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PRACTICA

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DETERMINACIÓN DE MEDIDAS MICROSCÓPICAS

INTRODUCCIÓN

En el mundo microscópico, es difícil determinar el tamaño de los organismos. En biología


microscópica, la unidad de medida más frecuentemente usada es la micra, que equivale a 0.001
mm y cuya abreviatura se representa por la letra griega μ. Como vemos en la Tabla 1, un milímetro
equivale a 1.000 μ y 1 μ equivale a 1.000 milimicras. De tal forma que una μ es igual a 0.001 mm y
un milímetro cuadrado equivale a 1.000.000 de micras cuadradas. De esta forma, la micra es la
unidad de medición para objetos tan pequeños que para ser vistos requieren del uso del
microscopio.
En los laboratorios de investigación se utiliza el micrómetro para obtener medidas microscópicas,
sin embargo, si no se dispone de este equipo para medir con exactitud las medidas de un objeto,
es posible estimar el tamaño de este objeto bajo el microscopio, determinando el diámetro del
campo visual del microscopio (DCV).

Tabla 1. Equivalencias de unidades de longitud


Unidad Símbolo Valor (m) Valor Valor Valor Valor (nm)
(cm) (mm) (μ)
Metro m 1.0 100 1000 1000000 1000000000
Centímetro cm 0.01 1.0 10 10000 10000000
Milímetro mm 0.001 0.1 1.0 1000 1000000
Micrómetro μ 0.000001 0.0001 0.001 1.0 1000
Nanómetro nm 0.000000001 0.0000001 0.000001 0.001 1.0

Sabemos que cuanto mayor es el aumento, menor es el diámetro del campo. Por lo tanto, el
diámetro del campo es inversamente proporcional a la ampliación, como vemos en la figura.

Figura 1. Diferentes tamaños del campo visual dependiendo de la aplicación usada


Si pudiéramos colocar una regla transparente bajo el microscopio,
podríamos determinar exactamente qué tan ancho es el diámetro del
campo en los diferentes aumentos y determinar el tamaño
aproximado del objeto que se está viendo. Como lo anterior no es
posible, haremos una aproximación simplemente colocando un
pedazo de papel milimetrado en un portaobjetos y viéndolo bajo el
microscopio.

PROCEDIMIENTO: Corte un pedazo de papel milimetrado de 1 cm2 y móntelo sobre el


portaobjetos. Agregue una gota de agua y luego coloque el cubreobjetos evitando la formación de
burbujas. Coloque la preparación sobre la platina del microscopio y observe con menor aumento
(4X). El papel milimetrado debe quedar de tal manera que una línea pase por todo el centro el
campo visual. Ver Figura 2.

Figura 2. Medición del diámetro del campo visual utilizando papel milimetrado

Cada bloque en el papel cuadriculado tiene 1 mm de ancho. Cuente cuántos bloques de 1 mm se


necesitarán para atravesar el diámetro del campo de cada objetivo. Ej.: en la Figura 3
encontramos el campo del objetivo de 4X. Para atravesarlo se necesitarán 4.2 bloques, es decir:

4.2 mm = 4200 μ

Figura 3. Campo visual de 4X


Ahora complete la tabla 2, calculando los DCV para cada uno de los objetivos usando la fórmula
que aprendiste en este laboratorio. Toma el objetivo de 20X como el de menor poder y úsalo para
calcular el resto de las casillas:

Ocular Objetivo Aumento DCV ( μ) DCV (mm)

10X 20X 200X 850


10X 500X 0,34
1200X
10X 200X

Tabla 2. Diámetros del campo visual en objetivos microscópicos

Como puede ver, cada vez que aumenta la ampliación, el bloque en el papel cuadriculado aumenta.
Así, si intentamos estimar el tamaño del campo utilizando papel cuadriculado con el objetivo de 40
X, el bloque será tan grande que no podremos ver las líneas claramente y será difícil, si no
imposible, estimar el tamaño del campo (Figura 4.).

4X 10X 40X

Figura 4. Aumento de la ampliación y del diámetro del campo

Tendremos entonces que usar una fórmula matemática para estimar el tamaño del campo en 40 X,
usando los diámetros calculados para los objetivos menores (4X y 10X):
𝟏𝟕𝟎𝟎 𝝁 𝟒𝟎
=
𝑫(𝒎𝒂) 𝟏𝟎
Donde:
D(me) es el diámetro del objetivo de menor aumento O (ma) es el objetivo de mayor aumento
D(ma) es el diámetro del objetivo de mayor aumento O (me) es el objetivo de menor aumento
1. Calcule el tamaño aproximado de las células vegetales
observadas en la imágen de microscopio. Considera el
objetivo con los que se observa la imagen.

Figura 5. Células vegetales y cloroplastos observados a 40X

Estoma

2. Calcule el tamaño aproximado


de los estomas observados en la imágen de
microscopio. Considera SÓLO a los estomas para
calcular su tamaño.

Figura 6. Estomas en hojas de vegetales a 40X.

3. Calcule el tamaño aproximado de los linfocitos


Linfocito
observados en la imágen de microscopio. Considera
SÓLO a los linfocitos para calcular su tamaño.

Figura 7. Linfocitos en frotis sanguíneo a 10X.

CUESTIONARIO
1. Calcule el tamaño en micras de un microorganismo con base en los siguientes datos: El

Lin
diámetro del campo visual con el objetivo de 3,2 X es de 0.98 mm. Este organismo al
observarlo en el objetivo de 40X ocupa la tercera parte del diámetro del campo visual.
¿Cuál es el tamaño real del microorganismo observado?
2. En un microscopio cuyo objetivo de mayor aumento es 40X y el objetivo de menor
aumento es 5X determine:

a. Área del campo visual de mayor aumento, cuando el diámetro del campo visual de
menor aumento es de 500 micras.

b. El diámetro en angstrom del campo visual de mayor aumento.

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