LABORATORIO DE ANÁ LISIS INDUSTRIAL - UNIVERSIDAD DEL VALLE

ANALISIS DE ALIMENTO PARA PERROS (DOGOURMET) POR

ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA Y ULTRAVIOLETA

Angie Lorena Bustamante (1629336-2131); angie.bustamante@correounivalle.edu.co

Lina Marcela Molano (1338221-2131); lina.molano@correounivalle.edu.co;
Melissa Muñoz (1735739-2131); melissa.munoz@correounivalle.edu.co;
María del Pilar Peñaloza Hurtado (1631448-2131); maria.penaloza@correounivalle.edu.co;

Universidad del Valle

Facultad de Ciencias Naturales y Exactas, Departamento de Química
Laboratorio de Análisis Industrial

Docente: Oscar Andrés Fernández Loaiza

Fecha de la práctica: julio 6 de 2019
Fecha de entrega: julio 13 de 2019

RESUMEN
Se trabajó con una muestra de un alimento para perros Dogourmet, elaborado por Alimentos Polar
Comercial; en una presentación de 1 Kg, con fecha de apertura: 13/06/19, reportando un contenido de
calcio (Ca, máx.) de 2.5 %, fosforo (P, min.) de 1.0%, Ceniza (máx.)11%, Humedad (máx.) 12% y Grasa
(min.) 12%. El resultado experimental obtenido para el porcentaje de humedad fue de (9.35±0.03) % en
base húmeda por secado en horno a 105°C, ceniza (10.287±0.003) % por calcinación a 500°C y grasa
de (11.57±0.002) %, este último se determinó por el método de extracción Soxhlet. Posteriormente, se
determinó el contenido de Ca por espectrofotometría de absorción atómica y el contenido P por
absorción ultravioleta, mediante el método de patrón externo y el uso de 5 soluciones estándar con
concentraciones que se encontraban en un rango entre (1-5) mg/L. Para el Calcio se empleó un
espectrofotómetro de absorción atómica modelo Aanalyst 100 marca Perkin Elmer y para el Fosforo se
usó un espectrofotómetro UV-1700 Pharma Spec de doble haz marca Shimadzu. Finalmente, se obtuvo
una concentración de calcio y fosforo en la muestra expresada en % (p/p) de (0.344±0.005) y (2.3±0.2),
respectivamente. Conforme a los resultados obtenidos, los porcentajes de humedad, ceniza, calcio y
fósforo, estuvieron dentro de los parámetros garantizados por el fabricante; sin embargo, el análisis de
grasa que quedó fuera del contenido garantizado en el empaque mínimo del 12%.

Palabras Clave: Absorción atómica, Ultravioleta, Calcio, Fosforo, pH, humedad y cenizas.

105.0°C por 15 minutos, se dejaron enfriar en

DATOS, CÁLCULOS Y RESULTADOS
Inicialmente se pesó 25.0256 ± 0.0001 g de la
muestra de alimento para perro Dogourmet, se
macero y se dejó en un desecador con el fin de
evitar que la muestra absorba humedad.
Posteriormente, se le realizó los diferentes
análisis.
DETERMINACIÓN DE HUMEDAD
Se utilizaron dos cajas de Petri con tapa, las
cuales se lavaron, se llevaron al horno a
un desecador durante 30 minutos y se
determinó el peso en una balanza analítica.
Posteriormente, en cada una de ellas se midió
una cantidad determinada de la muestra de
Dogourmet. Seguidamente, se llevaron las
cajas de Petri con la muestra al horno a 105°C
durante dos horas, luego se retiraron y se
dejaron enfriar en un desecador durante 50
minutos, se pesaron en balanza analítica. Los
resultados obtenidos experimentalmente se
muestran en la Tabla 1.

1
 LABORATORIO DE ANÁ LISIS INDUSTRIAL - UNIVERSIDAD DEL VALLE

Tabla 1. Datos experimentales del peso de la muestra del m 3=(0.4709 ±0.0001)g

alimento para perros Dogourmet, de las cajas Petri sin la
muestra y con la muestra seca
Peso de la Con los resultados anteriores y la ecuación 4,
muestra Peso caja petri Peso caja petri se calculó el porcentaje de humedad.
(sin muestra) (muestra seca)
(m1) (g) ± 0.0001 (g) ± 0.0001
(g) ± 0.0001 m 1−m 2
5,0002 85,8756 90,4049 % Humedad = ∗100( 4)
m1
5,0002 89,9760 94,5125
Donde (m 1) es el peso inicial de muestra;
Con los resultados anteriores, se calculó la
(m¿¿ 2)¿ es el peso de la muestra sin
masa del alimento para perros Dogourmet sin humedad, por lo que (m ¿ ¿ 1−m 2 )¿ es la masa
humedad (m 2) , por medio de la ecuación 1. de agua (m 3 )

m2=CS−CM (1) (0.4709 ± 0.0001)

%H= ∗100=9.4176 2
(5.0002 ±0.0001)
Donde (m 2) es la masa del alimento Dogourmet
sin humedad; (CM ) es la masa final de la % Humedad =9.4176
muestra seca con la caja petri, y (CS) el peso
de la caja petri sin la muestra
Para calcular la desviación del porcentaje de
humedad de 9.4176, se utilizó la ecuación 51
m 2=( 90.4049 ± 0.0001 )−( 85.8756 ± 0.0001 )=4.52 93 0

Sa 2 S b 2 Sc 2
m2=4.5293 g

Se procedió a calcular su respectiva desviación,

Sy
y
=
√( a ) ( )( )
+
b
+
c
(5)

haciendo uso de la ecuación 21.

