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LIPIDOS

Arboleda Valencia Lina María (lina.arboleda04@usc.edu.co)


Medina Delgado Carol Lizeth (carol.medina00@usc.edu.co)
Siachoque Meza Laura Vanessa (laura.siachoque00@usc.edu.co)
Triviño katherin (katherin.8c@gmail.com)
________________________________________________________________________
Facultad de Ciencias Básicas
Universidad Santiago de Cali
Programa de Química
Laboratorio de Bioquímica
Profesora Luz Dary Caicedo
Santiago de Cali
2019-2

RESUMEN
En la práctica se realizó diferentes pruebas fisco químicas para el análisis de lípidos
tófano, con la formación de dos fases y un “anillo”.

Palabras Clave: Lípidos, instauraciones, ácidos grasos, solubilidad, saponificación.

Determinar la solubilidad de las grasas en diversos solventes.

2. Realizar una saponificación sencilla y determinar algunas propiedades de los jabones.

3. Establecer la presencia de ácidos grasos libres y de insaturaciones en las grasas.

4. Realizar una prueba para el reconocimiento de esteroles.

Objetivos

 Experimentar de manera práctica Los lípidos son sustancias naturales que no se


algunas de las principales reacciones disuelven en agua. realizan un conjunto
fisicoquímicas de los lípidos. extraordinario de funciones en los seres vivos.
 Determinar solubilidad, presencia de algunos lípidos son reservas energéticas
ácidos libres e instauraciones. vitales. otros son los componentes
 Realizar pruebas de saponificación y de estructurales primarios de las membranas
reconocimiento de esteroles. biológicas. además, otras moléculas lipídicas
actúan como hormonas, antioxidantes,
INTRODUCCIÒN pigmentos, o factores de crecimiento vitales y
1
vitaminas. en este capítulo se describen las
estructuras y las propiedades de las principales 𝑎(𝑑𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑞𝑢𝑒 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑒 𝑙𝑎 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎)
clases de lípidos que se encuentran en los 𝑅𝑓 =
𝑏(𝑑𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑞𝑢𝑒 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑒 𝑒𝑙 𝑠𝑜𝑙𝑣𝑒𝑛𝑡𝑒)
seres vivos, así como las propiedades [Ecuación 1]
estructurales y funcionales de las
biomembranas. [1]
Alanina:
Desde el punto de vista químico los lípidos
3.3 𝑐𝑚
pueden dividirse en dos grupos principales: 𝑅𝑓 = = 0.47
Simples y Compuestos. 7.0 𝑐𝑚

Los esteroides y las vitaminas liposolubles se Ácido aspártico:


consideran también lípidos Derivados. Muchos 1.0 𝑐𝑚
𝑅𝑓 = = 0.14
de estos compuestos son, sin embargo, 7.0 𝑐𝑚
alcoholes y no ésteres y por lo tanto no
pueden saponificarse. [2] Leucina:
5.0 𝑐𝑚
𝑅𝑓 = = 0.71
7.0 𝑐𝑚

Mezcla:
METODOLOGÍA
3.3 𝑐𝑚
𝑅𝑓 = = 0.47
7.0 𝑐𝑚
RESULTADOS 1.0 𝑐𝑚
𝑅𝑓2 = = 0.14
7.0 𝑐𝑚
Cromatografía en capa fina (TLC)
5.0 𝑐𝑚
Una vez desarrollado el cromatograma tal como 𝑅𝑓3 = = 0.71
7.0 𝑐𝑚
se describe en la metodología, se procedió a
calcular los Rf de cada aminoácido y de cada
uno de los que estaba compuesta la mezcla. El
valor de Rf se calculó de la siguiente manera:

Figura 1. Esquema del cálculo del Rf.

Figura 2. Resultados del Cromatograma.


2
Reacción con Ninhidrina

En esta prueba se obtuvo un resultado positivo


para todos los tubos de ensayo, ya que los
colores obtenidos (azul, violeta, marrón y
amarillo para el caso de la prolina) son
evidencia cualitativa de la presencia de
aminoácidos en cada tubo.

Figura 5. Resultados reacción con nitroprusiato de


sodio.

Reacción con ácido glioxílico

En esta prueba se obtuvo como resultado


positivo para el triptófano, esto debido a la
formación de dos fases y posteriormente la
formación de un “anillo”.
Figura 3. Resultados reacción con Ninhidrina.

Reacción xantoprotéica

En esta prueba se obtuvo como resultado


positivo (color amarillo) para la fenilalanina,
triptófano y tirosina.

Figura 6. Resultados reacción con ácido glioxílico.

Figura 4. Resultados reacción xantoprotéica.

Reacción con nitroprusiato de sodio

Para esta prueba se obtuvo un resultado


positivo (color rojo) para la cisteína.
3
Figura 7. Formación de las dos fases y anillo para el
triptófano.

