PRINCIPIOS DE MICROSCOPIA Y MICROMETRIA.

SNEIDER HERNÁNDEZ ÁLVAREZ.

MARÍA CAMILA MIRANDA CASTILLO.
MARIANA ATENCIA ACOSTA.

LIC. ERWIN CAMACHO

Lab. Biología y Botánica.

Universidad de Sucre.

Programa de Ingeniería Agrícola – Cód. (222) (SEM 1. 2019-2)

Biología y botánica.

Sincelejo, sucre.

2019.
RESUMEN.

El presente informe tiene como propósito realizar cálculos o mediciones

aproximadas de células y de otras estructuras, a través de estrategias
microscópicas las cuales se encuentran en los principios de microscopia y
micrometría; también conoceremos algunas de las distintas técnicas y métodos
específicos utilizados para observar objetos tan pequeños, que no puedan ser
alcanzados por el ojo humano.

El conocer las todas las formulas necesarias y el campo visual de un microscopio

con determinado aumento de x y cualquier objetivo, nos permitirá la observación y
análisis de todos estos microorganismos para así conocer más sus características.
INTRODUCCION.

Al observar células u objetos microscópicos, tenemos una imagen clara de ellos.

Pero no la idea real de su tamaño, ya que solo sabemos que se encuentra
aumentado en n veces, según el ocular y el objetivo utilizado. En algunos campos
de la biología es indispensable saber el número de células por campo óptico, el
tamaño de cada una de ellas, el tamaño aproximado de un determinado
microorganismos etc. datos que permiten deducir valores de importancia para una
determinada investigación

La parte que se encarga de averiguar el tamaño aproximado de un objeto se

denomina micrometría

El microscopio además de aumentar la imagen del objeto sirve para hacer

mediciones, y en general para hacer estudios morfológicos de células y tejidos

Para conocer el tamaño de los diversos objetivos microscópicos existen varias

técnicas micrométricas (laminillas y oculares con escalas). En ausencia de los
anteriores se puede recurrir al uso del papel milimetrado y convirtiendo los
milímetros a micras se puede saber el tamaño aproximado de los objetos
observados
MARCO TEORICO.

Poder de resolución: Es la capacidad que tiene el microscopio de distinguir o

resolver, dos objetivos separados de una distancia mínima. Mientras menor sea la
distancia que se pueda distinguir entre dos puntos en un campo microscópico
mayor el poder de resolución del microscopio.

Poder de aumento: Es la capacidad que tiene el microscopio de aumentar el

tamaño de los objetos que han sido resueltos, es independiente el poder de
resolución.

El poder de aumento se obtiene de multiplicar el número de aumento que

determina el ocular por aquellos que terminar separadamente cada uno de los
objetos.

Campo visual: Es el área ocular que se observa al mirar por el microscopio y

varían según las lentes utilizadas.

Milimicra: unidad de longitud equivalente a la milésima parte de una micra

=0,001 µ.

Micra (µm): unidad de longitud equivalente a una millonésima parte de un metro

=10-6 m (0,000001 m).

Milímetro (mm): unidad de longitud equivalente a la milésima parte del metro

=10-3 m (0,001 m).

Angstrom: unidad de longitud equivalente a 10-8 cm, 10-10 metros, ó 0.1

nanómetros – 10-10 m (0,0000000001 m).

Nanómetro: unidad de longitud que equivale a una mil millonésima parte de un

metro

=10-9 m (0,000000001 m).

OBJETIVOS

Comprender algunos conceptos básicos de microscopia tales como poder de

resolución, poder de aumento, campo visual con relación a los lentes utilizados

Realizar cálculos o mediciones aproximadas de células y de otra estructuras,

atreves de estrategias microscópicas

Identificar algunos problemas comunes en este campo, y utilizarlo mediante la

solución de campo visual del microscopio.