0.0001 2 0.0001 2
S%H
2
√ 2 2
Sm = ( S a ) + ( S b ) (2) 9.4176
=
√( 0.4709
+) (
5.0002 )
2 2 S % H =0.031
Sm =√( 0.0001 ) + ( 0.0001 )
2

% H =( 9.42± 0.03)
Sm =0.0001 4
2

De manera análoga, se realizó cálculos para la

m 2=(4.5293 ± 0.0001) g
Para calcular la masa del agua y su respectiva
desviación, se utilizó la ecuación 3 y 2.
muestra restante. Los resultados obtenidos se
muestran en la Tabla 2.
Tabla 2. Datos experimentales del peso de la muestra sin
humedad, peso del agua y porcentaje de humedad.

m 3=m 1−m2 (3) Muestra

m2 (g) m3 (g) Humedad
± 0.0001 ± 0.0001 (%) ± 0.03

Donde (m 3 ) es la masa del agua; (m 1) es la 1 4,5293 0,4709 9,42

2 4,5365 0,4637 9,27
masa de la muestra y (m 2) es la masa del
Promedio 4,5329 0,4673 9,35
alimento Dogourmet sin humedad.

m 3=( 5.0002 ±0.0001 ) −( 4.5293 ± 0.0001 )=0.470 90

2
 LABORATORIO DE ANÁ LISIS INDUSTRIAL - UNIVERSIDAD DEL VALLE

DETERMINACIÓN DE CENIZAS
Se utilizaron dos crisoles, los cuales se lavaron,
se llevaron a la mufla a 500°C durante 30
minutos, luego se retiraron, se dejaron enfriar
en un desecador y se determinó sus pesos en Tabla 4. Datos experimentales del peso de los crisoles
balanza analítica. Seguidamente, se adicionó con cenizas y porcentaje de cenizas
una cantidad determinada de la muestra del Muestra
m 2 (g) Cenizas (%)
alimento para perros Dogourmet, se trasladó el ± 0.0001 ± 0.003
crisol a la mufla y se calcinó a 500°C durante 1 1 0,4032 10,037
hora, pasado este tiempo se retiraron, se 2 0,4217 10,537
dejaron enfriar en un desecador y se pesó en Promedio 0,4125 10,287
balanza analítica. Los datos obtenidos
experimentalmente se muestran en la Tabla 3.
DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE
Tabla 3. Datos experimentales del peso de los crisoles GRASA
secos sin la muestra y crisoles con cenizas Para el análisis de grasa se utilizó dos balones
Peso crisol Peso crisol
Peso muestra de extracción, dos papeles filtro cuantitativos y
(sin muestra) (muestra seca)
(g) ± 0.0001 una cantidad determinada de la muestra, todo
(g) ± 0.0001 (g) ± 0.0001
4,0170 35,1950 35,5982 previamente pesado. Los datos experimentales
se muestran en la Tabla 5.
4,0020 37,9521 38,3738
Tabla 5. Datos experimentales del peso del balón de
Con los resultados anteriores, se calculó la extracción, papel filtro y de la muestra de Dogourmet.
masa de las cenizas (m¿¿ 2)¿ y su respectiva Peso inicial balón Peso papel filtro +
Peso
extracción sin muestra + cordón
desviación, se utilizó la ecuación 1 y 2. muestra
muestra (g) ± 0.0001
(g) ± 0.0001
(g) ± 0.0001
m2=(0.4032± 0.0001)g 5.0000 81,2582 7,3355
5.0000 115,4364 7,1535
Para calcular el porcentaje de cenizas en base
a la húmeda y su desviación, se utilizó la
ecuación 6 y 3. Para la extracción óptima de grasa se emplea
muestra libre de humedad, ya que la presencia
m2 de agua puede disminuir la facilidad del
% Cenizas = ∗100(6) solvente para evaporarse. También se empaco
m1
la muestra en papel filtro y se amarro con una
cuerda para evitar pérdidas de muestra durante
Donde (m 1) es la masa inicial de muestra,
la extracción.
(m¿¿ 2)¿ es la masa de las cenizas.
Esta muestra se transfirió al sistema de
recirculación soxhlet, el cual se encuentra
(0.4032 ± 0.0001) adaptado a un condensador y a un balón de
% cenizas = ∗100=10.03 74
(4.0170 ± 0.0001) fondo plano, en este último se depositó 250 mL
de éter de petróleo; que al calentarse se
evapora y sube por el sistema de recirculación
% cenizas =10.04 ± 0.004 hasta el condensador, donde baja la
temperatura del gas, favoreciendo la formación
De manera análoga, se realizó cálculos para la del estado líquido. El solvente gotea sobre la
muestra restante. Los resultados obtenidos se muestra, hasta cubrirla completamente,
muestran en la Tabla 4. solubilizando a su vez la grasa presente;
cuando ha llegado al nivel del sistema de sifón,
3
 LABORATORIO DE ANÁ LISIS INDUSTRIAL - UNIVERSIDAD DEL VALLE

el solvente es vertido nuevamente en el balón,

donde inicia el proceso de evaporación. Ac
% A c= ∗100(7)
m0
El proceso de sifón se realizó siete veces por
cada muestra, y se recuperó el solvente al
finalizar el procedimiento. Donde (% A c ) es el contenido porcentual de
aceite del producto, (m 0 ) es la masa inicial de
Se evaporo el solvente remanente del balón y muestra, ( A¿¿ c)¿ es el aceite obtenido en la
de la muestra dejándolo por 15 minutos en extracción en la muestra.
horno de calentamiento (103°C); seguido se
dejó enfriar en desecador, para realizar el Muestra 1 (balón)
proceso de pesaje.
0.5652± 0.0001
Los resultados obtenidos experimentalmente % A c= ∗100=11.30 4 2
5.0000 ± 0.0001
del peso de los balones y de los papeles filtro
más la muestra después del proceso de Ac =11.30
extracción, se reportan en la Tabla 6