DISCUSIÓN DE LOS RESULTADOS

Cromatografía en capa fina (TLC)

Debido a que los Rf obtenidos de los


componentes de la mezcla son iguales a los
patrones empleados, se infiere que la mezcla
está compuesta por los tres aminoácidos
patrones. i. 𝑁𝑖𝑛ℎ𝑖𝑑𝑟𝑖𝑛𝑎 + 𝑎𝑚𝑖𝑛𝑜𝑎𝑐𝑖𝑑𝑜 →
ℎ𝑖𝑑𝑟𝑖𝑛𝑑𝑟𝑎𝑛𝑡𝑖𝑛𝑎 + 𝑎𝑙𝑑𝑒ℎ𝑖𝑑𝑜 + 𝐶𝑂2 + 𝑁𝐻3
Reacción con Ninhidrina
ii. ℎ𝑖𝑑𝑟𝑖𝑛𝑑𝑟𝑎𝑛𝑡𝑖𝑛𝑎 + 𝑁𝐻3 + 𝑁𝑖𝑛ℎ𝑖𝑑𝑟𝑖𝑛𝑎 →
La ninhidrina es un oxidante energético que por
una desaminación oxidativa de los aminoácidos 𝑐𝑜𝑚𝑝𝑙𝑒𝑗𝑜 𝑑𝑒 𝑐𝑜𝑙𝑜𝑟 + 3𝐻2 𝑂
conduce a la formación del aldehído
correspondiente, con liberación de amoniaco y Figura 8. Reacción general de la ninhidrina con los
gas carbónico y formación de la hidrindrantina aminoácidos. [3]
(ninhidrina reducida). La molécula de Reacción xantoprotéica
hidridantina, en presencia de otra de ninhidrina,
condensa a través del amoniaco produciendo Los anillos aromáticos presentes en algunos
una estructura denominada indanona o púrpura aminoácidos reaccionar con el ácido nítrico
de Ruhemann, manifestando un color rojizo, concentrado formando nitroderivados de color
excepto para la prolina, hidroxiprolina y en amarillo o anaranjado[4]. Por esta razón, esta
menor medida para la histidina. reacción permitió identificar de manera
El grupo α-amino de los aminoácidos forma cualitativa la presencia de tirosina, fenilalanina
complejos coloreados con la ninhidrina; violeta y triptófano.
azuloso en la mayoría de los aminoácidos cuyo
grupo amino es primario, amarillo para la Reacción con nitroprusiato de sodio
prolina e hidroxiprolina y café para la
asparagina que tiene un grupo amido en la La cisteína es un aminoácido en cuya
cadena lateral. [2] estructura química hay un grupo sulfhidrilo, que
le permite interaccionar con otras moléculas.
Por ejemplo, la cisteína puede formar un
puente disulfuro con otra cisteína, dando lugar

4
a una cistina; al adicionar el hidróxido de esto permite inferir que la muestra contiene
amonio, se rompe el enlace disulfuro y se dichos aminoácidos y presentan un Rf,
forman dos aminoácidos de cisteína que tienen semejante, misma coloración y desplazamiento
grupos sulfhidrilo libres. El nitroprusiato de
en el papel cromatográfico, por tanto se hace
sodio interacciona con la cisteína, produciendo
un compuesto soluble de color rojo. [4] evidente que dichos aminoácidos en la muestra
son cualitativamente los mismo estándares que
Reacción con ácido glioxílico se tenían en el papel cromatográfico. [6]

El anillo indólico presente en la cadena lateral 3. Reacciones presentadas.


de los α-aminoácidos libres o haciendo parte de
péptidos y proteínas se puede reconocer  Reacción de nihidrina con aminoácidos:
mediante la reacción con el ácido glioxilico a pH
ácido, debido a que forma complejos de
coloración violeta o amarillo violeta[4]. Por esta
razón, es posible por medio de esta prueba
identificar al triptófano. [4]

PREGUNTAS

1. ¿En qué consisten las manchas


observadas?

La reacción de los aminoácidos con ninhidrina


se debe a la presencia del grupo α–NH2 en los
mismos. La posición del aminoácido en la placa
Figura 9. Reacción de la ninhidrina con los
se es revela con ninhidrina, apareciendo una
aminoácidos. [3]
mancha de coloración azul-violeta. La
ninhidrina reacciona con los aminoácidos
formando aductos coloreados según la
reacción. Debido a estas reacciones que sufren
los aminoácidos y a su polaridad se evidencian
en el papel cromatógrafico manchas de color
 Reacción xantoproteica
azul-violeta, lo cual es evidencia de la
presencia de dichos aminoácidos y determinar
el comportamiento de los aminoácidos que
contiene la mezcla problema. [5]

2. ¿Qué explicaciones pueden darse a las


diferencias de migración observadas?

La determinación de muestras estándar de


aminoácidos con ninhidrina, con lleva a la
observación de las respectivas reacciones de
coloración por la presencia del grupo α–NH2 en
Figura 10. Pasos de la reacción de la ninhidrina con
los mismos, por lo cual en la muestra problema los aminoácidos. [3]
se evidenciaron tres (3) tipos de coloración,

5
 Reacción con nitroprusiato de sodio CONCLUSIONES

Paso 1.
REFERENCIAS

[1] Trudy McKee, James R. McKee. Las bases


moleculares de la vida, 5e. pp 108

[2] Luz Caicedo., Guía de bioquímica,


Paso 2. Universidad Santiago de Cali, 2019, pp.
75.

[3] Teijón J., Fundamentos de Bioquímica


estructural, 2ª Ediciòn, Tebar, 2006, pp
64.

[4] Giraldo G., Guía de bioquímica, Universidad


del Quindío, 2010, pp. 96.

[5] Voet, D., Voet, J. y Pratt, C. 2007.


Figura 11. Pasos de la reacción con nitroprusiato Fundamentos de Bioquímica. Buenos Aires,
de sodio. [3] Argentina. Ed. Médica Panamericana, pag 333

[6] BOHINSKI. 1991 Bioquímica. 5ed., Pearson.


México. Pag. 202,208

 Reacción con ácido glioxílico

[3]
Figura 12. Reacción con ácido glioxílico.

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