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Introducción
La pureza de una droga es un aspecto sobre el cual tratan las Farmacopeas, Formularios,
Códex, Normas, etc.
La evaluación de las drogas se realiza por varios métodos como son: La percepción, la
microscopia, el físico-químico, y el biológico.
Se refiere a la evaluación por medio de los órganos sensoriales y tiene en cuenta entre
otros: Morfología; tamaño; olor; color externo e interno y fractura de los órganos vegetales.
Introducción.
Esta fase del trabajo de laboratorio tiene como objetivos familiarizar al alumno con drogas
crudas y capacitarlos para interpretar adecuadamente las monografías que sobre las -
mismas se describen en los compendios oficiales.
Parte experimental.
Nombre científico.
Uso tradicional o reconocido.
Nombre vulgar o vernáculo.
Planta endémica o aclimatada.
Familia botánica.
Con la ayuda del microscopio estereoscopio, el alumno realizará una monografía de las
drogas crudas a evaluar, teniendo en cuenta para las mismas los siguientes acápites:
A. Órganos subterráneos.
2. Color.
3. Olor.
8. Fractura: Describir como se rompe la pieza cuando se somete a presión; puede ser
completa, incompleta, corta, fibrosa, dura, débil, flexible, cornea, etc.
9. Otras particularidades.
B. Corteza y leños.
1. Forma de la pieza: Curvada, aplanada, acanalada, tubo simple, tubo doble, tubo
compuesto.
C. Hojas.
F armacognosia y Productos Naturales 3
Para describir las hojas podemos guiarnos por las siguientes características:
4. Color.
5. Olor.
D. Flores.
1. Estado de desarrollo.
3. Color.
4. Olor.
E. Frutos.
Al hacerse el estudio macroscópico del fruto deben definirse que tipo y / o que parte del
mismo constituye la droga. Las características más importantes son:
2. Dehiscencia.
3. Forma.
4. Dimensiones.
5. Color.
6. Olor.
F. Semillas
2. Color.
3. Olor.
4. Peculiaridades.
En la descripción de las hojas, uno de los parámetros evaluados son sus dimensiones,
(Largo y ancho), los cuales pueden variar en dependencia del grado de desarrollo de la
planta en el momento de la recolección.
En el estudio macro morfológico de las hojas se incluye por tanto la evaluación de sus
dimensiones.
Actividad Práctica No 2
Introducción
Toda evidencia de ataque por roedores, como pelos, heces y orina, es inaceptable y revela
un gran descuido en la recolección y almacenamiento.
Los roedores son trasmisores potenciales de diversas enfermedades, entre ellas; fiebre
tifoidea, la peste bubónica y la lepra murera. Las ratas también albergan garrapatas y ácaros
que son vectores de otras enfermedades.
El deterioro de las drogas por insectos y en particular por roedores, convierten a la droga en
su contrario, es decir, algo potencialmente peligroso para la salud humana, lo cual implica
que no es apta para el consumo.
F armacognosia y Productos Naturales 8
El objetivo de esta actividad práctica es la detección en las drogas de insectos, los cuales se
separan de las drogas por medios mecánicos y por medio de líquidos de diversa densidad.
Los aspectos teóricos deben ser revisados en el libro de texto.
Parte experimental
Materiales y reactivos.
Placa de Petri.
Microscopio estereo.
Embudo separador.
Plancha eléctrica.
Beaker de 500 mL.
Beaker de 100 mL.
Beaker de 50 mL.
Tapones de goma.
Varilla de vidrio.
Pinzas.
Éter de petróleo 60-80 oC.
Los escíbalos de roedores pueden observarse al examinar la droga extendida en una placa
de Petri.
Tienen forma cilíndrica terminando en punta más aguda en uno de los extremos. El color
varía de gris a marrón oscuro, casi negro con mayor frecuencia. El tamaño esta
generalmente en el rango de 3 - 10 mm. Tiene una densidad mayor que el agua, lo cual
debe comprobarse colocando el escíbalo en un beaker con agua suficiente.
C. Detección de insectos.
Actividad práctica No 3
Introducción
Se entiende por materias extrañas, aquellas partes de la droga que no corresponden a las
exigencias que señala la monografía en cuanto a color, tamaño, estado y grado de
pulverización, mezclas de otras partes de la planta o de otras plantas, polvo, arena, piedra y
otras sustancias minerales.
Este método se basa en el examen visual de la droga cruda, pudiendo auxiliarse de lupas o
del microscopio estereoscópico. El objetivo de esta actividad es determinar el contenido de
materias extrañas en una droga.
Parte experimental
Materiales y Equipos.
Placas de Petri
Balanza técnica.
Lupa o microscopio estereoscopio.
A. Peso de la muestra.
Para este ensayo se utilizan, según el tipo de droga, las cantidades siguientes:
B. Orden de ensayos.
C. Procedimiento.
X
P= x 100
M
Donde:
Los métodos microscópicos ayudan a evidenciar los caracteres histológicos de las drogas,
así como a detectar posibles adulteraciones de las drogas en polvo. También es útil en
microanálisis cualitativo y cuantitativo de polen, estomas, esporas, pelos epidérmicos,
etc. En estos métodos juega un papel importante los conocimientos adquiridos en
histología vegetal.
La histología se ocupa del estudio microscópico de los caracteres anatómicos de las células
y tejidos; mientras que la histoquímica estudia las técnicas encaminadas a la localización
microscópica de los compuestos químicos contenidos en las células y tejidos. Aunque son
consideradas como ciencias independientes, no cabe dudas de que mediante el empleo de
las técnicas histoquímicas se aumenta el contraste de las distintas estructuras anatómicas y
se facilita el estudio histológico.
Actividad práctica No 4
Introducción.
El corte puede realizarse a mano con una cuchilla afilada, pero el éxito de esta operación
depende de la habilidad del operario y del tipo de material, por ello este método no es -
ventajoso ya que el mismo no es reproducible y algunos materiales no se pueden cortar
adecuadamente.
Para obtener cortes finos y reproducibles se utiliza el micrótomo; pero para ello es necesario
darle a la muestra la debida consistencia y sujeción; empleándose para ello algunos
métodos, entre los que se encuentra la inclusión.
En parafina.
En gelatina.
En carbowax.
Son objetivos de esta práctica el aprendizaje de los métodos de corte e inclusión así como
de la identificación de los elementos anatómicos del tejido estudiado. Para la realización de
esta actividad el estudiante debe revisar los aspectos teóricos correspondientes en el libro
de texto.
Parte experimental.
Parafina
Baño histológico.
Carbowax 600 y 1500.
Micrótomo.
Papel grueso.
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Microscopio.
Dedales para muestras.
Seis beakers.
Regla.
Tijera.
A. Inclusión en parafina.
Para confeccionar el molde de inclusión, sobre un papel grueso se trazan las líneas que se
muestran en la Fig.2 y se siguen las siguientes instrucciones:
C D
A A'
B B'
a b
a' b'
C' D'
Fig. 2 Molde de inclusión en parafina.
Doble el papel grueso a lo largo de CC' y DD'. Después doble a lo largo de AA' y BB'.
Doble el papel hacia atrás según aa' y bb'.
Doble y saque hacia atrás el papel según las diagonales cortas de un extremo. Para
completar el dobles ponga el final y lado perpendicular con el dobles de la diagonal,
corte y vire hacia adentro la hoja resultante del final de la pared.
