenoles.Las enzimas que catalizan está reacción son: la oxidasa de aminoácidos. 6 de riñón. No siempre las cuatro enzimas (catalasa. 2. pero al menos la catalasa y oxidasa de hidroxiácidos a están siempre presentes. oxidasa de aminoácidos. Colocarlos en el cristalizador con hielo para conservar la muestra. Cortar 6 cubos de aproximadamente 1 cm3 de papa. bien directamente según la reacción: 2H2O2 2H2O + O2 O utilizando este H2O2 para oxidar diversas sustancias (alcoholes. oxidasa de hidroxiácidos a y oxidasa de urato) aparecen en todos los peroxisomas. El H2O2 resultado de la reacción es un producto altamente tóxico que es eliminado por otra enzima del peroxisomas. 6 de corazón. 3. oxidasa de hidroxiácidos a y oxidasa de urato.

posteriormente se decanta el líquido. HIGADO MACHACADO COCIDO CON HCl CON ETANOL CON NaOH SIN NINGUNA ALTERACION. debe colocar un trozo de cada muestra en un tubo de ensaye con 3 ml de agua destilada. RIÑON MACHACADO COCIDO CON HCl CON ETANOL CON NaOH SIN NINGUNA ALTERACION.5 6 TUBO 1 2 3 4 5 6 TUBO 1 2 3 4 5 6 TUBO 1 2 3 4 5 6 CON NaOH SIN NINGUNA ALTERACION. Anota tus resultados en la tabla. 5. 6. inmediatamente después de agregar el tejido tapa el tubo con el dedo pulgar. . CORAZON MACHACADO COCIDO CON HCl CON ETANOL CON NaOH SIN NINGUNA ALTERACION. Determinar en cada tubo la presencia de O2. prepare un cubo de material biológico en un tubo de ensaye y agregue los reactivos antes mencionados (1ml) y deje reposar 2 minutos. AL MOMENTO DE AGREGAR (H2O2) AL MOMENTO DE AGREGAR (H2O2) AL MOMENTO DE AGREGAR (H2O2) a) Cuando se requiera la muestra cocida. b) Cuando se utilice el HCl. pasado este tiempo agregar las 4 gotas de H2O2. NaOH y ETANOL.

.Aquí se pueden observar algunas imágenes de cómo se realizó el procedimiento antes mencionado de la práctica.

APIO MACHACADO COCIDO CON HCl CON ETANOL CON NaOH SIN NINGUNA ALTERACION. HIGADO MACHACADO COCIDO CON HCl CON ETANOL CON NaOH SIN NINGUNA ALTERACION.OBSERVACIONES: TUBO 1 2 3 4 5 6 TUBO 1 2 3 4 5 6 TUBO 1 2 3 4 5 6 TUBO 1 2 3 4 5 6 TUBO 1 2 3 4 5 6 PAPA MACHACADO COCIDO CON HCl CON ETANOL CON NaOH SIN NINGUNA ALTERACION. RIÑON MACHACADO COCIDO CON HCl CON ETANOL CON NaOH SIN NINGUNA ALTERACION. AL MOMENTO DE AGREGAR (H2O2) SI PRESENTA O2 NO PRESENTA O2 PRESENTA O2 (POCO) PRESENTA O2 (MINIMO) SI PRESENTA O2 AL MOMENTO DE AGREGAR (H2O2) PRESENTA O2 (MINIMO) NO PRESENTA O2 NO PRESENTA O2 NO PRESENTA O2 NO PRESENTA O2 AL MOMENTO DE AGREGAR (H2O2) PRESENTA O2 (POCO) NO PRESENTA O2 NO PRESENTA O2 SI PRESENTA O2 SI PRESENTA O2 AL MOMENTO DE AGREGAR (H2O2) PRESENTA O2 (POCO) PRESENTA O2 (MINIMO) NO PRESENTA O2 PRESENTA O2 (POCO) SI PRESENTA O2 AL MOMENTO DE AGREGAR (H2O2) PRESENTA O2 (POCO) PRESENTA O2 (MINIMO) PRESENTA O2 (POCO) SI PRESENTA O2 SI PRESENTA O2 . CORAZON MACHACADO COCIDO CON HCl CON ETANOL CON NaOH SIN NINGUNA ALTERACION.

por lo tanto. se produce una activación de la síntesis proteica y. Los peroxisomas contienen alrededor de 40 enzimas oxidativas. Forma ovoide y está delimitada por una sola membrana Las proteínas de la matriz del peroxisoma tendrán la señal SKL en el extremo carboxilo de la proteína. el cual va a ser reconocido por el pex5. y cuando las células están suficientemente hidratadas. ¿Cuál es la función de los glioxisomas en la germinación de las semillas de aceite de ricino? Al iniciarse la germinación de las semillas. 5. ¿Cuál es la enzima y como se relaciona con las peroxisomas? Oxidasa flavinica y catalasa 3. . síntesis de colesterol y eter-lipidos. Las funciones del peroxisoma son. El nombre de peróxido se debe porque intervienen en la formación y descomposición de peróxido de hidrogeno (h2o2). catabolismo de purinas y metabolismo del estradiol.CUAESTIONARIO: 1. catabolismo de ácidos grasos de cadena larga. la formación de enzimas hidrolíticas que son las que promueven la movilización de las sustancias de reserva. formación de ácidos biliares. ¿Cuál es la estructura y función de los peroxisomas? Son orgánelos que se originan en el citosol y todas sus proteínas se originan por la vía citosólica por medio de peroxinas. Al cocinar los alimentos demasiado ¿Cómo influye en la actividad de las enzimas? Disminuye la actividad enzimática puesto que al ser cocinados los alimentos disminuyen su oxigenación. metabolismo de radicales libres. ¿Cuál es la función del etanol y HCl sobre las enzimas? Evitan la producción de oxigeno por lo que el peróxido de hidrógeno no tiene reacción en las enzimas 4. detoxificación de alcohol (hígado). 2.

BIBLIOGRAFIA: y Biología celular y molecular.káiser.matsudair. berk. 5a edición.Scottzipursky y darnell .CONCLUSIONES: Se logró el objetivo porque se pudo observar la actividad enzimática que se tiene en los diferentes órganos analizados. Lodish. krieger.