UNIVERSIDAD POLITECNICA DE TLAXCALA. INGENIERIA EN BIOTECNOLOGIA. BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR.

ACTIVIDAD ENZIMATICA DE LOS PEROXISOMAS.

PRESENTAN: y DIDIER CARIN HERNANDEZ HERNANDEZ. y ARTURO DANIEL CEVADA PEREZ. y JATZIRI HERNANDEZ SALAMANCA.

PROFESORA. PROFESOR: JUVENAL JUAREZ HERNANDEZ.

TERCER CUATRIMESTRE. GRUPO: ³D´

FECHA DE ENTREGA: 04 ± AGOSTO ± 2011

).UNIVERSIDAD POLITECNICA DE TLAXCALA. ácido úrico. alantoína. QUIMICA ANALITICA. enoil-CoA. ácido glioxílico. OBJETIVO: Que el alumno pueda apreciar y la actividad enzimática de los peroxisomas en diferentes tipos de tejido y por lo tanto de células. . La reacción global sería: RH2 + O2 R + H2O2 Siendo RH2 el substrato oxidable (aminoácidos. etc. ácido glicólico. cetoácidosa. ACTIVIDAD ENZIMATICA DE LOS PEROXISOMAS. acil-CoA. MATERIALES: EQUIPO:                   12 tubos de ensaye 1 gradilla 1 bisturí 2 cajas Petri 5 vasos de precipitado de 100 ml 1 pinzas de disección 1 vaso de precipitado de 500 ml 1 pipeta de 10 ml Pizeta Espátula 1 mechero 1 mortero con pistilo 1 bolsa de hielo por grupo 3 pipetas graduadas de 5 ml 1 propipeta 1 pinza moss 1 matraz aforado de 50 ml 6 vasos desechables para gelatina         REACTIVOS: 1 hígado de pollo 1 papa 1 corazón de pollo 1 riñón de pollo 1 rama de apio 100 ml de HCl 100 ml de alcohol etílico al 98% 10 ml de peróxido de hidrógeno al 30 %  50 ml de NaOH 10 % INTRODUCCION: Los peroxisomas se denominas así porque contienen enzimas que utilizan el oxígeno molecular para eliminar átomos de hidrógeno de sustratos específicos. a través de una reacción oxidativa que produce H2O2.

los peroxisomas pueden intervenir en diversas vías metabólicas. El H2O2 resultado de la reacción es un producto altamente tóxico que es eliminado por otra enzima del peroxisomas. ácido fórmico. 3. 6 de riñón. 6 de corazón. pero al menos la catalasa y oxidasa de hidroxiácidos a están siempre presentes. Enumerar los tubos del 1 ± 6 y adicione 4 gotas de peróxido de hidrógeno. 6 de hígado. No siempre las cuatro enzimas (catalasa. bien directamente según la reacción: 2H2O2 2H2O + O2 O utilizando este H2O2 para oxidar diversas sustancias (alcoholes. fenoles. que difieren según los organismos y tipo de tejido.Las enzimas que catalizan está reacción son: la oxidasa de aminoácidos. Cortar 6 cubos de aproximadamente 1 cm3 de papa. oxidasa de hidroxiácidos a y oxidasa de urato) aparecen en todos los peroxisomas. DESARROLLO: 1. APIO MACHACADO COCIDO CON HCl CON ETANOL AL MOMENTO DE AGREGAR (H2O2) AL MOMENTO DE AGREGAR (H2O2) . 4. 6 de apio. variable de unos tejidos a otros. la catalasa. oxidasa de hidroxiácidos a y oxidasa de urato. según la reacción: 2H2O2 + R'H2 2H2O + R' Siendo R'H2 una de las diversas sustancias anteriormente mencionadas. Mediante su dotación enzimática. 2. Colocarlos en el cristalizador con hielo para conservar la muestra. A cada tubo adicione el tejido tal como se anota en la tabla: TUBO 1 2 3 4 5 6 TUBO 1 2 3 4 PAPA MACHACADO COCIDO CON HCl CON ETANOL CON NaOH SIN NINGUNA ALTERACION. formaldehído y acetaldehído). oxidasa de aminoácidos.

