NORMA COVENIN

VENEZOLANA 2164-84

DETERMINACION DE RESIDUOS
DE PLAGUICIDAS
ORGANOCLORADOSY
ORGANOFOSFORADOSEN
ALIMENTOS CON ALTO
CONTENIDO DE GRASA
 TRAMITE

COMITE TECNICO: CT12 PLAGUICIDAS

PRESIDENTE: Mauro Fernández
SECRETARIO: VRMA Zubillaga

SUBCOMITE TECNICO: CT2/SC3 RESIDUOS DE PLAGUICIDAS

COORDINADORA: Vrma Zubillaga

PIUH IC IPANTES

ENTIDAD REPRESENTANTE

AFAQUIMA Elio Hernández

BAVER Roger Van Stepski-Doli~a

CA VIDEA Mar!a Eugenia Ortiz

.CERVECERIA POLAR Leopoldo Rodr!guez c•

INOULAC Miriam Gut!errez

IVIC Santoe,Meléndez

MINISTERIO DEL AMBIENTE V DE LOS RECURSOS Pedro Luis Salazar

NATURALES RENOVABLES-D.I.A. Gladys o. de Rojas

MINISTERIO DEL AMBIENTE Y DE LOS RECURSOS Gustavo Vera

NATURALES RENOVABLES-DIRECCION PROTECCION
AMBIENTAL
MINISTERIO DE AGRICULTURA V CRIA José F. Dura'n

MINISTERIO DE SANIDAD V ASISTENCIA SOCIAL Ofelia Herrera

DIVISION HIGIENE DE LOS ALIMENTOS
MINISTERIO DE SANIDAD V ASISTENCIA SOCIAL Liliane Dot
SECCION PLAGUICIDAS

PENCO Ramón f. Noguera

PLANTAGRD Rogar Van Stepski-Doliwa
ESPALSA Rosmarie de Boer
ÜNIVERSIDAD CENTRAL DE VENEZUELA
FACULTAD DE VETERINARIA Raúl Silvestri

DISCUSIDN PUBLICA:

FECHA DE ENVIO: 11-08-83

DURACIDN: 45 días

FECHA DE APRDBACIDN POR EL CDMITE: 16-11-84

FECHA DE APRDBACION POR LA CDVENIN: 11-12-84

 NORMA VENEZOLANA CDVEN IN
DETERMINACION DE RESIDUOS DE PLA 2164'."'84
GUICIDAS DRGANOCLORADOS Y DRGANO
FOSFDRADDS EN ALIMENTOS CON ALTO
CONTENIDO DE GRASA

1 NORMAS COVENIN A CONSULTAR

COVENIN 1206-82 "Residuos de plaguicidas en alimentos. Definicio-

nes y terminología".

COVENIN 2: 3-003 Residuos _de plaguicidas •. Recpmendacjones para_ la

,preparació.n de c'o>wmnae cromatogréficaa.

2 OBJETO Y CAMPO DE APLICACION

Esta norma contempla el método de análisis para la determinación

de residuos de plaguicidas organoelorados y organofoeforadoe en al!
mantos con un contenido de grasa igual o superior al 2 %.
Este mátodo puede aplicarse a leche, prod~ctoe lácteos, carnes, pe~
cadas, grasas y aceites, huevos y cacao.
Por este mátodo pueden analizarse loe siguientes plaguicidas y/o
sus metabolitos.

2.1 DRGANDCLDRADDS:
o( BHC, e,BHt·, ~BHC ·e lindania), j 9:HC . ( HCB )", heptacloro, heptacloro epó
xido, aldrín, dieldrín, endrfo, op'DDT, ·pp'DDT, pp'TDE(DDD), metox!
cloro, toxafeno, o(..Clordano, 1(clordano, endoeul fan, ~p 'DDE, 8p 'DDE

2.2 DRGANOFOSFDRADDS:
Mala~i6n, pareti6n. (etil paratión), metil parati6n, etión, bromofós,
culmófóe, clorpirifóe, diazin6n.
2.3 INTERFERENCIAS: Las interferencias más comunes son producidas
por residuos de bifenilos policlorados del tipo Aroclor 1254a:L1262 y
en algunos casos del tipo 1242 al 1248 .. La interferencia se debe a .q-tre
:t•
-
1-os tiempo!l.:de retención de estos compuestos son similares a los del
 /2

D.D.T.y sus anáiogos y algunos otros organocloradoa.

