#5.

Caracterización química de aminoácidos y proteínas.

Sergio Stiven Castañeda Piña. cód.121003413

Objetivos.

 Comprobar la solubilidad de la proteína albúmina, en diferentes solventes.

 Desnaturalizar la albúmina mediante diferentes agentes.

 Analizar el comportamiento de aminoácidos y proteínas en diferentes

reacciones químicas.

Resultados.

Solubilidad de una proteína a diferentes valores de pH.

 Clara de huevo diluida + agua destilada: tuvo una solubilidad parcial. pH=8

 Clara de huevo diluida + NaCO: tuvo una solubilidad total. pH= 10

 Clara de huevo diluida + NaOH: tuvo una solubilidad total. pH=13

 Clara de huevo diluida + HCl: se formó una precipitación mayormente en el

fondo de la sustancia. pH=5

Calor.

 2 ml Albumina calentada: se volvió sólida y tomo una coloración blanca.

Alcohol.

 2 ml de albumina sin diluir + 2 ml de etanol al 90%: se formó un precipitado

en el centro de la sustancia de color blanco, la parte inferior de la sustancia
sigue de color amarillenta traslucida y la parte superior de la sustancia de
color transparente más liquida.

Metales pesados.
  2 ml de albumina diluida + AgNO3 al 5%: se formó un precipitado de color
blanco donde hicieron contacto las dos sustancias, en tan solo una parte
de la sustancia.

Ácidos orgánicos fuertes.

 2ml de albumina diluida + 1ml de ácido tricloroacetico al 5%: se formó un

precipitado de color blanco donde hicieron contacto las dos sustancias, se
expandió más que el anterior.

Reacciones químicas.

Ninhidrina.

 1ml de albumina diluida + 1ml de solución ninhidrina: la sustancia se volvió

de color morado oscuro.

Biuret.

2ml de albumina diluida + 2ml de reactivo Biuret: la sustancia se volvió de color

morado un poco translucida.

Xantoproteica.

 3ml de albumina sin diluir + 5 gotas de NaOH al 40%: se formó un

precipitado de color amarillo traslucido y en el fondo del tubo hay líquido de
color amarillo un poco más oscuro traslucido.

Ensayo de azufre.

 2ml de albumina sin diluir + 5 gotas de NaOH al 40% + hervir 2 minutos +

10 gotas de acetato de plomo: se formó una sustancia liquida de color
naranja oscuro.

Millon.

 2ml de albumina sin diluir + 5 gotas de reactivo Millon + 3 gotas de NaNO:

se formó un precipitado de color blanco, en la parte superior de la
sustancia se torna de color morado caro translucido, en la parte media de
 la sustancia de torna de color naranja clase translucido y en el fondo de la
sustancia se observa de color transparente.

Ácido Glioxilico.

 2ml de albumina sin diluir + 2ml de ácido acético glacial + 2ml de ácido
sulfúrico: se formó un precipitado de color blanco en el centro de la
sustancia, en la parte superior se torda de color morado oscuro translucido,
en la parte inferior de la sustancia de color morado muy oscuro y en lo
último de la sustancia en el fondo se torna de color amarillo claro.

Análisis de resultados.

Solubilidad de una proteína a diferentes valores de pH.

Aguan destilada.

 Al no haber sales en el agua des ionizada, solo hay solubilidad y no

desnaturalización.

NaCO y NaOH.

 Las sales neutras ejercen efectos pronunciados sobre la solubilidad de las

proteínas globulares. A baja concentración, las sales incrementan la
solubilidad de muchas proteínas, fenómeno que recibe el nombre de
solubilización por salado. Las sales de los iones divalentes La capacidad
de las sales neutras para influir en la solubilidad de las proteínas está en
función de su fuerza iónica, que constituye una medida, tanto de la
concentración como del número de las cargas eléctricas existentes en los
cationes y los aniones aportados por la sal.

HCl.

 Las proteínas son polipéptidos naturales de elevado peso molecular.

Poseen una estructura primaria, que es la secuencia aminoacídica, que es
una cadena lineal. Al ser un ácido y reaccionar de manera fuerte con la
 proteína cambia drásticamente la estructura de está generando así su
desnaturalización y formando un precipitado.

Desnaturalización de proteínas.

Calor

 Cuando la temperatura es elevada se desorganiza la envoltura acuosa de

las proteínas por lo tanto se desnaturalizan, se produce la agregación y
precipitación de la proteína.
Alcohol.
 El alcohol va desnaturalizando las proteínas del huevo, que se encuentran
principalmente en la clara.  Cuando las proteínas se desnaturalizan pierden
parte de su estructura molecular y por eso su aspecto cambia.
Metales pesados.
 También cumplen una función de desnaturalizar las proteína pero no tiene
tal efectividad para poderlo hacer completamente en la sustancia ya que es
un metal pesado y no se distribuye por toda la sustancia si no solo donde
tuvieron contacto.
Ácidos grasos fuertes.

 La solubilidad de una proteína es mínima en su punto isoeléctrico, Los

iones H+ y OH- del agua con similares en su reacción, afectan a la
envoltura acuosa de las proteínas y la carga eléctrica de los grupos ácidos
y básicos de las cadenas laterales de los aminoácidos.

Reacciones químicas.

Ninhidrina.

 La prueba nos da positivo para la presencia de aminoácidos y proteínas.

Las sustancias con al menos un grupo amino y uno carboxilo libre tienen
una reaccionan con la ninhidrina, para saber si es positivo se debe
observar una coloración amarillo o violeta, estas características las
comparten los aminoácidos y las proteínas, gracias a esto se pueden
identificarla.

Biuret.
  La prueba nos indica que la prueba es positiva ya que se formó un color
violeta debido a la formación de un complejo de coordinación entre los
iones Cu+2 y los pares de electrones no compartidos del nitrógeno que
forma parte de los enlaces peptídicos. El reactivo de Biuret contiene
CuSO4 en solución acuosa alcalina (gracias a la presencia de NaOH).

Xantoproteica.

 La prueba da como resultado positivo debido a la coloración amarilla que

tomo al formarse nitrocompuestos, algunas proteínas están compuestos
por estos aminoácidos que también ración (fenilalanina, triptófano y
tirosina), reconoce el grupo bencénico que poseen estos aminoácidos.

Ensayo de azufre.
 Cuando las proteínas contienen aminoácidos azufrados tenemos como
reacción que la sustancia se torna de color marrón a negra.

Millon.
 La presencia en la molécula de la tirosina produce una coloración roja
debido a la formación de nitrotirosina, por adición de mercurio en el
transcurso del calentamiento se transforma en una sal mercúrica de color
rojo, el reactivo de Millon es una mezcla de nitrato y nitrito mercúrico
disueltos en ácido nítrico concentrado.

Ácido Glioxilico.
 La muestra nos indica que tenemos presencia de triptófano. Se formaun
anillo entre rojo y violeta donde se unen las dos sustancias, la prueba para
el triptófano y para las proteínas que contienen triptófano. La solución se
mezcla con ácido glioxílico y se agrega ácido sulfúrico concentrado.

Bibliografías.

 V. Chechetkin, V.I. Voronianski, G.G. Pokusay, Practicas de Bioquímica del

ganado y aves de corral, Editorial Mir-Moscu, 1994, paginas 128-149.
 Vazquez-Contreras, Bioquímica y Biología Molecular en línea. Instituto de
QuímicaUNAM.
 Baird, C; 2001. Quimica Ambiental. Editorial Reverte. University of Western
Ontario. 622 pp.
 Timberlake, K. (2013). Química general, orgánica y biológica: estructuras
de la vida. México: Pearson Educación.