prepare un cubo de material biológico en un tubo de ensaye y agregue los reactivos antes mencionados (1ml) y deje reposar 2 minutos. .5 6 TUBO 1 2 3 4 5 6 TUBO 1 2 3 4 5 6 TUBO 1 2 3 4 5 6 CON NaOH SIN NINGUNA ALTERACION. inmediatamente después de agregar el tejido tapa el tubo con el dedo pulgar. Anota tus resultados en la tabla. b) Cuando se utilice el HCl. 6. CORAZON MACHACADO COCIDO CON HCl CON ETANOL CON NaOH SIN NINGUNA ALTERACION. 5. Determinar en cada tubo la presencia de O2. posteriormente se decanta el líquido. debe colocar un trozo de cada muestra en un tubo de ensaye con 3 ml de agua destilada. HIGADO MACHACADO COCIDO CON HCl CON ETANOL CON NaOH SIN NINGUNA ALTERACION. pasado este tiempo agregar las 4 gotas de H2O2. AL MOMENTO DE AGREGAR (H2O2) AL MOMENTO DE AGREGAR (H2O2) AL MOMENTO DE AGREGAR (H2O2) a) Cuando se requiera la muestra cocida. NaOH y ETANOL. RIÑON MACHACADO COCIDO CON HCl CON ETANOL CON NaOH SIN NINGUNA ALTERACION.

Aquí se pueden observar algunas imágenes de cómo se realizó el procedimiento antes mencionado de la práctica. .

CORAZON MACHACADO COCIDO CON HCl CON ETANOL CON NaOH SIN NINGUNA ALTERACION.OBSERVACIONES: TUBO 1 2 3 4 5 6 TUBO 1 2 3 4 5 6 TUBO 1 2 3 4 5 6 TUBO 1 2 3 4 5 6 TUBO 1 2 3 4 5 6 PAPA MACHACADO COCIDO CON HCl CON ETANOL CON NaOH SIN NINGUNA ALTERACION. RIÑON MACHACADO COCIDO CON HCl CON ETANOL CON NaOH SIN NINGUNA ALTERACION. AL MOMENTO DE AGREGAR (H2O2) SI PRESENTA O2 NO PRESENTA O2 PRESENTA O2 (POCO) PRESENTA O2 (MINIMO) SI PRESENTA O2 AL MOMENTO DE AGREGAR (H2O2) PRESENTA O2 (MINIMO) NO PRESENTA O2 NO PRESENTA O2 NO PRESENTA O2 NO PRESENTA O2 AL MOMENTO DE AGREGAR (H2O2) PRESENTA O2 (POCO) NO PRESENTA O2 NO PRESENTA O2 SI PRESENTA O2 SI PRESENTA O2 AL MOMENTO DE AGREGAR (H2O2) PRESENTA O2 (POCO) PRESENTA O2 (MINIMO) NO PRESENTA O2 PRESENTA O2 (POCO) SI PRESENTA O2 AL MOMENTO DE AGREGAR (H2O2) PRESENTA O2 (POCO) PRESENTA O2 (MINIMO) PRESENTA O2 (POCO) SI PRESENTA O2 SI PRESENTA O2 . HIGADO MACHACADO COCIDO CON HCl CON ETANOL CON NaOH SIN NINGUNA ALTERACION. APIO MACHACADO COCIDO CON HCl CON ETANOL CON NaOH SIN NINGUNA ALTERACION.

Los peroxisomas contienen alrededor de 40 enzimas oxidativas. Forma ovoide y está delimitada por una sola membrana Las proteínas de la matriz del peroxisoma tendrán la señal SKL en el extremo carboxilo de la proteína. catabolismo de purinas y metabolismo del estradiol. y cuando las células están suficientemente hidratadas. detoxificación de alcohol (hígado). ¿Cuál es la enzima y como se relaciona con las peroxisomas? Oxidasa flavinica y catalasa 3. se produce una activación de la síntesis proteica y. Al cocinar los alimentos demasiado ¿Cómo influye en la actividad de las enzimas? Disminuye la actividad enzimática puesto que al ser cocinados los alimentos disminuyen su oxigenación. el cual va a ser reconocido por el pex5. 5. por lo tanto. metabolismo de radicales libres. ¿Cuál es la función de los glioxisomas en la germinación de las semillas de aceite de ricino? Al iniciarse la germinación de las semillas. síntesis de colesterol y eter-lipidos. ¿Cuál es la estructura y función de los peroxisomas? Son orgánelos que se originan en el citosol y todas sus proteínas se originan por la vía citosólica por medio de peroxinas. formación de ácidos biliares. . 2. ¿Cuál es la función del etanol y HCl sobre las enzimas? Evitan la producción de oxigeno por lo que el peróxido de hidrógeno no tiene reacción en las enzimas 4. la formación de enzimas hidrolíticas que son las que promueven la movilización de las sustancias de reserva. Las funciones del peroxisoma son. catabolismo de ácidos grasos de cadena larga.CUAESTIONARIO: 1. El nombre de peróxido se debe porque intervienen en la formación y descomposición de peróxido de hidrogeno (h2o2).

Scottzipursky y darnell .CONCLUSIONES: Se logró el objetivo porque se pudo observar la actividad enzimática que se tiene en los diferentes órganos analizados. krieger.matsudair. 5a edición.káiser. Lodish. berk. BIBLIOGRAFIA: y Biología celular y molecular.

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