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ESCUELA COLOMBIANA DE INGENIER IA JUILO GARAVITO

Practica No.1 El Microscopio. Principios opticos´ manejo

Carlos Eduardo Zambrano Caicedo

Octubre 22 de 2013 Bogota,´ Colombia

carlos.zambrano-c@mail.escuelaing.edu.co

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y

Resumen—El objetivo de este laboratorio es entender la opera- cion´ y funcionamiento del microscopio, conociendo los elementos que lo componen y su manejo practico. Tambien,´ observaremos objetos y describiremos las estructuras que conforman a cada uno de ellos.

Index Terms—Microscopio, optica,´ microscop´ıa.

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I. INTRODUCCI ON

E N la medicina y en ciertas areas´ de ciencias naturales, el microscopio es un elemento indispensable como he-

rramienta para el estudio de los diferentes microorganismos

y estructuras que conforman materiales que se encuentran en

nuestro entorno. Convirtiendose´ as´ı en un elemento que ayuda

al avance cient´ıfico. Por eso en este laboratorio se va a conocer

un poco el manejo del microscopio, tambien´ en el estudio de tejidos para conocer su textura y elementos que la conforman.

II.

OBJETIVOS

1. Conocer los componentes y los principios opticos´ del microscopio.

2. Desarrollar habilidades para el manejo del microscopio optico.´

3. Realizar montajes humedos´ para la observacion´ mi- croscopica.´

4. Describir y analizar las estructuras observadas.

III.

MARCO TE ´

ORICO

III-A. Microscopio

El microscopio (de micro-, pequeno,˜ y scopio, observar), es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado pequenos˜ para ser vistos a simple vista. El tipo que se va a utilizar en este laboratorio y el primero que se invento´ es el microscopio optico.´ Se trata de un instrumento optico´ que contiene dos o mas´ lentes que permiten obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por refraccion.´

El microscopio fue inventado por Zacharias Janssen en 1590. En 1665 aparece en la obra de William Harvey sobre la circulacion´ sangu´ınea al mirar al microscopio los capilares sangu´ıneos y Robert Hooke publica su obra Micrographia. En 1665 Robert Hooke observo´ con un microscopio un delgado corte de corcho y noto´ que el material era poroso, en su conjunto, formaban cavidades poco profundas a modo de celditas a las que llamo´ celulas.´ Se trataba de la primera observacion´ de celulas´ muertas. Unos anos˜ mas´

tarde, Marcello Malpighi, anatomista y biologo´ italiano, observo´ celulas´ vivas. Fue el primero en estudiar tejidos vivos al microscopio.

Fue el primero en estudiar tejidos vivos al microscopio. Figura 1. Microscopio optico´ III-B. Microscopio optico´

Figura 1. Microscopio optico´

III-B. Microscopio optico´

Un microscopio optico´ es un microscopio basado en lentes opticos.´ Tambien´ se le conoce como microscopio de luz, que utiliza luz o ”fotones”. Los microscopios de Leeuwenhoek constaban de una unica´ lente pequena˜ y convexa, montada sobre una plancha, con un mecanismo para sujetar el material que se iba a examinar, la muestra o especimen.´ Este uso de una unica´ lente convexa se conoce como microscopio simple, en el que se incluye la lupa, entre otros aparatos opticos.´

El microscopio utilizado en esta practica fue un microscopio compuesto.

III-C.

Un microscopio compuesto tiene mas´ de una lente objetiva. Los microscopios compuestos se utilizan especialmente para

Microscopio Compuesto

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examinar objetos transparentes, o cortados en laminas´ tan finas que se transparentan. Se emplea para aumentar o ampliar las imagenes´ de objetos y organismos no visibles a simple vista. El microscopio optico´ comun´ esta´ conformado por tres sistemas:

El sistema mecanico´ esta´ constituido por una palanca que sirve para sostener, elevar y detener los instrumentos a observar.optico´ comun´ esta´ conformado por tres sistemas: El sistema de iluminacion´ comprende un conjunto de