Tabla 6. Datos experimentales, peso papel filtro más la Muestra 1 (papel filtro)
muestra, antes y después del proceso de extracción.
Peso final balón
Peso final papel (−0.5011± 0.0001)
filtro + muestra + % A c= ∗100=−10. 022
Muestra extracción con
cordón
5.0000 ±0.0001
grasa
(g) ± 0.0001
(g) ± 0.0001
% A c =−10.02
1 81,8234 6,8344
2 116,0286 6,6140 De la misma manera se calculó el porcentaje de
grasa en la muestra restante. Los resultados se
muestran en la Tabla 7.
El aceite obtenido en la extracción en la
muestra ( A c ) es, la diferencia entre el peso final Tabla 7. Datos experimentales del contenido porcentual
de aceite del producto, tanto en los balones como en
del balón con la grasa, menos el peso del balón
papel filtro.
sin ella. Igualmente se calculó la diferencia Contenido % de Contenido % de
entre el papel filtro con la grasa y el papel filtro Muestra aceite del producto aceite del producto
sin ella. % A c (balón) % A c (papel filtro)
± 0.002 ± 0.002
Muestra 1 (balón): 1 11,30 -10,02
2 11,84 -10,79
Ac = ( 81.8234 ±0.0001 ) −( 81.2582± 0.0001 ) Promedio 11,57 -10,41

Ac =(0.5652 ±0.0001) g DETERMINACIÓN DE CALCIO POR

Muestra 1 (papel filtro)
Ac = ( 6.8344 ±0.0001 ) −( 7.3355± 0.0001 )
Ac =(−0.5011 ± 0.0001) g
Con los resultados anteriores, se calculó el
porcentaje de grasa, se utilizó la ecuación 72.
ABSORCIÓN ATÓMICA
Preparación solución patrón de Ca 100 mg/L
Se calculó los gramos teóricos de carbonato de
Calcio (CaCO3) necesario para preparar
100.00 ± 0.1 mL de una solución patrón de
100.0 mg/L de Ca

4
 LABORATORIO DE ANÁ LISIS INDUSTRIAL - UNIVERSIDAD DEL VALLE

sln∗100 mgCa V 1∗C 1=V 2∗C2 (8)

∗1 g
1000 mL sln
∗1 mol Ca
1000 mg Estándar 1 de Ca
∗1 mol CaC O3
40.078 gCa
∗100.078 g CaC
( 50.0 ±0.06 ) mL∗O( 1.0
3 ) mg/ L
1mol Ca V = 482
100.00 ± 0.1mL 1
(103.7 ± 0.4) =0.0249=0.
mg/L 7
1mol CaC O3
V 1=0.482 mL≈ 482.0± 1.0 μL
CaC O 3=( 0.0249 ± 0.0001 ) g
De manera similar, se calculó el volumen
necesario de la solución patrón de Ca para
Concentración experimental de la solución
preparar las soluciones estándar restantes. Los
patrón de Ca de 100 mg/L
resultados teóricos y los valores tomados
Seguidamente, en un vaso de precipitado
experimentalmente se muestran en la Tabla 8.
50.0 ± 0.03 mL se pesó (0.0259 ± 0.0001) g de
CaCO3, se adicionó 1.000 ± 0.007 mL de ácido Tabla 8. Datos teóricos y experimentales del volumen
clorhídrico (HCl) concentrado y una pequeña necesario de la solución patrón de Ca, para preparar las
cantidad de modificador de matriz (Óxido de soluciones estándar.
lantano), se agitó la solución, se transfirió a un Volumen teórico Volumen Exp.
Estándar
matraz de 100.0 ± 0.1 mL y se enraso con agua (mL) ( μL) ± 1.0
destilada. Posteriormente se realizó el cálculo 1 0,482 500,0
para determinar la concentración real de la 2 0,964 1000,0
solución patrón de 100.0 mg/L de Ca.
3 1,446 1500,0
4 1,928 2000,0
g∗1 mol 5 2,411 2500,0
∗40.078 g Ca
100.08 g 1
∗1000 mg ∗1000 mL
1 mol Ca (100.00 ±Luego,
0.1)mLse realizó el cálculo para determinar la
0.0259 ± 0.0001 concentración real =103.71
de cada2 solución estándar
1g 1L
de Ca, mediante la ecuación 8.
[C a sln. patron ]=103.71 mg/L
C a sln. estandar 1=1.037 mg/ L
Para calcular la desviación de la concentración
de la solución patrón de Calcio de 103.71 mg/L, Para calcular la desviación estándar de la
se utilizó ecuación 5. solución de 1.037 mg/L se utilizó la ecuación 5.

S C a sln. patron =0.4 1 SC a sln .estandar 1

=2.07 4

[C a sln. patron ]=(103.7± 0.4) mg/ L

Curva de calibración por patrón externo
Preparación de soluciones Estándar de Ca.
Luego, se realizó el cálculo del volumen
necesario de la solución patrón de 103.7 ± 0.4
mg/L de Ca, para preparar 5 soluciones
estándar de Ca en matraz de 50.00 ± 0.06 mL
con concentraciones entre el rango de (1 – 5)
mg/L, se utilizó la ecuación 8.
[C a sln.estandar 1 ]=(1.04 ± 2.07)mg/L
De manera similar se calculó la concentración
de las soluciones estándar de Ca restantes y su
respectiva desviación. Los resultados se
muestran en la Tabla 9.
Tabla 9. Datos experimentales de las concentraciones y
desviaciones de las soluciones estándar de Ca

