“AÑO DE LA UNIVERSALIZACIÓN DE LA SALUD”.

UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTIN

FACULTAD DE INGENIERIA DE PROCESOS
PROGRAMA DE INGENIERIA QUIMICA

OBTENCIÓN DE LA ESPIRULINA
ARTHROSPIRA PLATENSIS

INGENIERÍA DE BIOPROCESOS

Integrantes:
Díaz Olivera, Jeremy Rubén
Pacheco Meza, Carla Alessandra
Vílchez Molina, María del Pilar
Zarate Rodríguez, Alexey Patricio

Docente:
Dr. PAVEL DELGADO SARMIENTO
 AREQUIPA – 2020

CONTENIDO

RESUMEN 3

INTRODUCCIÓN 3

CAPÍTULO 1: PROBLEMA 3

1.1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 3

1.2. JUSTIFICACIÓN DE LA INVESTIGACIÓN 3

1.3. OBJETIVOS 3

1.3.1. OBJETIVOS GENERALES 3

1.3.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS 3

CAPÍTULO 2: ANTECEDENTES Y MARCO TEÓRICO 4

2.1. ANTECEDENTES 4

2.2. HIPÓTESIS 4

2.3. VARIABLES 4

2.3.1. VARIABLE INDEPENDIENTE 4

2.3.2. VARIABLE DEPENDIENTE 4

2.4. MARCO CONCEPTUAL 4

CAPÍTULO 3: MATERIALES Y MÉTODOS 4

3.1. ORGANISMO Y CONDICIONES DEL CULTIVO 4

3.1.1. INSUMOS Y REACTIVOS 4

3.2. DISEÑO Y OPERACIÓN DEL SISTEMA 4

3.2.1. EQUIPOS E INSTRUMENTOS 4

3.2.2. METODOLOGÍA 4
 OBTENCIÓN DE SPIRULINA ARTHROSPIRA PLATENSIS

RESUMEN

INTRODUCCIÓN
La Spirulina o Arthrospira ha atraído la atención de los investigadores por muchos
años, como lo demuestran cientos de publicaciones en sus diversos aspectos. Hay más
información disponible sobre su biología, biotecnología y aplicaciones de la nutrición,
aplicación sanitaria, aplicaciones como la producción de biocombustibles y como un
sistema vital de ayuda en estudios espaciales. Esta microalga puede ser una alternativa
para ayudar en el tratamiento de aguas residuales, reduciendo el impacto
ambiental causado por los contaminantes y también utilizar la biomasa producida en
alimentación animal y fertilizantes, en la producción de pigmentos, vitaminas,
polisacáridos, entre otros (Huarachi Olivera, y otros, 2015). Actualmente existen varios
métodos que reducen el CO2 como la fijación biológica de CO2 por fotosíntesis
microalgal. Las microalgas crecen típicamente suspendidas en medio nutriente líquido,
con una fuente de enriquecimiento de CO2, requeridas para su cultivo; es por ello que
empleando su aptitud para la biofijación y utilización de CO2 es posible proponerlas
como un método biológico para el tratamiento de emisiones industriales de este gas en
la atmósfera, ayudando a aliviar la tendencia al aumento del calentamiento global. La
idea principal es hacer pasar el CO2 proveniente de procesos industriales o de las
plantas de generación de energía eléctrica, y dirigirlo hacia el cultivo de microalgas. De
tal manera, se presentaría la posibilidad para que el cultivo de microalgas se efectúe
cerca de refinerías, plantas de generación de energía y otras industrias que emitan
cantidades apreciables de CO2 y emplearlo como uno de los elementos básicos para el
medio de crecimiento de las microalgas (Seijas Velásquez, y otros, 20112). La elección
de un diseño óptimo de fotobiorreactor para el cultivo masivo de microalgas es un factor
importante que rige la productividad general fotosintética. Hasta la fecha, casi toda la
producción comercial de esta alga se realiza en estanques en la que el cultivo es agitado
con una rueda de paletas. Los fotobiorreactores cerrados proporcionan muchas ventajas
como mayor disponibilidad deINGENIERIA
luz (alta DE
relación superficie/volumen),
BIOPROCESOS – OBTENCIONcontrol de
DE ESPIRULINA
temperatura, alta concentración de biomasa, disminución de costos en la cosecha, baja
tasa de contaminación, y facilidad de automatizar el proceso con el fin de lograr una
mejor utilización de la energía solar y temperatura en todo momento. Por lo tanto, el
propósito del diseño y desarrollo de los fotobiorreactores a condiciones ambientales es
aprovechar la luz solar, disminuir costos y lograr la máxima producción de algas
(Huarachi Olivera, y otros, 2015). En base a lo mencionado anteriormente, se propuso la
presente investigación cuyo objetivo principal fue evaluar la productividad de
Arthrospira platensis empleada en el cultivo masivo en fotobiorreactor tubular solar
doblemente curvado secuestrante de CO2 que pueda capturar la mayor cantidad de luz
solar disponible a través de la optimización del proceso de producción de “espirulina”,
observando los cambios morfológicos en los filamentos de A. platensis, aprovechando
que la región desértica de Arequipa presenta una gran luminosidad solar caracterizada
por el cielo despejado y ausencia de lluvia durante todo el año, además de presentar
altas temperaturas diurnas siendo adecuados para la producción de biomasa (Huarachi
Olivera, y otros, 2015).