El sistema de iluminacion´ comprende un conjunto de instrumentos, dispuestos de tal manera que producen las ranuras de luz.para sostener, elevar y detener los instrumentos a observar. El sistema optico´ comprende las partes del

El sistema optico´ comprende las partes del microscopio que permiten un aumento de los objetos que se pretenden observar mediante filtros llamados ”de antigel subsecuente”.dispuestos de tal manera que producen las ranuras de luz. El microscopio compuesto esta´ formado por

El microscopio compuesto esta´ formado por dos lentes biconvexas. Cuando la luz pasa a traves´ de la lente objetivo, se concentra en el foco de esta.´ Si el objetivo se coloca a una distancia mayor que el foco, se produce una imagen real, si es menor que este´ se obtiene una imagen virtual. La imagen obtenida en este punto se convierte en imagen para el lente ocular, lograndose´ as´ı ampliar la imagen de acuerdo con el poder combinado de los dos lentes. Para poder pensar que un numero´ mayor de lentes se pueda obtener una imagen bastante grande, es necesario combinar los diferentes poderes de las lentes que son:

El Poder del aumento: Permite magnificar la imagen. Corresponde al aumento ( A ) dado por la relacion:´ : Permite magnificar la imagen. Corresponde al aumento (A) dado por la relacion:´

(A)

= T amanodelaimagen˜

T amanodelObjeto˜

De esta forma el aumento total se calcula de la siguiente forma:

A T OT AL = A OBJET IV O A OCULAR

El poder de resolucion´ : capacidad del lente para pre- sentar dos puntos separados. Depende de la longitud de : capacidad del lente para pre- sentar dos puntos separados. Depende de la longitud de onda de la luz utilizada y de la apertura numerica´ (N.A.) del objetivo.

P oderdeResolucion =

τ

2 N.A.

El poder de definicion´ :toma imagenes´ claras con con- tornos definidos. :toma imagenes´ claras con con- tornos definidos.

El poder de foco o campo:posibilita observar varios planos con el mismo enfoque. :posibilita observar varios planos con el mismo enfoque.

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:posibilita observar varios planos con el mismo enfoque. 2 Figura 2. Partes a senalar˜ del Microscopio

Figura 2. Partes a senalar˜

del Microscopio optico´

III-D. Microscop´ıa

Es el conjunto de tecnicas´ y metodos´ destinados a hacer visible los objetos de estudio que por su pequenez˜ estan´ fuera del rango de resolucion´ del ojo normal. Si bien el microscopio es el elemento central de la microscop´ıa, el uso del mismo se requiere para producir las imagenes´ adecuadas, de todo un conjunto de metodos´ y tecnicas´ afines pero extr´ınsecas al aparato. Algunas de ellas son, tecnicas´ de preparacion´ y manejo de los objetos de estudio, tecnicas´ de salida, procesamiento, interpretacion´ y registro de imagenes,´ y de Canas.˜

Exceptuando tecnicas´ especiales como las utilizadas en microscopio de fuerza atomica,´ microscopio de iones en campo y microscopio de efecto tunel,´ la microscop´ıa generalmente implica la difraccion,´ reflexion´ o refraccion´ de algun´ tipo de radiacion´ incidente en el sujeto de estudio.

IV. GU ´ IA DE LA PR ACTICA

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La practica´ se realizo´ con el objetivo de conocer un poco el mecanismo y funcionamiento del microscopio. Asimismo se busca analizar la textura y formas que componen a los objetos.Para realizar este objetivo se tiene que conocer los componentes del microscopio y cual´ es el funcionamiento de cada uno. Luego se podran´ observar los elementos en el microscopio. Para esta practica´ se necesito:´

Microscopio optico.´en el microscopio. Para esta practica´ se necesito:´ impreso. Tela delgada de Colores. Agua Pura. Agua

impreso.

Tela delgada de Colores.practica´ se necesito:´ Microscopio optico.´ impreso. Agua Pura. Agua de Florero. Tijeras. Papel para Lentes.