5
 LABORATORIO DE ANÁ LISIS INDUSTRIAL - UNIVERSIDAD DEL VALLE

Concentración Exp Ca y la muestra, se encuentran tabulados en la

Estándar
(mg/L) ± 2,07 Tabla 10.
1 1,04
Tabla 10. Datos experimentales, medición de absorbancia
2 2,07 a 422.7 nm en la solución estándares de Ca y la muestra.
3 3,11 Concentración Exp Absorbancia
Estándar
4 4,15 (mg/L) ± 2,07 (A) ± 0.001
5 5,19 1 1,04 0,067
2 2,07 0,139
Seguidamente a las soluciones estándar se
adicionó una pequeña cantidad de modificador 3 3,11 0,204
de matriz (Óxido de lantano) y se enrasaron 4 4,15 0,267
con HCl 0.1 M 5 5,19 0,340
Muestra --- 0,225

Preparación de la Muestra
En un vaso de 100.00 ± 0.04 mL, se pesó Al graficar Absorbancia (A) en función de la
0.1000 ± 0.00001 g de la muestra, se agregó concentración (mg/L), se obtuvó una línea
4.00 ± 0.015 mL de agua destilada y 6.0 ± recta, como se muestra en el Gráfico 1.
0.015 mL de HCl concentrado, se agito y se
filtró al vacío, seguidamente la solución filtrada
se transfirió a un matraz de 100.0 ± 0.1 mL y se f(x) = 0.06 x + 0
0.31
R² = 1
enraso con agua destilada. Para determinar la
concentración de Ca en la muestra, se realizó 0.26
Absorbancia (A)

el siguiente calculo:
0.21

muestra∗1000 mg 0.16
∗1
1g
∗1000 mL
(100.0 ± 0.1 ) mL 0.11
( 0.1000 ± 0.0001 ) g =1000. 00
1L 0.06
0.80 1.30 1.80 2.30 2.80 3.30 3.80 4.30 4.80 5.30 5.80

[Ca]muestra=(1000.0± 1.4) mg/ L Concentracion (mg/L)

Gráfico 1. Curva de calibración de las soluciones

estándar de Ca por el método patrón externo.
Determinación espectrofotométrica
Posteriormente para las medidas La linealidad determina la relación directa entre
absorciométricas se utilizó un la señal instrumental (absorbancia) y la
espectrofotómetro de absorción atómica concentración del producto analizado (Ca), el
modelo Aanalyst 100 marca Perkin Elmer, cual es un método lineal cuando presenta un r >
donde se determinó la 0.999, en base a esto y al r que se obtuvo en el
gráfico 1. r = 0.9997, se realizó una prueba t
para evaluar r3.
proporción adecuada de la mezcla aire-
acetileno la cual fue de 3:2, y se seleccionó la Prueba t para evaluar r
longitud de
onda de 422.7 nm para lámpara de cátodo 1. Hipótesis nula H 0 :si r=0 no hay correlación
hueco de Ca. Luego se midió la absorbancia
para cada estándar de Ca y la muestra. Los 0.9997=0
valores obtenidos experimentalmente en la
medición de absorbancia a cada estándar de
6
 LABORATORIO DE ANÁ LISIS INDUSTRIAL - UNIVERSIDAD DEL VALLE

2. Hipótesis alterna H 1 : r ≠ 0 hay correlación

S xy =∑ ( x 1− x́ )∗( y 1− ý)(11)
0.9997 ≠ 0

|r|∗√n−2 |0.9997|∗√ 3 S xy =0. 69902 (mg/ L)

3. t calculado = 2
= 2
√1−r √1−(0.9997)
t calculado=67.85 En el cálculo del Coeficiente de correlación (r ),
la desviación estándar residual ( Sr ) y la
varianza residual, se utilizó las ecuaciones 12,
4. t crítico= para ( n−2 ) grados de libertad 13 y 14 1 respectivamente.

t crítico=3.18 S xy
r= ( 12)
√( S xx )∗(S yy )
r =0.99 967
5. Decisión:
sit calculado >t critico → Rechazo H 0 Sr =√( S¿¿ yy )−¿ ¿ ¿ ¿
si67.85>3.18 Sr =0.00 314

6. Conclusión:
Existe una relación lineal entre la señal analítica Sr2 =(S¿¿ yy )−¿ ¿ ¿
y la concentración. El método es lineal.
Sr2 =0.0000 0987
Partiendo de este análisis se procedió a realizar
los datos estadísticos.
Para determinar la pendiente (b), su desviación
Datos estadísticos estándar ( S¿¿ b) ¿ y el intervalo de confianza
( IC ¿¿ b)¿ , se utilizó la ecuación 15, 16 y 17 1.
Método mínimos cuadrados
Para determinar la mayoría de los valores por el
método de mínimos cuadrados se necesita S xy
conocer el valor de tres variables ( S xx ) , ( S yy ) y S xy b= (15)
S xx
para calcular los valores se utilizó las
ecuaciones 9, 10 y 11 1.
2
b=0.064 9 9 mg/ L−1
S xx =∑ ( x 1−x́ ) (9)
Sb =√ ¿ ¿ ¿ ¿
2
S xx =10. 756 (mg/ L)
Sb =0.00 0957 mg/L−1

S yy =∑ ( y 1− ý ) 2(10)
b=(0.065± 0.0010)mg/L−1

S yy =0.04546

7
 LABORATORIO DE ANÁ LISIS INDUSTRIAL - UNIVERSIDAD DEL VALLE

Intervalo de confianza 95% ( IC ¿¿ b)¿ ; Pendiente b  0.065 mg/ L−1

( t =n−1 )
Desviación estándar Sb 0.0010 mg/ L−1
pendiente

t ( 2.78 )∗S b Intervalo de confianza IC b (0.065 ± 0.012)