Levante el lado opuesto de la pared, doble esta hoja hacia atrás.
Finalmente doble hacia abajo y hacia atrás la sección superior de la pared final y -
cierre así de modo seguro, un extremo. Repita toda la operación con el otro extremo
para obtener el molde.
El proceso normal de deshidratación dura unas 12 horas para las piezas chicas y de 27 a
49 horas para las piezas mayores. La impregnación de 4 a 6 horas en el primer recipiente -
de parafina fundida para desplazar el reactivo intermediario otras 4 a 6 horas en el segundo
recipiente.
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Reactivo
Intermediario
ESTUFA
Para adaptar este esquema al tiempo de la práctica se utilizarán drogas que no requieran el
proceso de fijación o lavado, procediéndose de la siguiente forma:
Para los dos pasos de impregnación el tiempo a emplear será de 15 min. en cada uno. -
Finalmente se incluye en el molde colocando la pieza incluida, sostenida con una pinza y -
añadiendo la parafina fundida, esperando hasta su solidificación.
B. Inclusión en Carbowax.
Una vez realizado el corte para su observación, es necesario realizar los siguientes pasos:
MORDAZA
BASE
TORNILLO MICROMETRICO
Actividad práctica No 5
Introducción.
Dentro de los métodos empleados para darle a la muestra a cortar la debida consistencia,
se encuentran también los de congelación entre los cuales podemos citar:
CO2.
Congelación con N2 líquido.
Efecto Peltier.
De acuerdo con el método utilizado para producir el frío y la congelación utilizaremos para
realizar los cortes el micrótomo de enfriamiento con CO2 y el micrótomo de enfriamiento con
N2 líquido.
ORIFICIOS
TORNILLO
MICROMETRICO
REGULADOR
BALON DE CO2
El cabezal no es más que un cilindro hueco de poca altura con una serie de agujeros en la
periferia para permitir la salida del gas. Sobre la tapa del cabezal se dispone un -
pequeño cilindro de papel (abierto por ambos extremos) donde se coloca la muestra en el -
líquido de inclusión.
Las flechas rectas indican los dos movimientos básicos del micrótomo para realizar el corte.
El objetivo de esta actividad, es el aprendizaje de los métodos de corte por congelación.
Parte experimental.
Placas Petri
Micrótomo por congelación por CO2
Papel para cilindro.
Goteros.
Micrótomo de congelación por N2 líquido.
Líquido de inclusión
Pinzas
Microscopio de transmisión.
CUCHILLA
Fig. 8
Esquema del ORIFICIOS
micrótomo de
congelación
BASE
por nitrógeno
líquido.
A. Corte con -
micrótomo de
CO2.
Se coloca un -
TERMO O DEWAR
cilindro -
pequeño de -
papel en la -
parte central -
de la superficie del cabezal. Mediante la llave de regulación se suministra CO2 al cabezal
para producir la congelación.
Se añaden unas gotas de líquido para sellar el fondo. Con una pinza se adhiere la muestra
al fondo congelado y se orienta en la posición adecuada. Se llena el cilindro con líquido de
inclusión, una vez congelada la muestra se retira el cilindro de papel con una cuchilla y se
efectúa el corte en la misma forma utilizada para realizar el corte por inclusión en parafina.
La congelación se produce inyectando aire en la vasija termo para forzar la salida del N2 -
hacia el cabezal. Los procedimientos para la preparación de la muestra y el corte son
similares a los descritos para el corte por congelación con CO2.
Actividad práctica No 6
Introducción.
Es importante para la realización de esta actividad que el alumno maneje los métodos de
corte del tejido vegetal.
Parte experimental.
Cortes histológicos
Microscopio de transmisión
Porta y cubre objetos.
Plancha eléctrica.
Goteros
Reactivos de tinción
Microscopio de luz UV.
Cámaras de tinción.
1.Sales de potasio:
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2. Sales de sodio.
Se colocan los cortes en una solución de acetato de zinc-uranilo. A la luz ultravioleta los
cristales se observan fuertemente fluorescentes, con ambos extremos afilados; pueden
también ser romboides, hexagonales y deformados.
3. Sales de calcio.
4. Sales de hierro.
5. Sales de cobre.
La reacción del -naftol (Molisch) resulta positiva con todas las categorías
de azucares, inulina, almidón y por tanto no es especifica, se humedece la muestra
con -naftol al 20 % en alcohol y se añade ácido sulfhídrico concentrado. Aparece
una coloración rojo-violáceo.
1. Monosacáridos.
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2. Celulosa.
3. Hemi-celulosa.
Son fácilmente solubles en ácido sulfúrico al 30%; algunas hemicelulosas lo son en solución
caliente de hidrato de cloral.
4. Pectinas.
5. Mucílagos y gomas.
Las características de los mucílagos de hincharse se hace visible tratándolos con idantreno.
Se pone el corte seco o el polvo en la solución de dos partes de idantreno con ocho partes
de agua y se observa inmediatamente que los trozos de mucílagos se hinchan; observados
al microscopio se muestran como manchas claras llenas de partículas de idantreno, o sea
aparece como una mancha transparente en el preparado oscuro.
C. Detección de Lignina.
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3. Si durante 5 min. se trata con una solución de permanganato, se lava con agua,
luego se trata con ácido clorhídrico diluido durante dos min. se lava de nuevo y
se trata con amoniaco, aparece una coloración rosada.
2. EL súber puede también teñirse con rojo escarlata al 0,5 % en solución de hidrato de
cloral, con, adición de amoniaco a manera de alcalinizar; se calienta varias veces y
se observa al cabo de i0 min.
4. Unas gotas de solución saturada de yodo, añadidas al corte previamente tratado con
ácido sulfúrico al 90 % y lavado con agua, tiñe el súber y la cutina de amarillo.
2. Después del tratamiento con Sudan III en glicerina, aplicando calor y lavando con
alcohol al 50 %, aparecen las gotas de grasas coloreadas de rojo.
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G. Detección de albúminas.
1. La reacción de Millón produce, cuando se calienta con el corte una coloración roja
difusa, que indica el grupo de la tirosina en la molécula de albúmina.
2. La reacción de biuret, utiliza solución saturada de sulfato de cobre por más o menos
media hora; luego de lavar con agua y tratar con hidróxido de potasio al 40 %, se
forma una coloración violeta que indica grupos CONH2 o sea el enlace peptídico.
4. Los granos de aleurona son disueltos en hidrato de cloral y para hacerlos visibles se
colocan los preparados en aceite de almendras, glicerina o una solución de azúcar
concentrada; así aparecen como pequeñas esferitas.
I. Detección de aldehídos.
K. Detección de alcaloides.
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El corte se humedece con una solución de ácido tartárico al 5% en etanol. Se deja secar y
se añade solución reactiva de Dragendorff. Los alcaloides se detectan como puntos o
aglomeraciones rojo-ladrillo sobre fondo amarillo-naranja.
L. Detección de antocianinas.
Los colores rojo o azul de los cortes de forma natural, debido a las antocianinas, cambian a
un color verde si el corte se trata con una gota de amoniaco concentrado.
M. Detección de flavonoides.
El corte, se humedece con etanol y se añade una solución de hidróxido de potasio al 10%
en etanol. Las partes que contienen flavonoides se colorean de amarillo.