Agua Pura.Microscopio optico.´ impreso. Tela delgada de Colores. Agua de Florero. Tijeras. Papel para Lentes. Papel

Agua de Florero.optico.´ impreso. Tela delgada de Colores. Agua Pura. Tijeras. Papel para Lentes. Papel absorbente. Papel

Tijeras.impreso. Tela delgada de Colores. Agua Pura. Agua de Florero. Papel para Lentes. Papel absorbente. Papel

Papel para Lentes.optico.´ impreso. Tela delgada de Colores. Agua Pura. Agua de Florero. Tijeras. Papel absorbente. Papel periodico´

Papel absorbente.optico.´ impreso. Tela delgada de Colores. Agua Pura. Agua de Florero. Tijeras. Papel para Lentes. Papel

Tela delgada de Colores. Agua Pura. Agua de Florero. Tijeras. Papel para Lentes. Papel absorbente. Papel

Papel periodico´

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Laminas portaobjetos.´ ESCUELA COLOMBIANA DE INGENIER IA JUILO GARAVITO Frasco gotero. Lapices´ 2H y 3H. Tela de

Frasco gotero.DE INGENIER IA JUILO GARAVITO Laminas portaobjetos. Lapices´ 2H y 3H. Tela de bayetilla. V. A

IA JUILO GARAVITO Laminas portaobjetos. Frasco gotero. Lapices´ 2H y 3H. Tela de bayetilla. V. A

Lapices´

2H y 3H.

Tela de bayetilla.Laminas portaobjetos. Frasco gotero. Lapices´ 2H y 3H. V. A N ´ ALISIS DE R ESULTADO

V.

A N ´

ALISIS DE RESULTADO

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V-A.

1. Senale˜ las partes del microscopio en su gu´ıa, de acuerdo con la descripcion´ que aparece en esta.´ Las partes aparecen resaltadas en negrilla:

Lente Objetivo: Produce una imagen extensa del objeto que es captada por el lente ocular. Se : Produce una imagen extensa del objeto que es captada por el lente ocular. Se localiza en la parte media del microscopio.

Lente Ocular: Se encuentra en la parte superior del tubo optico,´ y amplifica de nuevo la : Se encuentra en la parte superior del tubo optico,´ y amplifica de nuevo la imagen.

Tubo optico´ : Es el tubo que comunica al lente ocular con el lente objetivo. Este se : Es el tubo que comunica al lente ocular con el lente objetivo. Este se ubica en la parte superior del microscopio.

Revolver: Es la parte que posee cavidades para colocar los distintos lentes objetivos de diversos : Es la parte que posee cavidades para colocar los distintos lentes objetivos de diversos aumentos, de- pende de la preparacion´ que se quiera observar.

Brazo: Es un soporte del tubo optico´ que une la platina y a la base : Es un soporte del tubo optico´ que une la platina y a la base del microscopio.

Platina: Es una superficie plana que lleva un orificio central, sobre la cual se coloca : Es una superficie plana que lleva un orificio central, sobre la cual se coloca la lamina´ portaobjeto, sujetandola´ con pinzas al carro movil.´

Base: Es sobre la que se apoya el microscopio y tiene por lo general forma : Es sobre la que se apoya el microscopio y tiene por lo general forma de Y o bien es rectangular.

Diafragma: esta´ formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los rayos luminosos : esta´ formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los rayos luminosos sobre el plano de la preparacion,´ formando un cono de luz con el mismo angulo´ que el del campo del objetivo.

Condensador: el condensador esta´ provisto de un diafragma-iris, que regula su abertura para ajustarla a : el condensador esta´ provisto de un diafragma-iris, que regula su abertura para ajustarla a la del objetivo. Puede emplearse, de manera irregular, para aumentar el contraste, lo que se hace cerrandolo´ mas´ de lo que conviene si se quiere aprovechar la resolucion´ del sistema optico.´

El tornillo macrometrico´ o macroscopico: girando este tornillo, asciende o desciende el tubo del microscopio, deslizandose´ en sentido vertical : girando este tornillo, asciende o desciende el tubo del microscopio, deslizandose´ en sentido vertical gracias a un mecanismo de cremallera. Estos movimientos largos permiten el enfoque rapido´ de la preparacion.´

El tornillo micrometrico´ o microscopico: mediante el ajuste fino con movimiento casi imperceptible que produce al deslizar el tubo : mediante el ajuste fino con movimiento casi imperceptible que produce al deslizar el tubo o la platina, se logra el enfoque exacto y n´ıtido de la preparacion.´ Lleva acoplado un tambor graduado en divisiones de 0,001 mm, que se utiliza para precisar sus movimientos y puede medir el espesor de los objetos.