La diferenciaci6n entre loa bifenilos policlorados y los plaguicidas
organoclorados debe hacerse por métodos de derivaci6n química o sep~
raci6n cromatográfica.

3 PRINCIPIO

El método se basa en extracci6n y purificaci6n de las muestras, elu-

ci6n selectiva de loe plaguicidas, concentraci6n del eluato y cuant!
ficaci6n por cromatografía de gas-líquido de loa residuos organoclo-
rado con detector de captura electr6nica y de losorgan~fosforados
con detector específico para f6sforo.

4 EQUIPO DE ENSAYO

(Ver NOTA 1)

NOTA 1: El material de vidrio en general debe ser cuidadosamente 1~

vado por el procedimiento siguiente:

a) Se remoja y lava en agua caliente (superior a soºc) con detergen

te cati6nico biodegradable.

b) Se enjuaga sucesivamente con agua de chorro, agua destilada, ac~

tona y. al momento de ser utilizado, con hexano nanogrado.

c) En el caso de las pipetas y el material usado en la concentra-

ci6n de los extractos, después de lavar con detergente se enjua-
ga con agua de chorro y se sumerge en una mezcla sulfo-cr6mica
caliente (soºc aproximadamente) o equivalente, antes de seguir
con el paso b .(Detalles referirse al punto 1 de la Bibliogra-
fía).

4.1 CROMATDGRAFO DE GASES con sistema de inyecci6n sobre columna,

columna de vidrio seg6n 4.2 en horno de temperatura controlada, de-
tector de.captura electr6nica (fuente de tritio o níquel 63), detec-
1
tor específico para fosforo, registrador apropiado con escala com-
 /'3

pleta de 1 milivoltio, cada parte con suministro independiente de

energ{a.

4.2 COLUMNAS CROMATOGRAFICAS de vidrio de 185 cm (6 pies) x 4 mm de

diámetro interno empacadas con:

4.2.1 1,5 % OV~17 (fenil metil silicona)/1,95 % OV-210 6 QF1 (tri-

fluoro propil metil silicona) sobre Chromosorb W de alta eficiencia,
malla 100/120 o equivalente.

4.2.2 4 % SE-'30 (metil silícona)/6 % OV-210 ó QF1 (trifluoro propil

metil silicona) sobre Chromosorb W de alta eficiencia, malle 80/100
o equivalente.

4.2.'3 5 % OV-210 6 QF-1 sobre Chromosorb W de alta eficiencia, ma-

lle 100/120, o equivalente.

4.2.4 '3 %DEGS(dietilen glicol succinato) sobre gas-Chrom P, malla

00/100 o equivalente.

4.2.5 '3% DEGS sobre Chromosorb W, mella 00/100 ~on 0,5% H po

4
3
4.2.6 10 %DC-200 (metil silicoMe) sobre Chromosorb W de alta efi-
ciencis, ma!la 100/120, o equivalente.
4.'3 Micro jeringa de 5 ó 10 f-1• ·~

4.4 Balanza anal!tica con precisión de 0,1 mg.

4.5 Balanza semi-anal!tica con precisión de 0,1 g.
4.6 Balones aforados de 1, 2, 5 y 25 ml o recipientes equivalente••
4.7 Vaeoe de precipitado y balones de 100 ml.
4.8 Pipetas volumétricas de 2 ml.
4.9 Condensador de reflujo.
4.10 Balones de 500 ó 1000 ml.
4.11 Columnas de vidrio con salida reducida o llave de TFE-fluocar-
bomo, de 22 x 250 mm.
4.12 Embudo de separación de ti con llave de TFE-fluorocarbono.
 /4

4.13 Lana t:te· vidrio silanizada lavada con éter de petr6leo.

4.14, APARATOS PARA CONCENTRACION DEL EXTRACTO

-Concentrador-evaporador Kuderna Danisb (K-D) de 500,ml equipado con
tubo recolector en 5 ml gradu~do y columna Snyder de tres bulbos~ o
evaporaqo.~ rotatorio al vacío· provisto de un bal6n de evaporaci6n
1

de 1 l ..