CAPÍTULO 1: PROBLEMA

1.1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Hoy en día se vive la pandemia debido al coronavirus, donde la salud de la

población se ve afectada directamente y esto conlleva a la preocupación en la
alimentación que se debe tener para poder hacer frente a este virus. Por ello es
imprescindible que se brinden alimentos que contribuyan al sistema
inmunológico y que sean accesibles para todo sector de la población. Por otro
lado, la contaminación ambiental de los gases contaminantes, superan los
estándares de calidad ambiental para el aire (ECA) en la ciudad de Arequipa,
siendo las principales fuentes de contaminación el parque automotor, la
actividad industrial, comercio, entre otros.

1.2. JUSTIFICACIÓN DE LA INVESTIGACIÓN

1.2.1. JUSTIFICACIÓN AMBIENTAL

INGENIERIA DE BIOPROCESOS – OBTENCION DE ESPIRULINA

Un sistema de biofijación con microalgas es oportuno para la reducción de

emisiones de dióxido de carbono en gases de combustión, requiriendo su
 instalación preferentemente cerca del foco emisor. La fijación de CO2 con
microalgas se presenta como una opción natural y amigable con el medio
ambiente.

1.2.2. JUSTIFICACIÓN SOCIAL

La desnutrición representa un grave problema, por lo que la producción de

fuentes alternativas de alimento es de suma importancia. La biotecnología algal
se está moviendo hacia el campo de los productos de alto valor fabricados en
condiciones de cultivo bien controladas. Las microalgas, incluyendo
cianobacterias, pueden ser una fuente de compuestos bioactivos valiosos, por
ejemplo, pigmentos, vitaminas u otros complementos alimenticios, así como
metabolitos secundarios con actividad farmacológica altamente selectiva.

1.2.3. JUSTIFICACIÓN ECONÓMICA

Un mayor desarrollo de esta industria es dependiente de la capacidad de reducir

los costos de producción con el fin de permitir la comercialización de
Arthrospira. Una forma de obtener este propósito es mediante el aumento de la
productividad de los cultivos a condiciones ambientales mediante la superación
de los factores ambientales limitantes como la temperatura y luz.

1.3. OBJETIVOS

1.3.1. OBJETIVOS GENERALES

Obtener Spirulina del género Arthrospira empleando un fotobiorreactor tubular
solar doblemente curvado secuestrante de CO2.

1.3.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS

- Evaluar diferentes condiciones de cultivo en el crecimiento de la microalga
Spirulina con el fin de determinar cuáles presentan mayores rendimientos y/o
productividades de biomasa.
- Determinar la calidad deINGENIERIA
la SpirulinaDEmediante
BIOPROCESOS – OBTENCION
la cuantificación DE ESPIRULINA
del contenido
proteico, de cada uno de los cultivos, por el método de Kjeldahl.
 - Establecer el porcentaje de radiación solar óptima para obtener una buena
productividad de A. platensis en fotobiorreactores.

CAPÍTULO 2: ANTECEDENTES Y MARCO TEÓRICO

2.1. ANTECEDENTES
2.2. HIPÓTESIS
2.3. VARIABLES
2.3.1. VARIABLE INDEPENDIENTE
2.3.2. VARIABLE DEPENDIENTE
2.4. MARCO CONCEPTUAL

El cultivo comercial de microalgas y cianobacterias a escala industrial comenzó con la

cultura de Chlorella en Japón alrededor de 1960 y seguida por el cultivo de Spirulina en
México, Estados unidos y China en 1970. En los últimos 30 años, la industria
biotecnológica de microorganismos fotosintéticos ha crecido y se ha diversificado. Los
microorganismos fotosintéticos más importantes comercialmente producidos son
Spirulina, Chlorella y Dunaliella. Una característica de estas es que por crecer en un
medio altamente selectivo pueden ser cultivadas en sistemas abiertos y permanecer
relativamente libres de contaminación por otros microorganismos. [ CITATION
EMR07 \l 10250 ]