Adquirir destreza manual y matemática para calcular el diámetro óptico en

varias unidades microscópicas

Calcular el área de algunas células y de estructuras celular en forma de

práctica y por concepto matemático
METODOLOGIA Y MATERIALES

1. Primero ajustamos el microscopio para la muestra que íbamos a haber, luego

tomamos un pedacito de papel milimetrado e hicimos un montaje, de 3,2X y 10X;
no usamos el objetivo de 40X por argumentación y disposición práctica, ya que el
uso de este objetivo para analizar una muestra de fragmento de papel milimetrado
imposibilita la observación de este mismo, ya que el campo visual desarrollado por
este aumento es inferior al área del fragmento de papel milimetrado. Luego
observamos la muestra y realizamos un cálculo de la cantidad de cuadros
existentes dentro del campo óptico, con ayuda de fórmulas que proporcionó el
docente, logramos así hallar el área de un cuadrito de la hoja milimetrada, y de
esta manera pudimos hallar el tamaño de varios cuadros juntos.

2. Después hicimos un montaje utilizando una pequeña porción de la parte interna

de una cebolla blanca, luego enfocamos con el objetivo de 10x y seleccionamos
una célula que tuviera una forma geométrica mejor definida y que hiciera coincidir
su largo con el diámetro horizontal del campo y que uno de sus extremos estuviera
en el límite del campo visual. Las células que observamos fueron las que estaban
dentro del diámetro horizontal, hicimos el conteo de cada una de las células, tanto
como en el diámetro horizontal, como las de la parte vertical y calculamos el área
de la célula.

Microscopio compuesto

Porta objetos

Cubre objetos

Hoja milimetrada

Cebolla cabezona (Allium cepa)

Muestra de resultados obtenidos.

OBJETO AUMENTO ANALISIS Y

ESTUDIADO. (X) IMAGEN (MUESTRA) CONCLUSIONES.

Aquí observamos un
cuadro y menos de la
mitad del siguiente, de
HOJA 10X esto determinamos que
MILIMETRADA el diámetro del campo
visual del objetivo 10X,
experimentalmente, 1.8
mm.

Se evidencian 3
células en campo
horizontal, 11 células
en el campo vertical y
CEBOLLA
se sabe que su área
BLANCA
10X es igual a 70.63 um2

ANALIZIS DE RESULTADO.

La práctica de laboratorio de micrometría nos permitió obtener los siguientes

resultados:

1. A1/A2=D2/D1 donde A1 es igual a la medición con menor aumento y A2 se

refiere a la medición con mayor aumento. D1 es igual a diámetro del campo menor
y D2 significa diámetro del campo mayor.

En el enfoque 3.2x se obtuvo un diámetro de de 4mm el cual convertimos a micras

así:
1mm __________ 1000u

4mm ___________ x

X= 1000u • X 4mm
________________ = 4000u
1mm
X= 4000u
Esto quiere decir que el diámetro observado en el enfoque 3.2x fue de

4000u.

Luego enfocamos con en el objetivo 10x donde solo obtuvimos un cuadrado y un

pedazo de otro, es decir, se conoció 1mm del diámetro y un fragmento X ; y para
conocer X se fijó mentalmente una distancia imaginaria sobre el cuadro que se
conoció; a la cual le dimos un valor aproximado de 0.3mm al obtener este valor lo
sumamos con el valor del cuadrado ya conocido que era de 1mm + el valor
aproximado de la otra parte del otro cuadro que era de 0.3, lo que nos sirvió para
hallar el valor aproximado de el diámetro con aumento en 10x. Al obtener este
resultado lo hicimos de la siguiente manera:

1mm ___________ 1000u

1.3mm _________ x

X= 1000Ux1.3mm
_________ =1300u
1mm

X=1300u

Lo quiere decir que el diámetro observado en 10x es de 1300u

En este resultado se observó que a medida de que aumentaba la capacidad de

aumento de los objetivos, de esa misma forma disminuía el diámetro del campo
visual; lo que significa que el campo visual es inversamente proporcional a la
capacidad de aumento de los objetivos, ya que cuando uno aumenta, el otro
disminuye.
2. En el estudio de las células de la cebolla logramos determinar el número de
células que habían en un diámetro en forma horizontal y en forma vertical, esto
nos permitió hallar por medio de algunos cálculos el área del diámetro de la célula
de la cebolla.

Primero tuvimos que hallar cuanto media cada célula, y procedimos así:

Aumento

100x _________ 1.25 mm

400x_____________x
- 200x

𝐴1 • 𝐷1
A1 ______ D1 𝐷2 =
𝐴2
A2 ______ D2

D2 ____ 200X D2 ____ 400X

D2 = 100X • 1,25 mm D2 = 100X • 1,25 mm

________________ ________________
200X 400X
D2= 0,625 mm D2= 03125 mm

Área de un cuadrado.