N. Detección de quinonas.
P. Detección de glucósidos.
Q. Detección de taninos.
Al observarse al microscopio drogas que contienen taninos, se destacan éstos como masas
de contenido marrón oscuro y/o rojo.
3. El corte se humedece con una solución acuosa de cloruro férrico al10 % y una gota
de solución diluida (1-5%) de carbonato de sodio en agua. Si hay taninos la
preparación se colorea de azul o verde.
Actividad practica No 7
Introducción.
Las características microscópicas junto con las reacciones microquímicas de las drogas en
polvo se utilizan para la identificación de las especies. Estas características son lo
suficientemente constante para posibilitar una evaluación adecuada de la droga.
Características tales como el color y el olor y aspectos cualitativos de las reacciones con
yodo y floroglucina, la presencia o ausencia de oxalato de calcio, ofrecen criterios para
clasificar las drogas en polvo.
Parte experimental
En cualquier examen de una droga en polvo, se deben hacer las siguientes observaciones:
A. Color
El color puede revelar la parte del vegetal de que se trate. Las hojas y las plantas
compuestas son generalmente verdes, las drogas de corteza son bronceadas o. marrones,
mientras que los órganos bajo tierra son generalmente de colores claros.
Los almidones y la mayor parte de los órganos bajo tierra dan una reacción positiva intensa.
Leños, corteza y flores frecuentemente contienen almidón y los gránulos, o son pequeños o
están ausentes. (Fig.9)
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Cortezas y leños generalmente contienen tejido lignificado en cantidades más grandes que
cualquier otra parte de la planta. La ausencia de fibras lignificadas es una característica
frecuente y significativa en la identificación.
La detección y caracterización de las siguientes células o tejidos en las drogas en polvo son
necesarias para su identificación.
1) Oxalato de calcio. Cuando están presentes como cristales se describen para cada
especie y son de considerable importancia en la caracterización (Fig 19)
Las pruebas de taninos, aceites fijos, aceites esenciales, quinonas, etc; resultan también de
valor. Para la realización de todos los ensayos químicos pueden llevarse a cabo las
reacciones referidas en la actividad practica anterior.
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Mezcla aclarante. Hidrato de cloral / glicerina / agua (5:3:2) Se suman los efectos
aclarantes del hidrato de cloral y de la glicerina, las soluciones no son excesivamente
viscosas. Es un buen aclarante.
Agua de Yodo. Se agitan en un matráz con l00 mL de agua y uno o dos cristales de
yoduro de potasio, aproximadamente 0,1 g de yodo. No se filtra, en el fondo del
frasco deberá quedar siempre algo de yodo sin disolver.
Sudán III. Se disuelve bajo reflujo 0,5 g de rojo Sudan III en 50 mL de etanol al 96%,
o de isopropanol. Se deja enfriar, se filtra y se añaden 50 mL de glicerina. Aceites
fijos, aceites esenciales, ceras, cutina y suberina. fijan el colorante llpófilo
coloreándose de rojo después de algún tiempo.
F armacognosia y Productos Naturales 29
Fig. 16 Fibras.
Fig. 17 Esclereidos.
Actividad practica No 8
Introducción.
Portaobjetos
Cubreobjetos
Solución de Calberla
Etanol
Petrolato sólido
Polen de diferentes especies.
Microscopio de transmisión
Micrómetro ocular.
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Micrómetro de platina.
Se exponen tres láminas recubiertas con una película fina y uniforme de petrolato, durante
24 horas a la atmósfera. Seleccione un lugar que ofrezca protección de la lluvia, viento etc.
Traslade las láminas en una caja apropiada, tiña cada lámina con solución de Calberla,
cúbrala y cuente el número de granos de polen bajo el cubreobjetos en un área definida.
Determine el número promedio de granos por centímetro cuadrado. Seleccione el polen
predominante. Haga un conteo diferencial e informe todos los resultados.
Esta etapa de trabajo de laboratorio tiene como objetivo ejercitar a los estudiantes en la
realización de métodos de análisis que permitan la evaluación de drogas crudas.
Actividad práctica No 9
Introducción
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Se denominan cenizas totales al residuo inorgánico que se obtiene al incinerar una droga,
fundamentalmente en su determinación gravimétrica.
Las cenizas solubles en agua es aquella parte de las cenizas totales que se disuelven en
agua y las ácido insolubles, el residuo que se obtiene después de la disolución de las
cenizas totales en ácido clorhídrico al 10%.
Parte experimental
Materiales y reactivos.
Se enfría el crisol en una desecadora y se pesa, repitiéndose el proceso hasta que dos
pesadas sucesivas no difieran en más de 0.5mg por g (masa constante)
Para obtener la masa constante los intervalos entre calentamiento y pesada son de 30min.
Si el residuo presenta trazas de carbón, se le añaden unas gotas de solución de peróxido
de hidrógeno concentrado, ácido nítrico o solución de nitrato de amonio al 10% m/v y se
calienta hasta evaporar los solventes. Al enfriar el crisol el residuo es de color blanco o casi
blanco.
M2 - M
C= x 100
M1 - M
M2 - Ma
Ca = x 100
M1 - M
Procedimiento.
Actividad práctica No 10
Introducción.
Es por ello, que los límites en el contenido de agua debe ser determinado para las drogas
vegetales, especialmente para aquellas que absorben fácilmente la humedad o en las
cuales el deterioro puede ser promovido por la presencia de un exceso de agua.
Parte experimental.
Materiales y Equipos.
Procedimiento.
Se basa en la destilación por arrastre con tolueno, del agua contenida en la droga.
Parte experimental.
Procedimiento.
Vt - V1
H= x 100
M
Actividad práctica No 11
Parte experimental.
Materiales y reactivos.
Balanza analítica.
Disolvente indicado (agua, alcohol o mezclas hidroalcohólicas)
Erlenmeyer de boca esmerilada con tapa 250 mL.
Zaranda.
Embudo.
Pipetas de 20 mL.
Papel de filtro.
Cápsula de porcelana.
Baño de agua.
Estufa.
Procedimiento.
R.500.100
Ss =
M (100-H)
Estas reacciones se caracterizan porque son selectivas para las clases o grupos
de compuestos que se investigan, son simples y rápidas, detectan la mínima
cantidad posible y utilizan un mínimo de equipo de laboratorio.
No debe olvidarse que cuando se obtiene un resultado negativo, este puede deberse
a la ausencia de la clase de compuestos buscada, a la selección errónea del
solvente para extraer, a la presencia de sustancias extrañas que interfieran o a
una concentración en el orden de trazas del compuesto ensayado. Con relación
a la selección del disolvente, este da lugar a diferentes métodos o esquemas de
trabajo para el tamizaje fitoquímico.
Actividad práctica No 12
TAMIZAJE FITOQUÍMICO
Introducción.
En este caso se emplea un esquema general que utiliza la extracción sucesiva con
solventes de polaridad creciente. Para el desarrollo de esta actividad es necesario
rememorar las reacciones químicas estudiadas en las asignaturas precedentes y
revisar otras reacciones de mayor especificidad para cada grupo en su libro de texto.
Parte experimental.
Materiales y reactivos.
Gradillas
Éter etílico
Tubos de ensayo
Etanol.
Agua destilada
Reactivos del tamizaje.