4.15 Material usual de laboratorio.

5 REACTIVOS

5.1 SOLVENTES: éter de petr~leo o hexano, isoocteno. o tolueno,

acetato de etilo, diclorometeno y metano!, todos de frado. ,pláguicida ·
o equivalente.
En cada nuevo lote de solvente debe comprobarse su pureza de la si-
guiente manera: Se colocan 100 ml de solvente en el concentrador
K-D (4.14.1 ) o en un evaporador irotatorio al vacío ( 4~ 14.:?), se eva-
poren hasta 1 ml y se inyecten 5)(1 en el cromat6grafo de gas con
· las condiciones de opereci6n seleccionadas para el análisis de la
muestra. El solvente tendrá la pureza adecuada si no se producen P!
cosen el cromatograma que puedan interferir en el análisis de la
muestra.

5.2 MEZCLA AL 20 % (V/V) DE DICLORDMETANO EN ETER DE PETROLEO

GRANULAD □•
5 □ ), para análisis
5.3 SULFATO DE SODIO ANHIDRO
2 4 (Na
de residuos. Se deben eliminar ~osibles interferencias mediante ca!
cinaci6n por aproximadamente 16 horas a 550°c y se almacena en un r~
cipiente de vidrio herméticamente cerrado.

5. 4 AGUA DESTILADA LIBRE INTERFERENCIAS: Se extr·aen 500 ml de agua

destilada en un embudo de separaci6n de 1 1 con 50 ml de la mezcla
diclorometano-éter de petr6leo (5.2).
 /5

5.5 FLORISIL: Se ~urifice y active el edsorbente calentando e

55 □ c durante 16 horas, se deje enfriar y se almacene en un recipie~
0

te de vidrio herméticamente cerrado.

5.6 FLORISIL HIDRATADO: Al momento de efectuar los análisis se de-

be calentar une éantided apropiada de florisil preparada según 5.5 e
13 □ c durante por lo menos 5 horas (preferiblemente 12-16
0
horas),
se deje enfriar en un desecador y se e~ede 3 % en 1gue libre de in-
terferencias ( 5. 4) en el porcant§lje que asegure la mayor recu~ración
( ver NOTA 2). Se mezcle por agitación durante por lo menos 20 minutos y
se áeJe:'equilibrer en reposo-durante 10 e 12 horas.

NOTA 2: Este edsorbente parcialmente desactivado puede utilizarse

durante los tres días siguientes e su prepereci6n. Pare volver e
utilizarlo hay que repetir los pesos indicados en 5.6.
Cede nuevo lote de florisil hidratado debe ser probado verificando le
recuperación de los distintos plaguicidas, de le siguiente manera:

a) Se preparen columnas crometogréfices con 25 ~ □ ,1 g de florisll

.deaactivedo co8 2,3~4,5 %como se describe en 5~6.

b) Se prepare une mezcle de plaguicidas que contenga por ml, □ .214_9

de HG.B, 0,2rg de BHC; 1)49 ?ª

pp DDT y □ ,5 ~g de Dieldrín y Endrín
1

Se coloca 1 ml de esta mezcla sobre le columna preparada y se eluye

como ee describe en 6. 5. Se concentran los eluatos e 1 O ml.

c) Se inyecten alrededor de 5 JU de los eluetos y la misma cantidad

de una dilución 1: 1 Ü-de la solución de mezcla de plaguicidas prepa-
rada y ee comparan loe cromatogremás.

d) Se calcule el porcentaje de recupereci6n de cede plaguicida.