La Spirulina es una microalga considerada como un súper alimento. Es llamada alga

milagrosa. Su composición es increíblemente rica en proteínas, vitaminas, ácidos grasos
y otros nutrientes necesarios. Es un hecho importante, que la F.D.A. (Food and Drugs
Administration, U.S.A.) organismo regulador de los alimentos y medicamentos de
EE.UU., ha aprobado y auspiciado desde 1981 la utilización de la Spirulina como
complemento dietario natural de uso masivo y sin contraindicaciones, aún en muy altas
dosis. Ayuda a luchar contra las deficiencias inherentes a ciertas dietas (adelgazantes,
vegetarianas, etc.), para estimular las defensas inmunes pero también es un excelente
antioxidante. [CITATION And20 \l 10250 ]

2.4.1. CYANOBACTERIA ARTHROSPIRA PLATENSIS

INGENIERIA DE BIOPROCESOS – OBTENCION DE ESPIRULINA

La Spirulina es una diminuta microalga de color verde azulado que tiene una estructura
filamentosa de forma espiralada, visible solamente bajo el microscopio. La Spirulina es
una de las algas más primitivas, no tiene núcleo y sus membranas celulares son suaves y
sin la dura celulosa que tienen otras algas y vegetales. Esta característica asegura una
fácil asimilación de sus nutrientes. [ CITATION And20 \l 10250 ]

El color verde azul oscuro viene de una gama de pigmentos naturales que provienen de
la clorofila-a, los carotinoides y la ficocianina, pigmentos que captan las diferentes
frecuencias y colores de los rayos del sol y que protegen al mismo tiempo el alga de las
quemaduras y de los radicales libres (moléculas agresivas), producidos por el sol. Los
diferentes colores del espectro solar son absorbidos y almacenados en sus pigmentos,
así los pigmentos de la clorofila son verdes, del caroteno son amarillos, naranja y rojos,
de la ficocianina son azules. Estos pigmentos ofrecen inestimables beneficios para
nuestra salud.[ CITATION And20 \l 10250 ]

Tabla 1. Composición taxonómica de la Spirulina.[CITATION Men17 \l 10250 ]

Dominio Bacteria
Filo Cyanobacteria
Clase Cyanophyceae
Subclase Oscillatoriophycideae
Orden Oscillatoriales
Familia Phormidiaceae
Subfamilia Phormidioideae
Género Arthospira
Especie Arthrospira platensis

2.4.2. COMPONENTES DEL ALGA DE SPIRULINA

La Spirulina tiene pigmentos (clorofila, carotenos y ficocianina) ácidos

grasos poliinsaturados omega 3 y omega 6, posee los 8 aminoácidos esenciales (proteína
vegetal 60-70%), todas las vitaminas liposolubles e hidrosolubles (A, B1, B2, B3, B5,
B6, B12, D, E y K) y minerales como calcio, potasio, hierro, fósforo, magnesio, Selenio
y Zinc. Estas propiedades, lo convierte en un suplemento alimenticio de alto valor
biológico, con capacidad de corregir las deficiencias nutricionales que son entre otros
las culpables de nuestras enfermedades.[ CITATION And20 \l 10250 ]
INGENIERIA DE BIOPROCESOS – OBTENCION DE ESPIRULINA
Contiene poderosos inmuno estimulantes como los Polisacáridos, Glucolípidos y
Sulfolípidos que son los que evitan que el virus se adhiera a las células o que ingrese en
ellas, impidiendo de este modo su infección; hasta llegar al punto de que sea el cuerpo
mismo quien pueda eliminar el virus por sus propias defensas. También están
presentes estimuladores enzimáticos, factores que son importantes para el
funcionamiento armónico de nuestro metabolismo celular. [ CITATION And20 \l 10250 ]

Tabla 2. Composición General de la Spirulina.[ CITATION And20 \l 10250 ]

CAPÍTULO 3: MATERIALES Y MÉTODOS

3.1. ORGANISMO Y CONDICIONES DEL CULTIVO

3.1.1. INSUMOS Y REACTIVOS
▪ MATERIAL BIOLÓGICO: Arthrospira platensis.
▪ INSUMO: Agua declorada.
▪ REACTIVOS
- H 3 B O3
- Fetrilón combi INGENIERIA DE BIOPROCESOS – OBTENCION DE ESPIRULINA
- Superfosfato triple
- KN O3
 - N H 4 N O3
- MgS O 4
- NaHC O3

3.2. DISEÑO Y OPERACIÓN DEL SISTEMA

3.2.1. EQUIPOS E INSTRUMENTOS

- El sistema utilizar en este estudio consistirá de tres partes:

▪ Fotobiorreactor doblemente curvado (4m de largo)

- Tubo transparente de policloruro de vinilo (15.3 m de longitud y 12
mm de diámetro interno).
- Lámina de plástico anti-UV.
- Malla Rachel de 50%.
▪ Desgasificador (4 L de capacidad)
▪ Bomba de aire.