Procedimiento:
30 - 50 g MATERIAL VEGETAL
FILTRAR
EXTRACTO ETÉREO
Medir volumen y calcular concentración
RESIDUO SÓLIDO
Secar y pesar
EXTRACTO ALCOHÓLICO
Medir volumen y calcular concentración
RESIDUO SÓLIDO
Secar y pesar
FILTRAR
EXTRACTO ACUOSO
Medir volumen y calcular concentración
RESIDUO SÓLIDO
Secar, pesar y desechar
EXTRACTO ETÉREO
DIVIDIR EN FRACCIONES
5 mL 5 mL
ENSAYO DE SUDAN ENSAYO DE BALJET
(ACEITES Y GRASAS) (LACTONAS Y COUMARINAS)
15 mL (dividir en 3 porciones) 5 mL
ENSAYOS DE DRAGENDORFF ENSAYO DE LIEBERMANN-BUCHARD
(TRITERPENOS-ESTEROIDES)
MAYER Y WAGNER
(ALCALOIDES)
Fig. 22 Esquema de las reacciones a realizar en el extracto de éter etílico.
DIVIDIR EN FRACCIONES
1mL 2 mL 2 mL 2 mL
ENSAYO DE ENSAYO DE ENSAYO DE 2 mL ENSAYO DE
2 mL ENSAYO DE 6 ML en 3 porciones
CATEQUINAS FEHLING ENSAYO DE Cl Fe KEDDE
(AZ. REDUCTORES) 3 BORNTRAGER (CARDENÓLIDOS) ENSAYOS DE DRAGENDORFF
LIEBERMAN-BUCHARD (FENOLES Y T ANINOS) (QUINONAS)
(TRITERPENOS-ESTEROIDES) MAYER Y WAGNER
2 mL (ALCALOIDES)
ENSAYO DE 2 mL
RESINAS ENSAYO DE 2 mL
2 mL NINHIDRINA ENSAYO DE
ENSAYO DE BALJET (AMINOÁCIDOS) ANTOCIANIDINA
(LACT ONAS)
2 mL
ENSAYO ESPUMA 2 mL
(SAPONINAS)
ENSAYO DE
SHINODA
(FLAVONOIDES)
EXTRACTO ACUOSO
DIVIDIR EN FRACCIONES
6 ML en 3 porciones
ENSAYOS DE DRAGENDORFF 10 mL
MAYER Y WAGNER ENSAYO DE
(ALCALOIDES)
MUCÍLAGOS
2 mL
ENSAYO DE SHINODA
(FLAVONOIDES) 1 Ó 2 GOTAS
ENSAYO DE
2 mL PRINCIPIOS AMARGOS
ENSAYO DE FEHLING
(AZ. REDUCTORES)
2 mL
ENSAYO DE CLORURO 2 mL
FÉRRICO ENSAYO DE ESPUMA
(TANINOS) (SAPONINAS)
Ensayo de Wagner: Se parte al igual que en los casos anteriores de la solución ácida,
añadiendo 2 ó 3 gotas del reactivo, clasificando los resultados de la misma forma.
Ensayo de Hidroxamato férrico para coumarinas: Una gota del extracto se coloca en
una placa de porcelana y se añade una gota de clorhidrato de hidroxilamina disuelto en
etanol al 10 %. Se añaden unas gotas de hidróxido de potasio al 10% en etanol y se
calienta a la llama hasta burbujeo, se añaden unas gotas de ácido clorhídrico 0.5
mol/L y una gota de cloruro férrico al 1% en agua. El desarrollo de una coloración
violeta (+), claro (++), intenso (+++).
A veces el ensayo queda en dos fases o desarrollo de color. Muy pocas veces puede
observarse el primer cambio. El tercer cambio generalmente ocurre cuando el material
evaluado tiene cantidades importantes de estos compuestos.
Ensayo de catequinas: Para ello, tome de la solución alcohólica obtenida una gota, con
la ayuda de un capilar y aplique la solución sobre papel de filtro. Sobre la mancha
aplique solución de carbonato de sodio. La aparición de una mancha verde carmelita a la
luz UV, indica un ensayo positivo.
TIPO DE EXTRACTO
METABOLITO ENSAYADO ETEREO ALCOHOLICO ACUOSO OTRO
Aclarando además:
Infusión: La droga se extrae con agua caliente, pero sin someterla a ebullición o
con agua fría.
El agua se vierte sobre ella, manteniendo bien cerrado el recipiente, durante unos
30 min.
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a y b, Hidrodestilación
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MENSTRUO
DROGA CRUDA
MACERACION
DECANT ACIO N
FRACCI ON I RESIDUO
MACERADO FILT RAR
ESCURRIR
FRACCI ON II RESIDUO
MENST RUO
PARA LAVAR
REPOSO
T ANQUE COLECTO R FILT RACION
PRODUCTO
TERMINADO
Actividad práctica No 13
Introducción.
Para la obtención de estos tipos de extractos, pueden ser empleados los métodos
de extracción siguientes: maceración, percolación y repercolación. Para realizar
estos procedimientos debe haberse comprobado la calidad de las materias primas
a utilizar (requisitos de calidad de la droga cruda y pureza y concentración del
menstruo)
Materiales y reactivos.
Procedimiento.
Materiales y reactivos
Procedimiento:
Materiales y reactivos
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Procedimiento:
Este proceso se repite por segunda vez. Los últimos 2 L de extracto obtenido
se reúnen y se concentran a una temperatura que no exceda los 60 oC hasta
obtener el volumen requerido (15% restante, se prefiere la concentración por
vacío).
Materiales y Reactivos.
Cuatro percoladores.
Algodón, gasa o papel de filtro.
Beakers.
Probeta.
Frasco con tapa.
Balanza técnica.
Droga cruda.
Menstruo seleccionado.
Procedimiento.
Excepto el paso de la extracción del percolador, los demás son válidos en este
método. Se prepara una batería de percoladores (4 ó 5) con la misma cantidad
F armacognosia y Productos Naturales 54
Extracciones:
6to día y siguientes: Siempre que haya droga cruda para seguir montando
nuevos percoladores se sigue igual que para el 5to día. Se recuerda que la
fracción del producto terminado se extrae del último, es decir del montado el día
anterior; y que el percolador mas agotado en cuanto a droga sale del proceso.
Actividad práctica No 14
Introducción.
Materiales y reactivos.
Procedimiento:
líquido al nivel empleado, si es preciso, una tira de papel para extraer el exceso y
secar exteriormente el picnómetro.
M -M
D25 = M 1 - M
2
donde:
Materiales y reactivos.
Refractómetro de Abbé
Varilla de vidrio.
Solución mezcla de alcohol etílico-éter dietílico (1:1) para la limpieza del equipo.
Procedimiento:
Se coloca sobre el prisma de medición una gota de agua destilada, utilizando para
ello una varilla de vidrio que no tenga cantos agudos, se ajusta el equipo
seleccionando la zona del espectro visible que aparece en la línea límite del
campo visual, moviendo el compensador cromático y colocando la intersección del
retículo sobre la línea límite de los campos claro y oscuro.
Se hacen tres lecturas y se calcula el promedio de las mismas. Dos o más lecturas
no deben diferir en más de 0.002.
Materiales y reactivos
Procedimiento.
Procedimiento:
5,0 mL del producto se llevan a una cápsula previamente tarada a 105 ºC, se
evapora sobre baño de agua hasta que el residuo esté aparentemente seco. Se
pasa entonces hacia una estufa y se deja hasta peso constante (aproximadamente 3
h). Se retira la cápsula de la estufa y se coloca en una desecadora hasta que
alcance la temperatura ambiente.