Le recupereci6n del HCB, Y9HC y DDT deberá ser superior al 90 %.
Pera el Dieldrín y Endrín un 80 % de recupereci6n se considere
aceptable.

5.7 PLAGUICIDAS GRADO PATRON PRIMARIO: De le más alta pureza dis-

ponible.
 /6

5.8 PREPARACION Y CONSERVACION DE PATRONES DE PLAGUICIDAS

PRECAUCION: □ urente le preparación de las soluciones se recomienda el
uso de guantes desechables y evitar la inhalación de vapores.

5. 8.1 PlaguicidH · organoelcn~a'dos.

5.B.1.1 Preparación de soluciones primarias.

Se prepara una soluci6n de 200 ngj},tl pesando 20,0 mg del patró~ pri-
maria (corregidos según el porcentaje de pureza)· y disolviendoloe en
.
isooctano o tolueno hasta 100 ml (Ver NOTA 3).

NOTA 3: En ceso de no disponer de los solventes anteriormente reco-

mendados, utilizar n-hexano, tomando en cuente que, debido a su vola-
tilidad, se reduce la vida útil de les soluciones patrones.
El ~HCH debe disolverse en tolueno, aplicando un poco de calor debi
do e su baja solubilidad en otros solventes.

5.8.1.2 Preparación de salucicnes intermedias.

Se preparen e partir de las soluciones primarias, diluciones con con-
centraciones entre 1 y 10 ng/j(-1 de ceda uno de los patrones. Les S.E!,
luciones deben ser llevadas a temperatura ambiente ántes de realizar
·las diluciones.

5.8.1.3 Preparaci6n de las diluciones de trabajo.

Se preparan por diluci6n de las soluciones intermedias 2 6 3 mezclas
de trabajo conteniendo los diferentes patrones. De acuerdo con les
concentraciones esperadas en las muestras, se recomienda que cada me~
ele sea preparada en 2 ó 3 niveles de concentraci6n (Ver Tabla 1).
Se prepara una mezcla total que incluye los plaguicidas contenidos en
las tres soluciones de trabajo, a las mismas concentraciones de
elles, con el objeto de comprobar una buena resolución de los picos.

5.8.2 Plaguicidas organofoeforados.

5.8.2.1 Preparación de las soluciones primarias.

Se prepara una solución de 200 ng/j',,l pesando ?.O,O ng del patrón pri-
maria ( corregidos según el porcentaje de pureza) y disolv~iendolos en
l.
 /7
acetato de etilo hasta 100 ml.

5.8.2.2 Preparación de las soluciones intermedias.

Se preparan a partir de las soluciones primarias diluciones con con-
centraciones entre 10 y 40 ng/,-.1 de cada uno de los patrones. Las
soluciones deben ser llevadas a temperatura ambiente antes de reali-
zar las diluciones.

5.8.2~3 Preparación de las diluciones de trabajo.

De acue~con las concentraciones esperadas en las muestras, se prep.!.
ran diluciones entre 0,1 y 1 ng/141 en acetato de etilo de los dife-
rentes patrones (Ver NOTA 4).

NOTA 4: Si se va a usar el detector de captura electrónica, estas d!

luciones deben ser hechas en isoactano o n-hexanD.

5.8.4 Conservación de patrones

5.8.4.1 Las patrones primarios pueden ser guardados a temperatura

ambiente en frascos bien cerrados.
En caso de ser guardados en un refrigerador no deben ser destapados
hasta alcanzar la temperatura ambiente.

5.8.4.2 Las soluciones primarias de plaguicidas arganoclorados pue-

den c6nservarse por un período de hasta 12 meses, y las de organofos-
forados hasta 6 meses, ?lmacenados a·-10QC -159C

PRECAUCION: Debe evitarse la exposición prolongada de las soluciones

a la luz solar o lámparas fluorescentes.