3.3. METODOLOGÍA

3.3.1. OPERACIÓN DEL SISTEMA

- Disolver todos los nutrientes en agua declorada y ajustar a pH= 9 y esterilizar
a 120 °C y 15 lb de presión durante 20 min.
- Instalar y esterilizar el fotobiorreactor: bombear agua estéril, circular por 20
minutos. Descargar el agua usando el apéndice del fondo. Colocar una
solución de hipoclorito de sodio al 1,5% haciéndolo circular por 1 hora,
descargar para luego nuevamente adicionar agua autoclavada en forma
continua.
- Cubrir con una lámina de plástico anti-UV y malla Rachel de 50%, el
fotobiorreactor, para evitar la excesiva radiación UV ocasionada por la
exposición directa a la luz solar.
- Insertar el medio en el fotobiorreactor. Estabilizar la temperatura y adicionar
el inóculo.
- Mezclar y airear la microalga mediante una bomba de aire.
INGENIERIA DE BIOPROCESOS – OBTENCION DE ESPIRULINA
3.3.2. MEDICIÓN DE LA BIOMASA
 - Filtrar la muestra.
- Secar la biomasa bajo las condiciones del laboratorio.

3.3.3. DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO PROTEICO

- Pesar con precisión 1g de muestra y colocarlo en el matraz Kjeldahl.

Agregar 10g de sulfato de potasio, 0.7g de óxido de mercurio y 20 ml de
ácido sulfúrico concentrado.
- Colocar el matraz en el digestor en un ángulo inclinado y caliente a
ebullición hasta que la solución se vea clara, continuar calentando por media
hora más. Si se produce mucha espuma, adicionar un poco de parafina.
- Dejar enfriar; durante el enfriamiento adicionar poco a poco alrededor de 90
ml de agua destilada y desionizada. Ya frío agregue 25 ml de solución de
sulfato de sodio y mezclar.
- Agregar una perla de ebullición y 80 ml de la solución de hidróxido de sodio
al 40% manteniendo inclinado el matraz. Se formarán dos capas.
- Conectar rápidamente el matraz a la unidad de destilación y colectar 50 ml
del destilado conteniendo el amonio en 50 ml de solución indicadora.
- Renovar el matraz receptor, al terminar de destilar, enjuagar la punta del
condensador y titular con la solución estándar de ácido clorhídrico.

BIBLIOGRAFÍA

- Huarachi Olivera, R., Yapo Pari, Ú., Dueñas Gonza, A., Condori
Huamanga, J., Pacheco Salazar, D., & Soto Flores, J. (1 de Junio de 2015).
Cultivo de Arthrospira platensis (Spirulina) en fotobiorreactor tubular
doblemente curvado a condiciones ambientales en el sur del Perú. Arequipa,
Perú. doi:10.15446/rev.colomb.biote.v17n1.50679

- Seijas Velásquez, S., Alcántara Alza, V., Esquivel Flores , C., Benites
Gutiérrez , L., González Sánchez , J., Seijas Bernabé, P., & Seijas Bernabé,
N. (8 de Agosto de 20112). Escalamiento de fotobiorreactor solar
secuestrante de CO2 de gases de combustión optimizando producción de
INGENIERIA DE BIOPROCESOS – OBTENCION DE ESPIRULINA
“espirulina”. Trujillo, Perú.
Andexs Biotechnology, S. (19 de Mayo de 2020). BIONUTREC. Obtenido de
https://www.spirulina.com.pe/espirulina-arequipa/
E.M., R., & C.O., R. (2007). Optimization of the repeated batch cultivation of
microalga Spirulina platensis in open raceway ponds. 265, 118-126.
Recuperado el 19 de Mayo de 2020, de
https://repository.eafit.edu.co/xmlui/bitstream/handle/10784/393/Bernar
doDavid_TorresUrango_2008.pdf;jsessionid=9DB28552B832E7AC11D
116A6AA6F44A7?sequence=3
Mendoza Pariapaza, K. (2017). Muffins de chocolate con relleno de mermelada
de kiwi enriquecida con Spirulina (Arthrospira platensis). [Tesis
universitaria], Universidad Nacional de San Agustín de Arequipa,
Arequipa.

INGENIERIA DE BIOPROCESOS – OBTENCION DE ESPIRULINA