Artículo de Biología Molecular N° 2.

Presentado el 07 de septiembre de 2020 – GrupoL1B

OBTENCIÓN DE BIOMASA. PRACTICA # 2

OBTAINING BIOMASS. PRACTICE # 2

Yovisna1 Caraballo1, Josias2 Cordero2, Nevis3 Correa3, Yesica4 Sanchez4

Email: nevicorrea2001@gmail.com

Universidad de Córdoba
Facultad de Ciencias Básicas
Biología
Montería
2020

Presentado a: Álvaro José Lorduy

Biólogo, M.Sc en Biotecnología. Universidad de Córdoba

RESUMEN

En el contexto energético, la biomasa puede considerarse como la materia orgánica originada en un

proceso biológico, espontaneo o provocado, utilizable como fuente de energía orgánica de las aguas
residuales y los lodos de depuradora así como la fracción orgánica de los residuos sólidos. En la
práctica de extracción de biomasa se tuvo como objetivo principal la obtención de la biomasa y
extracción de ADN genómico y plasmidial, a partir de una muestra de E. Coli.

Palabras Clave: ADN, biomasa, genómico, plasmidial.

ABSTRACT

In the energy context, biomass can be considered as organic matter originated in a biological process,
spontaneous or probocado, usable as a source of organic energy from wastewater and sewage sludge
as well as the organic fraction of solid waste. In the practice of biomass extraction, the main objective
was to obtain biomass and extraction of genomic and plamidial DNA from a sample of E. Coli.

Keywords: ADN, Biomass, Genomic, Plasmidial.

1. OBJETIVOS

Describir las pautas y recomendaciones generales para la obtención de biomasa y preparación para
una posterior extracción del ADN genómico y plasmidial.
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2. INTRODUCCIÓN
La biomasa es el uso materia orgánica como
fuente energía. Por su amplia definición. Se
ve expresa por un amplio conjunto de
materias orgánicas que se caracteriza por su
heterogeneidad, tanto por su origen como por
su naturaleza. La biomasa puede considerarse
como la materia orgánica originada en un
proceso biológico, espontáneo o provocado,
utilizable como fuente de energía. Estos
recursos biomásicos pueden agruparse de
forma general en agrícolas y forestales. La
transformación de biomasa en energía se
puede llevar a cabo en procesos: extracción
directa; métodos bioquímicos.
3. MATERIALES Y MÉTODOS
Para este procedimiento se utilizaron los
reactivos Cepa de escherichia coli y claro
liria Bertani, para llevar a cabo con éxito el
procedimiento se utilizaron los siguientes
materiales:
Centrifuga, micropipeta de 100-1000 ul,
nevera, pipetas de 1 y 2 ml, pera automática,
viales, tubos eppendorf, caja de Petri,
guantes, tapabocas.
Primeramente se preparó el caldo LB con
antibióticos (ampicilina), luego se tomó con
el asa una pequeña cantidad de colonias de E.
Coli contenidas en la caja de Petri, y se
suspendió el tubo de ensayo con caldo LB en
presencia de un mechero de alcohol, se
incubó el cultivo por 18-20 horas a 37 grados,
después de alerce cumplido el tiempo se sacó
el tubo y con la micropipeta automática se
tomó 1,5 ml el cultivo E. Coli y se depositó
al tubo eppendorf, posteriormente el tubo se
tapó y se introdujo a la centrífuga con un
tiempo de 3 minutos, al final del centrifugado
se descartó el sobrenadante y se llenó
nuevamente el tubo con 1,5ml del cultivo E.
Coli y se volvió a introducir a la centrífuga
repitiendo el procedimiento, posteriormente
la muestra se guardó al refrigerador a unos –
20 grados
4. ANALISIS Y DISCUSIÓN DE
RESULTADOS
La E. coli, que es una especie bacteriana de
considerable importancia científica,
económica y médica. Están incluidas en esta
especie cepas no patógenas y otras que son
capaces de causar enfermedades entéricas y
diversos tipos de infecciones
extraintestinales en humanos y animales
(Johnson, 2002). Separándolo de su medio de
cultivo a través de la centrifugación durante
tres minutos a 12000 r.p.m. y descartando el
sobrenadante. Se obtuvo una gran cantidad de
biomasa, la cual sirvió para la posterior
obtención de ADN genómico y plasmídico.
5. PREGUNTAS
COMPLEMENTARIAS
. 1) ¿Para qué se hace la obtención de biomasa
de la bacteria E. coli antes de la extracción de
ADN bacteriano?
R//. Para realizar la extracción de ADN
bacterianos, es necesario que el ADN se
encuentre libre de enzimas, proteínas o
agentes externos que puedan degradarlo o
dañarlo, es por eso que se hace necesario
realizar la obtención de biomasa ya que en la
obtención de biomasa el resultado son
organismos vivos y viables
2) ¿Porque se utiliza el caldo LB para hacer
la inoculación del cultivo bacteriano de E.
coli y no otro medio de cultivo?
R//. El caldo LB contiene peptona de caseína
y extracto de levadura que proporcionan al
medio los nutrientes necesarios para el
desarrollo óptimo de la mayoría de los
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microorganismos. El cloruro de sodio ayuda
a mantener el equilibrio osmótico. Esto a su
vez, le permite a la Bacteria E. coli, crecer y
desarrollarse de manera favorable en este
medio, por eso la utilidad del caldo.
6. CONCLUSIONES
La realización de este estudio explica de
manera detallada en que consiste la obtención
de biomasa, la cual se describe como un
proceso muy importante ya que
principalmente lo que se hace es utilizar la
materia orgánica y transformarla en una
fuente de energía, además esta puede ser
originada por un proceso biológico,
espontáneo o provocado. El cultivo de E. coli
que se encontraba en un sobrenadante de
caldo nutritivo ayudó de manera satisfactoria
a que se diera una buena obtención de
biomasa ya que las condiciones y los
componentes que esta poseía favorecía
considerablemente al cultivo, alcanzando con
éxito el objetivo planteado.
7. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
Fusconi, R., Godinho, M. J. L., Bossola, N.
R. S. (2005). Characterization and culture on
sugarcane molasses of Gordonia
Polyisoprenivorans CCT 7137, a new strain
isolated from contaminated groundwater in
Brazil.World Journal of Microbiology and
Biotechnology, 21 (8-9), 1425- 1431
pathogenic
Escherichia coli. In: Escherichia coli:
Virulence mechanisms of a versatile
pathogen. Donnenberg MS, Ed. Elsevier
Science Inc. USA 2002a, 55-77.
Peeters E, Nelis HJ, Coenye T.
Comparisons of multiple methods for
quantification of microbial biofilms grown in
microtiter plates. J Microbial Methods 2008,
72: 157-165.
., Bhattacharyya,
R., Wolfe, A.J. y Shiloach, J. (2005). Glucose
metabolism at high density growth of E. coli
B and E. coli K: Differences in metabolic
pathways are responsible for efficient
glucose utilization in E. coli B as determined
by microarrays and Northern blot analyses.
Biotechnology and Bioengineering 90- 805–
820.