En donde: b= diámetro de h = 11 células, 1.25/11 = 0.113 mm

10x/número de células en el campo
horizontal A= 0.625mm • 0.113mm

h= diámetro de 10x/número de = 70.63 um2

células en el campo vertical El área es igual a 70.63 um2
b= 3 células, 1.25/3 = 0.625 mm

CUEST
CUESTIONARIO.

1. ¿El poder de resolución del microscopio compuesto cuantas veces es mayor

con relación al poder de resolución del ojo humano?

R/T: el microscopio compuesto es igual a 0.2um, y el ojo humano a 0.2mm=

200um, es decir, el poder de resolución del microscopio compuesto es 1000 veces

mayor que el del ojo humano.

2. ¿Cuáles estructuras son visibles al ojo humano, teniendo en cuenta los poderes
de resolución respectivamente?

R/T: las estructuras que son visibles al ojo humano son las que van desde 400 a
700 nanómetros, aunque hay algunas personas que pueden ver desde 380 a 780
nanómetros. Estas estructuras pueden ser un rango de luz visible para el ojo
humano la cual necesita de un color que depende de la pigmentación de los
objetos, de la composición de la luz incidente en el y de las características del
sistema visual del observador; esta pigmentación es la responsable de reflejar la
luz incidente en el objeto.

3. Si se utiliza un microscopio con ocular 10x y objetivo 20x para mirar un objeto
¿cuantas veces se aumentan las imagen de este si se mira con un ocular 6x y un
objetivo 40x.?

R/T: (10x) (20x)=200xb.

(6x) (40X)=240x

Esto quiere decir que la imagen aumento 40x o 40 veces.

4. Convierta 0.25 mm a u, A y 1300 A a, mu, u, mm.

1mm___1000u
0.25mm___x

X= (1000U)(0.25mm)
_______________ = 250u
1mm

X=250u
1u _________ 10-6 m
250u_______x

X= (10-6 m) (250u)
____________________ = 0.000025m
1u

X=0.000025m

10-10 m ____________1A
0.00025m___________________x

X= (1A) (0.00025m)
______________ = 2.500.500A
10-10 m

1300A a, m

1 A _____________ 10-10 m
1300 A _____________x

X= (10-10 m) (1300A)
_____________________ = 1.3 * 10-7 m
1A

X=1.3 * 10-10 m = 0.00000013 m

5. El diámetro del campo visual de un microscopio es de 1500u cuando se observa
con un ocular de 10x y un objetivo de 10x. ¿Cuál será el diámetro del campo
visual si se observa con un objetivo de 40x y el mismo ocular?

R/T: (10x) (10x)= 100x = 1500u. b = (40x) (10x)= 400x

Entonces el diámetro del campo visual =

400X (1500u) 100x= 60,000,000

6. Que ocurre con el poder de resolución en la medida que aumenta el poder de

aumento. ¿Es la misma relación con la distancia límite de resolución?

R/T: el poder de resolución del microscopio no guarda relación alguna con el

aumento de la misma, diríamos que eso son dos aspectos muy distintos, ya que el
poder de resolución te permite diferenciar 2 puntos entre sí, en cambio, el poder
de aumento te permite observar cada vez más grande el objeto dado, por ejemplo,
un instrumento te puede aumentar una imagen sin lograr reconocer alguna figura,
pero si le agregas un cierto poder de resolución, el objeto además de aumentarte,
te permite ver con mucha más nitidez.
CONCLUSIONES

 El diámetro del campo visual de un microscopio disminuye a medida que

se aumenta el poder de aumento, pues aumenta el poder de resolución.

 Las magnificaciones básicas del microscopio compuesto son: 32X, 100X,

400X y 1000X.

 Entre el poder de aumento de un microscopio y el poder de resolución

de éste no existe relación de proporcionalidad alguna.

 La relación existente entre el poder de resolución y la distancia límite de

resolución es inversamente proporcional.
BIBLIOGRAFÍA

Curtis, Helena. Biología. Editorial Médica Panamericana, Argentina.

Kimball, Jhon. Biología.

Ford, Ben. 1951. The theory of the microscope. Bausch and Lombinc, New York.

Moreno, Jaime y Cal. 1980. Manual de laboratorio de Biología General.

Universidad de Antioquia 14 p, Medellín.