5.8.4.3 Las soluciones intermedias de plaguicidas organoclorados pu~

den conservarse hasta 12 meses y las de organofoseforados hasta 6 me-
ses entre - 10° y - 1sºc.

5.8.4.4 Las soluciones de trabajo pueden conservarse a 5QC hasta dos

meses en el caso de loe ~laguicidae organoclorados y 1 mee en el c•-
so de los organofosforados.
 /8

6 PROCEDIMIENTO

6.1 LECHE CRUDA, PASTEURIZADA, EVAPORADA, CONOENSADA~EN POLVO, CHQ

COLATE, CACAO EN POLVO, HUEVO.

6.1.1 Preparaci.6n previa de la muestra.

6.1.1.1 Leche cruda, pasteurizada, evaporada

Se pesen 10,0 g de leche en un vaso de precipitado de 250 ml.

6.1.1.2 Leche condensada.

Se mezclan 10,0 g de muestra con 5 ml de egua destilada libre de in-
terferencias en un vaso de precipitado de 250 ml.

6.1.1.3 Leche en polvo.

Se disuelven 3,0 g de muestra en 10 ml de agua destilada libre de ifr
terferencies a una temperatura de aproximadamente 40°c. Debe evitar
se la formación de grumos.

6.1.1.4 Chocolate y cacao en polvo.

Se pesen 3 1 0 g de muestre y se mezclan con 10 ml de egua destilada
libre de interferencias e· 809C aproximadamente, hasta homogeneizar
le grasa.

6.1.1.5 Huevos.
Se mezclan 5 g de la muestre homogeneizada (yema y clara) con 5 ml
de egua destilada libre de interferencias.

6.1.2 Purificación con florisil.

Se le eReden e la muestra preparada según 6.1.1, 25,0 g de florisil
(5.5) en pequeRes porciones. Durante le edición se mezcle vigorosa-
mente con una varilla de vidrio hasta obtener un polvo fluido, homo-
géneo. Se trasvase e une columna cromatográfica preparada según
6.4, vertiéndolo lentamente dentro del éter de petr6leo ci hexano so-
brenadante, el cual debe ser suficiente pera cubrir todo el florisil
 /9

6.1.3 Preparación del blanco

Paralelamente se prepara un blanco con 10 ml de agua destilada libre
de interferencias (5.4), siguiendo los pasos a partir de 6.1.2.

6.2 CARNE, PESCADO, QUESO, MANTEQUILLA

6.2.1 Extracción de la grasa

6.2.1.1 Carnes y pescados.

Se descongela y se deja escurrir el agua. Se muelen seg6n el conte-
nido de grasa, 25 a 50 g de la parte comestible. Se mezclan con 100
a 200 g de sulfato de sodio anhidro (5.3) y se homogen~izan hasta o~
tener un polvo grueso. Se transfiere el polvo a un balón de 500 ml
(4.10) y se le aNaden 100 ml de éter de petróleo (5.1). Se somete a
reflujo durante 20 minutos. Se deja enfriar y se vierte el sobrena-
dante en otro balón de 500 ml (4.10). Se repite el reflujo en igua~
les condiciones, dos veces más.
Se combinan los extractos del reflujo y se evapora el solvente para
obtener la materia grasa.

6.2.1.2 Queso.

6.2.1.2.1 Se ralla o se corta en pequeMos trozos, seg6n su textura,

una cantidad representativa de la muestra a analizar. Se homogenei-
zan 3O,0 g de la muestra con 60 g de sulfato de sodio anhidro (5.3).

6.2.1.2.2 Se trasvasa la muestra a un balón de 500 ml (4.10) y,se

somete a reflujo con 100 ml de cloruro de metileno en metano! (2.1)
por 1 hora.

6.2.1.2.3 Se deje enfriar y se decanta el extracto filtrándolo a

través de un embudo con lana de vidrío a
un balón fondo redondo de
500 ml. Se repite el reflujo en iguales condiciones.

6~2.1.2.4 Se combinan los extractos y se evapora el solvente.