Distancia de trabajo o frontal: Se denomina campo del microscopio al c´ırculo visible que se observa a traves´ del : Se denomina campo del microscopio al c´ırculo visible que se observa a traves´ del microscopio. Tambien´ podemos definirlo como la porcion´ del plano visible observado a traves´ del microscopio.

Componentes y Principio del Microscopio Optico

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Componentes y Principio del Microscopio Optico 3 Figura 3. Partes del Microscopio optico´ con una apertura

Figura 3. Partes del Microscopio optico´

con una apertura

numerica´ N.A.=1,30 y una longitud de onda en el espectro visible, ¿en que´ rango estar´ıa el poder de resolucion?´

2. Si trabaja con objetivo de inmersion,´

Para responder esta pregunta utilizamos la formula ya nombrada anteriormente:

P oderdeResolucion =

τ

2 N.A. Teniendo en cuenta que el espectro visible se encuentra en el rango de longitud de onda, entre 400nm y 700nm, el cual puede percibir el ser humano,al reemplazar los valores en la formula´ se llega a la conclusion´ de que el rango de resolucion´ es entre 0, 15µm y 0, 27µm.

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V-B.

3. Realice todas las observaciones propuestas y para cada

una apunte el nombre del objeto observado y aumento, dibuje

los observado.

Manejo del Microscopio Optico

A. Agua pura: Al realizar la observacion´ se encuentra

que el agua utilizada no estaba tan libre de part´ıculas

y de microorganismos al momento de realizar la

observacion,´ se encuentran unas pocas part´ıculas de origen desconocido.

al momento de realizar la observacion,´ se encuentran unas pocas part´ıculas de origen desconocido. Figura 4.

Figura 4. Agua pura

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B. Agua de Florero:Se logra ver formas de vida microscopica´ en movimiento. Tambien,´ se evidencian diminutos puntos, que se mueven de forma aleatoria. Se observa un contorno mas´ claro que el anterior en los microorganismos, y algunas part´ıculas estaticas.´

en los microorganismos, y algunas part´ıculas estaticas.´ Figura 5. Agua de Florero C. Papel periodico´ impreso:En

Figura 5. Agua de Florero

C. Papel periodico´ impreso:En este se pudo observar que los trazos de tinta no son tan continuos como el ojo lo percibe, sino que tiene unas diminutas partes blancas producidas por la superposicion´ de las fibras del papel.

producidas por la superposicion´ de las fibras del papel. Figura 6. Papel periodico´ impreso D. Letra

Figura 6. Papel periodico´

impreso

D. Letra con lapiz´ 2H: Al igual que el anterior se pudo observar que los trazos de grafito no son tan continuos, pero esta vez se nota mas claro los espacios en blanco que deja las fibras del papel.

claro los espacios en blanco que deja las fibras del papel. Figura 7. Letra con lapiz´

Figura 7. Letra con lapiz´

2H

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E. Letra con lapiz´ 6B: Se puede observar que tiene mas fuerza el trazo realizado ya que deja muy pocos espacios en blanco.

el trazo realizado ya que deja muy pocos espacios en blanco. Figura 8. Letra con lapiz´

Figura 8. Letra con lapiz´

6B

F. Grafito diferentes lapices:En´ este se dificulta ver las caracter´ısticas, ya que es un cuerpo muy oscuro e impide que la luz del microscopio pase para que sea observada, aunque se pueden notar pequenas˜ concentraciones de material en ambas muestras con lapiz´ tipo 2H y 6B.

de material en ambas muestras con lapiz´ tipo 2H y 6B. Figura 9. Grafito de lapiz´

Figura 9. Grafito de lapiz´

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con lapiz´ tipo 2H y 6B. Figura 9. Grafito de lapiz´ 1 Figura 10. Grafito de

Figura 10. Grafito de lapiz´

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G. Algodon:´ En el algodon´ se logran ver las fibras y filamentos muy desordenados y se puede observar que esta´ hecho a base de fibra vegetal por su contorno opaco.

