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APUNTE Micosis y Diangostico Micologico PDF
APUNTE Micosis y Diangostico Micologico PDF
Giusiano
MICOSIS
Y
DIAGNÓSTICO MICOLOGICO
Gustavo G. Giusiano
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Cátedra de Microbiología, Parasitología e Inmunología Dr. Gustavo E. Giusiano
1) Micosis superficiales
A. Dermatofitosis o tiñas
B. Malasseziosis
C. Tiña negra
D. Piedra negra
E. Piedra blanca
2) Micosis subcutáneas
A. Cromomicosis
B. Esporotricosis
C. Micetomas
D. Lobomicosis
a) Micosis oportunistas
A. Aspergilosis
B. Candidiasis
C. Criptococosis
D. Feohifomicosis
E. Hialohifomicosis
F. Zigomicosis
G. Pneumocistosis
MICOSIS SUPERFICIALES
A. Dermatofitosis o tiñas:
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Estudio micológico:
Se solicita como examen micológico directo y cultivo indicando la o las lesiones que
tuviera el paciente.
Toma de muestra:
Lesiones de piel lisa, pequeños y grandes pliegues: Se realiza por raspado cuidadoso de la
lesión, en especial de los bordes, con bisturí estéril de poco filo. Se recogerán escamas en
una placa de Petri estéril o entre dos portaobjetos estériles.
En caso de infección de pelos se extraerán pelos enfermos con pinza de depilar y raspado
de la lesión.
En el caso de infección en uñas (onicomicosis) depende del tipo de afección, puede
rasparse la cara profunda de la zona afectada (entre la lámina de la uña y el lecho
subungual) o bien, la tabla ungueal.
Si las muestras tomadas no pueden ser procesadas de inmediato, o deben ser derivadas a
un laboratorio alejado, se tomará la precaución de cerrar perfectamente las cajas de Petri o
portaobjetos que contienen las muestras y remitirlas cuidadosamente embaladas e
identificadas. Se conservan perfectamente a temperatura ambiente durante muchos meses
por lo que el envío no ofrece mayores inconvenientes.
Colocar una parte del material extraído en un portaobjetos, agregar una gota de KOH 20%-
40% y cubrir con cubreobjetos. Calentar suavemente el preparado sobre la llama de un
mechero. Dejar enfriar y observar al microscopio con óptica seca 10X y 40X. También se
puede dejar actuar el KOH durante 1 hora sin calentar y después observar.
Observación microscópica
En piel y uñas se deben observar hifas hialinas tabicadas, ramificadas o no, de 6 a 10µ de
diámetro.
En ocasiones pueden observarse artroconidios, que son células rectangulares de paredes
gruesas, formadas por fragmentación de las estructuras tubulares de los hongos.
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En los pelos parasitados se debe observar la disposición de artroconidias. Esta puede ser:
Cultivo
Medios de cultivo para hongos: Sabouraud, Agar papa dextrosa, Lactrimel, fraccionado en
tubos en pico de flauta con el agregado de antibióticos, por ejemplo cloranfenicol.
Se siembra una suficiente cantidad de escamas de piel, pelos o raspado de uñas, haciendo
toques sobre la superficie del medio de cultivo. Incubar un tubo a 25-28ºC y otro a 35-37ºC
durante 10 a 15 días con observaciones periódicas.
Con ansa estéril en forma de gancho separar una porción de la colonia tomando la parte
aérea del crecimiento. Colocar sobre un portaobjetos y agregar una gota de azul de
lactofenol. Disgregar el material con la ayuda de dos agujas estériles. Cubrir con un
cubreobjetos y calentar ligeramente. Dejar enfriar y observar al microscopio con 40X.
Microsporum canis:
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Microsporum gypseum:
Trichophyton mentagrophytes:
Trichophyton rubrum:
Trichophyton tonsurans:
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Epidermphyton floccusum:
B. Malasseziosis
Pitiriasis versicolor
Las zonas del cuerpo más comúnmente afectadas son tronco, cara, cuello y brazos.
Diagnóstico
Se solicita como examen micológico directo y cultivo indicando la o las lesiones que
tuviera el paciente.
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Los exámenes directos se realizan con hidróxido de potasio o de sodio al 20-40% con el
agregado de tinta Parker azul negro permanente.
El hidróxido tiene por objeto aclarar la capa cornea de la piel y la tinta la coloración del
hongo.
Otra técnica de observación utiliza azul de metileno al 1% con buenos rendimientos.
Se colocan las escamas con una gota del hidróxido o el azul de metileno entre portaobjetos
y cubreobjetos, se calienta suavemente, se deja durante 10 a 20 minutos y se observa con
objetivo de 40x.
Figura 1 Figura 2
INFORME:
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PARACOCCIDIOIDOMICOSIS
Existen diferentes formas clínicas y las localizaciones más frecuentes son: pulmón, ganglios,
mucosas, tejido cutáneo, glándulas suprarrenales, hueso y cerebro, por lo tanto, los
materiales posibles de estudio para el diagnóstico pueden ser: esputo, lavado bronquial,
biopsias, raspado de lesiones cutáneas y mucosas, etc.