Materiales y reactivos.
Procedimiento
M1 - M
P.E =
M2 - M
donde:
Se determina el por ciento de alcohol en la muestra según los datos de la Tabla II.
Materiales y reactivos
Procedimiento
Color.
Altura.
Descripción de las diferentes partes.
Cambios de coloración con vapores de amoníaco.
Examen bajo la luz ultravioleta.
Vivamente coloreada.
Poco coloreada.
Muy poco coloreada.
Altura: La altura de una imagen capilar se determina midiendo con una regla
graduada en cm, del borde inferior del papel a la franja, siendo esta
inversamente proporcional al grado alcohólico de la muestra. La altura promedio de
una imagen capilar es de 8 cm aproximadamente, de ahí que se pueden clasificar
las imágenes en:
Una de las zonas de mayor interés es la franja, que ésta puede ser o no
traslucida, lo que denotará la presencia de resinas o aceites esenciales y
grasas.
En la franja también debe describirse la forma que ésta adopta, dentro de ella: (Fig.
32).
Lineal.
Festonada
Dentada ( regular o irregular).
Profundamente dentada.
Las imágenes pueden variar su coloración desde el amarillo hasta el violeta, por la
acción de estos vapores y en otros casos puede no cambiar, es por ello que
resulta de gran interés para la caracterización de la imagen.
Contrariamente con el ensayo de alcalinidad en este caso debe dejarse secar bien
la tira de papel después de corrido el análisis, antes de observarla bajo la luz.
1. Factores extrínsecos:
2. Factores intrínsecos:
1.a) Calidad del papel de filtro: El soporte del análisis capilar, o sea, el papel de
filtro, juega un rol importante en el aspecto de la imagen obtenida, ya que
el mismo puede variar la altura de la imagen, el aspecto de la franja, etc. Debe
por tanto tenerse en cuenta la clase de papel y el sentido de la fibra del papel al
cortar las tiras.
Introducción
Los análisis cuantitativos de drogas y extractos requieren de una manipulación precisa para
lograr dosificar los principios activos ensayados.
Introducción
Dan reacciones características de coloración con las sales férricas y algunos reactivos de
precipitación.
Parte experimental
Materiales y reactivos.
SR ácido fosfotúngstico.
Matraz de 25 mL.
Soln. de carbonato de sodio.
Embudo.
Polvo de piel.
Papel de filtro 12 cm de diámetro
Pirogalol.
Espectrofotómetro UV-VIS.
Procedimiento.
F armacognosia y Productos Naturales 67
donde:
Parte experimental
Materiales y reactivos.
F armacognosia y Productos Naturales 68
Procedimiento.
Parte experimental.
Materiales y reactivos.
Etanol
Balanza analítica.
Tungstato de sodio
Erlenmeyer.
Ác. fosfomolíbdico
Zaranda.
Carbonato de sodio deshidratado
Embudo.
Ácido tánico
Papel de filtro.
Pipeta de 5mL.
Matraz aforado 50 mL.
F armacognosia y Productos Naturales 69
Equipo reflujo.
Procedimiento.
Reactivo B P M1 y M2
Am . P . 1000 .100
X=
Ap . Pm . (100 - p)
donde:
X = % de taninos en la droga.
Am = absorbancia de la muestra.
Ap = absorbancia de la soln de referencia.
P = masa de la sustancia de referencia (g).
P = % de humedad de la droga.
PM = masa de la droga (g)
1000 y 100 = factor matemático para el cálculo.
Solución de referencia.
Actividad práctica No 16
CUANTIFICACIÓN DE ALCALOIDES
Introducción
Así por ejemplo unos son volátiles (conicina), otros se descomponen (lobelina); otros se
racemizan (hiosciamina), otros se saponifican por los álcalis (cocaína),etc. Por estas
razones se procura encontrar para alcaloides el método preciso de dosificación, lo cual
explica las diversas técnicas que se conocen ante la imposibilidad de encontrar una sola
línea general.
Los métodos de purificación de alcaloides más usuales son los métodos químicos, físico-
químicos y biológicos.
Entre los métodos químicos, los más empleados son el gravimétrico, el volumétrico y entre
los físico-químicos el colorimétrico.
Parte experimental.
Materiales y reactivos.
Erlenmeyerde150 mL
Agitador mecánico.
Embudo
Bureta
Baño María
Algodón
F armacognosia y Productos Naturales 71
Éter etílico
Goma tragacanto.
Rojo de metilo.
HCL 0,1 mole/L.
NaOH 30 %.
Cloroformo.
Etanol
Procedimiento
Actividad práctica No 17
Introducción
Es conocido, que cuando el ácido perclórico se disuelve en ácido acético se forma el ión
acetacidio (CH3COOH2)+.
Como consecuencia, un ácido que sea fuerte donador de protones, es un electrolito más
débil en ácido acético que en agua.
En este caso, una solución de ácido perclórico en ácido acético presenta una acidez mayor
que en el agua, ya que el ión acetacidio formado es un donador de protones más fuertes
que el hidronio, cuestión reportada primeramente por Conant y Hall. Debido a la baja
constante dieléctrica del ácido acético, sólo una pequeña parte de la sal disuelta está
en forma iónica pudiendo por tanto, postular el equilibrio antes descrito.
Estas cuestiones serán determinantes para el viraje necesario en el punto final del indicador
a utilizar, violeta cristal, por interacción de éste con un medio de gran acidez.
Este indicador, estructuralmente, se caracteriza por el ión para-dimetil-amino-trifenil-
carbónico. En él, el átomo de carbono central debido a su deficiencia de electrones,
presenta características de atracción de electrones (antiauxócromo), mientras que los
anillos aromáticos forman el sistema de conjugación entre este átomo de carbono y el grupo
dimetilamino que cede electrones (auxocromo). Ambos grupos están conjugados y
resuenan, dando lugar de esta forma a la absorción en el visible. El átomo de nitrógeno, sin
embargo, es coordinativamente insaturado.
Por esta razón, el colorante actúa como una base poliacídica apantallando protones y de
esta forma, durante la aceptación de protones, la interacción del grupo amino nucleofílico
con el carbono central electrofílico gradualmente decrece y como consecuencia, el color
del indicador cambia.
Los equilibrios para el sistema ácido perclórico-violeta cristal propuestos por Kolthoff
y Bruckenstein son los siguientes:
En ellos se determinó que (a) y (b) tienen picos de absorción a 590 y 630nm
respectivamente, mientras que (c) absorbe por debajo de los 450 nm. Así el cambio de
violeta cristal es gradual y la acidez de cada cambio decrece por sucesivas adiciones de
protones, ya que el segundo y el tercer protón alcanzan un colorante ionizado
positivamente.
El objetivo de esta práctica es determinar las bases totales presentes en una droga,
empleando un método volumétrico.
Parte experimental
Materiales y reactivos
Erlenmeyer 25 y 50 mL.
Erlenmeyer de 100mL.
Embudo Buchner
Kitasato
Embudo separador
Frasco volumétrico 50 mL
Frasco volumétrico 25 mL Papel pH.
Baño María
Violeta cristal.
NH4OH conc.
Dicloro etano
H2S04 2%.
NaOH 5%
Cloroformo.
CO3K2.
Cl04H
CH3COOH.