IC b=b ± (17)
√N pendiente mg/ L−1
Intercepto a 0.0012

IC b=( 0.065 ± 0.012 ) mg/ L−1 Desviación estándar Sa 0.003

Intercepto

En el cálculo del intercepto (a), su desviación Intervalo de confianza IC a (0.0012 ± 0.0041)

intercepto
estándar ( S¿¿ a)¿ y el intervalo de confianza
( IC ¿¿ a)¿ , se utilizó la ecuación 18, 19 y 201. Coeficiente de determinación r2  0.9993

a= ý−b x́ (18) Coeficiente de correlación r 0.9997

a=0.0 0120 Desviación estándar residual Sr 0.003

√
Sa =S r∗ +
1 ( x́ )
n S xx
Sa =0.0 0329
(19)
Varianza residual

Promedio de x
Sr 2

x́
0.000010

3.11 mg/ L

Desviación en x S xx  10.76 (mg/ L ¿2

a=(0.0012± 0.0033)
Promedio de y ý  0.02034

Intervalo de confianza 95% ( IC ¿¿ a)¿ ; Desviación en y S yy  0.04546

( t =n−1 )
Covarianza de x e y S xy  0.6990 mg/ L

t ( 2.78 )∗S a A partir del método de mínimos cuadrados se

IC a=a± (20)
√N halló la ecuación de la recta por patrón externo.

IC a=( 0.0012 ± 0.0041 ) y ± Sr =(b ± S b) x 0+(a ± S a )

A ± 0.003=( 0.065 ± 0.001 ) mg / L−1 (x 0 )+ ( 0.0012± 0.0033 ) (2

Los datos obtenidos experimentalmente por
método de mínimos cuadrados para el método Determinación de la concentración de Ca en
de patrón externo, se encuentran tabulados en la muestra por el método de patrón externo.
la tabla 11. Teniendo en cuenta la ecuación de la curva de
calibración por el método de patrón externo y
valor de la absorbancia obtenido en la muestra,
Tabla 11. Datos estadísticos de la regresión lineal curva se calculó la concentración de Ca mg/L en la
de calibración por el método patrón externo para Ca. muestra y su desviación estándar, se utilizó
Variable Valor ecuación 22 y 23 3.
Número de estándar n  5
A ± 0.003=( 0.065 ± 0.001 ) mg /L−1 ( x 0 )+ ( 0.0012± 0.0033 )
8
 LABORATORIO DE ANÁ LISIS INDUSTRIAL - UNIVERSIDAD DEL VALLE

A partir de la concentración de Ca en la
Donde (A) es el valor de la señal en la muestra muestra 3.44 ± 0.05 mg/L, se determinó la
(0.225), ¿ ¿) es la concentración de Ca en mg/L, concentración de Calcio en la muestra.
despejando (Cx¿ ¿ 0) ¿ se tiene la concentración
de Ca en la dilución. ( 3.44 ± 0.05 ) mg
∗1 g
1000 mL
A−( a) ∗(100.0 ±0.1)mL
Cx0 = (22) 1000 mg
b ∗100=0.3 4 4
( 0.1000± 0.0001) g M
0.225−( 0.0012) % Ca=0.344( p / p)
Cx0 = =3. 4437
0.065mg /L−1
Para el cálculo de la desviación de
[ Ca muestra ]=3.444 mg/ L concentración de Ca, se utilizó la ecuación 5.

La desviación estándar concentración del S(Ca)=0. 0053

analito en la muestra ( SCx¿¿ 0) ¿ se calculó
con la ecuación 17. % Ca=( 0.344 ± 0.005 ) ( p/ p)
2
Sr 1 1 y 0− y 1
SCx0= ∗
b
+ +
m n √ b (
S xx
(23) ) DETERMINACIÓN DE FÓSFORO COMO P2O5
POR ABSORCIÓN ULTRAVIOLETA
m=1 ¿ réplicas de lamuestra
n=5 ¿ de datos o puntosde calibración Preparación de la solución molibdovanadato
Se utilizó dos vasos de precipitados de
100.0 ± 0.04 mL, en uno se pesó
0.003 1 1 0.225−0.02034 2 1 4.0040 ± 0.0001 g de (NH4)6Mo7O24 • 4H2O
SCx0=
0.065 √
∗ + +
1 5 (
0.065 10.76 ) (molibdato de amonio) y se agregó 40.0 ± 0.2
mL de agua caliente. En el otro vaso se pesó
0.2007 ± 0.0001 g de NH₄VO₃ (metavanadato
SCx0=0.0532 de amonio), se adicionó 25.0 ± 0.02 mL de
agua caliente y 25.0 ± 0.02 mL de HClO 4 al
¿ 70%. Posteriormente se transfirió ambas
soluciones a un matraz 200.0 ± 0.5 mL, se
enraso con agua destilada (solución de
El intervalo de confianza al 95 % se calculó con molibdovanadato amonio)
la ecuación 24. donde ( t =n−1 )
Preparación solución patrón de P2O5 1000.0
mg/L
t ( 2.78 )∗SCx0
IC=Cx 0 ± (24) Se calculó los gramos teóricos de fosfato
√N monopotásico (KH2PO4) necesario para
preparar 10.00 ± 0.04 mL de una solución
IC=( 3.44 ± 0.07 ) mg / L patrón de 1000.0 mg/L de P2O5

Determinación de la concentración de Ca en
la muestra

9
 LABORATORIO DE ANÁ LISIS INDUSTRIAL - UNIVERSIDAD DEL VALLE

sln∗1000.0 mg P2 O5 Para calcular la desviación de la concentración

∗1 g de la solución de 50.32 mg/L, se utilizó
1000 mL sln
∗1 mol P2 O5 ecuación 5.
1000 mg
∗2mol P
141.945 g P 2 O5 S P2 O 5∗1
=0.4
mol8 KH 2 PO 4
1 mol P2 O5
∗136.085 g KH PO 4
1 mol P [P 2 O 5 ]=(50.3 ± 0.5) mg/ L 2
10.00 ± 0.01mL =0.01917 4
1 mol KH 2 PO 4