6.2~1.2.5 Pera eliminar las proteínas coextraídas con la grasa, se

aMaden 20 ml de éter de petróleo (5.1) y se agita por rotación.
 /10

6.2.1.2.6 Se deja reposar durante 15 minutos, se decanta la solu-

ci6n dé grasa filtrándola a través de un embudo con lana de vidrio a
un bal6n da 100 ml (4.7); se evapora el solvente para obtener lama-
teria grasa.

6.2.1.3 Mantequilla
Se fundan aproximadamente 50,0 g de la muestra en un vaso de precipl,
tado a aoºc. Se decanta la capa de grasa, filtr,ndola a través de
un embmdd con lana de vidrio a un vaso da precipitado de 100 ml
(4.7).

6~2.2 Purificaci6n de la. g¡ese e~treída del pescado, carn~, guesg

y mantequilla.
Se pasan con precisi6n de □ ,1 mg, da 0,5 - 0,75 g da materia grasa y
se disuelven en 10 ml de éter-de patr6lao o hexano. Se trasvasa
cuantitativamente aste soluci6n e la columna preparada según 6.4,
lavando con 3 porciones da 2 ml da éter de petr6leo o n-hexano para
enjuagar.

6.2.3 Preparaci6n del blanco.

Paralelamente se prepara un blanco según 6.2.2 utilizando 10 ml de
éter de patr6leo o n-haxano en lugar de le grasa.

6.3 GRASAS V ACEITES

Se procede según 6.2.2. y 6.2.3.

6. 4 PREPARAC ION DE LA COLUMNA °Cff-OMAfOGRAF ICA~.

6.4.1 En una columna crometográfica (4.8) provista de un tap6n de

lena de vidrio (4.10) se vierten- 100 ml da éter de petr6leo o hexan·o

6.4.2 Se a~aden lentamente 25 g de florisil hidratado (5.6) golpee~

do suavemente le columna pare favorecer le compactaci6n. Se espera
que al edsorbente sedimente.

6.4.3 Se abra la llave y se deja drenar solventa hasta 1 cm por en-

cime de le superficie del florisil; se descarta el solvente drenado.
 /11

6.4.4 Para las muestras preparadas según 6.1.2, ee agrega una cent!
dad adecuada de solvente de manera que recubra el florisil adiconal
que acompaf'fa la muestra.

6.5 ELUCION V PURIFICACION

Se eluyen los plaguicidas con 300 ml de cloruro de metileno - ~ter
de petróleo (5.2) o cloruro de metileno - hexano (5.2) y se recogen
en un recipiente apropiado según el aparato de ooncentraci6n a utili
zar.

6.6 CONCENTRACION

6.6.1 Con evaporador rotatorio al vacío.

6.6.1.1 Se conecta al evaporador rotatorio el bal6n que contiene el

eluato, sin utilizar siliconas ni grasas en lea conexiones.

6.6.1.2 Se concentra el extracto lentamente a una temperatura de

50-60°C, aplicando un ligero vacío hasta un volumen de 1 a 3 ml aprQ
xiJnadamente. Luag'i::i s:e l~ev~ e riquedad con una corriente suave de
nitrógeno limpio y seco.

6. 6.1. 3 Se lava el balón con pequef'f~s porciones de n-hexano o isooc-

tamo y se trasvasa el extracto cuantitativamente a un balón aforado
de 5 ml. Si se sobrepasa el en~ase, se concentra hasta el aforo me-
diante una corriente de nitr6geno limpio y seco.

6.6.2 Con evaporador Kuderna Danish

· 6.6.2.1 Se transfiere cuantitativamente el elueto el evaporador con

pequenes porciones de n-hexeno.

