UNIVERSIDAD NACIONAL EXPERIMENTAL

FRANCISCO DE MIRANDA
PROGRAMA DE CIENCIAS VETERINARIAS
UNIDAD CURRICULAR HISTOLOGIA Y EMBRIOLOGIA
VETERINARIA

M.V Libni Chacón

HISTOTECNIA???
UNEFM
PARAFINA
 TÉCNICA DE INCLUSIÓN EN PARAFINA
PASOS:
1. TOMA DE MUESTRA

Necropsia

Necropsia Biopsia

Tamaño de la Muestra: 0,5 – 1 cm

Evitar AUTOLISIS (Fijadores)
 TÉCNICA DE INCLUSIÓN EN PARAFINA
2. FIJACION

Fijadores Físicos
Fijadores Químicos (Formol al 10 %)

VOLUMEN DEL FORMOL

 TÉCNICA DE INCLUSIÓN EN PARAFINA
3. DESHIDRATACION
Alcohol Puro (Creciente)
 TÉCNICA DE INCLUSIÓN EN PARAFINA
4. DIAFANIZACION O ACLARAMIENTO

XILOL

INCORRECTA
DESHIDRATACION
 TÉCNICA DE INCLUSIÓN EN PARAFINA
5. INCLUSION EN PARAFINA
Tipos de Parafina:
 Parafina Blanda (45 – 52 °C)
 Parafina Semidura ( 53 – 58 ° C) UNEFM
 Parafina Dura ( 59 – 65 °C)

ESTUFA
 TÉCNICA DE INCLUSIÓN EN PARAFINA
6. FORMACION DEL BLOQUE DE PARAFINA

Barras de Leuckart

Bloque de Parafina
 TÉCNICA DE INCLUSIÓN EN PARAFINA
7. CORTE DEL BLOQUE DE PARAFINA

MICROTOMO
 TÉCNICA DE INCLUSIÓN EN PARAFINA
CORTES SERIADOS DE LA MUESTRA

( cortes de 5 – 8 µm )
 TÉCNICA DE INCLUSIÓN EN PARAFINA
BAÑO DE MARIA

PESCA DE LA MUESTRA

45 ° C
 TÉCNICA DE INCLUSIÓN EN PARAFINA
8. DESPARAFINAR (XILOL)

9. HIDRATACION

Alcohol
Decreciente
 TÉCNICA DE INCLUSIÓN EN PARAFINA
10. COLORACION DE LA MUESTRA

COLORANTES : EOSINA - HEMATOXILINA

 TÉCNICA DE INCLUSIÓN EN PARAFINA
COLORACION CRUZADA
Colorante HEMATOXILINA N’UCLEO
ADN - ARN
Básico

Colorante EOSINA CITOPLASMA

Acido
 TÉCNICA DE INCLUSIÓN EN PARAFINA
11. DESHIDRATACION
Alcohol Puro (Creciente)
 TÉCNICA DE INCLUSIÓN EN PARAFINA
11. MONTAJE

Lámina Porta objeto

Lamina Cubre objeto

Bálsamo o Martex de Canadá

TÉCNICA DE INCLUSIÓN EN PARAFINA