Manual de Microbiología Ambiental

AISLAMIENTO DE HONGOS AMBIENTALES

(Duración de la práctica: 10 días)
Fecha de presentación: 01 de julio del 2020
Lugar: Aula virtual UNAJMA
1. Materiales
- 200 gramos de papa pelada y picada en rodajas o en cuadrados medianos, el
cual debe estar lavado.
- 10 gramos de colapiz o gelatina sin sabor o gelatina de cualquier sabor que
tengan en casa.
- 10 gramos de azúcar (glucosa o sacarosa)
- 01 cápsula de antibiótico (gentamicina o amoxicilina).
- 06 frascos de vidrio de boca ancha (pueden ser frascos de penicilina o de
antibióticos vacíos y limpios, frascos de vidrio de jugos de frutas, etc.).
- 01 balanza
- Un vaso medidor de volúmenes.
- 01 cuchara de metal
- Papel toalla o papel higiénico.
- Hilo pabilo o lana para amarrar los frascos donde se colocarán los medios de
cultivo.
- Plumón marcador o lápiz o cinta masking tape.
- Papel reciclado.
- 01 cocina eléctrica
- 01 cuaderno de apuntes
- 01 colador fino
- 01 botella de agua mineral de medio litro.
- Algodón
- Fósforo

2. Preparación del medio de cultivo.

- Pesar las papas, lavarlas y colocarlos en medio litro de agua, en una olla a
cocinar por aproximadamente 10 a 15 minutos. Tener cuidado a no sancochar
excesivamente la papa.
- Luego cernir con ayuda de una gasa o colador y obtener el líquido o agua
donde se sancochó la papa.
- Medir el volumen del líquido aproximadamente 250 mililitros y colocarlos en
un recipiente limpio y agregarle el azúcar y el colapiz o gelatina. Someterlo al
calor hasta que la gelatina se haya disuelto por completo.
- Servir el medio en las botellas con un volumen aproximado de 30 a 40 ml cada
botella. El volumen dependerá del tamaño de los recipientes donde se
colocarán los medios. Solo colocar un poco menos de la mitad del volumen
de la botella a utilizar.
- Cada botella debe estar con su tapón de algodón y/o con un papel cubriendo
la boca del tubo y debidamente amarrado con hilo pabilo o lana con la
finalidad de que no se abra y se exponga el frasco al ambiente.
- Colocar las botellas en baño maría o en una olla autoclave si es que tuvieran
en casa y someterlo por espacio de 15 minutos en olla autoclave o 25 minutos
en el baño maría.

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Manual de Microbiología Ambiental

- Posteriormente dejar enfriar las botellas con el medio de cultivo inclinado

sobre un soporte, para obtener medios inclinados sólidos.

- Luego guardarlos en refrigeración o en temperatura ambiente para utilizarlos

en la siembra de hongos ambientales, obtenidos de cualquier ambiente de su
interés (cuarto, cocina, baño, almacén, panadería, etc).

3. Siembra de hongos ambientales

- Siguiendo todos los protocolos de seguridad, para la siembra de los hongos
ambientales, utilizarán dos frascos con medios de cultivo preparados, los
cuales serán colocados en ambientes de su elección, donde destaparán los
frascos con medio estéril y lo dejarán destapado por espacio de 8 a 12 horas
en el ambiente que quieren evaluar.
- Luego de ese tiempo procederán a tapar el frasco con el mismo algodón o
papel con el cual prepararon y esterilizaron el medio, para posteriormente
rotular el frasco con el siguiente detalle: fecha de colección de la muestra,
ambiente muestreado y el nombre del medio de cultivo.
- Monitorear y evaluar diariamente el crecimiento de los hongos, hasta que se
identifiquen los micelios característicos del hongo, para lo cual deberán
describir las características macroscópicas del micelio como son: aspecto,
color, forma, tamaño, etc).
- En su cuaderno de apuntes deberán escribir todos los pasos que han seguido
en su procedimiento, así como reportar las fotos tomadas del proceso de
crecimiento lento de los hongos ambientales.
- Realizar su informe de práctica, de acuerdo a las instrucciones dadas en el aula
virtual.
- Para descartar los frascos con crecimiento microbiano (hongos), deberán
hervir los frascos en baño maría por 30 minutos o en olla autoclave por 15
minutos para su posterior descarte y limpieza de los frascos.