KH 2 PO 4= ( 0.01917± 0.0001 ) g Curva de calibración por patrón externo

Preparación de soluciones Estándar de P2O5
Seguidamente, se realizó el cálculo del
volumen necesario de la solución con
Experimentalmente se pesó 0.0193 ± 0.0001 g concentración de 50.3 ± 0.5 mg/L de P 2O5, para
de KH2PO4, se realizó el cálculo para preparar 5 soluciones estándar en matraz de
determinar la concentración real de la solución 25.0 ± 0.04 mL con concentraciones entre el
patrón de 1000.0 mg/L de P2O5. rango de (2–10) mg/L, se utilizó la
ecuación 8.
.
PO 4∗1 mol KH 2 PO 4 Estándar 1 de P2O5
∗1 mol P
136.085 g KH 2 PO 4
∗1 mol P2 O5 ± 0.05 mL
V 1=0.97
1 mol KH 2 PO 4
∗141.945 g P2 O 5
2 mol P 1
De manera similar se ∗1000 mg el volumen
calculó ∗1000
1 mol P2 O 5necesario de la solución de 50.3 ± 0.5
(10.00 ±0.01)ml
mg/L de
0.0193 ± 0.0001 g KH 2
1P g 2O5, para preparar las soluciones estándar.1 L
Los resultados teóricos y los valores tomados
[P 2 O5 ]=1006.55 mg/ L experimentalmente se muestran en la Tabla 12.

Para calcular la desviación de la concentración Tabla 12. Datos teóricos y experimentales del volumen
necesario de la solución de P2O5, para preparar las
de la solución patrón de P2O5 de 1006.55 mg/L, soluciones estándar.
se utilizó ecuación 5.
Volumen teórico Volumen Exp
Estándar
(mL) (mL)
S P2 O5sln . patron =5.31
1 0,97 1,00 ± 0,007
2 1,92 2,00 ± 0,01
[P 2 O5sln. patron ]=(1006.5 ±5.3) mg/ L
3 2,90 3,00 ± 0,01
A partir de la solución patrón de 1006.55 ± 5.3 4 3,87 4,00 ± 0,015
mg/L, se preparó 100.0 ± 0.1 mL de una 5 4,84 5,00 ± 0,022
solución de 50.0 mg/L, se utilizó la ecuación 8
para conocer el volumen de la alícuota y la
concentración real de la solución 2. Experimentalmente se tomaron valores
diferentes a los teóricos, razón por la cual se
V 1=5.00 ± 0.015 sln P 2 O5 realizó el cálculo para determinar la
concentración real de cada solución estándar
[ P2 O5 ]=50.32mg/ L de P2O5, se utilizó la ecuación 8. Para calcular
la desviación estándar de la solución se utilizó
la ecuación 5.

10
 LABORATORIO DE ANÁ LISIS INDUSTRIAL - UNIVERSIDAD DEL VALLE

3.00 ± 0.0015 mL de la solución 1, 3.00 ± 0.01

[P 2 O5sln. estandar 1 ]=(2.013 ±0.02) mg/L mL de HCl concentrado y 10.00 ± 0.02 mL de la
solución de molibdovanadato de amonio, se
enrasaron con agua destilada (solución 2).
De manera similar se calculó la concentración
de las soluciones estándar de P2O5 restantes y Preparación del blanco
su respectiva desviación. Los resultados se A un matraz de 25.0 ± 0.05 mL, se adiciono
muestran en la Tabla 13. 3.00 ± 0.0015 mL de agua destilada, 3.00 ±
0.01 mL de HCl concentrado y 10.00 ± 0.02 mL
de la solución de molibdovanadato de amonio,
Tabla 13. Datos experimentales de las concentraciones y se enrasaron con agua destilada
desviaciones de las soluciones estándar de P2O5
Concentración Exp Determinación espectrofotométrica
Estándar
(mg/L) Para las medidas absorciométricas, se utilizó
1 2,01 ± 0,02 un espectrofotómetro UV-1700 Pharma Spec, el
cual se ajustó en una longitud de onda máxima
2 4,03 ± 0,03
de absorción 400 nm, luego se midió la
3 6,04 ± 0,04 absorbancia para cada estándar y las tres
4 8,05 ± 0,05 muestras, donde se estableció el 0.000 de
5 10,07 ± 0,06 absorbancia con el blanco. Los valores
obtenidos experimentalmente en la medición de
absorbancia de las muestras y de cada
Posteriormente a cada matraz se agregó estándar, se encuentran tabulados en la Tabla
3.00 ± 0.01 mL de HCl concentrado y 14.
10.00 ± 0.02 mL de la solución de
Tabla 14. Datos experimentales, medición de absorbancia
molibdovanadato de amonio, se enrasaron con en la solución estándares y en las muestras.
agua destilada.
Concentración
Estándar Absorbancia
(mg/L)
Preparación de la muestra
1 2,01 ± 0,02 0.0325
En un vaso de 100.00 ± 0.04 mL, se pesó
0.1095 ± 0.0001 g de la muestra, se agregó 2 4,03 ± 0,03 0.4008
6.00 ± 0.015 mL de agua destilada y 4.0 ± 3 6,04 ± 0,04 0.4500
0.015 mL de HCl concentrado, se agito y se 4 8,05 ± 0,05 0.5226
filtró al vacío, seguidamente la solución filtrada 5 10,07 ± 0,06 0.5656
se transfirió a un matraz de 100.0 ± 0.1 mL y se Muestra 1 --- 0.3870
enraso con agua destilada (solución 1). Para Muestra 2 --- 0.3645
determinar la concentración de P en la muestra, Muestra 3 --- 0.3820
se realizó el siguiente calculo:
Promedio M. --- 0.3778

muestra∗1000 mg
∗1 Al graficar Absorbancia (A) en función de la
1g concentración (mg/L), se obtuvó una línea
∗1000 mL
(100.0 ± 0.1 ) mL
( 0.1095 ± 0.0001 ) g =1019.recta,
00 como se muestra en el Gráfico 2.
1L