Procedimiento
El proceso se repite como mínimo 2 veces para sacar un promedio. Se valora con la mezcla
ácida hasta cambio del indicador de violeta a azul proceso que debe realizarse gota a gota
para poder observar el cambio.
F armacognosia y Productos Naturales 74
C+f .P
R=
0,32
Donde:
Actividad práctica No 18
Introducción.
Parte experimental.
Materiales y reactivos.
Erlenmeyer de 150 mL
F armacognosia y Productos Naturales 75
Metanol-agua 1:1
Embudo
HCL 10 %.
Papel de filtro
Eter etílico.
Papel indicador rojo congo
H2S04 50 %.
Embudo separador
Soln. de NaOH 1 mol/L.
Soln. HCO3Na 1 mol/L.
Procedimiento.
Extraer 5 veces con 20 mL de éter etílico. Reunir las fases etéreas y separar la
fase acuosa que se desecha.
Actividad práctica No 19
Introducción.
Parte experimental.
Materiales y reactivos.
Balanza analítica
Alcohol etílico al 90 %.
Fenolftaleina.
Solución alcohólica KOH 0,1 mol/L.
Procedimiento.
56,1 . V . Z
IA =
g
donde:
Balanza analítica
Etanol al 95 %
F armacognosia y Productos Naturales 77
Frasco de saponificación
Fenolftaleina
Condensador
Soln acuosa NaOH 0,1 mol/L
Baño María
Soln alcoholica KOH 0,5 mol/L
Fragmentos de plato poroso
Soln HCL 0,5 mol/L
Procedimiento.
56,1 . (V - V') . N
IE =
g
donde:
56,1 . (V - V') . N
%E =
10g
donde:
Introducción.
Actividad práctica No 20
Introducción.
La destilación comprende variantes según si el material fresco o seco se altera por ebullición
con agua.
Además, la mezcla destilará a una temperatura constante mientras exista por lo menos algo
de cada uno de los componentes.
Para la obtención de aceites esenciales, pueden ser empleados alguno de los equipos
representados en la Fig. 26 epígrafe II.
Parte experimental.
Materiales y reactivos
Balanza analítica.
Plancha eléctrica o fuente de calor.
Balón o matraz de destilación.
Aparato para la determinación de aceite esencial.
Pesa filtrode25 mL.
F armacognosia y Productos Naturales 79
Procedimiento.
Se pesan 100 g de la droga seca y molida, sino se especifica otra cosa en la norma, se -
transfieren a un balón de destilación de 1 L, se añaden 400 mL de solución de cloruro de
sodio y se conecta el equipo de destilación de aceite. Se calienta el balón a ebullición y se
ajusta la destilación a 2-3 mL / min. Mantener la destilación por 2 h o más de acuerdo
a la monografía de la droga.
Los resultados se aproximan hasta las décimas. El aceite esencial obtenido se reserva
para su análisis correspondiente, dentro de los que se encuentran:
Se dice que el aceite esencial es soluble en N volúmenes (20 como máximo) de alcohol
etílico de determinada graduación, si el volumen mínimo de alcohol adicionado para
obtener una solución límpida es N veces el volumen de aceite esencial.
Procedimiento.
F armacognosia y Productos Naturales 80
Medir con pipeta 1 mL de aceite esencial previamente enfriado a 20 oC, el cual se lleva a
una probeta de 25 mL. Por medio de una bureta se añade el alcohol de la graduación a -
ensayar gota a gota al aceite esencial, agitando con frecuencia. Cuando se obtiene una -
solución límpida, se registra el volumen consumido.
B. PODER ROTATORIO.
Procedimiento.
Llenar el tubo del polarímetro con aceite esencial previamente enfriado a 20 oC, evitando
que queden burbujas de aire.
Realizar la determinación.
donde:
t =Poder rotatorio
= Ángulo de desviación de la luz.
l = longitud del tubo.
Actividad práctica No 21
Introducción.
Objetivo de la actividad.
Parte experimental.
Procedimiento.
Actividad práctica No 22
Introducción
El flavonoide principal del albedo, la naringenina se aisló por primera vez por De Vry en
1866, en las flores de los cítricos de Java, de las uvas y de diferentes cítricos amargos. Su
característica fundamental es su fuerte amargor, que necesita el tratamiento comercial de
los jugos con enzimas para hidrolizar el glicósido y eliminar su amargor.
O
alfa glucosa - O - beta glucosa OH
OH O
Parte experimental.
Materiales y reactivos.
Batidora
Equipo para destilar
Celite
Etanol
Isopropanol
Corteza de cítrico
Procedimiento
Una parte de corteza (en pedazos) en peso y 4 partes en peso de agua, se calientan a 90
o
C durante 10 min. y se filtra. El proceso de repite una vez más. Los extractos reunidos se
calientan a ebullición con un 1 % en peso de celite. Se filtra y se concentra hasta 1/9 parte
del volumen inicial. Se refrigera y la naringenina cristaliza como cristales octahidrato de p.f.
83 oC.
Realizar una cromatografía en capa delgada empleando celulosa como fase estacionaria y
como disolvente etanol – agua 60:40. Como revelador se emplea lámpara UV a 366 nm y
AlCl3 1% en metanol. Debe aparecer una mancha carmelitoza a Rf 0,86
Actividad práctica No 23
Introducción.
Las quinonas son dicetonas insaturadas, que por reducción se convierten en polifenoles, los
que se regeneran fácilmente por oxidación.
Objetivo de la actividad.
Parte experimental.
Materiales y reactivos.
Extracto de aloe.
Etanol.
HCl 1%.
Cloroformo.
Acetona.
Sílica gel G.
NaOH 5 %.
Benceno.
Beaker.
Plancha de calentamiento.
Embudo separador.
Mortero.
Placas cromatográficas.
Lámpara UV.
Tubos de ensayo.
Procedimiento.
c) Una alícuota se agita en tubo de ensayos con igual volumen de NaOH al 5%. Dejar
reposar. Observar la coloración de las fases.
Actividad práctica No 24
Introducción.
Las saponinas y en particular aquellas que contienen un aglicón de tipo esteroidal son de -
gran interés para la Industria farmacéutica, ya que los núcleos esteroidales sirven como
fuente de materia prima para la síntesis parcial de hormonas.
Para la realización de esta práctica el estudiante debe revisar los siguientes aspectos:
Objetivo de la actividad:
Parte experimental
Materiales y reactivos.
HCl 4 mol/L.
Equipo de reflujo.
n-hexano.
Embudo.
Cloroformo.
Papel de filtro.
Sílica gel.
Equipo Soxhlet.
H2SO4 50%.
Balanza técnica.
S. R Salkowski.
Placas cromatográficas
S. R Rosenheim.
Cámaras cromatográfica.
H2SO4.
Tubos de ensayo.
Anhidrido acético.
Procedimiento.
50 g de droga se mezclan con 250 mL de HCl 4 mol/L y se calienta a reflujo durante 1 hora.
Se filtra en caliente lavando el residuo varias veces
con agua fría.
F armacognosia y Productos Naturales 85
El líquido ácido del filtrado se elimina y el residuo se seca. El residuo oscuro seco se coloca
en el dedal de un equipo Soxhlet y se extrae durante 45 min. con n-hexano o éter de -
petróleo (no menos de 15 descargas del equipo)
El resto del extracto clorofórmico se subdivide para realizar los ensayos de:
a) Liebermann-Burchard.
b) Rosenheim (ác. tricloro acético 90%)
c) Salkowski.