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´ ESCUELA COLOMBIANA DE INGENIER IA JUILO GARAVITO Figura 11. Algodon´ H. Tela: En la tela

Figura 11. Algodon´

H. Tela: En la tela podemos observar el orden de las fibras,

aunque tambien´

filamentos desordenados en el orden visto y su contorno opaco.

se puede conocer su origen vegetal por

y su contorno opaco. se puede conocer su origen vegetal por Figura 12. Tela I. Tela

Figura 12. Tela

I. Tela sintetica:En´ la tela sintetica´ se puede observar fibras mas´ ordenadas que las anteriores y muy separadas se nota el orden en las fibras y que su origen no es natural.

nota el orden en las fibras y que su origen no es natural. Figura 13. Tela

Figura 13. Tela sintetica´

J. Toalla:

La

toalla es muy parecida

al algodon,´

con

filamentos desordenados y con un contorno opaco.

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con filamentos desordenados y con un contorno opaco. 5 Figura 14. Toalla K. Bayetilla: Por su

Figura 14. Toalla

K. Bayetilla: Por su color rojo la bayetilla puede observarse muy poco aunque tiene filamentos muy unidos y algunos grandes y otros pequenos.˜

filamentos muy unidos y algunos grandes y otros pequenos.˜ Figura 15. Bayetilla L. Pluma: Para la

Figura 15. Bayetilla

L. Pluma: Para la pluma se hicieron dos observaciones una seca y la otra mojada. En la seca se observa una estructura trenzada muy unida desde el raquis (parte principal) de la pluma hasta el estandarte (parte exterior). Al mojarla se observa muy diferente, ya que no es trenzada y solo se ven los filamentos principales que van al raquis pero mas´ recogido.

que no es trenzada y solo se ven los filamentos principales que van al raquis pero

Figura 16. Pluma Seca

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´ ESCUELA COLOMBIANA DE INGENIER IA JUILO GARAVITO 6 Figura 17. Pluma Mojada M. Pelo de

Figura 17. Pluma Mojada

M. Pelo de Perro: Para el pelo de animal, se utilizo´ un perro cuyo pelaje era de color muy claro, en el microscopio se observo´ un filamento claro con muchos microorganismos y los tejidos que conforman el pelo.

muchos microorganismos y los tejidos que conforman el pelo. Figura 20. Papel absorbente VI. C ONCLUSIONES

Figura 20. Papel absorbente

VI.

CONCLUSIONES

el pelo. Figura 20. Papel absorbente VI. C ONCLUSIONES Figura 18. Pelo de Perro El uso

Figura 18. Pelo de Perro

El uso del microscopio nos sirve para comprender el origen de los seres vivos, y de los organismos que los conforman.

Los lentes que tiene el microscopio permiten analizar diferentes tipos de tamanos˜ en las muestras, as´ı como hacer aumentos para analizar zonas de interes.´

Para hacer un buen uso del microscopio, es importante reconocer los diferentes componentes, pues esto permite al usuario manejar con facilidad este instrumento.

BIBLIOGRAF IA

REFERENCIAS

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N. Cabello de Humano Para el pelo de humano se observa un filamento mas´ oscuro pero se pueden observar los tejidos que lo conforman.

[1] http://es.wikipedia.org/wiki/Microscopio c ompuesto

[2] http://es.wikipedia.org/wiki/Microscop [3] http://es.wikipedia.org/wiki/Microscop [4] http://es.wikipedia.org/wiki/Microscopio

[4] http://es.wikipedia.org/wiki/Microscopio Figura 19. Cabello de Humano ˜ N. Papel absorbente:

Figura 19. Cabello de Humano

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N.

Papel absorbente: Estas fibras de tonalidad transparente, son principalmente celulosa, es decir, las fibras de la madera que se utilizan en la elaboracion´ de papeles. Esta tambien´ es una fibra de origen natural.