6.6.2.2 Se instale le colum~e Snyder de 3 bulbos en el tope del ev~

parador y se evapore en un bef'fo de María. Terminada le evaporaci6n,
se retira el evaporador del baf'fo; se retira el frasco de la columna
aún caliente y se lava con pequenas porciones de n-hexano, recogien-
do los lavados en un tubo recolector.
 /12

6.6.2.3 Se deconecta el tubo 1 se coloca en un bafto de María (70QC)

y se evapora culdadosamente la.muestra con una corriente de nitr6g~;
no seco y limpio, hasta-uh volumen de aproximadamente 5 ml.

6.7 ANALISIS CROMATOGRAFICO

6.7.1 Acondicionamiento de lee columnas.

(Detalles en la Norma Ve-
/
nezolane CDVENIN 2:3-003 Puntos 6.11 a 5.14).
Se instale le columna empacada en el horno del cromet6grefo sin co-
nectar le salida el detector. Se caliente el horno hasta le temper~
tura recomendada pera le fase líquida y se ajuste el flujo de ges de
arrastre según se especifica en la T~bla 2. Se mantiene la columna en
estas condiciones por el tiempo mínimo estipulado en la misma tabla.

6.7.2 Después del acondicionamiento, se deje enfriar el horno y se

conecte le columna el detector; se ajusten les temperaturas del blo-
que de inyecci6n, horno, detector y le velocidad de flujo de ges de
arrastre,_ según las condiciones recomendadas e~ la Tabla 3.

6.7.3 Pare el análisis de plaguicidas orgenoclorados, se reálizen

los ajustes necesarios pera que 25 pg de Linden □ produzcan el menos
une desvieci6n del 30 % de le escale del papel del aparato registre-
. dar.

6.7.4 Se obtiene une identificeci6n de los plaguicidas de interés

inyectando cada uno de ellos por separado y estableciendo sus tiem-
pos de retenci6n relativos el Aldrín pera los plaguicidas orgenoclo-
redos y ~1 Pareti6n pera los orgenofosforedos.

6.7.5 Con une microjeringe (4.3) se inyecten cantidades entre 2 y

5 J.tl de mezcle petr6n o de diluc.i6n de plaguicidas, preparadas según
5.8.1~3 o 5.8.2.3, con concentraciones cercenes el rango esperado en
la muestre.
Se espere hasta que todos los picos posibles hayan eluído (aproxima-
damente 20 - 30 minutos).
 /13

6.7.6 A continuaci6n, se inyecta bajo las mismas condiciones croma-

tográficas el extracto de la muestra usando, preferiblemente, el mi~
mo volumen del patr6n.

7 EXPRESION DE LOS RESULTADOS

7.1 Se determina el área del pico para cada uno de los componentes
patrones de interés que estén presentes en el extracto de le muestra
y se calcula el factor de respuestas ttí f '' para cede uno, mediante le
siguiente ecueci6n:
Ps
f -------
As

Donde:

f = Factor de respuesta ( ng¡ unidades de área)

As= Aree del pico correspondiente al patr6n (unidades de
área).
Ps = Peso del patr6n (ng).

7.2 Se determinan las áreas de los picos de aquellos plaguicidas

identificados de interés y se calcula le concentraci6n en la cantidad
original de muestre usando le siguiente ecuacipn:,fVer NOTA 5).

CONCENTRAC ION ( mg/kg de grasa') -= f x AcxVe X'

10
-3
Vi X M
Donde:

f = Factor de respuesta (rt9 / unidades de áfea)

Ac = Aree del pico correspondiente al componente de la muestra
(unidades de área).
Ve = Volumen final del extracto concentrado ~ ) -
Vi = Volumen inyectado pera el análisis ;/1 ).
M = Mase de grasa utilizada ( g).
 /14

NOTA 5: Pare ~l ceso de leche se determine le mese de grasa tomando

en cuente el porcentaje de grasa de le muestre.

B INFORME

El informe debe eontener lo siguiente:

8.1 Feche de ensayo.

8.2 Identificación complete de le muestre.

8. 3 Contenido de plaguicida er. -.g/Kg de grasa.