[P muestra ]=( 1019.0 ± 0.1 ) mg/L

Disolución de la muestra
Seguidamente se tomó 3 matraz de
25.00 ± 0.05, a los cuales se les adicionó

11
 LABORATORIO DE ANÁ LISIS INDUSTRIAL - UNIVERSIDAD DEL VALLE

0.60 en base a esto y al r que se obtuvo en el gráfico

2. r = 0.9969, se realizó una prueba t para
0.55 f(x) = 0.03 x + 0.29 evaluar r.
R² = 0.99
Absorbancia (A)

0.50
Prueba t para evaluar r
0.45
1. Hipótesis nula H 0 :si r=0 no hay correlación
0.40
0.9969=0
0.35
2.00 4.00 6.00 8.00 10.00
2. Hipótesis alterna H 1 : r ≠ 0 hay correlación
Concentracion (mg/L) 0.9969 ≠ 0
Gráfico 2. Curva de calibración de las soluciones
estándar de P2O5, por el método patrón externo. 3. t calculado =21.99

Debido a que el punto 4 se encuentra por fuera
de la tendencia lineal de la curva se procedió a
realizar una prueba Q (prueba de Dixon)3 para
descartar o no el punto en la curva.
Prueba Q de Dixon
1. Hipótesis nula H 0 :no se descarta
2. Hipótesis alterna H 1 : si se descarta
4. t crítico= para ( n−2 )=3.18
5. Decisión: sit calculado >t critico Rechazo H 0
si12.30>3.18
6. Conclusión: Existe una relación lineal entre la
señal analítica y la concentración. El método es
lineal.

| X q −X p| |0.5226−0.5656| Datos estadísticos

3. t calculado = = Método mínimos cuadrados
Rango 0.5656−0.0325
Para determinar los valores por el método de
t calculado=0.08 mínimos cuadrados, se utilizaron las
ecuaciones 9,10,11,12,13,14,15,16,17,18,19 y
4. t crítico= para ( n−1 ) grados libertad 95 % 20. Los datos obtenidos experimentalmente por
método de mínimos cuadrados, se encuentran
t crítico=0.829 tabulados en la tabla 15.
Tabla 15. Datos estadísticos de la regresión lineal curva
5. Decisión: de calibración por el método patrón externo para P2O5.
Variable Valor
sit calculado <t crítico → Retengo H 0
si0.04 <0.829 Número de estándar n  5

Pendiente b  0.0272 mg/ L−1

6. Conclusión:
El dato atípico no se descarta con un 95% de Desviación estándar Sb 0.0012 mg/ L−1
pendiente
confianza de la curva de calibración.
Intervalo de confianza IC b (0.0272 ± 0.0015)

La linealidad determina la relación directa entre

pendiente mg/ L−1
la señal instrumental (absorbancia) y la Intercepto a 0.2939
concentración del producto analizado, el cual es
un método lineal cuando presenta un r > 0.999, Desviación estándar Sa 0.0082

12
 LABORATORIO DE ANÁ LISIS INDUSTRIAL - UNIVERSIDAD DEL VALLE

Intercepto [ P2 O5 muestra ]=3.083 mg/ L

Intervalo de confianza IC a
intercepto
(0.2939 ± 0.0103) SCx0=0.25 4

Coeficiente de determinación r2  0.9938 ¿

Coeficiente de correlación r 0.9969
IC=( 3.1 ± 0.3 ) mg /L
Desviación estándar residual Sr 0.008

A partir de la concentración de P en la muestra

Varianza residual Sr 2 0.00006
3.1 ± 0.3 mg/L, se determinó la concentración
de P en la muestra expresado en % p/p
Promedio de x x́ 6.04 mg/ L

Desviación en x S xx  40.525 (mg/ L ¿2 ( 3.1 ±0.3 ) mg

∗1 L
1 L sln
∗( 25.0 ±0.05 ) mL sln
Promedio de y ý  0.4583 1000 mL
∗( 100.0± 0.1 ) mL
Desviación en y S yy  0.0302
( 3.0 ±0.01 ) mL
∗1
( 0.1095± 0.0001 ) g M
Covarianza de x e y S xy  1.1032 mg/ L 1000 mg

A partir del método de mínimos cuadrados se % P=2.35( p/ p)

halló la ecuación de la recta por patrón externo.
Para el cálculo de la desviación de
A ± 0.008=( 0.0272 ± 0.0012 ) mg/ L−1 (Cx 0)+ ( 0.2939 ± 0.0082 ) (25)
concentración de P se utilizó la ecuación 5.