Diagnóstico
Se solicita como examen micológico directo y cultivo de la o las lesiones que tuviera el
paciente o de las muestras a estudiar.
Fresco
Se realiza un montaje del material con Azul de
lactofenol. En el caso de biopsias se debe
realizar un tratamiento previo con mortero para
obtener preparaciones finas. Para los esputos
puede hacerse con hidróxido de potasio 20-
40% para clarificar mejor la preparación.
Observar al microscopio con óptica seca 10X y
40X. Se observan levaduras de pared gruesa y
refringente de 10 a 40µ que pueden presentar
1,2 o más brotes, generalmente se observan multibrotantes.
Coloraciones
Con otra porción de la muestra se realizan extendidos y se colorean
con Giemsa, también Gram y Ziehl Neelsen, para observar no solo
elementos de hongos, sino también para descartar otros posibles
agentes de infección.
La coloración de Grocott en preparaciones histológicas permite la
coloración selectiva de los elementos de hongos que aparecen negros.
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Cultivo
En medio de Sabouraud, Agar infusión cerebro-corazón y medios especiales, siempre con el
agregado de antibióticos. Se incuban un mínimo de 6 tubos repartidos 3 a 25-28º y 3 a 35-
37º. Las lecturas se realizan hasta las 6 semanas.
HISTOPLASMOSIS
Los órganos más frecuentemente afectados en las formas diseminadas a partir del
pulmón son: hígado, bazo, ganglios linfáticos, médula ósea, piel y mucosas. Por lo tanto los
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materiales de estudio para el diagnóstico pueden ser: Esputo, lavado bronquial, sangre,
aspirado de médula ósea, biopsias, raspado de lesiones cutáneas y mucosas, etc.
Diagnóstico
Se solicita como examen micológico directo y cultivo de la o las lesiones que tuviera el
paciente o de las muestras a estudiar.
Fresco:
Se realiza un montaje del material con Azul de lactofenol o con hidróxido de potasio al 20-
40%. Observar al microscopio con óptica seca 10X y 40X. En el caso de biopsias se debe
realizar un tratamiento previo con mortero para obtener preparaciones finas.
En este paso del examen micológico generalmente es muy difícil ver el agente
etiológico ya que este organismo en estado parasitario es una levadura de tamaño muy
reducido, mide 1-5µ y es intracelular.
Coloraciones
Con otra porción de la muestra se realizan extendidos y se colorean con Giemsa, Gram,
Ziehl Neelsen, para observar no solo elementos de hongos, sino también para descartar
otros posibles agentes de infección. La coloración de Grocott en preparaciones histológicas
permite la coloración selectiva de los elementos de hongos que aparecen negros.
INFORME:
Se observan elementos levaduriformes compatibles con Histoplasma capsulatum.
Cultivo
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COCCIDIOIDOMICOSIS
Coccidioides sp. es un hongo dimórfico que en su fase saprofítica vive en el suelo de zonas
áridas. Es endémica de extensas zonas secas de América. En nuestro país en la pampa
occidental seca, donde la precipitación anual no es mayor a 600 mm3.
Diagnóstico
Se solicita como examen micológico directo y cultivo de la o las lesiones que tuviera el
paciente o de las muestras a estudiar.
Coloraciones
Con otra porción de la muestra se realizan
extendidos y se colorean con Giemsa, también Gram y Ziehl Neelsen, para observar no solo
elementos de hongos, sino también para descartar otros posibles agentes de infección. La
coloración de Grocott en preparaciones histológicas permite la coloración selectiva de los
elementos de hongos que aparecen negros.
INFORME:
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Cultivo
En medio de Sabouraud, Agar infusión cerebro-corazón y medios especiales, siempre con el
agregado de antibióticos. Se incuban un mínimo de 6 tubos repartidos 3 a 25-28º y 3 a 35-
37ºC, hasta 6 semanas.
Desarrolla una colonia blanca con micelio aéreo que toma color
pardo con el tiempo, en ambas temperaturas, ya que el
dimorfismo de este hongo es dependiente de los nutrientes.
Microscópicamente se observa micelio hialino tabicado
fragmentado en clamido-artroconidias.
MICOSIS SUBCUTÁNEAS
Las micosis subcutáneas se adquieren generalmente por vía traumática, que permite la
inoculación del agente. Por esta razón los brazos y piernas son las localizaciones más
frecuentes de este tipo de afecciones.
ESPOROTRICOSIS
Estos nódulos luego reblandecen y pueden ulcerarse formando un goma e incluso tender a
la cicatrización. Después de días o semanas pueden aparece nuevos nódulos como
lesiones en escalera siguiendo la vía linfática con linfangitis y adenopatías satélites. No hay
diseminación ni compromiso general del paciente.
La lesión se presenta en forma de gomas que se diseminan siguiendo la vía linfática. Para el
diagnóstico de la esporotricosis se estudia el material de punción de los gomas o el exudado
de aquellos que se encuentren ulcerados, o bien, biopsias de los mismos.
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Diagnóstico
Se solicita como examen micológico directo y cultivo de la o las lesiones que tuviera el
paciente o de las muestras a estudiar.