8.4 Realizado segdn le Norma CDVENIN 2:3-005.

8.5 Observaciones.

8 IBLIOGRAF IA

1) EPA-600/8-80-038 (June 1.980), Manuel of Anelyticel Methods for

the Anelysis of Pesticidas in Humane end Environmentel semples
(U.S.A).

2) Stijve T. end Cerdinele"E., Mitt. Geb. Lebensmittelunters.

Hyg. 65, 131-150 (1.974).

3) Stijve T. end Brand E, Deutsche Lebensmittel-Rund~ohau TI., 2,

41-42 (1.977).

4) ADAC Officialmethods of analyeis of tha association of offi-

th
cial analytical chemests, 13 edition (1980) 29.001-20.018.
Multiresidue methods fg~ elorinated end certain organophosphoruos
pesticidas.
 /15

TABLA 1. Mezcles de patrones recomendadas.

Solución de Trebejo I Concentración de pg(,e:l

Compuesto !l f
-ª-
Aldrín 5 10 20
Lindeno ( 0 HCH) 5 10 20
Dieldrín 10 20 40
o,p'DDT 15 30 60
p,p'DDT 15 30 60

Solución de Trebejo II

Comeuesto

(,HCH 15 30 60
d HCH 5 10 20
Heptecloro-epóxido 10 20 40
p,p~DDE 10 20 40
p,p~TDE (DDO) 15 30 60

Solución de Trebejo III

ComE!uesto

ex HCH 5 10 20
o,p'-DDE 10 20 40
o,p'-TDE (DDD) 15 30 60
Heptecloro 5 10 20
Endrin 20 40 80

Otros plaguicidas (~ndo~ulfen, '(y o<...clordano, metoxicloro y toxafe-

no) pueden ineiuíree en cualquiera de estas mezcles siempre y cuando.
no se presenten problemas con la resolución de sus picos en el cro-
metograma.
 /16

TABLA 2. Parámetros recomendados para el acondicionamiento

de columnas cromatográficas.

' Tem. del Flujo de gas de Tiempo Mí-

Fase
Horno, ºc. arrastre, ml/min. nimo, hr.

1,5 % OV-17/1,95 % Qf-1 245 30 70 48

4 % SE-30/6% OV-210 245 30 90 72

5 % OV-210 245 30 60 48

10,% DC - 20 245 30 70 48

3 %DEGS * 235 30 90 20 **-'

* Columna no recomendada para análisis de rutina. Para uso confir-

matorio únicamente.

** No exceder este tiempo.

 TABLA 3. Condiciones de opereci6n recomendadas(*).

FASE ESTACIONARIA (**) 1,5 % □ V-17 ·4 % SE-3O 5 % 0V-210. 3 % DEGS' 10 % DC 200

+1,95 % QF-1 +6 % □ V-210

TEMPERATURA DE LA
COLUMNA (ºc) 180-210 180-200 180 185 180-210

TEMPERATURA DEL BLOQUE

DE INYECCI0N (ºc) 200-250 200-250 200-250 200-250 200-250

VELOCIDAD DE FLUJO DEL

GAS DE ARRASTRE. 30-90 30-90 30-60 30-90 30-60

TEMPERATURA DEL DETEf,

T0R DE CAPTURA ELECTRQ
63
NICA (ºC)c Ni 250-300 250-300 250-300 250-300
H 3 (Máxi'~*) 200 200 200 200 200
2
TEMPERA.TURA DEL DETEC.-.
t□R ESPECIFICO PARA 250-300 250-300
fOSFOR0 (QC). (***)
..____,
~
..,:¡
,,
( Continúa pag. 18)
 /18

(*) Los datos de la tabla son indicativos. El analista selec-

cionará las condiciones 6ptimaa para lograr la mejor reeo-
lici6n de los picos y eficiencia de la columna.

(**}', Se debe dar preferencia a la columna empacada con

1,5 % OV-17/1,95 % OV-210 6 QF-1 sobre Cromosorb W(4.2.1)

(***) .Refierase al manual del IM'fUÍpo.

 COVENIN
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