Determinación de la concentración de P en S( P)=0. 19

la muestra por el método de patrón externo.
Teniendo en cuenta la ecuación de la curva de
% P=( 2.3 ±0.2 ) ( p / p)
calibración por el método de patrón externo y
valor de la absorbancia obtenido en el promedio
de la muestra, se calculó la concentración de P
4. DISCUSIÓN DE RESULTADOS
mg/L en la muestra y su desviación estándar, al
igual que el intervalo de confianza al 95%, se
Para el análisis de los parámetros, primero se
utilizó ecuación 22, 23 y 24 respectivamente.
determinó el porcentaje de humedad que es el
valor
A ± 0.008=( 0.0272 ± 0.0012 ) mg/ L−1 (Cx 0)+ ( 0.2939 ± 0.0082 ) porcentual del peso total de la muestra
que corresponde a la concentración de agua
Donde (A) es el valor de la señal en la muestra presente.
(0.3778), ¿ ¿) es la concentración de P en mg/L,
despejando (Cx¿ ¿ 0) ¿ se tiene la concentración Para algunos procesos de laboratorio es muy
de P en la dilución. importante conocer el porcentaje de humedad
de las muestras orgánicas, ya que la cantidad
de agua que contienen puede acelerar o reducir
0.3778−(0.2939) el tiempo de vida de un producto, en este caso
Cx0 = =3. 0833
0.0272mg/ L −1
de alimento para perro. Como se pudo observar
en los resultados, el valor teórico permitido de
13
 LABORATORIO DE ANÁ LISIS INDUSTRIAL - UNIVERSIDAD DEL VALLE
Humedad (máx.) es 12%, lo cual no se
encuentra tan alejado del obtenido
experimentalmente.
Por otra parte, es importante determinar el
porcentaje de cenizas en los alimentos, ya que
estas están constituidas por el residuo
inorgánico que queda después de que la
materia orgánica se ha quemado, es decir, es
una medida del total de minerales presentes en
un alimento.
Dependiendo de la cantidad y tipo de
minerales, será la calidad del producto, como
también su estabilidad microbiológica, ya que
los altos contenidos de estos pueden retardar el
crecimiento de ciertos microorganismos y en la
parte de nutrición, algunos son esenciales para
la salud de los perros (Ca, P, K, Na), mientras
que otros son tóxicos (Pb, Hg, Cd, Al).
En teoría el porcentaje de Ceniza (máx.) es
11%, mientras que el resultado obtenido
experimentalmente fue de (10.287±0.003) %,
con una diferencia pequeña, al igual que en el
parámetro analizado anteriormente,
probablemente debido a que no fue suficiente el
tiempo al que estuvo sometida la muestra en el
horno y en la mufla.
Otro parámetro importante para tener en cuenta
en el análisis de una muestra de alimento de
perro, es el contenido de grasas, puesto que
mmuchas grasas representan una forma
concentrada de energía y son importantes para
la operación de los músculos (movimiento) y los
órganos del cuerpo de las mascotas.
La mayoría de los alimentos secos para perros
contienen entre el 7% a 15% de grasas, en esta
presentación el contenido de Grasa (min.) es de
12% y de acuerdo a los resultados
experimentales el valor determinado fue de
(11.57±0.002) %, lo que indica que esta dentro
de los parámetros permitidos.
Este último parámetro se determinó por el
método de extracción Soxhlet, cuyo objetivo es
determinar la concentración de la materia grasa
14
cruda o extracto etéreo libre del material
vegetal (alimento).
El proceso de esta técnica, como ya se explicó
anteriormente consiste en hacer hervir en el
matraz el disolvente (éter de petróleo) con el
cual se va a extraer la materia sólida deseada
que se encuentra en la muestra depositado en
el cartucho del “soxhlet”. Los vapores del
disolvente ascienden por el extractor y se
condensan en el refrigerante cayendo gota a
gota sobre el cartucho. La parte soluble pasa
por gravedad al matraz.
Por último, es indispensable tener en cuenta
que el calcio es un mineral esencial para la
construcción y mantenimiento de los huesos y
los dientes de los organismos vivos y es muy
importante que se ingiera en cantidades
adecuadas, especialmente los primeros meses,
ya que es en esta etapa cuando se crean las
reservas de calcio en el cuerpo para el resto de
la vida de los perros. Por otro lado, también es
fundamental entender que la energía
fundamental de los seres vivos, ya sean plantas
o animales, es la denominada (ATP) fosfato de
adenosina, cuya composición se basa
principalmente en el fósforo y que se encuentra
repartido a lo largo de todo el cuerpo, bien sea
en la sangre, los músculos, los nervios, e
incluso en dientes y huesos.
Para la cuantificación de Ca se usó
espectroscopia de absorción atómica con llama,
debido a su amplia variedad de matrices,
mientras que la concentración de P se
determinó por espectroscopia ultravioleta a
partir del P2 O 5 . Los resultados obtenidos como
se mostro anteriormente, son aceptables y se
encuentran dentro de especificación, con
diferencias en comparación al teórico muy
pequeños, como resultado de los diferentes
errores sistemáticos y aleatorios presentes en
el desarrollo de la práctica.
5. CONCLUSIONES
Se logro determinar el porcentaje de humedad,
ceniza y de grasa de una muestra de alimento
para perros, obteniendo los siguientes
resultados, (9.35±0.03)%, (10.287±0.003) % y
 LABORATORIO DE ANÁ LISIS INDUSTRIAL - UNIVERSIDAD DEL VALLE

(11.57±0.002) %, respectivamente. Estos

resultados estuvieron dentro de los parámetros
garantizados por el fabricante; sin embargo, el
análisis de grasa que quedó fuera del contenido
garantizado en el empaque mínimo del 12%.

Se pudo cuantificar el Ca y P, mediante

espectrofotometría de absorción atómica y
ultravioleta, consiguiendo una concentración de
ambos en la muestra expresada en % (p/p) de
(0.344±0.005) y (2.3±0.2), respectivamente.

Por otro lado, por medio la técnica de

extracción soxhlet se pudo determinar el
contenido en porcentaje de materia grasa
presente en la muestra.

6. REFERENCIAS
1. Skoog D; West D; Holler F; Stanley R.
Fundamentos de Quimica analítica. Errores
aleatorios en el análisis químico. Edición 9a
Cengage Learning Editores S.A. México. pp.
86, 110 y 173.

2. Norma Técnica Colombiana NTC 6240;

Alimento para animales; Determinación del
Contenido de Grasa o Aceite. Método Soxhlet;
ICONTEC; septiembre de 2017; Bogotá D.C,
Colombia; pp 2-4.

3. Miller, J.N., Miller, J.C. Estadística y

Quimiometría para Química Analítica. Capítulo
4ta ed., editorial Prentice Hall; Paginas 111-130.

4.

5.

15