UNIVERSISDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

LABORATORIO DE QUIMICA ORGANICA

PRACTICA N° 5
CROMATOGRAFIA DE COMPUESTOS ORGANICOS

NOMBRES Y APELLIDOS: BRYAN PERCY PEREZ VILLANUEVA CODIGO: 18170081

MARCO TEORICO

El término cromatografía fue introducido en 1906 por el botánico ruso Mikhalil Tswett, para
hacer referencia a la separación de los pigmentos contenidos en extractos vegetales, conforme
éstos se filtraban a través de una columna rellena con un sólido poroso (Chicharro, 2005).
Keulemans (1959) definió cromatografía como “Método físico de separación en el que los
componentes a separar se distribuyen en dos fases, una de las cuales constituye un lecho
estacionario de gran desarrollo superficial y la otra un fluido que pasa a través o a lo largo del
lecho estacionario (fase móvil)”.

Por tanto, la cromatografía comprende procesos en los que los componentes de una mezcla,
disueltos en una fase móvil, se van desplazando con diferente velocidad a través de una fase
estacionaria. La adecuada elección de estas fases puede permitir que tales diferencias se
traduzcan en una separación efectiva de los solutos, a la vez que éstos pueden identificarse
atendiendo a su particular velocidad de avance.

En cuanto a la naturaleza del proceso cromatográfico, los componentes disueltos de una

mezcla se mueven continuamente entre las dos fases, se asocian momentáneamente con la
fase estacionaria, no migran, mientras todos los componentes momentáneamente presentes
en la fase móvil migran a la misma velocidad que ésta. Entonces, la separación no ocurre en
ninguna de las dos fases, sino que es el resultado de continuos movimientos de las moléculas
entre ellas. Los componentes se separan cuando uno de ellos pasa a una velocidad diferente
en la fase estacionaria respecto del resto. El tiempo empleado por cualquiera de los
componentes en la fase estacionaria depende de su afinidad por ésta en las condiciones
ensayadas.
CUESTIONARIO

1. ¿Qué es una serie eluotropica?

Una serie eluotrópica es un listado de varios compuestos ordenados según su poder de elución
para un adsorbente dado. Tales series son útiles para determinar los disolventes necesarios en
la cromatografía de una mezcla de compuestos químicos. Normalmente tales series comienzan
con disolventes no-polares, como el n-hexano, y finalizan en disolventes polares como metanol
o agua. El orden de disolventes en una serie eluotrópica depende a la vez de la fase
estacionaria, así como del compuesto empleado para determinar el orden.

2. Mencione las aplicaciones de la HPLC y la cromatografía de gases (GC)

En cromatografía de gases la muestra se volatiliza y se inyecta en la cabeza de una columna

cromatográfica. La elución se produce por el flujo de una fase móvil que es un gas inerte, y a
diferencia de la mayoría de los tipos de cromatografía, la fase móvil no interacciona con las
moléculas del analito; su única función es la de transportar el analito a través de la columna.

Aplicaciones

Medioambientales: Análisis de pesticidas y herbicidas, análisis de hidrocarburos, semivolátiles

y volátiles, análisis del aire...

Alimentos y aromas: fragancias y aromas, aceites, bebidas, ácidos orgánicos, azúcares, FAMES,
ésteres metílicos, triglicéridos, alcoholes...

Química Industrial: alcoholes, ácidos orgánicos, aminas, aldehídos y cetonas, ésteres y glicoles,
hidrocarburos, disolventes, anilinas, gases inorgánicos...

Biociencia: drogas, fármacos, alcoholes y contaminantes en sangre, disolventes residuales...

Derivadas del petróleo: gas natural, gases permanentes, gas de refinería, gasolinas, gasóleos,
parafinas...

En la cromatografía líquida, la fase móvil es un líquido que fluye a través de una columna que
contiene a la fase fija. La separación cromatográfica en HPLC es el resultado de las
interacciones específicas entre las moléculas de la muestra en ambas fases, móvil y
estacionaria

A diferencia de la cromatografía de gases, la cromatografía de líquidos de alto rendimiento

(HPLC, de high-performance liquid chromatography) no está limitada por la volatilidad o la
estabilidad térmica de la muestra.