Es importante indicar siempre el diagnóstico presuntivo como orientación el tipo de muestra
a tomar.
Fresco: Generalmente es difícil ver el agente etiológico ya que este organismo en estado
parasitario es una levadura muy pequeña, en ocasiones se puede observar la presencia
cuerpos en forma de cigarro o los llamados cuerpos asteroides. Se realiza un montaje del
material con Azul de lactofenol o con hidróxido de potasio al 20-40% y se observa al
microscopio con óptica seca a 40X.
Coloraciones: extendidos del material se colorean con Giemsa, Gram, Ziehl Neelsen, para
observar no solo elementos de hongos, sino también para descartar otros posibles agentes
de infección. En preparaciones histológicas se emplea PAS y Grocott, esta última permite la
coloración selectiva de los elementos de hongos que aparecen negros.
Cultivo
En medio de Sabouraud con el agregado de antibióticos, a 25-28º y agar Sangre 35-37º,
hasta 4 semanas.
A 25-28º desarrolla una colonia que inicialmente (3 a 6 días) tiene aspecto levaduriforme y
color beige. A partir de los 10 a 15 días, toma color pardo que se va oscureciendo hasta
adquirir el color negro. Las colonias se presentan con estriaciones del centro hacia la
periferia y a veces con una elevación central.
CROMOMICOSIS
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jardineros, que trabajan descalzos, con una edad promedio de entre los 30 y 50 años,
siendo rara en los niños.
Estos agentes penetran por inoculación traumática originando una lesión de evolución
crónica y localizada, en la piel y tejido subcutáneo. Las localizaciones más frecuentes son
pies, piernas, manos y brazos. También se han informado en glúteos, pabellón auricular,
pecho y abdomen.
Diagnóstico
Se solicita como examen micológico directo y cultivo de la o las lesiones que tuviera el
paciente o de las muestras a estudiar.
Es importante indicar siempre el diagnóstico presuntivo como orientación el tipo de muestra
a tomar.
Los materiales de estudio pueden ser escamas obtenidas por raspado con bisturí estéril de
las lesiones o bien, materiales de biopsias de las mismas.
Coloraciones: Extendidos del material se colorean con Giemsa y Gram para observar no
solo elementos de hongos, sino también para descartar otros posibles agentes de infección.
En preparaciones histológicas se emplea PAS y Grocott, esta última permite la coloración
selectiva de los elementos de hongos que aparecen negros.
INFORME:
Cultivo
En medio de Sabouraud con el agregado de antibióticos, a 25-28º y 35-37º, hasta 4
semanas. Según los diferentes especies se obtendrás colonias de hongos dematiáceos con
características específicas.
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MICETOMAS
Diagnóstico
Se solicita como examen micológico directo y cultivo de la o las lesiones que tuviera el
paciente o de las muestras a estudiar.
Es importante indicar siempre el diagnóstico presuntivo como orientación el tipo de muestra
a tomar.
Fresco: Los granos deben fragmentarse por cortes o ayuda de mortero y solución salina. Se
realiza un montaje del material con Azul de lactofenol y se observa al microscopio con óptica
seca 10X y 40X.
* En el caso de los eumicetomas, estos granos pueden ser blancos o negros, según el
agente etiológico sea un hongo hialino o dematiaceo. Están constituidos por hifas gruesas,
vesiculosas, tabicadas.
Coloraciones: Las coloraciones más usadas para actinomicetales son Fite y Kinyoun.
Giemsa y Gram para observar, no solo elementos de hongos, sino también para descartar
otros posibles agentes de infección.
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Cultivos:
En el caso de eumicetomas, estos granos se cultivan en medio de Sabouraud con el
agregado de antibióticos, a 25ºC, hasta 4 semanas.
En el caso de actinomicetomas se siembran en agar sangre, agar infusión cerebro corazón,
medio de Lowestein-Jensen y Sabouraud con extracto de levadura, a 25ºC y 37ºC.
Según las diferentes agentes se obtendrán colonias con sus características específicas.
Agentes de micetomas
Bibliografia:
2.- Arenas, Roberto. Micología Médica Ilustrada. Clínica, Laboratorio y Terapéutica. Ed.
Interamericana. Mc Graw Hill. 1993.
3.- De Hoog, G. S & Guarro, J. Atlas of Clínical Fungi. CBS Universitat. Rovira i Virgili. 1995.
4.- Zinsser, Joklik, W.K. y otros. Microbiología. 20a edición. Ed, Médica Panamericana,
Buenos Aires. 1994.
8.- Kendrick, B. The fifth Kingdom. Micologue Pub. Waterloo, Ontario. Cánada, 1985.
10.- Kwon-Chung, K.J.; Bennett J.E. Medical Micology. Lea & Febiger. Philadelphia. London.
3ra ed. 1991.
11.- Negroni, P; Negroni, R. Micosis Cutáneas y Viscerales. López Libreros. Bs As. 1989.
13.- Rippon, J,W. Tratado de Micología Médica. Tercera edición. Interamericana. Mc Graw
Hill. 1990.
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