Actividad práctica No 25
Introducción
En las técnicas de tamizaje, los errores más comunes corresponden a los ensayos falso -
positivos y negativos. Por ello, algunos extractos deben purificarse de forma rápida y -
sencilla para evitar interferencias que aseguren la afirmación del resultado del ensayo
empleado y la reproducibilidad de la determinación.
Este es el caso de las saponinas y taninos frente al ensayo de hemólisis, por ello se
desarrolla la técnica que se describe.
Objetivo de la actividad.
Determinar la presencia de saponinas y taninos en un extracto vegetal sin que uno de ellos -
interfiera en los ensayos del otro.
Parte experimental
F armacognosia y Productos Naturales 86
Materiales y reactivos.
n-hexano.
Equipo reflujo.
Etanol 80 %.
Papel de filtro
Soln. salina.
Embudo.
Oxido de magnesio.
Tubos de ensayo.
Plancha de calentamiento.
Procedimiento.
Los extractos salinos reunidos se dividen en 1/3 y 2/3. La alícuota menor se somete a los
ensayos de taninos seleccionados para la actividad.
La alícuota mayor se calienta con 5 g de óxido de magnesio hasta formar una pasta. Dicha
pasta se calienta con 10 mL de etanol al 80 %. Se filtra y el filtrado se somete a los
ensayos de saponinas seleccionados para la actividad.
Actividad práctica No 26
Introducción.
Objetivo de la actividad.
Parte experimental.
F armacognosia y Productos Naturales 87
Materiales y reactivos.
Equipo de reflujo.
Embudo separador.
Tubos de ensayo.
Placas cromatográficas.
Cámara cromatográfica.
Plancha de calentamiento.
Cera.
H2SO4 concentrado.
Cloroformo.
Acetatode etilo.
Éter de petróleo
KOH 15 % en etanol.
Anhídrido acético.
S. R de Rosemheim
Procedimiento.
Actividad práctica No 27
Introducción.
Las propiedades del colesterol de formar complejos poco solubles con cantidades
equivalentes de digitonina, se describió por primera vez por Windaus en 1910. Otros
alcoholes forman estos complejos pero difieren en solubilidad y estabilidad respecto a los
esteroles.
Por ello, la precipitación de los esteroles con digitonina es un método efectivo para el
aislamiento y purificación de esteroles de la serie 3-hidroxi. Esta metodología permite la
cuantificación de los esteroles ayudado por un agente precipitante como es el tricloruro de
aluminio en medio ácido.
Parte experimental.
F armacognosia y Productos Naturales 88
Materiales y reactivos.
Acetona
AlCl3
Colesterol
Digitonina
Dimetil sulfóxido
Etanol
Éter
HCl
Metanol
n-Hexano
Sulfato de sodio anhidro
Cloroformo
Centrífuga
Equipo Soxhlet
Plancha de calentamiento
Procedimiento
Una pequeña porción de material vegetal seco y molido se desengrasa en equipo Soxhlet
con n-hexano.
Análisis cromatográfico.
En una placa delgada de sílica gel G 60 se aplica el residuo anterior contra los patrones
disponibles de esteroides tipo esteroles. Se emplea como disolvente cloroformo y como
revelador H2SO4 50 % en agua y calor.
En el informe se indica los esteroles que formaron digitónidos y los posibles presentes en el
extracto, de acuerdo a la metodología aplicada.
Actividad práctica No 28
Introducción.
Los glicósidos cardiotónicos son estructuras de tipo esteroidal con una estereoquímica
específica y un agrupamiento lactónico insaturado de especial importancia para su efecto
biológico.
Para el desarrollo de esta práctica el estudiante debe revisar los siguientes aspectos:
a) ¿Cuáles son los glicósidos cardiotónicos más interesantes y los azúcares que -
involucran?
d) Interés biológico.
Objetivo de la actividad.
Parte experimental.
Materiales y reactivos.
Sulfato de sodio
Cloroformo
Metanol
H2SO4 50 %
S. R Baljet
S. R Kedde
S.R Raymond - Marthund
S.R de Legal.
Procedimiento.
Añadir agitando NaOH en solución hasta pH alcalino) .Se mezcla y se filtra. Al filtrado se
le añaden 2 g de sulfato de sodio y se lava en embudo separador 2 x 15 mL de acetato de
etilo o de cloroformo. Las fases orgánicas se dividen en 5 tubos de ensayos y se -
concentran a sequedad en baño de agua. Con ellos se realizan los siguientes ensayos:
Actividad práctica No 29
Introducción
Cheoreul fue el que por primera vez aisló los alcoholes triterpenoides del corcho, cerina y
friedelina. Los mismos son los componentes mayoritarios de los productos solubles del
corcho y fácilmente recristalizables de cloroformo. La friedelina está en una composición
mayor del 1 % y la cerina en el orden de 0,1 %.
F armacognosia y Productos Naturales 91
HO
O O
CERINA FRIEDELINA
Parte experimental.
Materiales y reactivos.
Acetato de etilo
2,4-dinitrofenilhidracina
HCl
Cloroformo
Corcho triturado.
Procedimiento.
100 g de corcho triturado se reflujan con 500 mL de acetato de etilo durante 3 horas (o se
extraen en equipo Soxhlet con el mismo disolvente).
Las aguas madres se concentran lentamente hasta turbidez. En este momento se añaden 5
mL de acetona. El precipitado está constituido por friedelina cruda que se recristaliza de
acetato de etilo dando agujas de p.f. 262 – 263.
Preparación de fenilhidrazonas.
Actividad práctica No 30
Introducción.
Las proteínas son polipéptidos comunes de encontrar en el protoplasma de todas las células
de animales y vegetales. En algunos vegetales el contenido proteico es importante, -
ejemplo el fríjol de soya que contiene un 37 %, el maní un 26 % y las almendras un 21%. -
Todas producen aminoácidos por hidrólisis y por ello son de gran importancia para el
hombre.
Parte experimental
Materiales y reactivos
SR gelatina
Solución acuosa concentrada de ác. pícrico
Solución de eosina
Ácido acético glacial
Solución salina fisiológica
Sulfato de amonio 10 %
SR ninhidrina
Embudo. Mezcladora.
Papel de filtro.
Tubos de ensayos.
Papel de pH.
Procedimiento.
Actividad práctica No 31
Introducción.
Objetivo de la actividad.
Parte experimental.
Materiales y reactivos
HCl al 1 %.
Sulfato de sodio.
KOH al 10 %.
Acetato de etilo.
Etanol.
S. R de Dragendorff.
S. R de Mayer.
S. R de Hager.
S. R de Wagner.
Erlenmeyer 200 ml.
Embudo.
Papel de filtro.
Embudo separador.
Tubos de ensayo.
Placas de cromatografía.
Cámara cromatográfica.
Plancha de calentamiento.
Procedimiento.
d) Una alícuota de la misma forma que en (b) se realiza el ensayo de Hager (ác. -
pícrico).
Actividad práctica No 32
Introducción.
Los aceites fijos de los vegetales se extraen generalmente de las semillas, hay casos, como
el Olivo, donde la parte utilizada es el pericarpio del fruto.
También se puede utilizar con este propósito la extracción con solventes orgánicos.