La HPLC es capaz de separar macromoléculas y especies iónicas, productos naturales lábiles,

materiales poliméricos y una gran variedad de otros grupos polifuncionales de alto peso
molecular. Con una fase móvil líquida interactiva, otro parámetro se encuentra disponible para
la selectividad, en adición a una fase estacionaria activa.

La HPLC ofrece una mayor variedad de fases estacionarias, lo que permite una mayor gama de
estas interacciones selectivas y más posibilidades para la separación.

 Campos de Aplicación de HPLC

 Fármacos: Antibióticos, sedantes esteroides, analgésicos

 Bioquímica: Aminoácidos, proteínas, carbohidratos, lípidos

 Productos de alimentación: Edulcorantes artificiales, antioxidantes, aflatoxinas,

aditivos

 Productos de la industria química: Aromáticos condensados, tensoactivos,

propulsores, colorantes

 Contaminantes: fenoles, Pesticidas, herbicidas, PCB

 Química forense: Drogas, venenos, alcohol en sangre, narcóticos

 Medicina clínica: Ácidos biliares, metabolitos de drogas, extractos de orina,

estrógenos.

3. Diga que es la electroforesis y cuál es su fundamento

Los orígenes de esta técnica se remontan a los trabajos de Tiselius en 1973, quien logró
separar mezclas de proteínas (micelas cargadas eléctricamente) por su distinta movilidad en
un soporte poroso al que se aplicaba un campo eléctrico. Posteriormente se ha aplicado a la
separación de cualquier especie cargada o alrededor de una doble capa eléctrica.

El fundamento de la técnica consiste en depositar sobre un medio poroso una mezcla de

especies cargadas. Por aplicación de un campo eléctrico entre los extremos del soporte poroso
las especies se separan en función de sus cargas y su movilidad iónica en ese medio. Cuanto
más elevado sean el voltaje y la intensidad en menos tiempo se produce la separación; sin
embargo, valores altos de estas variables provocan un aumento de temperatura, con la
consiguiente evaporación del disolvente y acumulación de sales del tampón, lo cual es
indeseable.

4. Diga Usted que métodos cromatográficos se podrían aplicar en su carrera profesional.

Explique cada uno.

Se utiliza cromatografía de gases y cromatografía de líquidos en alta resolución para lo

siguiente:

1. Determinación de concentración y porcentaje de solvente en un producto

agroquímico terminado.

2. Control de calidad de pureza de solvente, como alcohol etílico anhidro, tolueno, xileno,
benceno, que entran como materias primas a una planta.

3. Determinación del contenido de principio activo de un antitóxico en una planta de

medicamentos.

4. Control de calidad de la pureza de materias primas entrantes a bodega de una fábrica

de productos medicinales, tales como: alcohol etílico al 95%, glicerina, alcohol
isopropílico, o-toluidina, paracetamol, butanol, acetato de etilo, alcanfor, y muchos
otros.

5. Control de calidad de producto terminado en una fábrica de cosméticos, como, por

ejemplo, porcentaje de alcohol en una laca para el cabello, acetona en un esmalte de
unas, colorantes en casi todos los productos elaborados, porcentaje de control, en las
esencias que se utilizan para la confección de perfumes, allí es muy importante,
realizar esta prueba.

6. En fábricas de adhesivos, pegamentos, pinturas, para controlar que el producto

terminado lleve las cantidades indicadas de solventes, humectantes, colorantes,
gomas, resinas, poliuretanos, secantes, re-llenantes, esponjan tés, suspensores,
emulsificantes.

7. En fábricas de alimentos, para control de calidad de producto terminado y materias

primas, tales como: proteínas, sabores, sustancias que dan el olor, o sea
aromatizantes, pues algunos son sintéticos, como el olor a pollo, y solo este tiene
variantes, como pollo con barbacoa, pollo frito, pollo asado, determinación de
colorantes.

8. En la industria petrolera, es un método indispensable, para analizar las composiciones

de casi todos los productos que van saliendo, del cracking, los tipos de gasolinas, los
compuestos orgánicos destinados a síntesis.
9. En el control de la producción vinícola, tiene infinidad de usos, desde usarse como una
nariz electrónica, para caracterización de vinos, de acuerdo con parámetros
previamente establecidos por expertos, concentración de componentes, análisis de
aminas, como etanolamina, metilamina, agmatin.

En la actualidad la cromatografía es una técnica ampliamente utilizada en la resolución de

macromoléculas de interés en la industria, biotecnológica, biológica y bioquímica.