El objetivo de esta práctica es extraer las semillas del vegetal convenientemente triturada
de forma continua con solvente orgánico. De esta forma se extrae todo el aceite hasta
agotar el material. Finalmente se evapora el solvente utilizando un baño de agua y se
recupera el aceite. A partir de los datos obtenidos se calcula el contenido de aceite crudo -
del material original.
Materiales y reactivos
F armacognosia y Productos Naturales 95
Extractor Soxhlet
Gotero
Mortero con su mano
Dedal de Soxhlet
Plancha eléctrica
Cuchilla
Refractómetro Abbe
2 beakers de 50 mL
Microscopio compuesto
Soporte universal
Porta y cubreobjetos
Pinzas
Agitador de vidrio
Baño de agua
Algodón
Semillas del vegetal
Talco o tierra de diatomea
Éter etílico
Éter de petróleo 40 – 60 oC
S. R. de Serger
Procedimiento.
Se trituran 9 g del material vegetal con 2 g de talco. El material resultante se coloca sin
presionar en el dedal. El dedal se coloca en el extractor Soxhlet y se extrae con éter
o
de petróleo 40 – 60 C. La extracción se realiza en forma continua unas 15 veces para -
asegurar la extracción completa del aceite.
Ensayos de coloración.
Realice esta experiencia con diferentes aceites fijos y compárelo con el aceite obtenido por -
Ud. en la práctica.
Actividad práctica No 33
Introducción.
F armacognosia y Productos Naturales 96
Los carbohidratos son muy comunes en los extractos acuosos de diferentes plantas
medicinales, en particular frutos y / o tubérculos.
Diferentes métodos se han desarrollado para su análisis, siendo uno de los más simples el
que proponemos en la siguiente metodología de trabajo.
Parte experimental.
Materiales y reactivos.
Celite
Sílica gel G 60
Placas de cristal
Estufa
Asperjador
Ácido acético concentrado
Ácido sulfúrico concentrado
Anisaldehído
n- butanol
Etanol
Éter etílico
Patrones de carbohidratos.
Material vegetal.
Procedimiento.
El material vegetal se extrae a ebullición durante 10 min. con agua (cantidad que la cubra
más 1 cm por encima) Se filtra. El extracto se calienta con un 1% en peso de Celite durante
5 min. y se filtra. El extracto se destina para el análisis cromatográfico contra los patrones
disponibles.
Se emplean placas de sílica gel G 60 y como fase móvil: n-butanol – ácido acético – éter
etílico – Agua (9:6:3:1). Como revelador se emplea 0,5 mL de anisaldehído disuelto en 9 mL
de etanol, 0,5 mL de ácido sulfúrico concentrado y 0,1 mL de ácido acético.
Se informará los posibles carbohidratos que se detectan en el extracto acuoso del material
vegetal procesado.
F armacognosia y Productos Naturales 97
Aquenio: Fruto seco, indehiscente, con el pericarpio separado de la única semilla que
contiene.
Axila: Fondo del ángulo superior que forma la hoja, bráctea, etc, con el eje caulinar con que
se inserta.
Cáliz: Estructura más externa de la flor, compuestas por varias piezas generalmente
semejantes a hojas y de color verde.
Capítulo: También llamada cabezuela, inflorescencia típica de las especies del género
Asteraceae (Compositae), que agrupa un número variable de flores sésiles sobre un eje
corto y generalmente dilatado (receptáculo).
Corola: Estructura floral, situada a continuación del cáliz y generalmente formada por
piezas de mayor tamaño y colores vistosos (pétalos). A veces ausente, o no diferenciada -
del cáliz.
Cotiledón: La primera o cada una de las primeras hojas de la planta, que se forman en el -
embrión de las plantas con flores.
Dehiscentes: Relativo a los frutos u otro órgano vegetal, que se abren para dispersar las
simientes cuando están maduras.
Estipete: Tallo largo y no ramificado de las plantas. Término utilizado para designar otras
estructuras semejantes a un tallo. En América se asigna el término al pecíolo de los
helechos.
Espiga: Inflorescencia en la que las flores se disponen, sin pedúnculos, a lo largo de un eje
más o menos prolongado.
Membranáceo: Con aspecto de membrana.
Pecíolo: Pequeña rama que une la base de las hojas con la rama o tallo al que está
adherida. Cuando está ausente se dice que la hoja es sésil o sentada.
Pedúnculo: Pequeña rama que une a la flor a la rama o tallo, del que parte o se aleja de
la inflorescencia de la que forma parte.
Peltado: Relativo a las hojas que presentan forma redondeada y el pecíolo insertado en el -
centro.
Pericarpio: Parte externa del fruto que rodea a la semilla para su protección; suele estar
formada por tres partes: epicarpio, mesocarpio y endocarpio.
Pistilo: Órgano sexual femenino de las flores, formado por el ovario, el estilo y el estigma.
Racimo: Inflorescencia compuesta de un eje central a cuyo lados se disponen las flores
con sus correspondientes pedicelos florales.
Roseta: Se dice de las hojas que en la base del tallo o de las ramas, se disponen muy
juntas a causa de la brevedad de los entrenudos, formando una estructura en forma de
rosa.
Sarmentoso: Carácter relativo a las plantas con ramas largas, finas y flexibles que suelen -
apoyarse en cuanto objeto encuentren al crecer, como es el caso de la bouganvillea.
Sicono: Nombre que se aplica a las compuestas de la higuera y otras especies del género
Ficus, formadas por un receptáculo cónico o en forma de pera, en cuyo interior se
disponen flores y frutos diminutos.
Silícua: Fruto capsular, alargado, que se abre a través de estructuras longitudinales a partir
de la base.
Suculentas: Estructura del vegetal muy carnosa y gruesa, que poseen abundante jugo.
Umbela: Inflorescencia en la que a partir del extremo del pedúnculo o tallo principal,
ocasionalmente ensanchado a modo de receptáculo, parten todos los pedicelos florales
(radios de la umbela generalmente de igual longitud.)
Verticilo: Conjunto de tres o más órganos, generalmente hojas, que parten de un mismo -
punto en el tallo o rama.
F armacognosia y Productos Naturales 100
5. Solución saturada de ácido pícrico: 2 g de ác. pícrico en agua destilada csp 100
mL. Se reposa por 24 h, se agita y se filtra.
32. Solución de cuoxam (cobre amoniacal): Triturar 0,5 g de carbonato cúprico con
10 cc de solución concentrada de amoníaco (d = 0.88), lentamente y agitando la -
mezcla.
57. Gelatina salina (para sangre): Gelatina al 3 % se mezcla con una solución de sal
común (NaCl al 0,7 %, con adición de 0,6 g de fosfato de sodio para obtener un
pH de7,4. Después de calentar a unos 35o C, añadir un 5 % de sangre
desfibrinada. Puede añadirse 0,50 % de Nipagín como conservador.
BIBLIOGRAFÍA
4. Guenther, E. : The essential oils. Vol. 1-6. Van Nostrand Co. 1962.
6. Ikan, R. : Natural products a Laboratory guide. Israel Univ. Press. Jerusalem. 1969.
8. Normas Ramales. Drogas crudas y Extractos y tinturas. NRSP 309, 311 y 312. -
MINSAP 1992.
10. Trease. G. E.; W.C. Evans: Farmacognosia. Interamericana. Mc Graw - Hill. 13ava -
Ed. 1991
F armacognosia y Productos Naturales 108
INDICE